耳蜗干细胞内耳移植对感音神经性耳聋大鼠听力恢复的实验研究

目的：探讨耳蜗干细胞内耳移植能否对感音神经性耳聋大鼠听力恢复产生影响。方法：从新生大鼠耳蜗分离的组织,经原代和传代培养,鉴定后移植入感音神经性耳聋模型大鼠内耳,将感音神经性耳聋大鼠模型分为两组：耳蜗干细胞移植组;PBS移植对照组;术后分别于1个月、18个月和24个月采用听觉脑干诱发电位方法检测模型大鼠的听力恢复情况,处死大鼠,通过免疫荧光染色方法,观察移植的耳蜗干细胞在内耳存活、分化和迁移情况。结果：分离新生大鼠耳蜗组织,细胞培养后,可获得大量Nestin阳性耳蜗干细胞。制作感音神经性耳聋模型,将耳蜗干细胞移植入感音神经性耳聋模型大鼠内耳,免疫荧光检测发现在耳蜗干细胞移植组移植针道两侧可见移植的Nestin阳性细胞和Myosin ⅦA阳性细胞。对照组呈较弱的荧光反应。听觉脑干诱发电位结果显示耳蜗干细胞移植组的感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复情况较好,对照组无明显改善。结论：耳蜗干细胞移植入内耳可存活、迁移和分化为内耳毛细胞,可促进感音神经性耳聋模型大鼠的听力恢复。     

干细胞移植治疗肝病的研究现状☆

学术背景：常规的内科保肝治疗效果不佳，原位肝移植仍然是治疗终末期肝病最有效的措施，但肝源缺乏、费用昂贵、移植排斥反应及长期应用免疫抑制剂引起并发症等成为限制其广泛应用的主要原因。干细胞移植有利于受损肝组织修复，能够代偿部分肝功能，已成为治疗肝病的一种新方法。 目的：介绍干细胞移植治疗肝病的研究现状。 检索策略：由该论文的研究人员应用计算机检索 Pubmed 2002-01/2007-12的相关文献，检索词“transplantation of stem cell，liver disease，hepatic disease”，并限定文献语种为“English”。同时计算机检索中国知识资源总库CNKI 2002-01/2007-12的相关文献，检索词“干细胞移植，肝病”，并限定文献语种为中文。共检索到125篇文献，对资料进行初审，纳入标准：①文章内容与干细胞移植应用于肝病的治疗相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准：重复研究或Meta分析类文章。 文献评价：文献的来源主要是通过对干细胞移植治疗肝病方面内容进行汇总分析，其中36篇相关度较高，对完全符合标准的30篇作为参考文献进行综述。进一步查找全文，2篇为综述，其余均为临床或基础实验研究。 资料综合：①干细胞移植动物实验：采用不同方法建立肝损伤动物模型，对成模动物以不同途径进行不同种类的干细胞移植实验，移植后行肝脏组织学检查及检测转氨酶和白蛋白等肝功能指标，结果显示干细胞移植能够改善肝功能，修复肝脏组织结构，减轻肝脏损伤。②干细胞移植用于临床治疗：多项通过干细胞移植治疗终末期肝病和难治性肝病患者的研究表明，干细胞移植后患者症状缓解，肝功能和凝血功能明显好转，治疗时间缩短，改善预后，且无严重并发症出现。③干细胞移植相关并发症及其应用评价：行干细胞移植治疗肝病患者的临床研究，未经合理的多中心、大样本、随机对照实验设计，其治疗效果不确切，至今仍存在不同观点，且移植后可出现病毒感染及肝静脉梗阻等并发症，以及干细胞的致瘤性，均限制了其应用。 结论：尽管目前多项干细胞移植用于治疗肝病患者的临床研究均已取得一些疗效，但有报道认为其对肝损伤无明显改善，且产生相关并发症，同时仍存在一定问题。因此需要合理设计，并进行随机对照来确证以往研究结果的可靠性，使其成为治疗肝病的一个安全有效措施，从而排除质疑，推进其临床应用。     

神经干细胞移植对脑出血模型大鼠神经功能的影响☆

背景：外源性神经干细胞具有神经修复作用，可能对脑出血后的神经功能恢复起到一定的作用。 目的：观察胎鼠神经干细胞的体外生长、分化及移植到脑出血大鼠后的存活、迁徙、分化情况，探讨神经干细胞对脑出血模型大鼠受损神经功能的修复作用。 设计：完全随机分组设计，对照动物实验。 单位：复旦大学附属华山医院神经外科 材料：选用健康雄性成年SD大鼠18只为受体，体质量280~320 g，由中国科学院上海实验动物中心提供。实验用鼠抗BrdU为Neomarkers产品, 鼠抗胶质纤维酸性蛋白和兔抗微管相关蛋白2 为Chemicon产品。 方法：实验于2006-02/12在复旦大学附属上海医学院解剖组胚实验室完成。从胎龄14 d的胎鼠海马中分离、培养、鉴定神经干细胞。16只受体SD大鼠被随机分为3组：对照组，PBS组和移植神经干细胞组。均通过尾状核内注射自体动脉血制作大鼠脑出血模型。移植NSC组在造模后30 min在血肿腔周围四点分别移植浓度为2×1011 L-1神经干细胞悬液5μL；PBS组于相同时间点在脑内相同部位注射PBS；PBS和神经干细胞的移植方法同自体血的移植方法。对照组大鼠在造模后30 min只造成四点损伤，不注射任何物质。 主要观察指标：在造模后立即，1，3，5，14，21，28 d采用前肢评分和转身评分对大鼠神经功能进行评估。大鼠于造模后28 d麻醉后取脑，并通过双标胶质纤维酸性蛋白、微管相关蛋白2、BrdU免疫组化来检测移植入脑的神经干细胞在体内的分化情况。 结果：①神经功能评分：造模后5 d，各组差异无显著性意义（P > 0.05）。造模后14~28 d，干细胞移植组较其他3组明显改善（P < 0.05）。②脑组织切片双免疫组织学双标染色结果：干细胞移植组血肿周围凋亡细胞少于PBS组。受体大鼠脑组织切片显示有BrdU, 微管相关蛋白2,胶质纤维酸性蛋白阳性细胞，说明神经干细胞可以在宿主脑内存活、迁徙和分化，可以分化为神经元样细胞和神经胶质样细胞。 结论：神经干细胞移植可能通过分化为神经元样细胞和神经胶质细胞促进大鼠脑出血的神经功能恢复。     

神经干细胞与内耳听力损伤及修复

背景：神经干细胞不仅在大脑、脊髓及周围神经的临床应用有大量研究,在内耳的应用也日益受到重视。研究发现利用神经干细胞移植修复内耳毛细胞、螺旋神经节以及听神经损伤是可行的。目的：复习相关文献,就神经干细胞的特性、培养、内耳听力损伤的应用等方面进行综述。方法：由第一作者检索1990/2008 PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及万方数据库(http://www. wanfangdata.com.cn)有关神经干细胞培养、分化及在内耳应用等方面的文章。英文检索词为“neural stem cells,transplant,inner ear,peripheral nerve”,中文检索词为“神经干细胞,移植,内耳,周围神经”。检索文献量总计107篇,排除重复性研究,初检得到107篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,共保留其中的36篇归纳总结。结果与结论：虽然对神经干细胞的生物学特性有了进一步的了解,对神经干细胞的研究取得了重大的进步,在听觉研究中可以应用干细胞移植,再生或保护毛细胞和与之相连的螺旋神经元,给内耳疾病治疗带来广泛的前景;但实现毛细胞再生和重建听觉通路依然是充满希望的挑战。随着神经干细胞基础理论的不断更新和发展,其在临床的应用一定会取得突破性进展。     

帕金森病的干细胞治疗进展☆

传统帕金森病的治疗方法主要有药物治疗和外科治疗,近来发展较快的治疗方法则包括干细胞移植及基因治疗等。用于治疗帕金森病的干细胞有胚胎干细胞、神经干细胞、间充质干细胞,干细胞移植在帕金森病动物模型和临床上都取得了一定的治疗成果,干细胞联合基因治疗也取得了较好的研究结果。干细胞移植治疗帕金森病的机制主要有替代作用、对多巴胺能神经元的保护及营养作用及促进内源性多巴胺能神经元的发生,但干细胞来源的多巴胺能神经元移植后能否存活、恢复纹状体的神经支配、移植干细胞的远期疗效等还有待于进一步证明。     

神经营养因子3基因修饰神经干细胞移植脊髓损伤的相关蛋白表达☆

背景：研究表明神经干细胞和神经营养因子3基因修饰的神经细胞联合移植能够在移植后存活并有效促进脊髓横断后脊髓的功能恢复,但神经营养因子3基因修饰的神经干细胞能否在脊髓受损部位发挥功能并促进脊髓损伤大鼠的功能恢复? 目的：观察神经营养因子3基因修饰胚胎脊髓神经干细胞移植后脊髓损伤大鼠的功能恢复情况及损伤局部的基因表达。 方法：将30只SD大鼠在T9水平进行脊髓半切后,随机分为3组,分别在受损脊髓内植入细胞培养液、神经干细胞及神经营养因子3基因修饰神经干细胞。另取10只仅行椎板切除设置为空白对照。移植后通过行为学测试评价脊髓功能的恢复,RT-PCR和Western blot检测脊髓损伤部位神经营养因子3和髓鞘碱性蛋白的表达。 结果与结论：移植神经营养因子3基因修饰神经干细胞组行为学测试结果最好,移植细胞培养液组行为学测试最差。与移植细胞培养液组相比,移植神经干细胞及神经营养因子3基因修饰神经干细胞组大鼠脊髓组织中神经营养因子3基因和髓鞘碱性蛋白基因的mRNA水平明显上调,在蛋白水平也有类似的结果,且神经营养因子3基因修饰神经干细胞组效果更明显。提示移植神经营养因子3基因修饰神经干细胞能促进脊髓受损部位出现更多向少突胶质细胞分化的细胞,并能更强的表达神经营养因子3。     

ABO血型不合外周血造血干细胞移植10例☆

背景：ABO血型不合供受者之间进行外周血造血干细胞移植,面临受者血型的转变、移植后输血的选择等问题。 目的：观察ABO血型不合外周血造血干细胞移植治疗血液病的临床疗效和近远期并发症。 方法：回顾性分析了2005/2008武警总医院收治的10例ABO血型不合异基因外周血同胞供者造血干细胞移植患者的资料。总结植入效果,血型转变,移植物抗宿主病以及不良反应。 结果与结论：9例患者恢复造血功能,血型转变为完全供者型,1例患者白细胞血小板恢复,但红细胞植入延迟。所有患者在输注移植物时未出现短暂的血红蛋白尿,无严重急性溶血和迟发型溶血的发生,1例出现严重的移植物抗宿主病。可见ABO血型不合外周血造血干细胞移植对移植疗效无明显影响,红细胞植入延迟的预防和处理十分重要。     

单倍体相合造血干细胞移植治疗高危白血病☆

背景：异基因造血干细胞移植是治疗高危白血病的主要方法,单倍体相合的造血干细胞移植扩展了移植的应用范围。 目的：观察“改良Bu/Cy+ATG”为预处理方案的单倍体相合造血干细胞移植治疗高危白血病的疗效。 方法：对19例高危白血病患者,均采用“改良Bu/Cy+ATG”预处理方案,采用外周血造血干细胞移植5例,外周血+骨髓造血干细胞移植14例。应用甲氨蝶呤,环孢素A,吗替麦考酚酯预防移植物抗宿主病。 结果与结论：①短期疗效：中性粒细胞恢复的中位时间为12(8~20) d;血小板恢复的中位时间为13(10~31) d;移植后100 d内,移植相关死亡率为(15.8±8.4)%。②移植物抗宿主病发生情况：Ⅰ~Ⅳ度急性移植物抗宿主病总发生率(63.1±11.1)%,慢性移植物抗宿主病发生率(54.54±15.0)%。③远期疗效：2年无病生存率为(28.2±15.5)%,2年总体生存率为(46.9±16.5)%。结果提示,高危白血病无人类白细胞抗原相合血缘供者及无人类白细胞抗原相合非血缘供者,而又急需进行挽救性移植时,“改良Bu/Cy+ATG”为预处理方案的单倍体相合造血干细胞移植是一种可行的选择。     

嗅鞘细胞移植修复大鼠脊髓损伤的组织病理学变化☆

背景：对于脊髓损伤,目前临床尚无有效的治疗对策,近年来嗅鞘细胞移植对脊髓损伤修复取得了一定的进展。 目的：观察嗅鞘细胞移植在缓解损伤脊髓的病理反应和超微结构变化,及其在发生发展中的作用。 方法：60只大鼠随机分为空白组,模型组,嗅鞘胞移植组和DF12组,每组15只。空白组：仅切开T10全椎板及T9,T11部分椎板,对脊髓未作其他处理,明胶海绵轻柔压迫止血;模型组：仅切断脊髓,未作特殊处理;嗅鞘细胞移植组和DF12组：切断脊髓后用微量注射器分别注射嗅鞘细胞和DF12培养液,随后缝合切口。脊髓损伤后1,3,7,14,28,42,56 d每组麻醉2只受检大鼠,取材做光镜观察和电镜观察。 结果与结论：单纯脊髓横切损伤后,发生了出血、水肿、变性、坏死以及囊腔形成,胶质细胞增生和神经纤维再生。嗅鞘细胞移植后,明显减轻了神经元和神经纤维的坏死变性程度,减轻病理反应,并能对损伤神经元实施保护;防止了胶质细胞过度增生形成瘢痕屏障,明显增加了再生神经纤维的数量。提示嗅鞘细胞移植对损伤脊髓具有减轻病理反应和促进修复的作用。     

干细胞移植治疗脑血管病的临床研究

近几年,干细胞的研究已成为世界研究的热点。在这场前景诱人的国际竞争中,我国和世界水平同步发展。我院在这方面反应较快,与北大医院合作,成立了国内为数不多的干细胞实验室,分化的干细胞已应用于临床。由于干细胞具有分化和繁殖能力,对神经系统具有修复和再生功能,所以可用于脑血管病的治疗。我们采用自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑血管病,临床治疗7例,取得初步成效,现将研究及观察结果报告如下。1资料与方法1.1临床表现见表1。表17例患者临床表现患者性别年龄病史症状体征孙生才男754dI完V全级性。运动性失语,左侧肢体肌力赵福顺男551…     

Neural stem cells suppress the hearing threshold shift caused by cochlear ischemia

Neural stem cells are multipotent progenitor cells that show self-renewal activity. In this study, we assessed the use of neural stem cells for ameliorating ischemia-reperfusion injury of the gerbil cochlea. Neural stem cells were injected into one inner ear through the round window 1 day after ischemic insult. Immunostaining for nestin showed that the distribution of neural stem cells was concentrated within the organ of Corti. Seven days after ischemia, the injury-induced auditory brainstem response threshold shift and progressive inner hair cell damage were markedly less on the neural stem cell-transplanted side. These results suggest that the transplantation of neural stem cells is therapeutically useful for preventing damage to hair cells that occurs after transient ischemia of the cochlea.     

神经干细胞与神经生长因子对豚鼠损伤内耳保护效果的比较

背景：研究证明神经干细胞在体外能自然分泌一定量的神经生长因子，因此若将神经干细胞移植入内耳，可作为神经生长因子源源不断的供体。 目的：比较神经干细胞内耳移植和神经生长因子肌肉注射两种方式对豚鼠损伤内耳的保护效果。 设计：随机对照动物实验。 材料：新生24 h豚鼠5只，用于脑海马神经干细胞的制备。 方法：①动物实验：健康豚鼠40只，随机分为6组：正常对照组4只，不施加任何处理因素；单纯耳蜗打孔组8只，仅施以耳蜗底转骨壁打孔术；单纯神经干细胞移植组8只，经耳蜗底转骨壁打孔后，向内耳注入Brdu标记的神经干细胞；致聋模型组4只，按4 mg/kg体质量连续3 d腹腔注射顺铂建立耳聋模型；致聋后神经干细胞移植组8只，先造成耳聋模型，而后经耳蜗底转骨壁打孔向内耳注入Brdu标记的神经干细胞；致聋后神经生长因子移植组8只，先造成耳聋模型，然后肌肉注射神经生长因子。移植后14，28 d测定纯音听阈值，各处死4只用于耳蜗基底膜四唑氮蓝铺片、苏木精-伊红染色、Brdu免疫组化染色、神经生长因子免疫组化染色。②RT-PCR检测实验：健康豚鼠30只，随机分为4组：正常对照组8只、致聋模型组8只、致聋后神经干细胞移植组5只、致聋后神经生长因子移植组9只，干预措施同上。移植后28 d RT-PCR检测各组动物耳蜗组织神经生长因子mRNA的表达。 结果：与正常对照组比较，移植后14，28 d致聋模型组、致聋后神经干细胞移植组、致聋后神经生长因子移植组的纯音听阈值均显著升高（P < 0.05），但后2组升高幅度明显低于致聋模型组（P < 0.05），且毛细胞排列整齐，无缺失、核溶解、碎裂等现象，螺旋神经节细胞的结构及形态基本接近正常对照组。移植后7 d，耳蜗底转的移植位点、鼓阶蜗轴侧周围及基底膜下方均可见大量BrdU阳性细胞，血管纹、鼓唇和蜗神经纤维神经生长因子免疫组化染色均呈阳性表达，28 d时致聋后神经干细胞移植组染色程度强于致聋后神经生长因子移植组。RT-PCR检测耳蜗神经生长因子mRNA的表达与免疫组化染色结果基本一致。 结论：内耳移植神经干细胞和肌肉注射神经生长因子对豚鼠损伤内耳的毛细胞、螺旋神经节以及听力保护作用基本相似，但免疫组化及RT-PCR结果表明前者耳蜗内分布的神经生长因子较后者更为密集。     

Origins and targets of commissural connections between the cochlear nuclei in guinea pigs

Our objective was to identify the origins and targets of axons that project from one cochlear nucleus to the other. First, retrograde tracers were injected into one cochlear nucleus to label commissural cells in the opposite nucleus. In the dorsal cochlear nucleus, a few cells in the deep layers were labeled; they were not further classified according to type. In the ventral cochlear nucleus, all commissural cells that could be classified were multipolar cells. Second, an anterograde tracer was injected into one cochlear nucleus, and the distribution of boutons in the opposite cochlear nucleus was examined. Labeled boutons were present throughout the ventral cochlear nucleus, where they appeared to contact multipolar cells, spherical and globular bushy cells, and octopus cells. In the dorsal cochlear nucleus, labeled boutons were present in the fusiform cell and deep layers and appeared to contact fusiform cells and cells of unknown type. Many labeled terminals were also present in the granule cell regions. Injections into regions associated with high or low frequencies labeled boutons in corresponding regions in the contralateral ventral cochlear nucleus. Third, multiple tracers were used to determine whether cells that project to the inferior colliculus are contacted by commissural axons. Boutons labeled by anterograde transport of one tracer placed in the cochlear nucleus were frequently observed to be apposed to cells that were labeled by retrograde transport of a different tracer placed in the contralateral inferior colliculus. We conclude that commissural projections originate from multipolar cells throughout the ventral cochlear nucleus (and from a small number of cells in the dorsal cochlear nucleus) and make contact with all major cell types of the cochlear nuclei, including at least some of those that project to the inferior colliculus. © 1996 Wiley-Liss, Inc.     

Identification and characterization of mouse cochlear stem cells

Genetic, noise- and drug-induced loss of hair cells in the mouse and human cochlea leads to permanent hearing loss due to lack of regeneration of hair cells, which may be due to reduced numbers or loss of the regenerative ability of stem cells in the adult cochlea. We hypothesized that the mouse neonate cochlea harbors stem cells capable of differentiating into hair cells. Cells from the primary neonate cochlear culture began to proliferate and formed floating spheres after 14 days in vitro (DIV). By comparison, spheres from the primary culture of the cortex were observed after 7 DIV. Cochlear sphere cells could be passaged and the new spheres were observed after 7 DIV. Cochlear sphere cells were capable of differentiating into astrocytes and oligodendrocytes, but not neurons under the conditions tested. Cochlear sphere cells expressed Sox2 and Myo7a, but failed to show markers that are expressed exclusively in mature cochlear tissue, while cells from cortex spheres expressed Sox2 and Otx2, but not Myo7a. Our results show that cochleae from neonatal mice harbor cells capable of forming spheres and cells from these spheres appear to be better endowed to become hair cells.     

经5-氮胞苷诱导后的骨髓间充质干细胞心肌移植后对心功能的影响

背景：骨髓间充质干细胞具有多分化潜能,但其在体外经5-氮胞苷诱导后移植于急性心肌梗死大鼠中,能否改善近期及远期的心功能,目前尚不明确。 目的：观察兔骨髓间充质干细胞移植入急性心肌梗死组织后对心功能的影响。 方法：分离培养兔骨髓间充质干细胞,5-氮胞苷诱导4周后,体外DAPI标记。新西兰兔随机均分3组,假手术组：打开胸腔1 h后缝合胸腔;骨髓间充质干细胞组：于冠状动脉结扎建立急性心肌梗死模型后1 h在梗死周边区用微量注射器分4点注射诱导后的自体骨髓间充质干细胞;急性心肌梗死组：造模后于相同部位注射等量生理盐水。移植后3 d,4周超声心动图检测各组大鼠左室舒张末期容积,左室收缩末期容积及射血分数变化。 结果与结论：荧光显微镜观察发现,骨髓间充质干细胞组移植后3 d,4周心脏标本中均发现有DAPI标记的阳性细胞,呈散在分布于瘢痕周边区并沿心肌纤维排列方向走行。移植后3 d,骨髓间充质干细胞组与急性心肌梗死组相比,左室舒张末期容积、左室收缩末期容积及射血分数无明显差异,心功能没有明显的改善;移植4周后,骨髓间充质干细胞组与急性心肌梗死组相比,射血分数明显提高,左室舒张末期容积、左室收缩末期容积明显降低。     

胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植对宿主肝功能的影响及安全性评估**☆

背景：体外诱导胚胎干细胞分化为肝细胞已有不少成功的报道，但其体内移植后能否有效整合入宿主肝板、在肝内能否进一步生长分化并表达肝细胞功能以及成瘤的风险等情况目前还不清楚。 目的：应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植, 观察其在肝组织替代、体内的生长分化及成瘤性情况。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学附属第二医院小儿外科。 材料：选用BALB/c小鼠24只为受体，鼠龄6~8周，体质量20~ 35 g，雌雄不拘购自广州市实验动物中心。实验所用胚胎干细胞源性肝干细胞由作者所在课题组诱导胚胎干细胞分化而成。小鼠胚胎干细胞株E14由本院干细胞中心提供。 方法：实验于2006-07/2007-06在中山大学附属第二医院干细胞研究中心完成。将24只小鼠随机分为2组：肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组，每组12只。前组分两次按50 mg/kg剂量腹腔内注射倒千里光碱(retrorsine) ，间隔2周，第2次注射4周后行70%肝部分切除制造肝损伤；然后经门静脉分别移植1×105羟基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）荧光标记的细胞入小鼠肝内进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。后组在行70%肝部分切除制造肝损伤模型后进行胚胎干细胞源性肝干细胞移植。 主要观察指标：荧光显微镜下观察移植细胞组受体鼠肝脏内分布、整合与体内生长分化情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)、血清白蛋白水平检测其功能状况。将胚胎干细胞源性肝干细胞注入治疗性肝再生小鼠肝内，将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下作为对照，观察胚胎干细胞源性肝干细胞体内成瘤情况。 结果：①肝干细胞在受体鼠肝内生长情况：CFDA SE标记的胚胎干细胞源性肝干细胞肝内移植1周，受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分布。2周后，肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大，且可见类似肝索样结构排列。②肝功能：共焦白蛋白荧光免疫组化(双荧光染色)结果表明，受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达白蛋白阳性信号（呈黄色荧光），肝再生模型+干细胞移植组和肝切除+干细胞移植组血清白蛋白水平则无明显差异（P > 0.05）。③肝干细胞移植安全性：6周内未见畸胎瘤形成，而将未分化的胚胎干细胞移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成。 结论：胚胎干细胞源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能；且此移植安全性较好。     

Effects of antioxidants on auditory nerve function and survival in deafened guinea pigs

Based on in vitro studies, it is hypothesized that neurotrophic factor deprivation following deafferentation elicits an oxidative state change in the deafferented neuron and the formation of free radicals that then signal cell death pathways. This pathway to cell death was tested in vivo by assessing the efficacy of antioxidants (AOs) to prevent degeneration of deafferented CNVIII spiral ganglion cells (SGCs) in deafened guinea pigs. Following destruction of sensory cells, guinea pigs were treated immediately with Trolox (a water soluble vitamin E analogue)+ascorbic acid (vitamin C) administered either locally, directly in the inner ear, or systemically. Electrical auditory brainstem response (EABR) thresholds were recorded to assess nerve function and showed a large increase following deafness. In treated animals EABR thresholds decreased and surviving SGCs were increased significantly compared to untreated animals. These results indicate that a change in oxidative state following deafferentation plays a role in nerve cell death and antioxidant therapy may rescue SGCs from deafferentation-induced degeneration.     

Origins of projections from the inferior colliculus to the cochlear nucleus in guinea pigs

We used retrograde tracing techniques to examine the projections from the inferior colliculus to the cochlear nucleus in guinea pigs. Following injection of a retrograde tracer into one cochlear nucleus, labeled cells were found bilaterally in all subdivisions of the inferior colliculus. The majority of cells were located in the central nucleus and external cortex; relatively few cells were located in the dorsal cortex. Multipolar (stellate) cells were labeled in all subdivisions of the inferior colliculus. In the central nucleus, disk-shaped cells were also labeled. To determine whether individual collicular neurons send collateral projections to the cochlear nuclei on both sides, we injected different fluorescent tracers into left and right cochlear nuclei in the same animal. The inferior colliculi contained very few double-labeled cells, indicating that the projections to ipsilateral and contralateral cochlear nuclei originate from separate populations of cells.     

Cochlear stem cell transplantation for hearing recovery in a rat model of sensorineural hearing loss

BACKGROUND: Transplantation of in vitro, cultured, neural stem cells or bone marrow stem cells into the cochlear wall or oval window has been used to observe survival, proliferation, and differentiation of cochlear stem cells, as well as migration of differentiated hair cells in scala tympani over a short period of time.OBJECTIVE: To investigate the relationship between survival, proliferation, differentiation, and migration of transplanted cochlear stem cells and hearing recovery from sensorineural hearing loss. DESIGN, TIME AND SETTING: A randomized, controlled, animal experiment was performed at the Laboratory of Neurobiology, Southeast University in 2009.MATERIALS: Stem cells were isolated from neonatal rats, followed by primary and passaged cultures.METHODS: A total of 30 adult, male rats with normal hearing were treated with gentamicin sulfate to establish models of sensorineural hearing loss. The model rats were randomly assigned to cochlear stem cell transplantation and control groups, which were respectively injected with a 10-μL cochlear stem cell suspension (1 × 105/μL) and phosphate-buffered saline into the scala tympani.MAIN OUTCOME MEASURES: Rat hearing recovery was detected by brainstem auditory-evoked potential at 1, 9, and 15 months following transplantation. The location of stem cells was detected using nestin immunofluorescence, proliferative capacity was detected using bromodeoxyuridine immunofluorescence, and hair cell differentiation was detected using Myosin VIIA immunofluorescence. RESULTS: Cochlear stem cells migrated from the needle track to the spiral organ along the scala tympani following transplantation, and the hair cell-like cells migrated to the basal membrane and organ of Corti. The threshold of brainstem auditory-evoked potential increased with increasing time (P < 0.05). CONCLUSION: Transplanted cochlear stem cells from the internal ear migrated to the basal membrane and reached the injury site. The cells differentiated into cells with internal ear functions to improve hearing in rat models of sensorineural hearing loss.