UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中古伦宾浓度及药动学研究

目的:建立一种灵敏度高、重复性好的UPLC-MS/MS法用于定量测定大鼠血浆中古伦宾浓度,并观察古伦宾在大鼠体内的药代动力学。方法:血浆样品由甲醇沉淀蛋白法处理后,经Waters BEH C18柱,乙腈-水作为色谱分离流动相,采用电喷雾离子源(ESI+)串联质谱检测,多反应离子监测(MRM)模式进行定量分析。结果:血浆中古伦宾在1.225~2 500 nmol/L内线性关系良好,最低检测限为1.22 nmol/L,日内与日间精密度均小于15%,提取回收率在85%~115%之间,均符合药代动力方法学分析要求。结论:本研究建立的UPLC-MS/MS方法操作简便、灵敏、快速、专属性强,可用于血浆中古伦宾的含量测定及其在大鼠体内的血浆药动学研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的左旋紫堇达明及其药代动力学研究

目的：建立快速、灵敏的LC-MS/MS分析方法定量测定大鼠血浆中左旋紫堇达明（L-CDL）的浓度,经系统方法学验证后,应用于该药的大鼠药代动力学研究。方法以普萘洛尔为内标,以水（含0.1%甲酸与5 mmol/L的甲酸铵）和乙腈（含0.1%甲酸）为流动相,血浆样品中的L-CDL和内标经C18（2.1 mm×750 mm,3μm）柱分离后,质谱电喷雾离子化源（ESI）正离子多反应监测（MRM）方式分别对离子对m/z 342?192.1和m/z 260?116.2进行检测。方法验证包括专属性、标准曲线与定量下限、批内和批间精密度、准确度、基质效应、提取回收率、稳定性。结果 L-CDL在大鼠血浆样品的定量线性范围为1~5000 ng/ml,最低定量下限为1 ng/ml,批内和批间精密度（RSD）＜10%,回收率93.5%~102.8%,基质效应108.3%~112.5%。大鼠经胃给予L-CDL 10 mg/kg后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC0-24分别为：（557.8±330.1）ng/ml、（7.04±3.93）h、（2408±630）h·ng/ml。结论建立的LC-MS/MS方法简便、快速、灵敏,适用于L-CDL在大鼠体内的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血中埃博霉素B浓度及其在Ⅰ期临床药代动力学研究中的应用

建立一种快速测定人全血中埃博霉素B血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国晚期肿瘤患者体内的Ⅰ期临床药代动力学行为。以埃博霉素A作为内标,采用C18色谱柱(150 mm×2.0 mm,4.6μm),柱温40℃。流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸)(64∶36),流速0.2 mL/min,电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,多反应监测(MRM)。药物和内标分别为埃博霉素B(m/z 508.3→490.4)和埃博霉素A(m/z 494.3→476.1)。在本文建立的方法下,埃博霉素B在0.1～20 ng/mL以及5～500 ng/mL呈良好的线性关系(r=0.999 5和0.999 4),方法回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。该方法适用于埃博霉素B血样的定量分析。     

LC-MS/MS法测定人血浆中奈比洛尔浓度及其在中国人体内的药代动力学

本文建立了一种快速测定人血浆中奈比洛尔血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国健康人体内的药代动力学行为。以氨氯地平作为内标,采用C₁₈反相柱(150 mm×2.0 mm,4.6 μm),柱温35 ℃。流动相为乙腈-水（含0.05%甲酸）（45∶55）,流速0.2 mL/min;电喷雾离子化（ESI）,正离子扫描,选择性反应监测（SRM）药和内标分别为：奈比洛尔m/z 406.2→151.0;氨氯地平m/z 409.0→238.2。在本文建立的方法下,奈比洛尔在0.025~25 ng/mL呈良好的线性关系,r=0.998 6,最低检测浓度为0.008 ng/mL,低、中、高浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。健康受试者口服5 mg奈比洛尔片后的t_1/2,AUC_0-t,c_max,MRT分别为：(14.4±5.5) h,(7.35±2.48)ng?h/mL,(1.05±0.35) ng/mL,(16.5±5.3) h。结果表明：该方法专属性强,适用于奈比洛尔血样的定量分析。     

LC－MS/MS法测定升麻葛根汤颗粒在犬体内的药代动力学研究

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)的方法测定犬灌胃给药升麻葛根汤颗粒后葛根素、芍药苷、异阿魏酸的药代动力学。[方法]采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相:0.05%甲酸水(A)-乙腈(B)梯度洗脱;流速:0.2 mL/min;柱温:25℃;进样量:5μL。以甲苯磺丁脲为内标,采用电喷雾离子源(ESI离子源),在负离子检测方式下进行多反应离子检测(MRM),检测离子对分别为m/z 415.2→294.9(葛根素)、m/z 525.0→449.0(芍药苷)、m/z 193.05→133.9(异阿魏酸)、m/z 269.09→169.9(甲苯磺丁脲,内标)。[结果]葛根素、芍药苷、异阿魏酸在10～4 000 ng/mL范围内线性关系良好。血浆中内源性物质不干扰测定,方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。[结论]该方法准确度强,专属性好,灵敏度高,可用于检测葛根素、芍药苷、异阿魏酸的药代动力学。     

LC-MS/MS法测定人血浆中雷洛昔芬及其临床药代动力学研究

目的:建立人血浆中雷洛昔芬(Raloxifene,RAL)的LC-MS/MS测定方法,研究口服RAL60 mg/d后RAL及其葡萄糖醛酸代谢产物的体内药代动力学过程。方法:绝经后女性志愿者单剂量口服雷洛昔芬60 mg/d,在0、0.5、1、2、4、6、8、24、48、72 h时间点采集血液样品,分离血浆后,经乙腈沉淀蛋白后采用液-液萃取法提取,进行LC-MS/MS分析。RAL及其代谢产物雷洛昔芬-6葡萄糖醛酸苷(M1)、雷洛昔芬-4’葡萄糖醛酸苷(M2)的多重反应监测的离子对分别为m/z 474.2/112.2、650.3/474.2和650.3/474.2。结果:RAL及其代谢物M1、M2的定量下限分别为0.195、0.975和3.9 nmol/L,提取回收率为77.14%～83.64%。人体中RAL及其代谢物M1、M2的药代动力学参数:RAL、M1和M2的C_(max)分别为(0.45±0.043)、(92.22±12.84)、(466.71±113.50) nmol/L;AUC_(0～t)分别为(19.55±0.65)、(2 133.25±326.91)、(7 344.45±819.18)μmol h/L;T_(1/2)分别为(69.48±25.26)、(100.10±29.80)、(29.65±0.92) h。结论:建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适用于RAL的临床药代动力学研究。RAL吸收后被快速代谢成了M1、M2,其体内药代动力学特点是半衰期长。建议RAL的临床药代动力学研究需同时检测其葡萄糖醛酸化代谢产物。     

LC—MS法测定人血浆中克林霉素浓度及药代动力学研究

目的 :建立人血浆中克林霉素浓度的高效液相色谱 -质谱法 ,测定志愿者口服盐酸克林霉素胶囊后的血药浓度 ,并对供试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价。方法 :血浆中加入内标西沙必利后碱化 ,以乙酸乙酯提取 ,进行高效液相色谱 -质谱法检测。色谱柱为 Kromasil ODS1 5 0× 4 .6 mm,5 μm,流动相为甲醇 -1 %冰醋酸 ( 5 7∶ 4 3) ,流速 0 .8ml/min,质谱检测采用选择性离子检测方法。 2 0名健康志愿者随机分成两组 ,分别服用供试胶囊和参比胶囊 ,临床实验方案采用双交叉实验设计法。结果 :克林霉素的线性范围为 0 .0 0 5～ 1 5 μg/ml,最低检测浓度为 1 ng/ml,本测定方法的提取回收率在 1 0 0 .5 %～ 1 0 5 .2 % ,用本法测定了 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 6 0 0 mg后血浆中药物的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。测得的 2种胶囊的主要药代动力学参数无显著性差异。结论 :该法简便 ,准确 ,灵敏度高     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中妇科断红饮胶囊3种有效成分的含量及其药代动力学研究

目的 建立UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中妇科断红饮胶囊主要有效成分在大鼠血浆中的浓度,并初步研究其在大鼠体内的药代动力学行为。方法 雌性SD大鼠单次或重复灌胃给药妇科断红饮胶囊内容物后,收集72 h内的血液样本,通过UPLC-MS/MS同时测定3种指标性成分的浓度,由Phoenix WinNonlin 8.1计算药代动力学参数。结果 以苯海拉明为内标,芍药苷、益母草碱、三七皂苷R1的检测范围分别为2～2000、0.1～300、0.1～800 ng·mL^-1。准确度分别在85%～115%之间,日内精密度与日间精密度RSD≤15%。与单次给药组比较,重复给药组大鼠3种成分的药时曲线下面积显著增大,平均滞留时间MRT_0-∞显著延长(P<0.01),消除半衰期t_1/2无明显变化。结论 该方法线性关系良好,线性范围宽,定量限低,精密度、回收率等均符合生物样品定量要求,提示该方法快速、灵敏、重复性好,可用于妇科断红饮胶囊3种有效成分在大鼠体内的相关药代动力学研究。以其主要成分芍药苷、益母草碱和三七皂苷R1为代表,妇科断红...     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的：建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法：血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果：血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为（2.46±1.25）h;Tmax为（1.96±1.00）h;Cmax为（1.70±1.48）ng/mL;AUC0-24为（7.08±5.27）ng.h/mL;AUC0-∞为（8.11±5.83）ng.h/mL。结论：该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的:建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法:血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果:血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为(2.46±1.25)h;Tmax为(1.96±1.00)h;Cmax为(1.70±1.48)ng/mL;AUC0-24为(7.08±5.27)ng.h/mL;AUC0-∞为(8.11±5.83)ng.h/mL。结论:该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS测定人血浆中咪达那新的浓度及其生物等效性研究

用UPLC-MS/MS测定人血浆中咪达那新的浓度,并应用于咪达那新片在中国健康受试者中的药代动力学及生物等效性研究。采用Acquity UPLC BEH C₈(2.1 mm×50 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相A为2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.2%乙酸),B为乙腈,梯度洗脱。采用液液萃取的前处理方法减小血浆样品的基质效应。质谱条件为正离子模式,咪达那新和咪达那新-d10 的检测离子分别为m/z 320.2→238.1和m/z 330.2→248.2。临床试验采用单剂量双周期自身交叉试验设计,24例健康受试者空腹条件下口服咪达那新片参比制剂或受试制剂。使用上述检测方法检测生物样品中咪达那新的含量,后用DAS3.2.8软件进行药代动力学及生物等效研究。咪达那新在10.0~1 000 pg/mL范围内线性良好,低、中、高浓度的样品提取回收率分别为84.0%、88.0%、90.0%,基质效应分别为105%、100%、101%。参比及受试制剂的药代动力学参数c_max分别为524.8和612.6 pg/mL,t_max分别为1.250和1.063 h,AUC_0-∞分别为2 229和2 466 pg/mL·h,参比制剂及受试制剂生物等效。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度

目的 建立使用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中紫草氰苷、格列风内酯浓度的方法,并研究其药物代谢动力学特征。方法 采用Aglient C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0~1 min,5%~20%B;1~2 min,20%~60%B;2~6 min,60%~70%B;6~6.5 min,70%~5%B;6.5~7.5 min,5%B),流速0.3 mL/min,柱温35 ℃。大鼠灌胃给药量为4 g/(kg·d),使用液质联用色谱法测定给药后不同时间点紫草氰苷和格列风内酯的血药浓度,通过DAS2.0软件模拟计算,得出相应的药物代谢动力学参数。结果 在大鼠血浆中,紫草氰苷在0.701 9~140.4 ng/mL,格列风内酯在1.120~240.4 ng/mL内线性关系良好,两者日内、日间精密度和准确度RSD均小于15%,回收率在87.22%~107.75%之间。紫草氰苷和格列风内酯在体内吸收均较迅速,0.5 h达到最高血药浓度,并且消除速率较快,24 h基本消除。结论 经方法学检验,此方法准确、稳定,可用于紫草氰苷和格列风内酯的药物代谢动力学研究。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中雷公藤内酯醇及其药代动力学

目的建立大鼠血浆中雷公藤内酯醇的超高效液相色谱质谱联用(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer/mass spectrometer,UPLC-MS/MS)法测定大鼠灌胃给药与静脉注射给药后的血浆药物浓度,并进行药代动力学参数评价。方法 Sprague Dawley大鼠分别经灌胃与尾静脉注射给药,经颈静脉取血,测定不同时间的大鼠血浆药物浓度,并计算其主要药代动力学参数。结果在0.1~200.0 ng/m L质量浓度范围内,血浆雷公藤内酯醇线性关系良好,血浆中雷公藤内酯醇的定量限为0.1 ng/m L,该药稳定性良好,回收率均在95%以上,日内与日间差异均小于15%。口服与静脉给药后,雷公藤内酯醇在大鼠体内的消除均较快,口服生物利用度为9.5%。结论本实验操作简便、稳定可靠、检测限低、效率高、重现性好,可以可靠地用于雷公藤内酯醇血药浓度测定及其药代动力学研究,本研究结果为雷公藤内酯醇的结构优化、剂型改进以及临床应用提供了实验依据。     

毛发中地佐辛、杜冷丁的UPLC-MS/MS检测

建立快速检测毛发中地佐辛和杜冷丁含量的超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法.将清洗后的毛发样品经甲醇研磨超声提取后进行UPLC-MS/MS分析.色谱柱为Waters Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为0.1％甲酸水-甲醇,0.4 mL/min梯度洗脱.质谱采用E...     

UPLC-MS/MS法同时测定黄芩中8种主要指标性成分的含量

目的 采用超高效液相-三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)的方法,对黄芩中的黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素、汉黄芩苷、木蝴蝶素A、木蝴蝶苷A、白杨素、芹菜素进行定量检测。方法 采用Thermo BDS Hypersil C₁₈(2.1mm×100mm,2.3μm)色谱柱进行色谱分离,柱温为40℃,流动相为乙腈(A)和0.1%甲酸水(B),梯度洗脱,流速为0.25mL/min,采用多反应监测的方法进行质谱扫描。结果 白杨素、黄芩素、芹菜素、木蝴蝶素A、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、木蝴蝶苷A的定量范围分别为0.975~62.5ng/mL(r=0.9998)、4.875~2500ng/mL(r=0.9997)、0.975~62.5ng/mL(r=0.9994)、0.0975~12.5ng/mL(r=0.9996)、0.04883~6.25ng/mL(r=0.9999)、4.875~2500ng/mL(r=0.9998)、0.4883~250ng/mL(r=0.9999)、0.4883~250ng/mL(r=0.9998),在该范围内线性关系良好;8种指标性黄酮成分的回收率(n=6)分别为98.75%、96.44%、101.13%、99.41%、102.26%、98.45%、96.75%、99.42%;检测方法的重现性和稳定性良好。结论 所建立的分析方法操作简便、快速、灵敏,结果准确,重复性好,所需样品少,可应用于黄芩中这8种成分的检测。      

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

液相色谱-串联质谱法测定连续肾脏替代治疗患者血浆及超滤液中头孢哌酮与舒巴坦浓度

目的：建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定连续肾脏替代治疗（continuous renal replacement therapy, CRRT）患者血浆及超滤液中头孢哌酮与舒巴坦浓度。方法以头孢呋辛酯为内标,采用WatersAtlantis dC18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5.0μm）进行分离,通过串联质谱仪,以多反应监测方式进行测定。用于定量分析的离子对分别是m/z 644.1→528.1（头孢哌酮）、m/z 231.8→188.0（舒巴坦）和m/z 509.3→206.9〔头孢呋辛酯,内标（IS）〕。结果头孢哌酮在10~500μg/ml范围内,舒巴坦在6~300μg/ml范围内线性关系良好。提取回收率＞90.0%,日内和日间相对标准偏差均＜15%。血浆和超滤液的基质效应结果表明,两种介质的基质对头孢哌酮、舒巴坦和IS的测定影响较小。结论本方法简便、快捷、灵敏度高,可在同一样品中同时检测两种药物,适用于危重患者行CRRT时血药浓度、超滤液药物浓度的监测,计算筛选系数（sieving coefficient,Sc）,为剂量调整提供准确依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定血必净注射液中15种有效成分的含量

[目的]建立同时测定血必净注射液中15种有效成分含量的测定方法,并用于10批血必净注射液的含量测定。[方法]采用超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MS/MS),色谱柱为ACQUITY UPLC誖BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈、0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,洗脱时间为6 min,流速为0.3 m L/min,电喷雾离子源,多重反应监测(MRM)模式进行负离子扫描。[结果]各目标成分线性关系良好,方法学精密度RSD值为1.02%~4.94%,重复性RSD值为2.13%~4.99%,加样回收率为94.89%~105.34%,除没食子酸外各成分在12 h内均稳定。对10批不同批次血必净注射液含量测定结果表明,目标成分中芍药苷含量最高,原儿茶酸含量最低。[结论]该方法简便、快捷,可用于血必净注射液的质量控制。     

人血浆中阿戈美拉汀浓度的测定及其药代动力学

建立测定人血浆中阿戈美拉汀浓度的LC-MS/MS方法,测定单剂量口服25 mg阿戈美拉汀片后其在中国健康受试者体内的血药浓度,利用Phoenix WinNonlin 6.3.0软件计算药代动力学参数。该方法中阿戈美拉汀浓度的线性范围为0.051 3~10.38 ng/mL(r=0.999 4),最低检测浓度为0.051 3 ng/mL。日内、日间精密度测定RSD均小于15%。单次口服给药后,阿戈美拉汀的c_max为(13.25±15.78)ng/mL,t_max为(0.68±0.41)h,AUC_last为(14.00±19.26)ng/mL·h,AUC_inf为(14.14±19.35)ng/mL·h,t_1/2为(0.78±0.44)h。本方法简便、准确、重现性好,可用于阿戈美拉汀血药浓度的测定及其人体药代动力学研究。