酶联免疫吸附试验中HIV抗体室内质控品的制备及应用

目的制备酶联免疫吸附试验(ELISA)检测中HIV抗体室内质控品。方法用HIV抗体阴性血清,按1∶1、1∶2、1∶4、1∶8稀释ELISA试剂盒中HIV阳性对照品,检测不同稀释度的HIV抗体,选择S/CO=2～4倍临界值作为弱阳性质控品的稀释倍数,大批量配制,分装,-20℃储存。将自制质控品与日常血清样品同时检测HIV抗体,每月统计检测S/CO均值、标准差和变异系数,监测其均一性和稳定性。结果经单因子方差分析自制的弱阳性质控品均一性无显著性差异,12个月中HIV抗体S/CO均值在2～3之间,变异系数20%,稳定性良好。结论自制的HIV抗体质控品均一性、稳定性良好,保存期达12个月,可作为ELISA检测中弱阳性质控品使用。     

HIV抗体ELISA检测室内质控品的制备及应用

目的探讨自行配置HIV抗体弱阳性血浆样本作为酶联免疫吸附试验(ELISA)室内质控品的方法,力求保证HIV抗体的筛查质量。方法将3份HIV抗体阳性血浆样本等体积混匀,用1份HIV抗体阴性血浆样本倍比稀释该混匀样本,再用ELISA检测。根据稀释倍数和S/CO比值的散点图,确定弱阳性反应的稀释样本和相应的稀释倍数,制备和分装室内质控品,并对室内质控品做均一性评价、稳定性评价和冻融实验。评价后,连续20 d检测室内质控品,建立L-J质控图并分析实验结果。结果根据散点图,稀释到2~(15)的样本的S/CO值为3.066,确定将HIV阳性混合血浆样本稀释至2~(15)来制备弱阳性室内质控品。均一性评价中,室内质控品的变异系数(CV)为5.66%;稳定性评价中,分别放置于37℃、室温(22~25℃)、2~8℃、-20℃的室内质控品的CV均小于10%,并随着温度降低,CV减小;冻融实验的CV小于10%。L-J质控图的控制限为1.46±0.06(1_(1s))、1.46±0.12(1_(2s))、1.46±0.18(1_(3s)),连续10 d的室内质控品检测结果均在控。结论自制的室内质控品均一性、稳定性好,可反复冻融3次,可作为商品化质控品的替代品保证实验室HIV抗体ELISA检测的质量。     

供多年使用、多厂家试剂共用的HIV抗体干血棉球质控品应用研究

[目的]研究设计一种供多年使用,多厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒共用的干血棉球质控品。[方法]用HIV抗体阴性血清稀释HIV抗体强阳性血清,制备成较高S/CO值的干血棉球质控品。根据不同厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒敏感性的差异,标定出不同试剂盒检测干血棉球质控品S/CO值2～3时溶解液的各自用量。实验时,不同厂家试剂盒用不同用量的溶解液溶解干血棉球质控品,使之成为该厂家试剂盒S/CO值2～3的弱阳性质控血清,用于室内质量控制。[结果]干血棉球质控品置-20℃历时3年,经多个厂家的ELISA检测HIV抗体试剂盒对干血棉球质控品20次检测结果,其S/CO值的变异系数(cv)均﹤20%。[结论]使用干血棉球质控品大大减少了制备频次,简化了操作程序,为各级艾滋病检测实验室ELISA检测HIV抗体的室内质量控制提供了极大的方便。     

电化学发光法检测对弱阳性HBsAg的影响因素分析

目的了解不同保存温度下标本放置时间对弱阳性HBs Ag检测结果的影响。方法选取门诊病房送检的用电化学发光法检测HBs Ag结果为弱阳性的患者血清标本10份,观察各标本在不同放置时间及温度下的测定值。结果弱阳性HBs Ag标本分别在室温、4℃、-20℃下放置3 d、5 d、7 d后结果略有降低,但差异无统计学意义(P0.05);弱阳性HBs Ag标本在室温和4℃保存时,部分检测结果转阴性,特别是在室温情况下,第7 d检测转阴率达30%;而标本在-20℃保存,阳性数无变化。结论标本放置时间及温度对弱阳性HBs Ag检测结果差异无统计学意义,可认为ECLIA法检测弱阳性HBs Ag结果基本保持稳定。随储藏时间延长,放置温度越低,标本检测转阴率也越低。     

全血锌检测的质控物制备及应用评价

目的制备血锌检测全血质控物以加强室内质控,监控血锌检测结果。方法采集健康人静脉全血,肝素抗凝,0.5%曲拉通1:200稀释无菌分装,-20℃冷冻保存。检测前平衡至室温,和临床标本一同检测。结果分装的全血质控物均一,-x为7.65 mg/L,s为0.24,各管间CV为3.14%,管间差符合要求;连续监测半年,计算其-x在7.60~7.76 mg/L之间s、介于0.40~0.48,CV在5.14%~6.31%之间波动。结论自制全血锌质控物性状稳定,质量可靠,可满足临床检测质控需要。     

微粒子化学发光免疫分析检测乙肝核心抗体阳性结果的意义

目的某院将HBV血清标志物检测方法由ELISA法更换为微粒子化学发光免疫分析(ARCHITECT-i4000)检测后,依据ARCHITECT i系统给定的参考值判定结果,发现临床乙肝核心抗原(HBc Ab)阳性率显著增高。本研究旨在探讨ARCHITECT-i4000检测HBc Ab阳性结果的意义。方法先将所有血清标本用ARCHITECT-i4000检测,再将其中HBs Ag为阴性且HBc Ab为阳性标本的血清(30倍稀释或不稀释)用ELISA法检测。结果用原倍血清(作为流行病学调查依据),ELISA法与RCHITECT-i4000法检测HBc Ab的阳性符合率为100.00%;ELISA法采用生理盐水30倍稀释的标本(作为临床诊断依据)检测,阳性符合率仅为43.97%。ELISA检测为阳性标本的ARCHITECT-i4000检测值(S/CO,9.25±1.23)明显高于阴性标本(S/CO,4.88±2.35),P0.001。将ARCHITECT-i4000检测值在1.0~8.10 S/CO之间判为阴性,HBs Ab+HBc Ab+模式中HBc Ab的阳性符合率仅有18.8%,而"大三阳"和"小三阳"的阳性符合率可高达95.5%。结论 ARCHITECT-i4000用原倍血清检测HBc Ab,其检测的阳性结果 S/CO值在1.0~8.10可能更具有流行病学调查的意义。     

病理水平D-二聚体室内质控品的制备及应用评价

目的研制病理水平的D-二聚体室内质控品,并对其稳定性和质控效果进行评估。方法用病理水平的D-二聚体混合血浆为血浆制备来源,以"抑肽酶、25 mmol/L的pH=7.4磷酸缓冲液、60 g/L蔗糖、20 g/L聚乙二醇2万衍生物、10 g/L小牛血清清蛋白、0.5 g/L叠氮钠"为保存介质制备D-二聚体质控品;采用L-J质控图比较自制质控品和西门子定值质控品的质控效果;观察自制质控品在室温、4℃、-20℃冰箱保存条件下的稳定性。结果自制病理水平D-二聚体质控品定值为4.13 mg/L;自制质控品与定值质控品质控效果一致,可监测到试剂、仪器、环境等因素引起的失控;自制质控品在-20℃冰箱保存条件下可稳定8个月,复融后须在室温2 h内、4℃冰箱2 d内使用。结论自制病理水平D-二聚体质控品的稳定性和质控效果均符合室内质控品的要求,可应用于实验室的室内质控。     

HIV抗体弱阳性质控血清的制备及应用评价

目的 掌握抗HIV弱阳性外部对照质控血清的制备方法,有效运用到试验过程中。方法 用HIV抗体阴性血清成倍比稀释强阳性血清,采用酶联免疫吸附检验(ELISA)来检测各稀释度OD值,并计算S/CO值来确定某一稀释度为配置稀释度(即临界值2-3倍)。结果 采用倍比稀释法,可获得所需外部质控所用血清浓度,并且连续检测20次,绘制出室内质控图。结论 制备适合自己试验室的弱阳性的外部质控血清方法简单,使用起来方便,也易于保存,适用于HIV初筛实验室日常检测的室内质量控制工作。     

ELISA法和NAT联合检测降低经血传播感染性疾病风险的效果分析

目的探讨献血者血液采用ELISA法和NAT联合检测降低经血传播乙型肝炎、丙型肝炎及艾滋病的效果。方法选取本站2015年4月~2016年12月采集的献血者血液样本72110例作为研究材料,所有样本均应用两种不同厂家试剂进行ALT、HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP平行检测,同时对献血者样本进行NAT检测。结果在72 110例献血者中603例(0.84%)血清学HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测不合格;71507例血清学检测合格献血者中检出HBV-DNA阳性49例(0.07%),未检出HCV-RNA和HIV-RNA阳性样本;在152例ELISA法HBs Ag 0.7≤S/CO1.0样本和1.0≤S/CO≤3.0样本中检出13例HBV-DNA阳性,HBs Ag 1.0≤S/CO≤3.0样本NAT阳性检出率高于0.7≤S/CO1.0样本,差异有统计学意义(P0.05)。结论献血者血液样本采用ELISA法和NAT联合检测可降低经输血传播感染性疾病的风险,提高血液质量和输血安全。     

HBsAg弱阳性质控血清基质液的稳定性比较

目的 选择不同基质配制乙肝表面抗原（HBsAg）室内质控血清用于ELISA试验，寻找配制HBsAg弱阳性质控血清的稳定基质液。方法 收集HBsAg、抗-HIV、抗-HCV、梅毒螺旋体抗体均为阴性的血清混合液作为阴性血清（HBVA），乙肝五项（HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb）、抗-HIV、抗-HCV、梅毒螺旋体抗体均为阴性的血清混合液作为抗体阴性血清（HBV-B），以及人血白蛋白（HBV-C）、胎牛血清（HBV-D）共4种基质，按1∶1 000、1∶2 000、1∶4 000、1∶8 000、1∶16 000、1∶32 000、1∶64 000倍比稀释HBsAg阳性血清，配制成不同基质的稀释系列，用ELISA方法检测HBsAg，选取临界值的2～4倍作为目标S/CO值，比较4种基质稀释系列在4℃下放置1、3、5、7、9、11 d、1个月和2个月，目标S/CO值对应浓度的稳定性。观察3种选定较稳定基质配制的稀释系列，4℃下放置5周和-20℃下放置6个月，目标S/CO值对应浓度的变化，比较3种选定基质配制的质控血清在-20℃下放置15个月的稳定性。结果 HBV-A为...     

ELISA检测HIV抗体弱阳性外部质控血浆的制备和应用

目的 制备HIV抗体检测的弱阳性外部质控血浆并进行应用,确保HIV初筛实验室的检测质量.方法 用不同个体HIV阴性血浆稀释不同个体的HIV阳性血浆得到弱阳性外部质控血浆,用荷兰生物梅里埃试剂检测20次后得到的S/CO值在Eexcle表格上绘制质控图.结果 自制的弱阳性外部质控血浆经1年使用后稳定性好,变异系数＜20％.结论 自制适合自己实验室的弱阳性外部质控血浆方法简单,经济实惠,使用方便,易于保存,适用于HIV初筛实验室日常检测的质量控制工作.     

HBsAg阳性孕妇感染状态对胎儿宫内感染的影响

目的探讨乙肝表面抗原(HBs Ag)阳性孕妇的不同感染状态对胎儿宫内感染的影响。方法选取2013年9月-2014年11月在该市妇幼保健院门诊就诊及住院的120例HBs Ag阳性孕妇为研究对象,分为A组(HBs Ag,HBe Ag,HBc Ab均为阳性)、B组(HBs Ag,HBe Ab,HBc Ab均为阳性)、C组(HBs Ag,HBc Ab为阳性)、D组(HBs Ag,HBe Ag为阳性),另选取孕期血清HBV标志物全阴性的50例孕妇为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇乙肝两对半,采用全自动荧光定量PCR仪检测PCR-HBV-DNA值,检测其所生的新生儿在出生后24 h的乙肝两对半。结果 A组孕妇与B组孕妇所生的新生儿发生宫内感染情况比较差异无统计学意义(P=0.139),孕妇血清HBV DNA水平1×10~5(基因拷贝/ml)的新生儿血HBs Ag阳性率为53.8%,1×10~5(基因拷贝/ml)的为100%(P0.001),即当母血中HBV-DNA值10~5基因拷贝/ml时,新生儿出现HBs Ag阳性的概率升高(χ~2=24.828,P0.001)。结论乙肝大三阳孕妇或体内HBV-DNA载量高是胎儿宫内感染的危险因素。     

标准品血清在ELISA室内质量控制及结果判定中的运用

目的探讨低浓度定标法在酶联免疫吸附试验(ELISA)室内质量控制中的运用,按照统计学原理分析血清浓度界值法判定临界值附近结果的稳定性。方法以乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)的测定为例,运用不同厂家、不同批次试剂盒同时对系列标准血清进行测定,依据相应标准品的浓度(x)与吸光度(y)建立直线回归方程(y=ax+b)。根据所测质控品吸光度及相应线性回归方程,可得定标后的质控品浓度。以质控品浓度均值为靶值,建立Levey-Jennings质控图。采用两厂家不同批次ELISA试剂盒对经微粒子酶免疫分析法(MEIA)定量的108份低浓度HBs Ag阳性血清进行检测,分别用cut-off界值法和血清浓度界值法判断结果,并通过统计学分析进行稳定性评价。结果使用浓度定标的质控方法结果变异小,不受不同厂家及批号更换的影响。血清浓度界值法解决了目前厂家设定临界值(cutoff)不合理的问题,结果稳定,可靠。结论采用低浓度定标法的ELISA室内质控方法明显优于以吸光度/临界值(OD/CO)为指标的ELISA室内质控方法。血清浓度界值法客观、科学,可更好的判断临界值附近样本的结果,减少漏检。     

健康体检HBsAg无症状携带者血清检测结果分析

为进一步了解 HBs Ag无症状携带者 (ASC)的感染特点 ,探讨 HBs Ag滴度与 HBe Ag、抗 - HBe和抗 - HBc检出的相关性 ,对 781例 HBs Ag阳性血清的检测结果与 HBe Ag、抗 - HBe和抗 - HBc的检测结果进行了分析 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　血清标本　 781份 HBs Ag阳性血清 ,来源于 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 1年 12月到盐都县卫生防疫站进行健康体检领证人员中筛检出的 HBs Ag阳性血清。1.2　检测方法　取静脉血后采用 EL ASA法 ,检测 HBs Ag、HBe Ag、抗 - HBe及抗 - HBc。试剂盒为北京万泰生物药业有限公司生产 ,均在有…     

HIV抗体筛查实验室弱阳性血清的制备及其应用

[目的]探索HIV抗体弱阳性对照血清简便、易行、准确的制备方法及HIV抗体室内质控图的应用。[方法]用另一种试剂的阴性对照血清梯度稀释该试剂的阳性对照血清,制备出弱阳性血清。[结果]用双抗原夹心ELISA法进行HIV抗体检测后找出S/CO值在2~3倍之间的血清稀释倍数,连续检测12次,制出室内质控图。[结论]制作弱阳性对照血清时,逐渐降低阳性血清抗体滴度能准确简便地找出若阳性对照血清孔数。     

HIV抗体筛查实验室弱阳性血清的制备及其应用

目的：探索HIV抗体弱阳性对照血清简便、易行、准确的制备方法及HIV抗体室内质控图的应用。方法：用正常人阴性血清按不同稀释倍数梯度稀释HIV抗体阳性血清后，制备出弱阳性血清。结果：用双抗原夹心ELISA法进行HIV抗体检测后找出S／CO值在2—3倍之间的血清稀释倍数，连续检测20次，制出室内质控图。结论：制作弱阳性对照血清时，用不同稀释倍数逐渐降低阳性血清抗体滴度能准确简便地找出弱阳性对照血清孔数。     

242例乙型肝炎患者前S1抗原与HBV血清标志物、HBV DNA检测结果分析

目的:探讨HBV前S1抗原与乙型肝炎血清标志物(HBVM)、HBVDNA检测的关系。方法:应用ELISA法检测HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBc Ab、前S1抗原,采用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果:242例HBs Ag阳性标本中,67例HBs Ag(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为89.55%;HBVDNA抗原阳性率为92.54%;142例HBs Ag(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为50.70%,HBVDNA抗原阳性率44.37%;31例HBs Ag(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为32.26%,HBVDNA抗原阳性率为35.48%;2例HBs Ag(+)、HBe Ag(+)患者组中的前S1抗原阳性率为100.00%,HBVDNA抗原阳性率为100.00%。结论:前S1抗原与HBVDNA、HBe Ag阳性有显著相关性,在防治中应联合检测提高诊断的准确度。     

242例乙型肝炎患者前S1抗原与HBV血清标志物、HBV DNA检测结果分析

目的:探讨HBV前S1抗原与乙型肝炎血清标志物(HBVM)、HBVDNA检测的关系。方法:应用ELISA法检测HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBc Ab、前S1抗原,采用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果:242例HBs Ag阳性标本中,67例HBs Ag(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为89.55%;HBVDNA抗原阳性率为92.54%;142例HBs Ag(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为50.70%,HBVDNA抗原阳性率44.37%;31例HBs Ag(+)、HBc Ab(+)患者组中的前S1抗原阳性率为32.26%,HBVDNA抗原阳性率为35.48%;2例HBs Ag(+)、HBe Ag(+)患者组中的前S1抗原阳性率为100.00%,HBVDNA抗原阳性率为100.00%。结论:前S1抗原与HBVDNA、HBe Ag阳性有显著相关性,在防治中应联合检测提高诊断的准确度。     

HIV质控血清稳定性的关键影响因素研究

目的研究温度、冻融、运输等因素对HIV抗体质控血清稳定性的影响。方法将配置的HIV质控血清分别进行如下处理:(1)置于-20℃、4℃、室温、37℃不同时间;(2)反复冻融;(3)模拟运输。之后用ELISA试剂盒检测样本的反应OD值,统计分析处理后与样本参考值的差异。结果质控血清在-20℃可以保存1年,在4℃不超过3周,在室温下不超过1周,在37℃不超过2d是稳定的。反复冻融对检测值绝对影响不大,但统计学差异显著。运输路途时间超过15 d,样品稳定性得不到保证。结论 HIV质控血清必须按照要求进行正确的保存、运输和使用。     

242例乙型肝炎患者前S1抗原与HBV血清标志物、HBV DNA检测结果分析

目的：探讨HBV前S1抗原与乙型肝炎血清标志物（HBVM）、HBVDNA检测的关系。方法：应用ELISA法检测HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBc Ab、前S1抗原,采用荧光定量PCR法检测HBVDNA。结果：242例HBs Ag阳性标本中,67例HBs Ag（＋）、HBe Ag（＋）、HBc Ab（＋）患者组中的前S1抗原阳性率为89.55%;HBVDNA抗原阳性率为92.54%;142例HBs Ag（＋）、HBe Ab（＋）、HBc Ab（＋）患者组中的前S1抗原阳性率为50.70%,HBVDNA抗原阳性率44.37%;31例HBs Ag（＋）、HBc Ab（＋）患者组中的前S1抗原阳性率为32.26%,HBVDNA抗原阳性率为35.48%;2例HBs Ag（＋）、HBe Ag（＋）患者组中的前S1抗原阳性率为100.00%,HBVDNA抗原阳性率为100.00%。结论：前S1抗原与HBVDNA、HBe Ag阳性有显著相关性,在防治中应联合检测提高诊断的准确度。