霍乱疫苗效力试验替代方法的研究

目的研究霍乱疫苗效力试验的替代方法。方法以不同剂量霍乱疫苗免疫小鼠,用间接ELISA方法检测小鼠全血的抗菌、抗毒抗体滴度,小鼠毒菌攻击法计算保护率。结果抗毒、抗菌抗体水平与免疫剂量和攻毒后的动物保护率成正相关,结果稳定。结论可以通过检测高免疫剂量组实验动物的抗菌、抗毒抗体替代以往小鼠攻毒法的效力试验。     

用抗原捕获ELISA进行组织培养乙型脑炎灭活疫苗的效力试验

从往常用小鼠攻击法对组织培养乙型脑 炎(JE)灭活疫苗进行效力试验,其缺点是需要的小鼠量大,且21天后才能获得结果。以单克隆抗体(McAb)捕获抗原ELISA对组织培养JE灭活疫苗进行效力试验,可使试验简单、快速、可靠,而且敏感性和特异性都好,因此,可作为测定JE灭活疫苗效力的筛选试验。     

百日咳血清学效力试验的建立

作者采用ELISA法测定百日咳全菌体菌苗（WCV）诱导小鼠产生的特异性IgG抗体,建立了抗体应答的血清学试验。并比较小鼠保护试验（MPT）和百日咳血清学效力试验（PSPT）,认为小鼠抵抗致死性脑内（ic）攻击的保护力主要依赖于特异性抗体,因此可使用血清学方法估测百日咳菌苗的效力。     

乙型肝炎疫苗在豚鼠、小鼠和人体中的免疫原性

本文报道了用豚鼠效力试验评价巴斯德研究所生产的乙型肝炎疫苗免疫原性的重复性和敏感性,比较了该疫苗在不同温度下的稳定性以及在豚鼠、小鼠和人体中的不同免疫原性.免疫原性试验所用疫苗分商品疫苗和实验疫苗两种.商品疫苗每ml含5μg HBsAg,吸附在Al(OH)_3上,以未稀释和生理盐水连续稀释的疫苗,皮下接种300～350g雄性豚鼠,28天后采血用RIA检测抗体.>50RIA单位为阳性.然后与参考标准疫苗比较结果,计算相对效力(RP);实验疫苗含5、1.25和0.312μg HBsAg,佐剂同上.皮下接种豚鼠每种疫苗各1ml.6周龄雌性小鼠用连续稀释     

不同ELISA检测狂犬病疫苗抗原性的比较

目前常用疫苗攻击试验(如小鼠效力试验)对人用和兽用狂犬病灭活疫苗进行效力检定,本文讨论了体外ELISA法代替体内效力试验的可行性.人用冻干狂犬病灭活疫苗选用原代狗肾细胞培养的PM株(PM-DKC)制备,兽用液体灭活疫苗分别用PV、SAD、PM和Flury-LEP株制备.采用两种免疫捕获ELISA(GPELISA 6-15和GP ELISA 78-9)及一种竞争ELISA(GP ELISA)检测疫苗糖蛋白(GP)抗原,这些试验均以生物素标记的GP-单克隆抗体(McAb)2-22为指示抗体;采用竞争     

快速金标法检测HBsAg在无偿献血初筛中的应用

目的 观察金标法在初筛献血员中的应用价值。方法 用金标法测定献血员末梢血中的HBsAg，测定结果与ELISA法结果以及RIA（放射免疫测定）结果相比较。结果 在283员献血员中，用金标法检测，阴性258人，阳性25人；用ELISA及RIA法检测，258例阴性（金标法检测结果），2例显示阳性，25例阳性（金标法）1例显示阴性，ELISA及RIA法结果一致。结论 金标法初筛献血员结果可靠，该法可予以推广。     

口服脂质化卡介苗能预防小鼠肺结核

卡介苗(BCG)是全世界应用最广的疫苗，自发现以来已接种达30亿剂，但其保护效力变化不一，从0％至80％不等，研究表明BCG接种能使肺结核(TB)的危险性降低50%，TB的死亡率降低70％。本文报道了新型脂质化BCG配方的研制，及其在小鼠中的     

Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法的建立及应用

目的  建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV）D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA方法,用于sIPV的体外效力评价。方法  以纯化D抗原分别免疫西门塔尔牛和BALB/c小鼠,获得牛免疫血清和小鼠单克隆抗体（单抗）杂交瘤细胞株,以杂交瘤细胞株免疫小鼠制备单抗腹水。牛血清和小鼠腹水分别经沉淀和亲和层析后得到纯化牛多克隆抗体（多抗）和小鼠单抗。以多抗为包被抗体、单抗为检测抗体进行配对筛选,建立D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA。对方法的线性、范围、特异性、准确度、精密度以及在sIPV制备过程中样品检测的适用性进行验证。结果  纯化多抗和单抗均具有中和抗体活性,纯度分别达到80%和90%以上。经抗体配对筛选,确定3H10、901、1H10作为检测抗体,分别用于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA的建立。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型包被抗体的使用浓度分别为1:8 000、1:8 000、1:10 000, 3H10、901、1H10检测抗体的使用浓度分别为1:10 000、1:20 000、1:10 000。建立的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原检测方法的检测范围分别为0.4~13.0、0.4~12.0和0.4~20.0 DU/ml,线性回归决定系数≥0.99。该法能特异性检出D抗原,与C抗原、不同型别D抗原以及生产过程中的其他物质无交叉反应。用该法对高、中、低浓度样品进行测定,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型测定值/理论值（×100%）分别为97%～111%、91%～104%和95%～102%、相对标准偏差分别为≤7%、≤9%和≤10%;采用该法检测sIPV生产过程中的样品,显示出抗原纯化趋势。结论  建立了脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法,可有效用于sIPV的体外效力评价。     

RIA和ELISA测定A群脑膜炎球菌荚膜多糖抗体的比较

作者用A群和C群两价脑膜炎球菌多糖菌苗免疫16名20～60岁的成人,采用放射免疫试验(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定A群脑膜炎球菌多糖抗体,抗体水平以μg抗体蛋白/ml血清表示.在RIA中用~(125)I标记多糖,在ELISA中用纯化多糖或~(127)I标记多糖.实验结果证明,酪胺和碘标记多糖并不影响其抗原性.应用RIA和ELISA两种方法重复测定16份血清样品的抗体水平,结果RIA的重复性的变差系数明显低于ELISA     

用ELISA法筛选针对细胞表面抗原的单克隆抗体

本文介绍一种筛选针对血小板及其它细胞表面抗原的单克隆抗体的酶联免疫吸附法(ELISA)。本方法特异性与敏感性较高,10ng/100ul浓度的抗血小板单克隆抗体即呈明显的阳性反应。与放射免疫法(RIA)同时测定100份杂交瘤培养上清,结果ELISA法55份阳性,RIA法57份阳性,符合率为90%,无统计学差异(P=0.75)。ELISA法OD值与RIA法cpm值之间高度相关(r=0.89)。ELISA简单安全,抗原细胞用量为RIA的1/50,是一种实用的方法。     

人用狂犬病疫苗全球问题

自巴斯德研制出狂犬病粗制神经组织疫苗以来，各种人用狂犬疫疫苗相继问世，其效力和安全性各不相同。如使用得当，新的细胞培养疫苗的保护率几达１００％，且安全性很高，尽管如此，每年全世界仍有４万余人死于狂犬病。有此暴露前及暴露后的免疫对照实验及临床研究表明，纯化的鸡胚细胞疫苗Ｒａｂｉｐｕｓ的安全性和效力与人二倍体细胞疫苗的相同，而后者是目前人用狂犬病疫苗的金标准。     

乙型肝炎表面抗原检验质量调查分析（摘要）

1992年对我医34个免疫实验室的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测进行了室间质量调查。我区HBsAg检测主要采用酶免法(ELISA)和血凝法(RPHA),只有个别单位采用放免法(RIA)。第一季度调查时以RPHA为主(22个)．该季度总正确符合率为55%,第四季度RPHA法减至5个．而ELISA法增至27个．     

轮状病毒疫苗研究进展

本文简介了轮状病毒的结构和生物学特性，并概述了轮状病毒疫苗的研制状况、困难、提高疫苗效力的一些方法以及进一步研究的方向。     

疫苗诱导的抗结核病保护性免疫应答

BCG是公认的结核病预防疫苗，但其保护力从0％～80％不等，因而印度德里大学南校的Khera等分别以pAK3和pAK4为载体制备了6种表达结核杆菌（MTB）ESAT-6蛋白（E6）、a晶体蛋白（acry）或超氧化物歧化酶（sod）的DNA疫苗（pAK3-E6、pAK4-E6、pAK3-acry、pAK4-acry、pAK3-sod和pAK4-sod），并评估了疫苗诱导小鼠体液和细胞免疫应答的能力及对MTB感染豚鼠的保护效力。     

百口咳菌苗血清学效力试验与小鼠保护性试验结果的相关性研究

目的：了解百日咳菌苗血清学效力试验（PSPT）与小鼠保护试验（MPT）结果的相关性,为该法替代MPT积累资料。方法：用不同剂量DTP疫苗免疫小鼠,4周后采血,用ELISA测定小鼠血清中针对百日咳菌苗表面抗原的总抗体滴度,用平行线法计算疫苗的效力,与MPT测定结果进行相关性分析。结果15批疫苗分别用PSPT和MPT法测定效力关性显著（r=0.9358,p<0.001),配对t检验表明,二者差异无显著意义（P＞0．05）,与MTP法相比,PSPT法有更高的重复性,而且95％可信限较小,结论 PSPT法有以代MPT。     

DNA重组乙型肝炎疫苗对HBeAg阳性母亲所生婴儿的保护效力

本文探讨了DNA重组乙型肝炎疫前对高危新生儿的安全性、免疫原性和保护效力.该疫苗为酵母源性乙型肝炎疫苗,是将乙型肝炎病毒(HBV)adw_2亚型S-基因引入酿酒酵母细胞,表达出24kDa蛋白,经纯化而成,每10μg抗原(0.5ml)中含有0.25mgAl~(3+)和1∶20000硫柳汞.作者用ELISA和放射免疫法(RIA)从3675名孕妇中筛选出     

基于甲病毒复制酶的DNA疫苗效力的增强有赖于细胞凋亡

基于甲病毒复制酶的DNA疫苗与传统DNA疫苗相比，在免疫原性及效力方面有很大提高，转染此类疫苗的细胞因为容易发生凋亡而使抗原表达量降低。由此推测，细胞凋亡可能在增强疫苗效力中发挥了重要作用。     

检测 HBsAg 的新放射免疫吸附法

检测 HBsAg 的各种方法不仅早有介绍,且大多已有试剂盒出售。较灵敏的方法有ELISA 和 RIA,此两法都是应用“夹心”原理,皆需要两种试剂,即固相抗体及标记抗体。测定过程 RIA 需孵育2次,ELISA 需孵育3     

人用狂犬病疫苗ELISA快速鉴别试验的建立及验证

目的:建立人用狂犬病疫苗快速鉴别试验并进行验证。方法:采用双抗体夹心ELISA,以4株抗狂犬病毒核蛋白单抗包被微孔板,通过捕捉检品中狂犬病病毒核蛋白进行快速鉴别试验,对该方法进行特异性、灵敏度、重复性和适用性验证。结果:采用双抗体夹心ELISA进行鉴别试验,验证结果显示该方法具有较高的特异性和灵敏性,RSD<15%,对于不同疫苗生产毒株均可有效鉴别。结论:双抗体夹心ELISA可以替代传统效力试验对人用狂犬病疫苗进行快速鉴别。     

中和抗体检测应用于新型冠状病毒mRNA疫苗效力分析

目的 通过对新型冠状病毒（2019 novel coronavirus,2019-nCoV）mRNA疫苗（简称新冠mRNA疫苗）免疫小鼠后产生的中和抗体进行检测，探索中和抗体检测法应用于mRNA疫苗体内效力评价的可行性。方法 采用6～8周BALB/c小鼠进行后肢肌肉免疫，检测不同免疫剂量和不同免疫程序的中和抗体滴度。并对8家企业生产的新冠mRNA疫苗免疫的小鼠血清进行中和抗体和IgG抗体检测。结果 2 µg、5 µg、10 µg不同剂量mRNA疫苗按照不同免疫程序免疫小鼠后中和抗体检测结果显示，抗体阳转率均为100%，中和抗体反应有明显的剂量-效应关系。2针间隔14 d加强免疫组抗体滴度显著高于间隔7d加强免疫组及一针组（F=57.13, P<0.001）。2 µg剂量间隔7 d加强免疫和间隔14 d加强免疫产生的中和抗体几何平均滴度（geometric mean titer,GMT）分别为218和468，差异有统计学意义（t=3.40， P=0.003）；5 µg剂量间隔7 d加强免疫和间隔14 d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为499和1 436，差异有统计学意义（t=3.62，P=0.002）；10 µg剂量间隔7 d加强免疫和间隔14 d加强免疫产生的中和抗体GMT分别为608和1 909，差异有统计学意义（t=3.23，P=0.005）。国内8家企业生产的新冠mRNA疫苗免疫小鼠后均可产生高滴度的IgG抗体(104.5～107.5)和中和抗体(102.6～104.8)，效力测定结果均符合企业质量标准。各企业生产的mRNA疫苗的中和抗体滴度结果差异有统计学意义（F=70.03，P＜0.001）。结论 小鼠免疫后中和抗体检测可用于mRNA疫苗的体内效力评价。