鬼臼毒素固体脂质纳米粒冻干粉的制备及理化性质考察*★

目的：制备含有不同冻干保护剂的鬼臼毒素固体脂质纳米粒(POD-SLN)冻干粉，并考察其理化性质，筛选出最佳配方。 方法：实验于2006-12/2007-11在南方医科大学药学部实验室完成。冻干配方为15%海藻糖、15％甘露醇和二者联用各取 5％，冷冻干燥制作冻干粉制剂。扫描电镜下观察冻干粉复溶后粒子形态，Image -Pro Plus 6.0软件计算粒径大小，高效液相考察固体脂质纳米粒的药物包封率，并考察冻干粉的外观、复溶和4 ℃保存对其影响，评价不同辅料对冻干品的影响。 结果：①外观和复溶情况：海藻糖冻干粉、海藻糖联用甘露醇冻干粉表面均松脆多孔，疏松，复溶较快，约需20 s，甘露醇冻干粉表面较光滑，结构致密，饼状，复溶较慢，需借助外力。冻干粉样品4 ℃冰箱放置24 h、1，3，6个月其外观和复溶均无明显变化。②电镜下粒子形态：呈圆形或椭圆形，分布较均匀，冻干前后无明显差异。③粒径：未加冻干保护剂时为（82.65± 18.43）nm，加入海藻糖、海藻糖联用甘露醇、甘露醇后分别为（94.78±21.94），（109.26±16.15），（114.63±21.42）nm。④包封率：未加冻干保护剂时为 87.4%，加入海藻糖、海藻糖联用甘露醇、甘露醇后分别为86.2%，80.3%，79.6%。 结论：以15%海藻糖为冻干保护剂制备的鬼臼毒素固体脂质纳米粒冻干粉粒径较小，包封率高，稳定性好，其制备工艺合理可行。     

鬼臼毒素－固体脂质纳米粒与鬼臼毒素酊经皮外用的安全性比较

目的：为了克服鬼臼毒素酊剂在临床应用的局限性，进行了鬼臼毒素-固体脂质纳米粒与鬼臼毒素酊经皮外用安全性比较的实验。 方法：实验于2006-09/2007-08在南方医科大学药学部实验室完成。①取豚鼠32只，按照随机数字表法分成0.5%鬼臼毒素－固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组、0.5%鬼臼毒素酊剂完整皮肤组和破损皮肤组，每组4只，分别进行单次和多次给药皮肤刺激试验。单次给药方法：豚鼠背部两侧对称脱毛后用手术刀片作#字划痕制作皮肤破损模型，采用同体左右侧自身对照法，左侧为受试区，分别取0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒混悬液及0.5%鬼臼毒素酊剂各0.1 mL均匀涂布于受试区，再以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区。分别于去除敷料和清洗受试物后1，24，48 h观察涂药部位有无红斑和水肿等情况，以及上述变化的恢复情况与时间。多次给药方法：皮肤处理方法、观察指标及评价指标同上，每日给药1次，连续给药14 d。②取大鼠100只，按照随机数字表法分成0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒、0.5%鬼臼毒素酊剂完整皮肤组和破损皮肤组及正常对照组，每组10只，分别进行急性和长期皮肤毒性试验。急性毒性试验方法：脱毛后，分别取0.5%鬼臼毒素固体-脂质纳米粒、0.5%鬼臼毒素酊剂1 mL均匀涂布于脱毛区，连续观察14 d，每日观察大鼠体质量、进食量、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。长期毒性试验方法：皮肤处理方法及观察指标同上，每日给药1次，药量均为0.1 mL，连续给药30 d，末次给药后24 h麻醉后处死动物，取血3.0~4.0 mL进行血液学、血液生化学检查，然后切取各组大鼠涂药中心区域的皮肤组织行皮肤病理检查及激光共聚焦显微镜扫描。 结果：纳入大鼠100只、豚鼠32只，均进入结果分析。①单次和多次给予鬼臼毒素-固体脂质纳米粒对豚鼠完整和破损皮肤均无刺激作用。②单次大剂量给予0.5%鬼臼毒素酊剂对豚鼠完整皮肤无刺激性，对破损皮肤有较强的刺激性；每日小剂量给予0.5%鬼臼毒素酊剂对豚鼠完整皮肤、破损皮肤均有较强的刺激性，其中破损皮肤组豚鼠皮肤刺激性出现的最早和最严重。③单次大剂量应用0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒和0.5%鬼臼毒素酊剂时大鼠容易出现短期的系统吸收毒性，尤以皮肤破损组症状较明显，其中0.5%鬼臼毒素酊剂组大鼠中毒症状持续时间均较0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组持久。④每日小剂量长期应用0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒和鬼臼毒素酊剂对大鼠比较安全无系统吸收毒性。⑤每日小剂量给予0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组大鼠于给药后的18~25 d，均出现轻度的皮肤红斑、水肿、糜烂和结痂等炎症反应及局部毛发生长稀疏、缓慢或无毛发生长，皮肤组织病理学检查可见以表皮为主的急性炎症反应。激光共聚焦显微镜扫描可见以红色荧光显像的药物主要富集于表皮层及毛囊而真皮及皮下组织药物含量相对较少。⑥每日小剂量给予0.5%鬼臼毒素酊剂组大鼠于给药后的4~7 d，均出现程度逐渐加重的皮肤红斑、水肿、糜烂、坏死、结痂及明显的毛发生长障碍，皮肤组织病理学检查可见皮肤全层急性炎症反应，激光共聚焦显微镜扫描可见表皮全层坏死，以红色荧光显像的药物主要富集于真皮、皮下组织、毛囊及其周围，荧光强度相对较0.5%鬼臼毒素-固体脂质纳米粒组强。 结论：在有效观察时间和一定浓度范围内，鬼臼毒素-固体脂质纳米粒、鬼臼毒素酊剂对实验动物均无严重系统吸收毒性，但鬼臼毒素-固体脂质纳米粒与鬼臼毒素酊剂相比具有局部不良反应少，不良反应程度轻，不良反应出现迟，皮肤靶向性好等优点。     

盐酸在磁性纳米粒制备中的作用

在磁性纳米粒的制备与储藏中常用盐酸作为稳定或胶溶剂，但关于盐酸所产生的作用及最后产物不太明确。为了明确盐酸在磁性纳米粒制备中的作用，采用改良常用的共沉淀法，制备铁磁微粒，在一定温度下再加入盐酸和聚乙二醇2000与铁磁微粒反应，再纯化，即得磁性纳米粒。根据此技术，可获得粒径小而可调的磁性纳米粒，在水中分散性好。而且，结果发现盐酸在制备中的作用主要在于氢离子，可以减小四氧化三铁纳米粒的粒径。如果铁磁粒子与盐酸过度反应，则几乎失去磁性。     

乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的研究进展★

摘要: 乳酸-羟基乙酸共聚物是目前被认为最具发展前景的生物医用高分子可降解材料之一，对近年来乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的制备方法和改性研究进行分析。目前制备乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒药物载体的方法主要有沉淀法、乳化溶剂挥发法、溶剂扩散法、喷雾干燥法等。乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒的表面涂层、表面接枝、表面特异性配体修饰及与其他高聚物共聚、与无机物复合是改性研究的热点。乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒药物载体的制备技术和改性研究方法较多，但尚未完全解决临床应用上如何控制药物适量的突释，使血药浓度快速达到有效治疗浓度而不导致杀死正常细胞等一些问题，乳酸-羟基乙酸共聚物纳米粒系统有待进一步的完善。     

载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜的制备及体外释药评价

背景：纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无需缝合生物移植材料还无法有效地在局部长时间缓释药物,特别是对于一些不稳定的生物活性蛋白药物。 目的：构建新型的能有效缓释蛋白药物的载表皮生长因子壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶羊膜复合体。 方法：制备表皮生长因子/壳聚糖载药纳米粒并考察其表征,然后将载药纳米粒掺入纤维蛋白胶,再将载纳米粒的纤维蛋白胶和羊膜胶联黏合,制备出负载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜,并进行形态学和体外释药观察,检测释放出的表皮生长因子生物活性。 结果与结论：表皮生长因子/壳聚糖纳米粒的粒径为(275.7±6.8) nm,Zeta电位为(32.7±0.6) mV,包封率为(67.03±1.22)%,多分散指数为0.23±0.04,形态圆形均一,载纳米粒纤维蛋白胶能够很好地与羊膜胶联黏合,表面呈网状结构,纳米粒充斥其中。载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜体外释药可达14 d,释放的表皮生长因子生物活性可保持7 d以上。说明制备的载重组人表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无缝合生物移植材料可在局部缓慢释放表皮生长因子。     

包裹pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒的制备以及特性研究

摘要背景：壳聚糖是生物可降解性天然多糖,其生物相容性好,安全无毒,故而在基因成为基因传递方面展现巨大潜力。目的：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒,观察研究其相关特性。设计、时间及地点：对比观察实验,于2009-02/2009-08在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。材料：pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70由国家卫生部纳米生物技术重点实验室构建,壳聚糖 (批号060306,上海伯奥生物科技有限公司,脱乙酰度>90.0%,粘度<100cps) ,B16细胞由中南大学肿瘤研究所惠赠。方法：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒,将壳聚糖基因纳米粒转染B16细胞,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测体外转染效果;应用噻唑蓝(MTT)评价壳聚糖基因纳米粒子的体外细胞毒性。 主要观察指标：激光粒度仪测定壳聚糖基因纳米粒径、Zeta电位;紫外分光光度计检测包封率;凝胶阻滞实验观察壳聚糖和质粒DNA的聚合;DNaseⅠ的保护试验分析壳聚糖基因纳米粒抗核酸酶降解能力。结果：壳聚糖基因纳米粒的平均粒径约为223 nm,zeta电位为16mV; DNA包封率为92.3%,B16细胞转染实验显示其效率与Lipofectamine 2000相近, 而其毒性远低于Lipofectamine 2000。 结论：壳聚糖纳米粒子可高效装载质粒DNA转染B16细胞,而且对细胞基本无毒。     

改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒对成骨细胞的毒性*

两亲性嵌段聚合物由于其较强的载药能力强、纳米级大小、血液中长循环等优点在载药系统中得到广泛的应用。 目的：评估改良自乳化溶剂扩散法制备的甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸 (MePEG-PLA)纳米粒对人骨肉瘤细胞MG63的毒性。 方法：通过改良自乳化溶剂扩散法制备MePEG-PLA纳米粒,MTS法测定纳米粒培养1,2,3 d后对MG63的毒性。激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布及Zeta电位;透射电镜表征纳米胶束外观形态;酶标仪检测培养1,2,3 d细胞吸光度值。 结果与结论：MePEG-PLA纳米粒的平均粒径为25.7 nm,分布均匀,呈球形,Zeta电位为-8.06 mV,MePEG-PLA毒性为 0级。提示改良自乳化溶剂扩散法制备纳米粒简单易行,制备的纳米粒无毒,具有良好的应用前景。     

壳聚糖-siRNA纳米粒的制备及其特征分析

目的 探讨离子凝胶法制备壳聚糖（CS）-siRNA纳米粒的特点，并分析其理化性质。方法 将CS、三聚磷酸钠（TPP）和siRNA通过离子凝胶法制备CS—siRNA纳米粒：透射电镜观察其形态，zeta电位／粒度分析仪测定纳米粒的平均粒径和zeta电位；分光光度计测定上清中siRNA含量．计算包封率、siRNA的体外控释能力；凝胶电泳分析与胎牛血清作用后纳米粒中siRNA的稳定性。结果 成功制备的CS—siRNA纳米粒经电镜观察发现纳米粒呈球形，大小均匀；zeta电位／粒度分析仪测定其平均粒径为83．3nin．zeta电位＋24．2mV；包封率为95％，24h内siRNA的体外释放率不足20％；电泳结果表明CS—siRNA性质稳定，能够阻止RNase对siRNA的降解，具有保护siRNA的作用。结论 离子凝胶法制备CS—siRNA纳米粒方法简单、条件温和，包封率高、稳定性好：纳米粒体外能显著延缓siRNA释放，保护siRNA免受降解。     

司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体的制备

背景：经作者检索,未见到有关制备司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体方面的相关报道。 目的：制备司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体,并对其表征进行分析。 设计、时间及地点：观察性实验,于2007-03/09在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。 材料：司莫司汀由浙江瑞新药业股份有限公司提供。聚乙烯吡咯烷酮由美国Sigma公司提供。 方法：加入聚乙烯吡咯烷酮作为磁性粒子包裹剂制备水基磁流体,采用反相蒸发超声法加高速搅拌制备司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体。 主要观察指标：运用透射电镜和PE热分析系统对磁流体进行表征,在高频交变磁场下进行体外加热试验。用透射电镜、图像分析系统和能谱仪对脂质体进行表征,HPLC法检验其中司莫司汀的包封率。 结果：干燥聚乙烯吡咯烷酮磁性粒子近似球形,粒径10~40 nm。居里温度在 120~140 ℃。其磁流体在高频交变磁场下可升温至40~46 ℃并保持恒定。以此磁性材料为载体制成的司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体的平均粒径为126.1 nm,其中含有Fe3O4成分,药物包封率达到65.48%。 结论：采用反相蒸发超声法加高速搅拌可制备纳米级司莫司汀聚乙烯吡咯烷酮磁性脂质体。所制备的脂质体粒径均匀,分布范围窄,药物含量稳定。     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察*★

目的：纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统，具有较高的载药量和物理稳定性。探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒（podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier，PPT-NLC）的制备方法及理化性质。 方法：实验于2006-08/2007-10在南方医科大学药学部实验室完成。选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸，采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC，用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)纳米粒混悬液。用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT-NLC理化性质，并比较SLN与NLC的包封率和稳定性。 结果：透射电镜下PPT-NLC外形呈圆形或椭圆形，平均粒径为（88.2±8.4）nm，多分散指数为0.190±0.085，Zeta电位为（-33.2±3.1）mV，包封率为86.6%。PPT-SLN分别为（75.3±16.2）nm，0.300±0.072，（-25.2±3.4）mV，包封率为76.5%。 结论：PPT-NLC制备工艺简单，分布均匀，稳定性较SLN好，包封率高。     

叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物制备及表征***

背景：醛基化海藻酸钠具有良好的水溶性和组织相容性,利用其改性Fe3O4磁性纳米颗粒可增加表面活性和稳定性,叶酸的修饰可赋予载体分子靶向性。 目的：制备具有叶酸受体靶向及磁靶向的载顺铂磁性纳米药物(CDDP-FA-ASA-MNPs)。 方法：采用高碘酸钠氧化法制备醛基化海藻酸钠,叶酸的羧基经二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺活化后合成FA与双端氨基聚乙二醇的耦连产物FA-PEG,化学共沉淀法制备Fe3O4,海藻酸钠侧链含有大量羧基,85 ℃下与Fe3O4纳米颗粒表面的羟基形成化学键结合,然后通过雪夫氏碱将FA-PEG与醛基化海藻酸钠相连接,最后根据配位络合的原理,顺铂分子中的-Cl被海藻酸钠的羧基取代,形成稳定的叶酸和醛基化海藻酸钠改性载顺铂磁性纳米复合物。 结果与结论：所制备的磁性纳米药物呈颗粒状,稳定分散于水溶液中,Fe3O4磁核平均粒径为(8.116±0.24) nm,流体力学直径为(110.9±1.7) nm,zeta电位为(-26.45±1.26) mV,最大饱和磁化强度为56.2 emu/g,顺铂包封率为(49.05±1.58)%,载药量为(14.31±0.49)%。体外实验证实,叶酸分子靶向载顺铂磁性纳米药物能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌细胞HNE-1和喉癌细胞Hep-2选择性摄取,而叶酸受体表达阴性的鼻咽癌细胞CNE-2则不摄取。提示所制备的CDDP-FA-ASA-MNPs具有良好的水溶性和稳定性,能被叶酸受体表达阳性的鼻咽癌和喉癌细胞摄取。     

磁性白蛋白纳米微粒的制备及其物理性能分析

目的探讨磁性白蛋白纳米微粒(MAN)的制备方法及其物理性能。方法用热处理法将人血白蛋白分散在纳米磁性微粒(Fe3O4)中,并加入表面活性剂——聚丙烯酸,在超声激烈搅拌下加热,使人血白蛋白稳定,得到人浆白蛋白包裹的生物相容MAN。结果实验制备出MAN具有纳米级的大小、尺寸和形状,扫描电镜和粒径测试仪测试MAN直径为100~1000nm,且具有确切的磁响应性、磁特性、靶向性和分散性等性能。结论用热处理法可以制备出纳米级具有磁响应性、磁特性、靶向性和分散性的生物相容的MAN。     

纳米氧化铁颗粒表征分析及其对体外标记肿瘤细胞磁信号变化的影响

背景：超顺磁性纳米氧化铁颗粒的粒径小,且具有良好的水溶性、组织相容性、超顺磁性及表面积效应,使其应用于磁共振成像和作为生物大分子等药物载体成为可能。 目的：构建葡聚糖包被的超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒(dextran coated iron oxide nanoparticles, DCIONP),分析其主要物理性质和磁学特性,并探讨其标记肿瘤细胞后对肿瘤细胞磁学特性的影响。 方法：通过化学共沉淀法制备葡聚糖包被的DCIONP。透射电镜和X射线粉末衍射法分析DCIONP的粒径和晶体结构,磁共振仪测定其弛豫率等主要物理和磁学参数。体外DCIONP分别标记人骨肉瘤MG63细胞、人肝癌HGP2细胞和鼠骨髓间充质干细胞后,用普鲁士蓝铁显色法和透射电镜观察DCIONP粒子在细胞内的分布,1.5T磁共振仪测量DCIONP体外标记肿瘤细胞后对肿瘤细胞磁信号的影响。 结果与结论：X射线衍射分析确定所制备的葡聚糖包被的磁性纳米粒子主要为Fe3O4晶体,氧化铁核心约为10 nm,具有超顺磁性,其弛豫率达3.936×106 mol/s。体外标记3种细胞后,见DCIONP主要分布在细胞核中,细胞浆中所占比率相对较小。体外磁标记后,肿瘤细胞的T2信号随着细胞数的增加而逐渐缩短,且2×109 L-1和2×1010 L-1磁标记细胞的磁信号呈明显的衰减状态。结果证实所制备的DCIONP粒子物理性能稳定,磁标记肿瘤细胞后在MR上能产生特征性的低信号。 关键词：超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒;肿瘤;细胞;磁共振成像;衰减;纳米生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.017     

肝素修饰金纳米粒子的制备及表征

背景：大分子修饰的金纳米粒子可被应用于治疗学或诊断学等其他方面,但是大多数报道多限于制备蛋白质、DNA及小分子糖修饰的金纳米粒子方面,对于制备多糖修饰的金纳米粒子的研究尚不深入。目的：制备一种肝素修饰的金纳米粒子,考察工艺条件并对其粒径及紫外吸收光谱进行观察。设计、时间及地点：对比观察实验,于2007-04/2008-09在武汉理工大学化工学院生物技术制药实验室完成。材料：制备金纳米粒子并在4 ℃保存供实验用。方法：将肝素钠用亚硝酸降解法降解,得到还原末端为醛基的肝素,分别溶解于二甲亚砜、含0.05 mL,0.5 mL冰醋酸的二甲亚砜溶液,再与对巯基苯胺发生还原胺化反应,用氰基硼氢化钠作还原剂,得到带巯基的肝素衍生物。另取样品溶解于4支含0.5 mL冰醋酸的二甲亚砜溶液的瓶内,再加入对巯基苯胺和氰基硼氢化钠,分别反应2,4,6,24 h。将得到的肝素衍生物加入到制备好的金纳米粒子溶液中,肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面。主要观察指标：①肝素修饰前后金纳米粒子的紫外光谱最大吸收波长。②肝素修饰前后金纳米粒子的粒径大小。结果：制备金纳米粒子时,当柠檬酸钠和氯金酸物质的量比为6∶1时,纳米粒子粒径均一。通过还原胺化反应制备端基为巯基的肝素时,加入冰醋酸的量越多,反应产率越高。反应6 h内,反应时间越长,其反应产率越高,24 h的反应产率虽比6 h的略有提高,但差别不大,说明6 h 反应已经基本完全。将肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面,金纳米粒子的粒径为10 nm,紫外最大吸收为522 nm;肝素修饰的金纳米粒子的粒径为20 nm,紫外最大吸收为529 nm。结论：制备了粒径均一的肝素修饰的金纳米粒子,并且粒径大小对纳米粒子的紫外最大吸收有影响。还原胺化反应的最佳反应条件是采用浓度比为8∶1的二甲亚砜/冰醋酸混合溶液作为溶剂,反应时间为6 h。     

透析法制备生物素化高分子纳米粒子及粒径控制

背景：国内关于透析法控制粒径大小方面的研究报道较少。 目的：考察制备方式及制备条件等对生物素化高分子纳米粒子粒径大小的影响。 方法：采用透析法制备生物素化两亲性共聚物纳米粒子,通过单因素实验对比纳米粒子粒径的大小。 结果与结论：采用有机相滴加至水相的制备方法获得的粒径大小较适合用于药物载体,且初始有机溶剂加入量对粒径的影响较大。     

Biofunctionalized magnetic nanoparticles for specifically detecting biomarkers of Alzheimer's disease in vitro

Magnetic nanoparticles biofunctionalized with antibodies against β-amyloid-40 (Aβ-40) and Aβ-42, which are promising biomarkers related to Alzheimer's disease (AD), were synthesized. We characterized the size distribution, saturated magnetizations, and stability of the magnetic nanoparticles conjugated with anti-Aβ antibody. In combination with immunomagnetic reduction technology, it is demonstrated such biofunctionalized magnetic nanoparticles are able to label Aβs specifically. The ultralow-detection limits of assaying Aβs in vitro using the magnetic nanoparticles via immunomagnetic reduction are determined to a concentration of ～10 ppt (10 pg/mL). Further, immunomagnetic reduction signals of Aβ-40 and Aβ-42 in human plasma from normal samples and AD patients were analyzed, and the results showed a significant difference between these two groups. These results show the feasibility of using magnetic nanoparticles with Aβs as reagents for assaying low-concentration Aβs through immunomagnetic reduction, and also provide a promising new method for early diagnosis of Alzheimer's disease from human blood plasma.     

重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球的制备及体外细胞毒性*☆

背景：通过各种微球负载骨生长因子使骨形态发生蛋白达到缓释效果逐渐成为研究热点,但关于载药壳聚糖纳米微球的生物相容性特别是细胞毒性的报道较少。 目的：对重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球进行细胞毒性检测,评估应用壳聚糖纳米微球作为重组人骨形态发生蛋白2缓释载体的生物安全性。 方法：通过离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球,应用透视电镜观察微球的形态,激光粒径分析其粒径分布;通过重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球体外细胞毒性试验评估微球的生物安全性。 结果与结论：离子交联法制备的壳聚糖微球,球形规整,分散均匀,微球平均粒径为230 nm,分布较集中。载药及空白微球的反应分级为0或1级,均为合格。提示,离子交联法制备可成功制备出负载重组人骨形态发生蛋2的纳米微球,且微球细胞毒性检测合格,为进一步的骨组织工程研究提供理论实验基础。     

磁导向纳米磁微粒栓塞脑动静脉畸形的实验研究

目的探讨磁导向纳米磁微粒定向栓塞脑动静脉畸形(CAVM)的有效性和可靠性。方法将建立了CAVM模型的15头小猪随机分为3组:磁导向组(聚焦磁场导向,n=6),非磁导向组(无聚焦磁场导向,n=6)和对照组(不做任何处理n=3),前两组均采用纳米磁微粒栓塞CAVM。分别在栓塞后1周进行DSA和B超声检查,观察栓塞效果。结果磁导向组在栓塞1周后DSA显示,CAVM和引流静脉几乎全部消失。术后1周B超示引流静脉无血流,右侧颈静脉血栓形成;平均流速为0,与非磁导向组的(70.22±2.26)cm/s和对照组的(75.53±2.24)cm/s相比,差异显著(P<0.01)。结论实验证实在磁场作用下,纳米磁微粒可以有效地、可靠地靶向栓塞小猪的CAVM。这可能为临床治疗CAVM提供了新的途径和栓塞材料。     

脂质沉积性肌病骨骼肌磁共振31磷波谱的临床价值研究

目的探讨脂质沉积性肌病(LSM)患者骨骼肌磁共振31磷波谱(31P-MRS)改变特征,以及在LSM辅助诊断和疗效评价方面的临床价值。方法对12例LSM患者在治疗前后和11例对照者分别进行31P-MRS扫描,获取波谱图像,计算谱线中无机磷酸盐(Pi)、磷酸肌酸(PCr)及三磷酸腺苷(ATP)的峰下面积,记录Pi/ATP、PCr/ATP和Pi/PCr的比值,计算Pi、PCr、细胞内pH(pHint)、二磷酸腺苷(ADP)和磷酸化潜能(PP)的值,并比较LSM患者治疗前和对照组、LSM患者治疗前后上述31P-MRS指标的差异。结果 LSM患者治疗前的PCr、PCr/ATP和PP较对照组明显降低(P<0.05),Pi/PCr和ADP较对照组明显升高(P<0.05),Pi、Pi/ATP和pHint与对照组比较无明显差异(P>0.05);LSM患者治疗后的PCr、PCr/ATP和PP较治疗前明显升高(P<0.05),ADP较治疗前明显降低(P<0.05),Pi、Pi/ATP、Pi/PCr和pHint与治疗前比较无明显差异(P>0.05)。结论31P-MRS可无创性检测LSM患者肌肉组织的能量代谢变化,有利于LSM的辅助诊断,并可运用于LSM患者的疗效评价。