caspase抑制剂对大鼠缺血再灌注脑组织细胞凋亡和Aβ的影响

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时caspasc-3抑制剂对细胞凋亡及β-淀粉样蛋白（Aβ）表达的影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型．将Wistar大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、AcDEVD-CHO组和二甲亚砜（DMSO）组。大脑中动脉阻塞2h再灌注48h，Ac-DEVD-CHO组于大脑中动脉阻塞后30min向小脑延髓池注入caspasc-3抑制剂Ac-DEVD-CHO。采用TUNEL染色检测细胞凋亡。免疫组化SABC法检测AB的表达。结果与缺血再灌注组比较．Ac-DEVD-CHO组凋亡细胞百分率显著降低（P〈0．05）．AB表达显著减少（P〈0．05）。结论caspase-3抑制剂可减少脑缺血再灌注损伤时细胞凋亡的发生及Aβ表达．提示局灶性脑缺血再灌注损伤时可能存在caspase-3对AB前体蛋白APP的降解．使Aβ产生增多并促进凋亡的发生。     

甘露醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡的影响

目的 研究甘露醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡的影响。方法 采用大鼠大脑中动脉阻断（MCAO）模型，给予不同剂量甘露醇进行干预，用TUNEL染色标记大鼠神经细胞凋亡情况，按Swanson方法测量、计算梗死体积，并与未干预组及生理盐水对照组比较。结果 大、小剂量甘露醇均能减轻大鼠脑缺血再灌注后的神经细胞凋亡，并能阻止梗死体积的扩大。大、小剂量的效果之间无明显差异。结论 甘露醇的脑保护作用不完全与脱水降颅压有关，还可通过抑制神经细胞凋亡而发挥重要的脑保护作用。     

轻度低温对脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响

观察轻度低温对脑缺血再灌注后细胞凋亡的影响。方法：沙鼠４０只,随机分假手术组、缺血组和轻度低温（３２－３３℃）２ｈ组、６ｈ组、１２ｈ组共５组。夹闭双侧颈总动脉２０ｍｉｎ再灌注７２ｈ观察细胞凋亡。结果：ＦＣＭ显示缺血组海马区凋亡细胞９．３％,轻度低温２ｈ、６ｈ、１２ｈ组分别４．６％、２．６％、１．７％、。     

局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元凋亡研究

目的 观察大鼠局灶性脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤后海马CA1区神经元凋亡、TUNEL阳性细胞变化,以及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax蛋白的表达情况.方法 将健康雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠随机分为假手术组和I/R组,每组再分为缺血再灌注后3、6、12、24、48、72 h亚组.应用免疫组化方法检测再灌注后不同时间点大鼠海马CA1区神经元凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白的表达及Bcl-2/Bax比值变化,采用原位细胞凋亡检测(TUNEL)技术检测凋亡阳性细胞数.结果 各组非缺血侧相应区域神经元胞质中Bcl-2均有微弱表达.I/R组缺血侧海马CA1区于再灌注3 h开始出现Bcl-2和Bax蛋白微弱表达,随再灌注时间延长神经元内Bcl-2表达逐渐增强,再灌注24 h后Bcl-2表达达高峰,假手术组与I/R组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 I/R损伤后海马CA1区神经元不仅存在变性坏死,还存在明显的细胞凋亡且细胞凋亡在大鼠I/R损伤中发挥重要作用;I/R可诱导海马CA1区细胞凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达,且其表达呈一定规律.     

尤瑞克林对缺血再灌注大鼠脑神经生长因子表达的影响

目的探讨尤瑞克林对缺血再灌注损伤大鼠脑内神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的影响及其作用机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(model组)和实验组(test组)。在缺血2 h再灌注48 h后取材,检测各组大鼠大脑皮质NGF的表达情况。结果与假手术组比较,模型组大脑皮质NGF的表达明显增高(P<0.05);与模型组比较,实验组大脑皮质NGF的表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论尤瑞克林可增加缺血再灌注大脑皮质NGF的表达,从而起到脑保护作用。     

人参总皂甙对大鼠缺血再灌注后神经元凋亡的保护及作用机制的研究

目的探讨人参总皂甙对大鼠缺血再灌注脑组织的保护作用机制。方法利用大鼠大脑中动脉闭塞模型,脑组织切片行Nissel和TUNEL染色,计算调亡的细胞数。结果缺血非治疗组神经细胞数量明显减少,部分神经细胞胞体皱缩,核固缩,具有凋亡细胞的某些光镜特征。治疗组仅见少量神经细胞变性,胞体变形缩小。结论人参总皂甙能明显抑制神经细胞凋亡,从而发挥其神经营养和神经保护作用。     

雌激素对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NF-KB表达和细胞凋亡的影响

目的 研究雌激素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后NF-KB蛋白和细胞凋亡变化的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血再灌注模型.应用免疫组化检测NF-KB蛋白表达,利用原位缺口末端标记法(TUNEL )研究凋亡细胞的变化.结果 与对照组大鼠相比,雌激素组脑缺血再灌注后NF-KB表达明显减弱(P＜0.01);凋亡细胞显著减少(P＜0.01).结论 雌激素能抑制脑缺血后NF-KB表达,减少细胞凋亡.可能是其脑保护作用的机制之一.     

超负荷血糖对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞凋亡的研究

目的:探讨超负荷血糖对脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞凋亡及凋亡相关蛋白bax、bcl 2表达的影响。方法:用Wistar大鼠腹内注射链脲佐菌素,建立超负荷糖尿病大鼠模型,之后做大脑中动脉脑缺血再灌注模型。然后对大鼠进行脑梗死体积计算并且采用免疫组织化学方法检测超负荷血糖大鼠和正常大鼠脑缺血3h再灌注2 4hbax、bcl 2的表达,同时采用TUNEL法原位标记DNA片段,检测TUNEL阳性细胞的变化,并与假手术正常对照组比较。结果:超负荷血糖组梗死面积明显大于非超负荷血糖组;同时,前者bax的表达明显高于后者而bcl 2的表达则相反;糖尿病脑缺血再灌注损伤组TUNEL阳性细胞数明显高于非糖尿病脑缺血再灌注损伤和假手术对照组。结论:超负荷血糖加重了大鼠脑缺血再灌注损伤,超负荷血糖诱发的bax、bcl 2的表达异常促进了脑细胞的凋亡,可能是其加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

三七总皂甙对大鼠海马缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察三七总皂甙（panax notoginseng saponins,PNS）对脑缺血-再灌注大鼠海马区脑组织凋亡诱 导因子（apoptosis inducing factor,AIF）表达的影响,探讨PNS神经保护作用机制。 方法 68只雄性Wistar大鼠分为假手术组、生理盐水对照组（对照组）和PNS干预组（干预组）,再按照 干预时间点将对照组与干预组分为缺血-再灌注O h、2 h、4 h、6 h亚组。改良线栓法制备大鼠大脑中动 脉闭塞模型（middle cerebral artery occlusion,MCAO）,2 h后拔出栓线,造成缺血-再灌注。依次于再灌注 后0 h、2 h、4 h、6 h分别对干预组大鼠腹腔内注射小剂量PNS（50 mg/kg）、中剂量PNS（100 mg/kg）和 大剂量PNS（150 mg/kg）,对照组注射等体积生理盐水。采用免疫组化法检测大鼠脑缺血-再灌注缺 血侧海马区脑组织AIF的表达并对比各组的情况。 结果 假手术组大鼠海马区脑组织AIF阳性细胞表达数显著少于对照组和PNS干预组各亚组（均 P <0.01）;PNS干预组相同干预时间点的不同剂量组脑组织AIF阳性细胞表达数均明显少于生理盐水 对照组（均P <0.01）,与PNS小剂量组和中剂量组相比,PNS大剂量组AIF阳性细胞数表达显著减少。 结论 P NS可使缺血-再灌注大鼠缺血侧海马区脑组织AIF表达减少,可能通过抑制AIF表达而起到神 经保护作用。     

Hispidulin Protects Against Focal Cerebral Ischemia Reperfusion Injury in Rats

Focal cerebral ischemia is associated with ischemia/reperfusion (I/R) injury. Hispidulin is a flavonoid compound with a variety of pharmacological properties. The neuroprotective effects of hispidulin have not been fully elucidated. Herein, we demonstrated that pretreatment of animals with hispidulin improved the neurological outcomes and decreased the infarct size and brain edema in the cerebral focal I/R model. Mechanistically, we showed in vivo and in vitro that hispidulin exerted a protective effect against I/R injury by inducing the Nrf2 antioxidant pathway through modulation of AMPK/GSK3β signaling. Taken together, our results suggest that hispidulin may be a useful neuroprotective agent against ischemia/reperfusion (I/R) injury.     

人工合成E-选择素对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的探讨人工合成E-选择素对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性以及紧密连接咬合蛋白和闭锁小带蛋白-1含量表达的影响。方法 180只SD大鼠随机分为假手术组(用线栓法将线栓插入颈内动脉及颈外动脉分叉处,其余操作同模型组)、模型组(用改良Zea Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型)、治疗组(建模前10 min从股静脉缓慢注射人工合成E-选择素10 mg·kg-1)。每组分为3、6、24、48和72 h 5个时间点(每个时间点大鼠n=12),应用多功能酶标仪测量血脑屏障对伊文思蓝(EB)的通透性,应用免疫组化法和Western blot法测定咬合蛋白及闭锁小带蛋白-1的表达含量。结果与假手术组比较,模型组缺血再灌注损伤后3 h脑组织EB含量开始上升,6 h继续上升,24 h达峰值,48~72 h下降但仍高于初始值;治疗组各时间点EB含量均低于模型组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。模型组咬合蛋白和闭锁小带蛋白-1的表达都于缺血再灌注3 h开始下降,6 h继续下降,24 h达最低值,48~72 h上升但低于初始值;治疗组各时间点咬合蛋白和闭锁小带蛋白-1的表达含量均高于模型组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论人工合成E-选择素可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤造成的血脑屏障破坏,其机制可能与抑制紧密连接咬合蛋白和闭锁小带蛋白-1表达的减少有关。     

MicroRNAs Expression and Function in Cerebral Ischemia Reperfusion Injury

MicroRNAs (miRNAs) are small (18?~?25 nt) noncoding single-stranded RNA molecules that act as negative regulators of gene expression and modulating the stability and/or the translational efficiency of target messenger RNAs. Studies have shown that miRNAs control diverse aspects of brain disease. Recently, several studies have suggested that miRNAs alter the response to ischemia reperfusion injury and regulate the expression of various key elements in cell survival and apoptosis. This review article gives a brief overview of some miRNAs (miR-15a/b, miR-21, miR-29b/c, miR-124, miR-145, miR-181, miR-200 family, miR-338, miR-422a, miR-497, and miR let 7 family) in cerebral ischemia reperfusion injury. Although miRNAs could be potential therapeutic targets for the treatment of ischemia reperfusion injury, their safety and other limitations need further confirmation.     

Anemonin Alleviates Nerve Injury After Cerebral Ischemia and Reperfusion (I/R) in Rats by Improving Antioxidant Activities and Inhibiting Apoptosis Pathway

In the present study, we aimed at evaluating the potential neuroprotective effect and the underlying mechanism of anemonin against cerebral ischemia and reperfusion (I/R) injury. Anemonin was administered to rats by the intraperitoneally (i.p.) route once daily for 7 days before middle cerebral artery occlusion (MCAO). Focal cerebral ischemia was induced by 90 min of MCAO followed by 24 h of reperfusion. After that, animals were sacrificed by decapitation, brain was removed, and various biochemical estimations, neurological status, and assessment of cerebral infarct size were carried out. MCAO followed by 24 h of reperfusion caused a significant increase in infarct size, neurological deficit score, malondialdehyde (MDA) content, reactive oxygen species (ROS) level, and DNA fragmentation, as well as a decrease in the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), reduced glutathione (GSH), glutathione peroxidase (GPx), and Na⁺, K⁺-ATPase in the brain. Furthermore, elevated Bax expression, increased caspase-3 cleavage, and decreased Bcl-2 expression were observed in nontreated rats in response to focal cerebral I/R injury. However, pretreatment with anemonin significantly reversed these levels of biochemical parameters, reduced cerebral infarct size, and improved the neurologic score in cerebral ischemic animals. Additionally, a wide distribution of anemonin in plasma and brain tissues and the brain-to-plasma partition coefficient (Ri) ratio of 0.7 at 90 min indicated that this compound could penetrate the blood-brain barrier (BBB). These results showed that pretreatment with anemonin provided a significant protection against cerebral I/R injury in rats by, at least in part, its antioxidant action and consequent inhibition of apoptosis.     

高同型半胱氨酸血症对脑缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的：探讨高同型半胱氨酸血症（HHcy）对脑缺血再灌注损伤的影响。方法：制备HHcy大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，检测缺血l、2和4h再灌注24h不同时间窗各组大鼠脑梗死体积及血浆总同型半胱氨酸（tHcy）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平。结果：HHcy组大鼠脑缺血再灌注不同时间窗各组分别较相应对照组脑梗死体积增加，SOD水平降低，MDA水平增高，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；HHcy组和对照组大鼠脑缺血再灌注不同时间窗各组脑梗死体积的差值随缺血时间的延长而增加（均P〈0．05），但SOD与MDA水平的差值各组间无统计学意义（均P〉0.05）。结论：HHcy可能通过促进氧自由基产生等作用加重脑缺血再灌注损伤。     

七氟醚预处理对脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞缝隙连接的影响

目的探讨七氟醚预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞缝隙连接蛋白43(CX-43)以及缝隙连接超微结构的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血对照组(对照组)和七氟醚预处理组。采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。脑缺血再灌注24 h后,采用透射电镜观察星形胶质细胞间缝隙连接超微结构的改变;脑缺血再灌注24和72 h后,免疫荧光染色和蛋白免疫印迹法检测缺血侧脑组织内CX-43的表达。结果脑缺血再灌注24 h后,对照组仅残留少量缝隙连接,七氟醚预处理组细胞间缝隙连接超微结构完整。脑缺血再灌注24 h后,对照组CX-43含量显著低于七氟醚预处理组(P0.05)。结论七氟醚预处理可能通过减轻脑缺血再灌注损伤后缝隙连接的破坏和CX-43的缺失起到神经保护作用。     

选择素对脑缺血再灌注损伤作用的研究进展

选择素(selectin)是血管黏附分子大家族中的一类成员,根据表达部位不同可分为3类:E-selectin,L-selectin,P-selectin。选择素参与介导脑缺血再灌注损伤中的炎症反应,导致缺血区脑组织损伤。本文就选择素的分子结构和对脑缺血再灌注损伤的作用研究现状进行探讨。     

脑心通对脑缺血再灌注损伤细胞外信号调节激酶活化的影响

目的:观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注((ischemia/reperfusion,I/R)后信号转导介质细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)的活化情况以及脑心通对其影响。方法:雄性成年Wistar大鼠90只,随机分成3组:假手术组、对照组和脑心通组(每组30只),分别于缺血前6日每日用生理盐水4mL、生理盐水4mL和脑心通0.48g/kg(脑心通用4mL生理盐水溶解)灌胃。采用线栓法致大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在脑缺血再灌注后的3h、6h、24h、48h和72h分别处死大鼠(各组每个时间点6只),将脑组织进行免疫组织化学、TTC染色,TUNEL法观察细胞凋亡。结果:脑缺血诱导ERK活化,第6h达高峰,并持续到72h。脑心通组ERKs活化明显较对照组增强,而且各时间点ERK免疫反应阳性细胞数脑心通组显著较对照组增多(P<0.01)。脑心通组TTC染色梗死体积及凋亡细胞数较对照组明显较少(P<0.01)。结论:局灶性脑缺血再灌注可诱导缺血脑细胞部分ERK活化,脑心通干预可使缺血大脑海马ERK活化增强,减轻细胞的缺血性损伤。