内毒素耐受研究进展

背景 细菌内毒素(endotoxin,ET)或细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)入血是大多临床全身性炎症综合征和感染性休克的首要原因,而ET或LPS耐受却对机体有一定保护作用.但有关ET耐受的机制还不完全清楚. 目的 综述近年来有关ET耐受的研究进展,为未来有关ET耐受机制的研究提供指导. 内容 主要从细胞水平、受体水平、信号通路水平、分子水平研究ET耐受机制的进展情况. 趋向 进一步研究ET耐受中的分子调控机制.     

内毒素预处理对内毒素血症大鼠各器官细胞凋亡的作用

目的　观察大鼠内毒素血症时各脏器的细胞凋亡及内毒素 (LPS)预处理对其作用。方法　将雄性Wistar大鼠 42只随机分为 3组 :生理盐水组 (N组 ,n =6) ;LPS对照组 (L组 ,n =18) ;LPS预处理组 (P组 ,n =18) ,P组 :首次 ,经腹腔注射LPS 0 .2 5mg/kg体重 ;2 4h后再经腹腔注射LPS 0 .5 0mg/kg体重 ,其余两组在上述时间均给予等量生理盐水 (NS) ;第 2次腹腔注射 72h后 ,L组和P组经静脉注入LPS 10mg/kg体重 ,N组给予等量NS。在静注LPS后 ,N组取 6只在 6h末、L组和P组分别在静注 2、4、6h时各取 6只大鼠处死。取动物肺、肝、小肠、脾等脏器组织 ,采用光镜、电镜及脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法观察细胞凋亡。结果　内毒素血症时脾、肺、肝、小肠均出现不同程度的实质细胞和免疫细胞细胞凋亡增加 ,而内毒素预处理使上述器官的细胞凋亡明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　内毒素预处理可减少大鼠内毒素血症时脾、肺、肝、小肠等脏器的实质细胞及免疫细胞的细胞凋亡 ,这可能是内毒素预处理保护作用的机制之一。     

细菌及内毒素活化树突状细胞的研究进展

严重感染是大面积烧伤患者死亡的重要原因之一。严重烧伤早期可出现明显的细菌移位或内毒素移位。细菌、内毒素是触发烧伤后全身炎症反应综合征 (ｓｙｓｔｅｍｉｍｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅａｃｔｉｏｎｓｉｇｎｓ ,ＳＩＲＳ)的重要因素。一般认为由内毒素介导的单核 巨噬细胞的激活在其中起重要作用[1] 。近年来 ,对抗原递呈细胞 (ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌ,ＡＰＣ)中的树突状细胞 (ｄｅｎ ｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌ,ＤＣ)有了更深入的了解。ＡＰＣ包括ＤＣ、巨噬细胞和Ｂ细胞等。ＤＣ是功能最强的ＡＰＣ ,因其成熟时伸出…     

兴奋胆碱能抗炎通路对内毒素致心肌损害的保护作用

目的：研究兴奋胆碱能抗炎通路对内毒素引起大鼠心肌损害的保护作用。方法：① 内毒素休克模型[静注内毒素（LPS）10mg/kg]：设手术对照组、单纯LPS组、迷走神经切断（VC）＋LPS组和VC＋LPS＋迷走神经电刺激（VS）组,观察电刺激迷走神经对心肌组织炎症介质和心肌酶指标的影响。②内毒素血症模型（静注LPS5mg/kg）：设LPS＋电针非经非穴组、LPS＋电针足三里穴组、VC后注射LPS组和VC＋LPS＋电针足三里穴组,观察电针副交感神经相关穴位足三里穴对内毒素血症引起的心肌组织损伤的保护作用。各组大鼠均于注射LPS后2h处死,检测血浆肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）活性和组织病理学改变,内毒素休克各组测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果：刺激迷走神经可明显降低内毒素休克大鼠心肌组织TNF-α含量;刺激迷走神经或电针足三里穴能显著降低LPS注射后2h大鼠血浆CK-MB活性,减轻心肌组织病理损害;切断迷走神经能显著减轻或消除电针足三里穴的作用,进一步升高血浆CK-MB活性,加重心肌组织损害。结论：刺激副交感神经激活胆碱能抗炎通路对内毒素血症和内毒素休克大鼠心脏具有不同程度的保护作用。     

抗内毒素研究进展

内毒素(endotoxin)是革兰阴性菌细胞壁外膜的结构成分之一,其化学本质为脂多糖(lipopolysac-charide,LPS).LPS主要由O特异性侧链、核心多糖、脂质A(lipid A)3部分组成,其中lipid A为其毒性中心.在创伤、感染引起的全身炎症反应综合征(SIRS)及脓毒症中,内毒素是重要的致病因子.近年来虽然大量广谱、高效抗生素的应用为临床治疗感染性疾病提供了有力的措施,但并没有从根本上改变脓毒症患者高病死率的现状.     

蛋白激酶对内毒素休克后内皮细胞骨架的作用

目的　探讨内毒素休克发病机制中蛋白激酶G(PKG)的作用。　方法　用脂多糖 (LPS)刺激培养的内皮细胞 ,通过细胞裂解和离心获得细胞裂解液 ,用放射性同位素法标记法检测PKG的活性。同时采用特异性荧光染色法检测LPS刺激后细胞内肌动蛋白微丝 (F actin)的结构和分布变化。用PKG特异性抑制剂KT5 82 3预处理细胞后 ,再检测LPS介导的细胞内PKG活性和F actin的变化。以空白组为阴性对照 ,以PKG激动剂 8 Br cGMP刺激细胞作为阳性对照组。　结果　LPS分别刺激 5、10、30和 6 0min后细胞内PKG活力呈时间依赖性的增高 (与空白组相比P <0 .0 1) ,细胞内的F actin出现极性分布 ;而KT5 82 3预刺激 2 0min后再用LPS刺激没有出现上述变化。PKG的激动剂 8 Br cGMP刺激细胞后的变化与LPS的刺激相似。　结论　LPS可以介导血管内皮细胞PKG的激活和F actin的应力性变化 ;内毒素休克后内皮细胞通透性增高与cGMP PKG通路的激活有关。     

抗内毒素Fab'对严重烧伤早期肠道的保护作用

脓毒症是严重烧伤患者最常见的并发症,也是多器官功能障碍综合征(MODS)的主要诱因之一[1].有研究表明肠道在全身性炎症反应综合征(SIRS)、脓毒症、MODS的连续发生发展中起重要作用[2].肠源性脓毒症的防治已成为目前危重病研究的热点.内毒素(LPS)是引起严重创伤和烧伤并发SIRS、脓毒症以及MODS的重要因素之一[3].本研究通过建立小鼠的严重烧伤早期肠源性内毒素血症模型,探讨抗内毒素Fab'对严重烧伤早期肠道损伤的保护作用.     

一种简便的小鼠腹腔巨噬细胞内毒素耐受模型的建立

内毒素（LPS）耐受是生物在进化过程中形成的一种适应性防御机制,它可以使机体避免对LPS刺激的持续性反应,在感染性休克和脓毒症机体防御机制的建立中具有重要的作用。探讨LPS耐受建立的机制有助于深入认识机体的抗炎调节机制,可为与LPS介导的失控炎症反应性疾病的防治提供新的思路和依据。     

内毒素受体及跨膜信号转导研究进展

内毒素是革兰氏阴性菌的主要毒性成分，可引发机体的炎症级联反应，被公认为是导致全身炎症反应综合征、脓毒症、严重休克、多脏器功能衰竭的主要致病因子。深入研究内毒素的受体和信号转导可望为脓毒症等危重病人的治疗提供新思路。     

脂多糖受体簇和大电导Ca2+活K+通道在脂多糖信号识别中的作用

背景 细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)可激活细胞合成和释放多种细胞因子,导致全身炎症反应.LPS识别及跨膜信号转导是引起细胞效应的关键,成为近年的研究热点.目的 对新近提出的“LPS受体簇”理论和大电导Ca2+激活K+通道(MaxiK)在LPS信号识别中的作用研究进展进行综述.内容 LPS与CD14结合后,不同的信号分子在脂质筏内聚集,LPS被释放到脂质双分子层,并与由多种受体分子组成的受体簇相互作用.根据不同的细胞类型和细菌刺激,形成了不同的LPS受体簇.MaxiK通道在LPS诱导的巨噬细胞信号转导过程的早期即被激活.并且以IκB-α/NF-κB为中心的促炎症反应依赖MaxiK的功能.趋向 需要进一步研究来阐明LPS受体簇在细胞膜特定区域内形成的确切分子机制,以及组成受体簇的几种蛋白分子在刺激识别和信号转导过程中的作用.     

白介素10对内毒素诱导急性肾衰竭大鼠炎症介质的影响及保护作用

研究表明，促炎介质与抗炎介质的不平衡是加重炎症反应，促进多器官功能不全综合征(MODS)发生发展的重要因素。白介素10(IL-10)是重要的抗炎介质，它能明显抑制单核-吞噬细胞的致炎作用。本研究用内毒素攻击大鼠，观察IL-10对肾组织炎症介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素6(IL-6)基因表达的影响及对肾组织的保护作用，为IL-10治疗MODS及急性肾衰竭(ARF)提供实验依据。     

败血症时器官间的相互影响

尽管对重危外科监护和抗微生物治疗有了很大的进展,但合并革兰氏阴性菌败血症的成人呼吸窘迫综合征(ARDS)死亡率仍高于80%。ARDS实际上是反映多个器官受累的宿主防御机能失调的一部分。用细菌内毒素(脂多糖类,即LPS)激活的巨噬细胞能引起多种生物学的强烈细胞分裂,后者可传递炎症和败血症的病理生理学反应。这种炎性网状结构的核心是肿瘤坏死因子(TNF-α),为内毒素性休克的主要内源性介体。近来认为,TNF是引起ARDS的病因。Millar等已证明,在ARDS病人的支气管肺分泌物中TNF-α值升高。为了进一步叙述ARDS并有肝功能衰竭与肝肺巨噬细胞轴所致的特异性变化的关系,作者对TNF-α和由LPS刺激Kupffer细胞(KC(?))和肺泡巨噬细胞(AMs)的产物白细胞介素-6(IL-6)的动力学进行了比较。结果用5×10~5个KC经2.5 mg/L细菌的LPS     

内毒素对脓毒性ARDS肺内皮细胞通透性的直接影响

内毒素可直接或间接作用于脓毒性ARDS肺内皮细胞,导致肺内皮细胞通透性增加。LBP／sCD14在LPS－EC相互作用中起着主要的调节和增敏作用,而Toll样受体可能是介导LPS信号在内皮细胞等CD14阴性细胞内传递的必要条件;同时MAPK酪氨酸磷酸化在LPS信号转导中起重要作用。内毒素对肺内皮细胞的直接影响可致肌动蛋白解聚、内皮接合部及内皮－酶底物粘着的分离,从而导致细胞旁路开放,肺内皮细胞通透性增加。另外内毒素直接引起肺内皮细胞凋亡、损伤也是导致通性增加的原因。     

氯化镧对内毒素诱导巨噬细胞肿瘤坏死因子表达的影响

目的　探讨稀土化合物氯化镧对内毒素效应的影响。　方法　分离培养小鼠腹腔巨噬细胞 (M) ,用内毒素 (lipopolysaccharide ,LPS)对其进行诱导实验。采用ELISA法及SYBRGreen荧光定量RT PCR方法 ,观察氯化镧对LPS诱导的小鼠M肿瘤坏死因子α(TNFα)分泌及TNFαmRNA表达的影响。BALB/C小鼠随机分为 2组 ,分别给予致死量LPS及经氯化镧处理的LPS ,观察 7d内小鼠死亡率。　结果　经氯化镧处理的LPS诱导的小鼠 ,MTNFα分泌量及TNFαmRNA表达水平均明显低于LPS组 (P <0 .0 1)。经氯化镧处理的致死量LPS攻击小鼠 ,其死亡率明显低于LPS对照组。　结论　氯化镧具有降低内毒素毒性、抑制LPS诱导小鼠MTNFα分泌及TNFαmRNA表达的作用     

内毒素对脓毒性ARDS肺内皮细胞通透性的直接影响

内毒素可直接或间接作用于脓毒性ARDS肺内皮细胞,导致肺内皮细胞通透性增加。LBP/sCD14在LPS-Ec相互作用中起着主要的调节和增敏作用,而Toll样受体可能是介导LPS信号在内皮细胞等CD14阴性细胞内传递的必要条件;同时MAPK酪氨酸磷酸化在LPS信号转导中起重要作用。内毒素对肺内皮细胞的直接影响可致肌动蛋白解聚、内皮接合部及内皮-酶底物粘着的分离,从而导致细胞旁路开放,肺内皮细胞通透性增加。另外内毒素直接引起肺内皮细胞凋亡、损伤也是导致通透性增加的原因。     

内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺的作用及机制探讨

目的 观察内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺的作用及其机制。方法 将雄性Wistar大鼠84只随机分为7组：生理盐水(NS)组,内毒素脂多糖(LPS)2h、4h、6h组和LPS预处理2h、4h、6h组,每组12只。LPS预处理各组大鼠经腹腔注射LPS0．25mg／kg,24h后再注射LPS0．5mg/kg,NS组和LPS各组在上述时间均给予等容量NS;第2次腹腔注射72h后,LPS各组和LPS预处理各组大鼠经静脉注入(静注)LPS 10mg／kg,NS组注射等量NS。NS组在静注NS后6h,LPS2h、4h、6h组和LPS预处理2h、4h、6h组在静注LPS后2、4、6h时各取6只大鼠取血,行血气分析;取左侧肺组织检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及抑制性κB-α(IκB-α)蛋白表达;计数右肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数,测蛋白含量。上述7组另取6只大鼠,在上述相同时点取全肺,计算肺体指数,测定髓过氧化酶(MPO)。结果 LPS各组大鼠较NS组大鼠肺体指数、BALF中白细胞数和蛋白及肺组织MPO含量均增加,氧分压和HCO3^-下降;而LPS预处理各组大鼠上述各指标变化明显减轻。肺组织ICAM-1 mRNA在LPS2h、4h和6h组表达递增,而在LPS预处理各组表达显著减少;LPS2h组肺组织IκB-α蛋白表达较NS组减少,而LPS预处理2h组较LPS2h组表达增加。结论 内毒素预处理可防止内毒素血症时的肺损伤,可能与内毒素预处理使肺组织IκB-α蛋白生成增加和(或)消耗减少有关。     

MAPK与内毒素诱导炎症反应的关系

机体在针对内毒素(LPS)的防御反应中,免疫细胞活化、炎症相关受体表达、大量致炎细胞因子和抗炎细胞因子释放并相互作用形成网络式级联反应,临床可表现为全身炎症反应综合征(SIRS)。目前认为,SIRS的本质是机体在各种致病因素作用下产生的失控性炎症反应。由于众多炎症介质和细胞因子的多向协同或拮抗效应,造成对其认识过程和手段的复杂化,至今尚无能够阻断这种炎症级联反应的有效措施。关于LPS信号在细胞内传导的研究     

抗内毒素类脂A单克隆抗体对烧伤脓毒症大鼠的保护作用

采用我所研究制备的抗内毒素类脂 A 单克隆抗体(mAb)观察了其对攻菌后动物的保护作用,并采用30%Ⅲ度 TBSA 烧伤大鼠模型注射内毒素,模拟临床烧伤脓毒症,旨在为临床防治提供理论依据。实验动物分烧毒组、治疗组及对照组,于伤后不同时相点观察血浆 LPS、TNF 的动态变化,同时作内脏的光镜及电镜形态学检查。结果表明:mAb 除在体外可与多种 G~-杆菌及纯化的内毒素反应外,细菌攻击前后注入 mAb 均能有效地提高感染动物的存活率,并可明显降低模拟烧伤脓毒症大鼠血中内毒素,减少 TNF 的分泌。光、电镜观察证实,可减轻机体的损害效应。提示:抗类脂 A 单克隆抗体是一种有效的治疗烧伤脓毒症的免疫制剂。     

毒性炎症介质与脓毒症性休克

随着分子生物学的发展及对脓毒症性休克(SS)和多器官功能衰竭(MOF)的深入研究,众多学者认为G~-菌感染所引起的SS及MOF均与毒性炎症介质所致的组织损害有关。迄今为止,已发现的毒性炎症介质不下200种。目前研究较多的有内毒素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF)、血小板活化因子(PAF)、白介素(包括IL-1、IL-2及IL-6)、前列腺素E_2(PGE_2)及血栓素A_2(TxA_2)等。兹就参与G-菌所致的SS及MOF的几种常见毒性炎症介质及其拮抗药的研究作一简要介绍。一、内毒素(Endotoxin,ET) 内毒素系脂多糖(LPS)的聚合体。LPS分子的一端为亲水性基团,另一端为疏水性基团。LPS聚合链的长     

内毒素耐受对人正常前列腺上皮细胞分泌ＩＬ－６和ＩＬ－８的影响

目的 研究发现前列腺组织炎症在前列腺增生的发生与进展中有着重要作用。方法 内毒素耐受（endotoxin tolerance，ET）现象存在于人组织上皮细胞中如肠上皮细胞和人牙龈上皮细胞等，并可能影响组织的炎症和免疫反应。产生内毒素/脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）的G-菌如大肠埃希菌是影响前列腺炎的主要病原体。因此，本研究拟通过分析LPS反复刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1中细胞炎性因子IL-6和IL-8表达，探讨是否内毒素耐受现象存在于人前列腺上皮细胞中。结果 采用1 μg/mL大肠杆菌（Escherichia coli）LPS刺激人正常前列腺上皮细胞RWPE-1 24 h，洗涤细胞后，给予1 μg/mL 浓度LPS再次刺激24 h，构建内毒素耐受模型。采用液相芯片技术检测细胞培养液中细胞因子IL-6和IL-8分泌水平的变化。结果 LPS刺激后6 h和24 h，IL-6和IL-8分泌水平均呈现上升趋势（P<0.05），较空白对照组有明显增高（P<0.05），LPS反复刺激后，诱导细胞耐受后，IL-6和IL-8分泌水平较第1次刺激后明显降低（P<0.05）。结论 内毒素耐受现象存在于RWPE-1中，能抑制RWPE-1细胞因子IL-6和IL-8的表达，进而可能影响前列腺组织的炎症和免疫反应。