快速灵敏检测HCV核心抗原的免疫新方法及其性能分析

目的建立一种用于快速、灵敏检测血清丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCcAg)含量的免疫新方法,并对其性能进行评价。方法采用新型纳米材料修饰电极,将HCV核心抗体固定到电极表面,制备检测HCV核心抗原的电化学免疫传感器,并分析该传感器的检测性能。结果该免疫传感器对HCV核心抗原反应灵敏,其线性范围为2.50～300.00ng/mL,相关系数为0.997,检出限为1.20ng/mL。此外,该传感器具有较好的准确性、选择性和精密度。结论该电化学免疫传感器性能良好,可实现对HCcAg的快速、灵敏检测。     

基于CdTe量子点和磁性纳米材料构建的夹心型电化学免疫传感器

目的 制备新型夹心型电化学免疫传感器,并研究该传感器的性能. 方法 以甲胎蛋白（AFP）作为检测模型,以磁性微球为一抗固定载体,CdTe量子点作为二抗标记物,通过碳二亚胺交联法制备AFP一抗固化的免疫磁珠和AFP二抗固化的CdTe量子点,通过夹心免疫分析模式和电化学溶出伏安法建立新型高灵敏电化学免疫传感器,并采用红外光谱、紫外光谱及电化学方法对该传感器进行表征. 结果 该电化学免疫传感器对AFP抗原检测的线性范围为1～200 ng/mL,检测限为0.025 ng/mL. 结论 该电化学免疫传感器仪器简单、操作便捷、检测结果稳定,并具有较高的灵敏度.     

基于AgI模拟酶纳米材料构建阻抗型免疫传感器用于检测癌胚抗原

目的 设计一种基于AgI模拟酶纳米材料的阻抗型免疫传感器,对血清样品中的癌胚抗原(CEA)进行高灵敏检测.方法 合成一种壳聚糖修饰的碘化银(CS-AgI)纳米材料,利用透射电镜(TEM)和傅里叶红外光谱(FTIR)法对合成的CS-AgI进行表征,以CS-AgI为信号标记物修饰CEA抗体,采用夹心式免疫分析法在金电极表面制备一种高效、灵敏的电化学免疫传感器,采用电化学工作站定量分析检测所构建免疫传感器的电化学性能.结果 成功合成CS-AgI纳米颗粒,颗粒呈球形,粒径约为100 nm.以CS-AgI纳米颗粒为信号标记物构建的免疫传感器在pH7.0的磷酸盐缓冲液中检测CEA时表现出良好的电化学性能,其交流阻抗响应值与样品中的CEA浓度的对数呈线性增加趋势,并在CEA浓度为0.1～80 ng/mL范围内展现出良好的线性关系(r=0.996),检测限达到0.05 ng/mL.结论 基于AgI模拟酶纳米材料构建的阻抗型免疫传感器可以高灵敏检测CEA,同时具有较好的精确性、重现性和选择性,为癌症的早期诊断和早期治疗提供了实验依据.     

信号增强型电化学免疫传感器用于NT-proBNP高灵敏检测的研究

目的 构建用于人N末端前钠尿肽(NT-proBNP)高灵敏检测的电化学传感器.方法 采用自组装方法将牛血清清蛋白-碳纳米管复合物(BSA-MWNTs)固载在洁净的玻碳电极表面,结合共价交联固定化技术和亲和素-生物素信号放大技术,制得NT-proBNP高灵敏免疫传感器,优化实验条件,采用电化学方法对电极的响应特性进行研究.结果 在最优实验条件下,该传感器对NT-proBNP响应的线性范围为1～30 ng/mL和30～150 ng/mL,检出限为0.03 ng/mL.结论 该方法可实现对NT-proBNP的超灵敏检测.     

Pt@GR复合物用于构建高灵敏电化学甲胎蛋白传感器的研究

目的 构建基于铂与石墨烯纳米复合物(Pt@GR)的电化学免疫传感器.方法 在洁净的玻碳电极表面滴涂一层壳聚糖与Pt@GR的复合物,通过共价作用将纳米金固定在电极表面,进一步固载甲胎蛋白抗体制得甲胎蛋白免疫传感器,采用循环伏安法(cyclic voltammetry,CV)、示差脉冲伏安法(differential pulse voltammetry,DPV)对实验条件进行优化,对该传感器的响应特性进行研究.同时制备基于普鲁士蓝和石墨烯的免疫传感器以对照研究不同传感器的性能特点.结果 免疫反应最佳时间为24 min,测试底液最佳pH为6.5.在最优的实验条件下,连续扫描100圈,其电流响应下降5.1％.平行测定5支电极的RSD为8.1％,加标回收率为96.40％ ～ 102.49％.在测试底液中加入过氧化氢,其线性范围为0.1 ～ 100.0 ng/mL,检测限为0.026 ng/mL.结论 基于Pt@GR复合物修饰的电化学传感器具有灵敏度高和稳定性好的特点,可用于甲胎蛋白的高灵敏检测.     

基于石墨烯-依来铬青蓝R的新型免标记电化学免疫传感器用于CA19-9检测

目的构建石墨烯-依来铬青蓝R(GO-ECR)免标记电化学免疫传感器高灵敏检测CA19-9的新技术。方法化学法合成氧化石墨烯并滴涂于电极表面,通过循环伏安法电沉积制作GO-ECR修饰玻碳电极,在偶联剂EDC和NHS作用下以共价键合方式将CA19-9抗体固定于修饰电极表面,固定的抗体与CA19-9发生免疫反应形成抗原-抗体复合物。铁氰化钾溶液作为检测探针,对比免疫反应前后铁氰化钾响应信号的差异,利用信号降低程度与CA19-9浓度正相关,实现对CA19-9的特异性高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器检测CA19-9的线性范围为0.05～500 U/mL,检测限为0.01 U/mL,且能准确测定临床血清样本CA19-9的浓度。结论构建的GO-ECR免标记电化学免疫传感器可以简单、准确、特异地检测CA19-9。     

基于碳纳米管-硫堇/苝四甲酸二酐衍生物膜/纳米金的新型癌胚抗原电流型免疫传感器的研究

目的探讨采用碳纳米管-硫堇(CNTs-THi)/苝四甲酸二酐衍生物膜(PTC-NH2)/纳米金(nano-Au)构建的新型的高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器的性能。方法以氧化铟锡(ITO)电极为基底,在其表面首先电沉积一层纳米金,然后依次修饰CNTs-Thi、PTC-NH2、nano-Au,固载癌胚抗原特异性抗体(anti-CEA)制得新型高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器。通过循环伏安法考察电极修饰过程的电化学特性。结果该免疫电极的峰电流响应与癌胚抗原的浓度在1.0～75.0 ng/mL的范围内保持良好的线性关系,相关系数为0.991 5,检测下限为0.5 ng/mL。结论利用该方法制备的免疫传感器具有灵敏度高、线性范围宽、检测下限低等优点。     

电化学免疫传感器超灵敏检测髓过氧化物酶的研究

目的：本研究拟建立一种电化学免疫传感器用于超灵敏检测人血清中髓过氧化物酶（MPO）水平的方法。方法通过石墨化多孔碳-金复合纳米材料（AuNPs＠ GMCs）将 MPO 抗体固定到玻碳电极表面,研制出一种新型 MPO 电化学免疫传感器,探讨了实验条件对传感器性能的影响,并与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行方法学比较。结果在最优条件下该传感器对MPO 反应灵敏,其线性范围为2．000～300．000 ng／mL ,相关系数为0．999,检出限为0．5 ng／mL ,与 ELISA 法检测结果的相关系数为0．983。结论该电化学免疫传感器可实现对 MPO 的超灵敏检测。     

基于Au_(nano)-PB、AEAPS-Dextran-Fe_3O_4和Au_(nano)修饰的前列腺特异性抗原电流型免疫传感器的研究

目的采用普鲁士兰-纳米金(Au_(nano)-PB)、氨基硅烷化-葡聚糖-四氧化三铁纳米复合物(AEAPS-Dextran-Fe_3O_4)及纳米金(Aunano)共修饰于氧化铟锡(ITO)电极表面固载抗体制得高灵敏前列腺特异性抗原电流型免疫传感器。方法先将ITO电极表面滴加适量Au_(nano)-PB,随后将AEAPS-Dextran-Fe_3O_4滴涂在ITO玻璃电极的Au_(nano)-PB膜上,然后通过静电吸附Au-nano并固定前列腺特异性抗体(anti-PSA),制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与前列腺特异性抗原(PSA)浓度在该传感器(0.8～20)ng/mL及(20～170)ng/mL的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.6ng/mL。结论成功建立了前列腺特异性抗原免疫传感器,该方法制备简单,操作便捷,检测下限低。     

基于氧化锌纳米花的心肌肌钙蛋白I夹心式电化学免疫传感器构建研究

目的 结合氧化锌纳米花及夹心法信号放大策略,构建高灵敏心肌肌钙蛋白I(cTnI)电化学免疫传感器。方法 采用直接沉淀法合成氧化锌纳米花,在其表面标记硫堇与cTnI抗体。另外,采用恒电位溶出法在电极表面沉积纳米金,通过金-氮共价键捕获cTnI抗体作为传感平台,识别检测抗体,构成夹心式、高灵敏cTnI电化学免疫传感器。采用扫描电子显微镜（SEM）表征材料的形貌结构,采用循环伏安法和示差脉冲伏安法（DPV）探究传感界面的构建过程、实验条件以及响应性能。结果 功能化氧化锌纳米花与纳米金呈现出良好的信号放大性能。在最优实验条件下,免疫传感器DPV响应电流与cTnI抗原浓度呈正比,线性范围为0.05～0.25μg/L和0.50～8.00μg/L,检测限为0.014 3μg/L(S/N=3)。构建的电化学免疫传感器具备良好的选择性、重现性及准确度。结论 结合氧化锌纳米花优异的催化性能,成功构建一种双抗夹心式cTnI电化学免疫传感器,提高了cTnI检测的灵敏度与特异度。     

Highly sensitive electrochemical determination of rutin based on the synergistic effect of 3D porous carbon and cobalt tungstate nanosheets

Rutin, a flavonoid found in fruits and vegetables, is a potential anticancer compound with strong anticancer activity. Therefore, electrochemical sensor was developed for the detection of rutin. In this study, CoWO₄ nanosheets were synthesized via a hydrothermal method, and porous carbon (PC) was prepared via high-temperature pyrolysis. Successful preparation of the materials was confirmed, and characterization was performed by transmission electron microscopy, scanning electron microscopy, and X-ray photoelectron spectroscopy. A mixture of PC and CoWO₄ nanosheets was used as an electrode modifier to fabricate the electrochemical sensor for the electrochemical determination of rutin. The 3D CoWO₄ nanosheets exhibited high electrocatalytic activity and good stability. PC has a high surface-to-volume ratio and superior conductivity. Moreover, the hydrophobicity of PC allows large amounts of rutin to be adsorbed, thereby increasing the concentration of rutin at the electrode surface. Owing to the synergistic effect of the 3D CoWO₄ nanosheets and PC, the developed electrochemical sensor was employed to quantitively determine rutin with high stability and sensitivity. The sensor showed a good linear range (5–5000 ng/mL) with a detection limit of 0.45 ng/mL. The developed sensor was successfully applied to the determination of rutin in crushed tablets and human serum samples.     

Chemiluminescence determination of melamine with Luminol-K3Fe(CN)6 system

A sensitive chemiluminescence (CL) method was developed for determining melamine in urine and plasma samples based on the fact that melamine can remarkably enhance the chemiluminescence of Luminol-K₃ Fe(CN)₆ system in alkaline medium. The determination conditions were optimized. Under optimum conditions, the chemiluminescence intensity had a good linear relationship with melamine in the range of 9.0 × 10^?9 – 7.0 × 10^?6 g/mL with a correlation coefficient of 0.9992. The detection limits (3σ) were 3.54 ng/mL for urine sample and 6.58 ng/mL for plasma sample. The average recoveries of melamine were 102.6% for urine sample and 95.1% for plasma sample. Melamine in samples was extracted with liquid-liquid extraction procedures and the assay results coincided very well with that determined with flow injection chemiluminescence method. The method provides a reproducible and stable approach for sensitive detection and quantification of melamine in urine and plasma samples.     

基于双重信号放大的电化学免疫法对前列腺特异性抗原的检测

以谷胱甘肽修饰的CdTe量子点(GSH-CdTe QDs)与金纳米粒(AuNPs)形成复合材料(AuNPs@GSH-CdTe)为信号标记物,并在还原氧化石墨烯(rGO)和AuNPs双重信号放大的作用下,建立了一种高灵敏检测前列腺特异性抗原(PSA)的三明治免疫夹心式电化学方法。在rGO/AuNPs表面固定二抗蛋白(Ab₂),捕获目标物PSA和标记有一抗蛋白(Ab₁)的AuNPs@GSH-CdTe信号物,形成“三明治”免疫夹心结构。经HNO₃溶解后,采用方波溶出伏安法(SWSV)测定酸解的Cd²⁺的峰电流用于定量分析PSA。其中AuNPs较大的比表面积以及较好的生物相容能力,达到了成功装载抗体以及放大信号的效果,同时具有较大表面积的rGO起到了协同放大的作用。所构建的免疫分析方法实现了对肿瘤标志物PSA的检测,其线性范围为0.5~200 ng/mL,检测限为5.0 pg/mL,并且该方法专属性、重复性以及稳定性好。此外,在实际样品的检测中,加标样回收率为98.20%~106.2%,结果准确度良好,为检测PSA提供了准确可靠且灵敏度高的新方法。     

基于多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇纳米复合物修饰甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的采用多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇(MWCNT-CS-THi)纳米复合物及半胱氨酸盐酸盐共修饰于玻碳电极表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白免疫传感器。方法先在玻碳电极表面滴涂一层MWCNT-CS-THi纳米复合物,随后利用壳聚糖和硫堇分子中大量的正电荷氨基固定纳米金(GNPs)并吸附半胱氨酸盐酸盐(CH),最后用戊二醛(GA)交联甲胎蛋白特异性抗体制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与甲胎蛋白抗原(AFP)浓度在0.1～200.0ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.07ng/ml。结论成功建立了甲胎蛋白免疫传感器,该方法制备简单,线性范围宽,检测下线低。     

塞曼原子吸收汞分析仪测定尿汞的方法学评价

目的对塞曼原子吸收汞分析仪测定尿汞的方法进行评价,为实验检测及临床诊断中选用简便、快捷的测汞方法提供参考。方法采用塞曼原子吸收光谱法(ZAAS)和氢化物发生-原子吸收光谱法(HG-AAS)进行尿汞含量测定,对两种方法的检出限、准确度、精密度及一致性进行比较。结果 ZAAS在0~1000 ng/m L范围内呈良好的线性关系(R2=1.0000),HG-AAS在0~20 ng/m L范围内呈良好的线性关系(R2=0.9990)。ZAAS和HG-AAS检出限分别为0.156 ng/m L、1.593 ng/m L,ZAAS灵敏度较高。ZAAS加标回收率在97.5%~103.2%之间,HG-AAS加标回收率在95.6%~104.5%之间;重复测量10 ng/m L、100 ng/m L汞标准溶液10次,ZAAS的相对标准偏差(RSD)分别为0.30%和0.36%,HG-AAS的RSD分别为2.82%和1.11%,两种方法准确度和精密度均满足GBZ/T 210.5-2008标准的要求,ZAAS精密度较高。用两种方法对30份尿液样本进行检测,经配对t检验,差异无显著性(P0.05),两种方法检测结果有较高一致性(R2=0.9961)。结论 ZAAS能够快捷、准确测量尿汞含量,检出限较低、精密度较高。     

壳聚糖/碳纳米管修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白检测

目的构建壳聚糖/碳纳米管(CNT)修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白(AFP)检测的新技术。方法采用壳聚糖/CNT复合物修饰玻碳电极,通过共价键合方式将AFP抗体固定在修饰电极表面,固定抗体的电极与AFP、辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP抗体反应,构筑夹心型免疫复合结构。HRP催化TMB底物产生电流信号,电流信号大小与AFP浓度成正相关,实现对AFP的高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器可以准确检测AFP标准样品,也可用于检测血清中AFP的浓度。结论壳聚糖/CNT修饰电极构建的用于AFP检测的电化学免疫传感器具有较高的灵敏度和准确性。