安徽省不同地区分离的五株庚型肝炎病毒5‘末端编码区部分 …

目的：探索安徽省庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）基因的变异，方法：采用ＨＧＶ中国株５’非编码区序列设计引物，逆转录套聚合酶链反应法，检测我省不同地区血清中的ＨＧＶＲＮＡ，５份阳性产物采用ＡＢＩＰｒｉｓｍ３７７７ＤＮＡ自动测序仪进行序列测定。结果：测定的２１３个碱基中，５株安徽ＨＧＶ分离民非洲ＧＢＶ－Ｃ（ｕ３６３８０）序列同源性分别为８８．２６％、８５．９２％、８７８．２６％、８５．４５％和８８．２６％，与美     

逆转录聚合酶链反应检测HCV RNA血标本保存条件分析

目的 确定用于丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ逆转录聚合酶链反应测定的血清（浆）标本的最佳收集和保存条件。方法 按的不同条件处理,用逆转录聚合酶链反应测定ＨＣＶ ＲＮＡ。和高压消毒的离心管与未用高压消毒的离心管收集、保存ＨＣＶ ＲＮＡ血清,其阳性检出率有差异（Ｐ〈０．０５）。血凝固后４ｈ离心分离血清对ＨＣＶ ＲＮＡ阳性检出率不造成明显改变（阳性率为８５％）;１２ｈ后检测则变化明显（阳性率降至７５％）。     

肝癌组织中丙型肝炎病毒RNA的研究

对３０例原发性肝癌患者手术切除的癌及癌旁组织（共３８份标本）用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇端非编码区（５＇－ＮＣ区）ＲＮＡ。结果，１０例（３３．３％）肝癌患者被ＨＣＶ感染，２３例（７６．７％）患者被乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染。用酶切分析可见，肝癌组织中的ＨＣＶ是ＩＩ、ＩＩＩ型。对部分标本用ＰＣＲ直接测定核苷酸序列，ＨＣＶ５＇－ＮＣ区相当保守，差异无显著意义。因１０例ＨＣＶ感染的肝癌患者中８例同时有ＨＢＶ感染，因此可能ＨＣＶ及ＨＢＶ构成的双重慢性感染是导致肝癌发生的因素之一。     

标记引物逆转录原位聚合酶链反应的建立及对丙型肝炎病毒的检测

建立光敏生物素补骨脂素（ＢＰ）标记引物逆转录原位聚合酶链反应技术（标记法），并以此研究石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的定位分布。方法用葡聚糖凝胶纯化ＨＣＶ靶基因被标记引物，在其负链５′非编码区将ＢＰ标记置链４处，所得终产物１４５ｂｐ。分别用标记法、间接逆转录原位聚合酶链反应（间接法）和原位杂交检测ＨＣＶ。结果表明用ＢＰ标记引物进行聚合酶链反应是可行的，并具有良好的特异性。应用间接法及标记法检测ＨＣＶ，其检出率分别为５９％（１０／１７）和５３％（９／１７），差异无显著意义（χ２＝０．１２，Ｐ＞０．０５）；原位杂交对ＨＣＶ的检出率仅为２４％（４／１７），明显低于上述两种方法，差异有显著意义（χ２＝３．９７和４．３７，Ｐ＜０．０５）。ＨＣＶ的分布以肝细胞浆型为主，单核细胞及胆小管上皮细胞也可见阳性信号。结论间接法和标记法对检测石蜡包埋肝组织中的ＨＣＶ均具有良好的敏感性和特异性；在肝组织中，ＨＣＶ不仅存在于肝细胞，而且也存在于单核细胞及胆小管上皮细胞中，提示肝细胞可能不是ＨＣＶ唯一的复制部位。     

应用RT—PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５’端非编码（５’ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶ ＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测定－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），和ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶ ＲＮＡ，更早地确诊丙型肝     

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型［崔晓红等．中华医学杂志，１９９５；７５（２）：９２］用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌患者肝组织中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，对其中１８例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用ＨＣＶ非结构区－５（Ｎ...     

应用RT－PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５′端非编码（５′ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测抗－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶＲＮＡ，更早地确诊丙型肝炎。     

庚型肝炎病毒不同地理株5‘端非编码区序列的变异性分析

目的：为明确了解中国不同地区（广东，云南，香港）庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）株５‘端非编码区（ＮＣＲ）序列的差异。方法：采用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，从广东省２例，云南省１例，香港３例共６例ＨＧＶ感染者血浆中扩增ＨＧＶ５’ＮＣＲ ｃＤＮＡ片段，为２３８ｂｐ，ＰＣＲ产物纯化后直接经对脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。结果：中国ＨＧＶ株间５‘ＮＣＲ相应序列的同源性介乎９２．９３％￣９７．９８     

丙型肝炎患者HCV基因的检测,分型及临床分析

运用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测临床肝炎患者血清中ＨＣＶ ＲＮＡ对５４例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用限制性内切酶Ｓａｕ３ＡＩ／ＨａｅⅢ春５’ＮＣ区扩增产物进行酶切。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶ Ⅰ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ，Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅡ／Ⅲ，Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４）；     

逆转录——巢式聚合酶链反应检测戊型肝炎病毒核酸方法的建立

逆转录—巢式聚合酶链反应检测戊型肝炎病毒核酸方法的建立＊鲁学恒１李颖王占英乔光彦刘庆成（第二临床学院传染科，沈阳１１０００３）关键词戊型肝炎；戊型肝炎病毒；逆转录—巢式聚合酶链反应近来，聚合酶链反应方法已应用于ＨＥＶ的研究，但作为临床ＨＥＶ的诊断方法...     

血清抗－HCV与HCVRNA检测结果比较

血清抗－ＨＣＶ与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较［李方和，郭林生，喻植群等．中华传染病杂志，１９９４，１２（４）：２１４］采用逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ（Ａｂｂｏｔｔ）对一组经第二代抗ＨＣＶ．ＥＬＩＳＡ试剂筛选的抗－Ｈ...     

HCV广东株5‘NCRcDNA的克隆及序列测定

从广东省１例慢性丙型肝炎病人血清中提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录为ｃＤＮＡ后用ＨＣＶ５’端非编码区（５’ＮＣＲ）特异引物进行聚合酶链反应（ＰＣＲ），扩增产物３０２ｂｐ，经补齐和提纯后插入ｐＵＣ１９质粒，获得的重组质粒ｐＵＮ采用双脱氧链终止法测定核苷酸序列，与国内外多相株比较，核苷酸同源性介乎９２．６９％～１００％，其中与ＨＣＶⅡ（１ｂ）型的同源性最大，本文的测序结果可为引物设计提供依据，获得的Ｈ     

七株急性散发性戊型肝炎病毒部分核苷酸序列分析

比较我国流行性和散发性戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）的部分核苷酸和氨基酸序列及其与戊型肝炎流行的关系。方法应用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰＣＲ）从急性散发性戊型肝炎病人血清中扩增ＨＥＶ开放读码框架２（ＯＲＦ２）ｃＤＮＡ，并用ＳｅｑｕｅｎａｓｅＶｅｒｓｉｏｎ２．０ＤＮＡ序列分析试剂盒，经双脱氧核苷酸ＤＮＡ链末端终止直接测序法测定ＲＴ－ｎＰＣＲ扩增产物的核苷酸序列。结果从深圳、长春、杭州、西安、北京５个城市４１份急性散发性戊型肝炎病人血清中获得２８株ＨＥＶＯＲＦ２ｃＤＮＡ，对其中７株进行了核苷酸序列分析，表明它们与ＨＥＶ墨西哥株（Ｍ）的同源性为７８．９％～８０．２％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）流行株（Ｅｐ）的同源性为９３．１％～９５．１％；与ＨＥＶ缅甸（Ｂ）散发株（Ｓｐ）的同源性为９２．３％～９４．２％；与ＨＥＶ中国新疆流行株ＣＨ１．１同源性为９６．５％～９８．９％；７株散发性ＨＥＶ间核苷酸序列的同源性为９５．７％～１００％。结论该７株散发性ＨＥＶ与ＨＥＶ（Ｂ）和ＨＥＶＣＨ１．１核苷酸序列的同源性较高，均属同一亚型。     

原发性肝癌78例血清HCVRNA和抗HCV的观察

用逆转录－聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测了７８例原发性肝癌患者清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标物。     

用高度保守区引物和套式PCR扩增丙型肝炎病毒

采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，以具有高度保守性的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ５＇端非编码区引物对，扩增１０例输血后肝炎血清，８例（８０％）阳性。并将逆转录与第一轮ＰＣＲ结合连续进行，使操作简便有效。间接证明了ＨＣＶ上海株与世界若干地区ＨＣＶ株５＇端非编码区核酸序列具有高度同源性和保守性。     

中国大陆基因2a/Ⅲ型丙型肝炎病毒部分基因的cDNA序列分析

目的分析来源于徐州的中国株２ａ／Ⅲ型丙型肝炎病毒（ＨＣ－ＸＺ）的部分核苷酸序列。方法以逆转录巢式聚合酶链反应获得位于７９１８位至８２９３位间的ｃＤＮＡ片段，聚合酶链反应直接序列分析技术测定核苷酸序列，计算机分析其特征。结果与日本株２ａ／Ⅲ型丙型肝炎病毒（ＨＣＪ６）及中国株１ｂ／Ⅱ型丙型肝炎病毒ＨＣＣ２相比，ＨＣＸＺ在核苷酸水平的同源性分别为８９．６０％与６８．００％，在氨基酸水平的同源性分别为９２．９２％与６９．０３％。ＨＣＸＺ与ＨＣＪ６在此区域的亲水性相仿。结论ＨＣＸＺ与ＨＣＪ６属于同一亚型，且亲缘性较高。     

HGV与HBV,HCA重叠感染病例的研究

目的 探讨庚肝病毒（ＨＧＶ）与ＨＢＶ，ＨＣＶ重叠感染状况。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）技术检测了２２例乙肝病毒感染者及４８例丙肝病毒感染者血清ＨＧＶ ＲＮＡ。结果 ＨＧＶ与ＨＢＶ、ＨＣＶ重叠感染率分别为３１．８％（３１．８％（７／２２）、３１．３％（１５／４８），重叠感染病例与单纯ＨＢＶ，ＨＣＶ感染者在ＡＬＴ、ＳＢＩＬ水平及疾病的临床分型上无统计学差异。结论 ＨＧＶ与ＨＢＶ、     

肝细胞癌和癌旁肝组织中HCVRNA正,负链的检测

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正，负链，结果显示，肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正，负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％，ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％，血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性埂肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％，肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎     

RT－PCR检测HCV RNA假阳性结果分析

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...     

晚期血吸虫病患者合并HCV感染及与HBV感染的关系

采用酶联免疫吸附法检测４６１例各期血吸虫病患者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，并采用逆转录聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０２例晚期血吸虫病（晚血）患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）．结果表明，晚血患者血清抗ＨＣＶ检出率为７．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）．慢性血吸虫病（慢血）患者２．Ｏ％及对照人群１．８％．３０６例晚血患者血清抗ＨＣＶ和／或ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３８例（１２．４％），其中ＨＣＶ与ＨＢＶ合并感染６３．２％（２４／３８），ＨＣＶ单一感染３６．８％（１４／３８），９２例合并与未合并ＨＣＶ感染的ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者，ＨＢｅＡｇ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）．揭示，晚血患者ＨＣＶ感染率高，并多以与ＨＢＶ合并感染形式存在，ＨＣＶ感染对ＨＢＶ复制无明显抑制作用．