阿糖胞苷代谢关键酶基因在儿童恶性血液肿瘤中的表达

目的通过检测儿童急性白血病(AL)及非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓细胞内阿糖胞苷(Ara-C)代谢关键酶———脱氧胞苷激酶(DCK)和胞苷脱氨酶(CDA)的基因表达及酶活性水平,探索DCK和CDA表达与临床疗效的关系。方法共计31例患儿,其中初诊27例(ALL20例,AML3例,NHL4例),复发4例(ALL2例,AML、NHL各1例),采集患儿骨髓细胞,采用荧光定量PCR检测细胞内DCK、CDA基因表达,核素液闪法检测细胞内DCK、CDA酶活性,统计分析各组患儿的检测结果。结果 (1)DCK:ALL和NHL患儿DCK mRNA与酶活性水平均明显高于AML患儿(P0.05);初治患儿均明显高于复发患儿(P0.05);(2)CDA:AML和复发患儿的CDA酶活性水平明显高于ALL、NHL和初治患儿(P0.05),但各组病例间的CDA mRNA表达差异无显著性(P0.05)。(3)DCK和CDAmRNA表达与酶活性水平呈高度正相关。结论 AML以及某些复发的血液肿瘤患儿,其总体DCK酶活性及基因表达水平降低,CDA酶活性水平增高。DCK和CDA酶活性可能与儿童恶性血液肿瘤疗效相关。     

急性白血病、恶性淋巴瘤患儿大剂量阿糖胞苷治疗的药代动力学及代谢关键酶基因表达研究

目的 探索大剂量阿糖胞苷(HD-AraC)治疗儿童恶性血液肿瘤的药代动力学,以及代谢关键酶基因表达与临床疗效的关系.方法 应用高效液相色谱法测定HD-AraC治疗时血液和脑脊液中药物浓度;采用RT-PCR法检测3种白血病细胞株和48例急性白血病(AL)患儿骨髓细胞中脱氧胞苷激酶(dCK)和胞苷脱氨酶(CDA)基因表达,通过分析不同类型AL患儿,以及初治和复发患儿dCK和CDA mRNA表达差异,探讨dCK和CDA mRNA表达与疗效的关系.结果 ①HD-AraC治疗时血浆药物浓度可达到常规剂量Ara-C的50倍,脑脊液中药物浓度达到血浆浓度的10%;②不同类型儿童AL,以及初治和复发患儿的dCK mRNA表达强度差异有统计学意义,与临床疗效明显相关;③体外实验发现经Ara-C不同剂量和时间作用后,白血病细胞株的dCK和CDA mRNA表达没有变化.结论 HD-AraC治疗可明显提高血浆和脑脊液中药物浓度,是治疗儿童AL的有效疗法.dCKmRNA表达强弱可能为儿童AL远期疗效的重要影响因素之一.     

儿童急性白血病多药耐药基因检测的临床价值

随着联合化疗的应用,儿童急性白血病的疗效已有极大提高,但仍有部分患儿达不到完全缓解或缓解后易复发。多年的研究发现,白血病细胞多药耐药性(ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)是白血病难以获得良好疗效的障碍。多药耐药基因(ｍｄｒ1)的扩增和过度表达所引起的ＭＤＲ是其中的一个重要机制[1]。我们以半定量逆转录聚合酶链反应(ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴＰＣＲ)技术检测了33例儿童急性白血病细胞中ｍｄｒ1ｍＲＮＡ基因的表达,初步探讨了其与临床耐药的关系。对象…     

甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌抗生素耐药性及耐药基因的研究

目的 了解新生儿感染和携带凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的抗生素敏感性情况,并对耐甲氧西林CNS株(MRCNS)的mecA基因进行检测。方法 应用常规生化鉴定及微生物的微量鉴定系统(API)法进行MR-CNS分离株菌属鉴定;采用K-B纸片扩散法对114株CNS分离株进行11种抗生素敏感性检测;并建立PCR方法对MRCNS株的mecA耐药基因进行检测。结果 79.8％的CNS分离株对甲氧西林耐药;MRCNS对青霉素、红霉素、头孢唑啉、四环素、复方新诺明、庆大霉素、环丙沙星、氯霉素等8种抗生素耐药率明显高于甲氧西林敏感株(MSCNS),且多重耐药率高达92.3％。MRCNS分离株耐药率高的前三位分别是溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人型葡萄球菌,占分型总数(56例)的78.6％(44/56);在91株MRCNS中检出62株mecA基因阳性,检出率为68.1％。结论 我国新生儿感染CNS甲氧西林耐药情况同国外相似,MRCNS对多种抗生素交叉耐药现象十分严重。PCR方法检测mecA基因是一种方便、快速的检测方法,对指导临床治疗很有帮助,值得推广。     

甲氨蝶呤多聚谷氨酸盐在甲氨蝶呤治疗急性白血病中的作用及耐药机制研究进展

甲氨蝶呤已成功应用于临床多年,关于其毒性及耐药性机制的研究也较深入。该文主要从甲氨蝶呤多聚谷氨酸化(PG化)与相关酶的关系这一角度阐述其在白血病治疗中的研究进展及临床应用。     

甲氨蝶呤多聚谷氨酸盐在甲氨蝶呤治疗急性白血病中的作用及耐药机制研究进展

甲氨蝶呤已成功应用于临床多年,关于其毒性及耐药性机制的研究也较深入。该文主要从甲氨蝶呤多聚谷氨酸化(PG化)与相关酶的关系这一角度阐述其在白血病治疗中的研究进展及临床应用。     

儿茶酚胺类递质代谢酶基因与注意缺陷多动障碍

儿童注意缺陷多动障碍 (ａｔｔｅｎｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｔａｎｄｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｓｏｒｄｅｒ,ＡＤＨＤ)的病因及病理机制虽然至今不明 ,但一些颇具影响力的假说认为 :儿茶酚胺类 [多巴胺 (ＤＡ) ,去甲肾上腺素 (ＮＥ)和肾上腺素 ]神经递质代谢通路障碍可能是ＡＤＨＤ的神经生化基础。其遗传病因学的研究也主要集中在这类递质及其代谢产物、代谢酶以及递质转运体等基因表达方面。近年来 ,一些研究发现编码酪氨酸羟化酶 (ＴＨ)、多巴胺 β 羟化酶 (ＤβＨ)、儿茶酚氧位甲基转移酶 (ＣＯＭＴ)和单胺氧化酶 (ＭＡＯ)等代谢酶…     

急性白血病肺耐药相关蛋白基因表达及临床意义

已有研究表明 ,肺耐药相关蛋白 (lungresistance relatedprotein,LRP)与白血病多药耐药 (multidrugresistance,MDR)的发生有关。本研究应用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)技术检测 4 3例急性白血病 (AL)患儿LRP基因的表达水平 ,探讨其在儿童白血病的诊断、治疗以及预后中的意义。材料病例组 :为 1999年 9月～ 2 0 0 1年 5月期间 ,我院儿科住院急性白血病 (AL)患儿 4 3例 ,其中急性淋巴细胞白血病(ALL) 2 8例 ,急性髓细胞性白血病 (AML) 15例。男 2 9例 ,女 14例 ;年龄 3～ 14岁 ,平均 8岁。共采集标本 5 2例次 ,其中初发组 2 4例 ,…     

儿童急性白血病survivin、cyclin D1基因的表达

目的探讨基因survivin、cyclin D1的表达与儿童急性白血病（AL）的关系。方法采用RT-PCR方法对42例初发或复发AL患儿和13例完全缓解AL（AL-CR）患儿及15例非恶性疾病患儿骨髓单个核细胞进行基因survivin、cyclinD1表达的检测。结果①AL组survivin、cyclinD1mRNA的阳性率分别为78.6%和42.9%,高于AL-CR组和对照组（P〈0.01）;完全缓解组和对照组差异无统计学意义（P〈0.05）;急性淋巴细胞白血病（ALL）组和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）组之间表达差异无统计学意义。AL复发组cyclin D1 mRNA阳性率明显高于初发组。②儿童AL初发者survivin与cyclin D1的阳性表达差异无统计学意义。③cyclin D1 mRNA阳性者缓解率低。结论儿童AL中存在survivin、cyclin D1异常表达,两者阳性表达差异无统计学意义;cyclin D1高表达者可降低AL的化疗敏感性,cyclin D1对AL有判断疗效和预后的价值。     

急性淋巴细胞性白血病患儿WT1基因与肿瘤耐药基因表达的关系

目的　探讨儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)WT1基因与肿瘤多药耐药基因 (mdr1)表达的关系 ,为临床判断预后、指导个体化治疗提供依据。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)对 33例ALL患儿的同一份标本进行WT1mRNA及mdr1mRNA检测 ,用GQS 96 0图像处理系统软件进行半定量分析。结果　 (1)初治组ALL的WT1及mdr1阳性率分别为 6 7%及 15 % ,完全缓解组分别为 2 2 %及 18% ,复发难治组分别为 92 %及 75 % ,初治组和复发难治组WT1阳性率及表达水平与完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,复发难治组中mdr1阳性率及表达水平与初治组和完全缓解组相比 ,P均 <0 0 1,差异均有极显著性 ;(2 )WT1与mdr1表达无明显相关关系 ,但复发难治组WT1与mdr1均阳性者多 ,占 6 7% ,均阴性的为 0 ;与初治组及完全缓解组比较差异有极显著性。结论　ALL患儿WT1基因表达的同时出现肿瘤多药耐药基因表达 ,是白血病难治及复发的重要因素 ,提示预后差。动态监测WT1及mdr1,可预测白血病难治及复发 ,指导个体化治疗 ,有利于清除微小残留白血病细胞     

芳香化酶及其相关基因与儿童生长发育研究进展

儿童生长发育是一个复杂的过程,受到众多因素的影响,目前研究认为芳香化酶是影响因素之一.芳香化酶由CYP19A1基因编码,能催化雄激素转变为雌激素.有研究显示CYP19A1多态性变异部分是导致身高差异的基因学机制,芳香化酶相关基因多态性与青春发育亦有关联.该文主要综述芳香化酶及其相关基因的结构和功能、与青春发育的关系、基因缺陷所导致的青春发育异常,探讨儿童生长发育异常的发病机制.     

芳香化酶及其相关基因与儿童生长发育研究进展

儿童生长发育是一个复杂的过程,受到众多因素的影响,目前研究认为芳香化酶是影响因素之一.芳香化酶由CYP19A1基因编码,能催化雄激素转变为雌激素.有研究显示CYP19A1多态性变异部分是导致身高差异的基因学机制,芳香化酶相关基因多态性与青春发育亦有关联.该文主要综述芳香化酶及其相关基因的结构和功能、与青春发育的关系、基因缺陷所导致的青春发育异常,探讨儿童生长发育异常的发病机制.     

芳香化酶及其相关基因与儿童生长发育研究进展

儿童生长发育是一个复杂的过程,受到众多因素的影响,目前研究认为芳香化酶是影响因素之一.芳香化酶由CYP19A1基因编码,能催化雄激素转变为雌激素.有研究显示CYP19A1多态性变异部分是导致身高差异的基因学机制,芳香化酶相关基因多态性与青春发育亦有关联.该文主要综述芳香化酶及其相关基因的结构和功能、与青春发育的关系、基因缺陷所导致的青春发育异常,探讨儿童生长发育异常的发病机制.     

耐药相关基因HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp在儿童急性白血病中的表达及临床意义

目的 探讨HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp基因在AL患儿骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达及其在AL治疗中的临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测81例AL患儿BMMNC中耐药相关基因HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp的表达;并以14例免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患儿作为对照组.结果 1.AL患儿HA117、mdr1、mrp1、lrp、bcrp阳性表达率均高于对照组,难治/复发组5种耐药相关基因的表达率均高于初诊组及缓解组.2.HA117、lrp阳性的首次完全缓解率(CR1)低于阴性的CR1率(P均＜0.05),mdr1、mrp1、bcrp阳性的CR1率与阴性的CR1率之间差异无统计学意义(P均＞0.05).3.直线相关分析显示,AL中HA117与mdr1、mrp1、lrp、bcrp表达无相关性(r=0.031、0.319、0.203、0.176、11.178,P均＞0.05);mdr1与mrp1、mdr1与bcrp、lrp与bcrp呈正相关(r=0.260、0.308、0.317,P均＜0.05).难治/复发组中,HA117与mdr1、mrp1、lrp及bcrp呈正相关.结论 HA117与mdr1、mrp1、lrp、bcrp可能共同参与了儿童AL耐药的产生,可作为评估化疗效果与预后的一个重要指标.HA117与lrp较mdr1、mrp1及bcrp可能更具有预测多药耐药的意义.     

CYP3A与MDR1基因多态性在儿童急性淋巴细胞白血病的研究进展

儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)作为一种治愈率较高的疾病,化疗是其主要的治疗方法。CYP3A与MDR1作为决定药物代谢的关键基因,两者参与ALL化疗中大多数药物的代谢;两者基因多态性的表达会影响到药物代谢酶的活性进而影响药物代谢的效率。所以在日益提倡个体化治疗的今天,两者基因多态性的表达就直接关系到儿童ALL的治疗效果、药物毒副作用和预后。我们则可以根据两者基因多态性结合患儿的临床表现及其他实验室检查更为细致的划分出标危、中危和高危,采取不同的化疗方案,为实行个体化治疗提供理论依据。     

药物代谢酶基因多态性与甲氨蝶呤治疗儿童急性淋巴细胞白血病不良反应

随着白血病药物基因组学的研究进展,人们发现儿童急性淋巴细胞白血病药物代谢酶相关基因的多态性与不良反应相关.如何寻找有效预测甲氨蝶呤不良反应的基因型,进行个体化治疗是当前研究的热点.该文主要阐述三种药物代谢酶即亚甲基四氢叶酸还原酶、还原叶酸载体和谷胱甘肽S-转移酶基因多态性与甲氨喋呤相关不良反应之间的关系.     

急性淋巴细胞白血病微小残留病多药耐药基因的表达

目的 探讨急性淋巴细胞白血病（简称急淋，ALL）微小残留病（MRD）与肿瘤多药耐药基因mdrl-mRNA表达的关系。方法 选择本院住院及门诊的ALL患儿33例，采集初治前及完全缓解（CR）后不同时期的骨髓标本2ml，提取DNA及RNA。用聚合酶链反应（PCR）法扩增T细胞受体γ链（TCRγ）单克隆性基因重排，以确定MRD的存在；同时采用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法对同一份标本进行mdrl-mRNA表达的检测，将具有阳性特异性条带的电泳胶片用GQS－960图像处理系统软件进行定量分析，计算mdrl与β2－MG的比值，以mdrl/β2－MG比值≥0．3定为阳性表达。CR后按时进行强化治疗，每隔3－6个月对MRD DNA及mdrl-mRNA作动态观察。结果 （1）33例ALL患儿初诊时TCRγ单克隆性基因重排阳性率为82％（27／33），完全缓解（CR）率为91％（30／33），CR时MRD阳性率为80％（24／30）。（2）随访观察6－18个月MRD阳性率呈逐渐下降趋势，而mdrl-mRNA阳性表达率呈逐渐上升趋势。（3）根据随访结果，将处于CR期的28例患儿分为4个组：MRD及mdrl均阳性组（1组）7例ALL患儿有6例复发；MRD及mdrl均阴性组（4组）ALL复发数为0；MRD阳性而mdrl阴性组（2组），8例中有2例复发；MRD阴性而mdrl阳性组（3组）4例中有1例复发。1组与4组比较，P＜0．05，其他各组间比较差异均无显著意义。结论 （1）ALL完全缓解后随着CR时间延长及按时进行强化治疗，MRD阳性率逐渐下降，而mdrl阳性率却呈上升趋势，两者呈负相关；（2）MRD与mdr1均阳性者ALL复发率高，提示预后差；而MRD与mdr1均阴性者复发率低，预后较好；（3）CR期按时进行MRD及mdr1的监测，可为临床化疗方案个体化提供依据，有利于微小残留白血病细胞（MRLC）的彻底清除。     

泉州地区儿童呼吸道感染肺炎链球菌对大环内酯类药物耐药相关基因分析

<正>肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)是引起儿童呼吸道感染特别是社区获得性呼吸道感染的重要致病菌。近年来SP对抗生素的耐药情况已日趋严重,其中大环内酯类抗生素耐药较为普遍。为了解泉州地区引起儿童呼吸道感染SP对常用抗生素的耐药情况及可能的耐药原因,本研究调查泉州地区2012―2013年临床分离的引起儿童呼吸道感染SP对常用抗生素的耐药情况,进一步分析介导SP大环内酯类抗菌素耐药性的相关基因erm B、erm TR、mef A及mef E等,探讨SP对大环内酯类药物的耐药机制。     

去铁胺对K562细胞多药耐药基因MDR1及核因子κB表达的影响

目的 探讨去铁胺对柔红霉素（DNR）诱导多药耐药基因MDR1及核因子KB（NFκB）表达的影响,初步了解NFKB与MDR1表达、细胞内铁代谢的关系。方法 以DNR单用或联合应用25μmol／L去铁胺（DFO）为处理因素作用于人红白血病细胞株K562,应用RT-PCR法、流式细胞分析技术分别检测对照组、DNR组和DNR＋DFO组K562细胞MDRlmRNA和P糖蛋白（PgP）的表达情况,同时采用免疫组织化学染色法检测NFKBκB表达及活性情况。结果 与对照组相比,DNR可同时诱导MDRlmRNA、Pgp表达和NFgB活化（P〈0．05）;25μmol／LDFO联合DNR可显著抑制DNR诱导的MDRlmRNA、Pgp的表达及NFKB的活化（P〈0．05）。结论 去铁胺可减少柔红霉素诱导的MDRl、PgP表达,其机制可能与铁剥夺后降低了柔红霉索诱导的K562细胞的氧化应激反应,进而影响NFκB的活化有关。