牦牛心包的组织结构

本文以资源丰富的牦牛心包为对象,对其组织结构进行了探讨,并与商品牛心包瓣材料进行对比,结果发现: (1)牦牛心包主要由胶原纤维、弹性纤维和多种结缔组织成分构成;整个厚度的心包组织可分为三层:浆膜层、纤维层和心包外结缔组织层。 (2)与美国Edwards公司和Shiley公司牛心包材料相比,牦牛心包除弹性纤维数量较少外,在织组结构上没有重大差异。 (3)从组织学角度看,牦牛心包很有希望用作生物心瓣材料。     

不同方法处理的牛心包生物相容性和钙化结果分析

目的 观察脱细胞处理对牛心包体内生物相容性及钙化的影响并与戊二醛处理的牛心包进行比较；材料和方法对新鲜牛心包随机分为三组，A、戊二醛处理组：新鲜牛心包采用0．5％的戊二醛进行处理；B、新鲜牛心包组：新鲜牛心包保存于四联抗生素液中；C、脱细胞组：新鲜牛心包酶．去污剂联合脱细胞后保存于四联抗生素液中。上述处理后的牛心包经细菌培养，显示无细菌生长后，植入雄性昆明小鼠皮下三周观察炎性浸润及钙化情况。采用von Kossa钙染色检查进行定性分析；原子吸收光谱检查进行钙含量定量分析。同时体外对三组牛心包进行力学和热皱缩温度进行测试。结果 三组间炎性浸润程度明显不同，0．5％的戊二醛处理组钙化程度明显增高，每克干重牛心包平均含钙量71．2mg，较其他两组有明显差异（P〈0．001），新鲜牛心包组（平均2．12mg／g干重）和脱细胞组（1．41mg／g干重）间钙化程度方面亦有显著统计学意义（P〈0．001）。组织学钙染色光镜下检查显示三组间黑色颗粒有明显差异，支持三组间钙含量定量结果的差异。戊二醛处理组的力学性能与优于新鲜组和脱细胞处理组，热皱缩温度高于新鲜组和脱细胞处理组。结论 新鲜牛心包脱细胞处理后钙化显著降低，免疫源性降低，有很好的生物相容性。     

酒精对戊二醛固定牛心包影响的实验研究

目的探讨酒精处理对戊二醛固定牛心包体内钙化和力学性能的影响。方法牛心包经戊二醛固定后,再用酒精处理,未经酒精处理组作为对照组。将两组牛心包埋植于大鼠皮下,分别于3周和2个月后取出,然后通过原子吸收光谱法和VonKossa钙染色评估两组牛心包钙含量变化。进行力学性能测试和热皱缩温度测定评估两组牛心包的物理性能。结果组织学检查显示酒精再处理对牛心包胶原纤维结构无明显破坏;大鼠皮下埋植实验显示酒精再处理能显著抑制戊二醛固定牛心包的钙化,3周时酒精再处理的戊二醛固定牛心包组钙含量是(1.08±0.30)mg/g,酒精未处理组钙含量是(24.55±7.16)mg/g;2个月时酒精再处理戊二醛固定牛心包组钙含量是(1.20±0.43)mg/g,酒精未处理组钙含量是(120.22±37.36)mg/g,差异有统计学意义;酒精再处理后牛心包的断裂伸长率增大,抗拉负荷增大,但抗拉强度改变无统计学意义;酒精再处理后牛心包的热皱缩温度下降。结论酒精处理戊二醛固定的牛心包动物体内实验显示有显著的抗钙化作用,并且具有良好的力学性能。     

牛心包瓣性能的综合改进（Ⅲ）：醛处理对牛心包钙化的影响

本文观察了不同浓度戊二醛、甲醛处理对牛心包理化性能的影响。牛心包的收缩温度随着戊二醛或甲醛浓度的增高而提高。而抗拉强度在76～85℃收缩温度范围内,并没有随着收缩温度的提高而增强。随着收缩温度的提高,牛心包的抗蛋白酶水解性能有所增强。随着经甲醛溶液浸泡的牛心包收缩温度的提高,牛心包的钙化越趋严重。而经戊二醛溶液浸泡的牛心包,随着收缩温度的提高,其钙化有所减轻。     

液氮冷冻法制作兔股骨头坏死模型:可行,理想与可信

背景:目前缺乏一种理想股骨头坏死动物模型,从而制约了对其进一步的研究。目的:验证以液氮冷冻法制作兔股骨头坏死修复模型的可行行,为后续研究奠定基础。方法:取成年新西兰大白兔20只,双侧进行实验,在不切断股骨头圆韧带、髋关节不脱位的基础上,以液氮棉签连续快速冷冻股骨头25次,约10s/次。分别于术后第3,7天,2,4,6,8周拍双侧髋关节正位片X射线片、MRI,并进行股骨头标本的大体解剖学观察和组织学观察。结果与结论:在造模3d时的股骨头组织切片上,冷冻区和周围部的软骨细胞、骨细胞和骨髓组织呈现坏死。2周,可见坏死的骨小梁周围开始出现修复表现。4周,部分出现剥脱,6周,软骨剥脱更加明显,8周,呈骨性关节炎改变,关节软骨剥脱严重,有2例股骨头正常外形改变。证实非髋关节脱位情况下液氮冷冻股骨头,可以成功建立的兔股骨头坏死模型,简便易行成功率高,可作为其后续研究的理想模型。     

灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化

文题释义：组织工程：主要研究种子细胞、生物材料、构建组织和器官4个方向,其核心是建立由细胞和生物材料构成的三维空间复合体,对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代,具有良好的发展前景和广阔的应用市场。牛心包脱细胞支架：经化学和物理方法去除牛心包中的细胞,形成无免疫原性或低免疫原性材料,构建组织工程支架。 背景：组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。 目的：观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法：将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素(青霉素/链霉素/两性霉素B溶液)的PBS、氯己定及体积分数75%乙醇进行灭菌处理。采用LB固体培养基评价4种方法的杀菌效果;采用VB染色评估4组处理对牛心包组织结构的影响;通过CCK-8实验测定4种处理抽提液的细胞毒性。将体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包制作为脱细胞支架,与人脐静脉内皮细胞共培养,观察细胞的黏附与内皮化效果。结果与结论：①体积分数75%乙醇和氯己定处理24 h的牛心包满足完全灭菌的要求,1%抗生素处理组和对照组可见明显菌落形成;②VB染色显示,体积分数75%乙醇、氯己定和1%抗生素处理的牛心包胶原纤维呈波浪状排列整齐,结构紧凑,弹性纤维含量较少但结构清晰;③体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包不影响L929细胞的增殖活性,培养1-3 d内的细胞存活率均在100%以上;氯己定灭菌处理的牛心包有很强的细胞毒性,导致细胞死亡;④人脐静脉内皮细胞可在脱细胞支架表面正常生长与黏附;在20 d的种植期内,第8-12天脱细胞支架表面黏附的细胞最多;⑤结果说明,体积分数75%乙醇能够有效消灭附着在牛心包上的所有微生物,不会影响牛心包的组织学完整性与生物相容性。ORCID: 0000-0002-3448-8230(刘飞) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

心包纤维取向对压缩性能的影响

目的探究不同纤维取向心包组织压缩后的力学性能,评估对经导管瓣膜耐久性的影响。方法将心包条分为横、纵、斜向的心包条各12组,每组中包含3条,其中1条不压缩,另外两条分别在12.5、25 N下压缩1 h。利用单轴拉伸方法对压缩后的心包进行测试,分析其力学性能的变化。结果不同纤维取向心包在压缩前后均表现出明显的各向异性。压缩前后的割线模量、弹性模量以及极限拉伸强度,总体上都表现为纵向斜向横向。纵、斜向牛心包在25 N压缩后的平均拉伸强度比值分别为0.92和0.87,压缩前后的拉伸强度比值均有显著性差异(P0.05)。横向牛心包25 N压缩后的平均拉伸强度比值为0.97,压缩前后的拉伸强度比值无显著性差异(P0.05)。结论不同纤维取向心包在低应力、短时间下压缩损伤都很小。在经导管瓣膜的设计和制造过程中,应该充分考虑心包纤维取向和压缩后强度变化对瓣膜性能的影响。     

牛心包脱细胞处理后免疫原性的研究

牛心包用0.5%胰蛋白酶处理3 h,探讨其作为组织工程心脏瓣膜支架材料的可行性。大鼠被分成新鲜牛心包组、脱细胞处理牛心包组、空白对照组三组,分别测定其血清中产生的特异性抗牛心包抗体IgG的OD值,结果发现IgG含量在术后7 d三组间比较无统计学意义(P>0.05),其余各时点间比较差异有显著性(P<0.05),在相应时点新鲜牛心包产生的IgG值比脱细胞处理的牛心包高,且新鲜牛心包产生的IgG值在术后2月达峰值,而脱细胞处理牛心包产生的IgG在术后1月达峰值。组织学观察发现脱细胞处理后牛心包完全清除了细胞成分,纤维网架结构轻度松散,但基本保持完整。结果表明,这种脱细胞方法能完全清除牛心包上的细胞成分,降低免疫原性。     

胎兔周围神经低温保存温度值的实验研究

目的 :探讨胚胎兔周围神经低温冷藏后的改变。方法 :以 10 %DMSO(二甲基亚砜 )为低温保护剂 ,采用两步冷冻保存步骤 ,选择 4种不同的冷冻维持温度 (- 2 0℃、- 4 0℃、- 6 0℃、- 80℃ ) ,对孕龄 2 6d～ 2 8d的胎兔坐骨神经进行冷冻 ,维持 30min后 ,放入液氮中保存一周。复温后行四唑盐还原试验、组织学和超微结构观察 ,探讨冷冻维持温度对胎兔周围神经的影响。结果 :- 4 0℃维持温度冷冻后液氮保存的胎兔周围神经代谢活性和超微结构得到良好维持。结论 :两步冷冻法可以较好地保存胎兔周围神经的生物活性 ,为胎周围神经的冷冻保存和移植奠定了基础     

不同冷冻方案保存人类卵巢组织的活性比较

背景：卵巢组织冷冻保存被认为是保存女性生殖内分泌功能安全、有效的方法,但目前尚无统一确定的方案。目的：探讨3种冷冻方案对人类卵巢组织保存冷冻效果及卵泡活性的影响。方法：采用丙二醇慢速程序冷冻法、二甲基亚砜玻璃化冷冻法、液氮直投法对20例人类卵巢组织进行冷冻保存,复苏后采用细胞存活/死亡荧光分析法计数有活性的细胞,体外培养测定培养液雌二醇浓度及各级卵泡计数,判断3种不同冷冻方案对人类卵巢组织活性的影响。结果与结论：不同冷冻方案冻融后卵巢组织块的活性卵泡率均低于新鲜卵巢组(P < 0.05),二甲基亚砜组最低,液氮直投法组与慢速程序冷冻法组差异无显著性意义。体外培养各冷冻组分泌的雌二醇水平比较,第4天时二甲基亚砜组低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P < 0.05),至第8天时各冷冻组雌二醇水平与新鲜卵巢组一致。培养14 d组织学观察,各组卵巢组织内生长期卵泡比例增多,始基卵泡仍然占最主要的。新鲜卵巢组织正常卵泡的总数高于冷冻组(P < 0.05),二甲基亚砜组的正常卵泡数低于液氮直投法组和慢速程序冷冻法组(P < 0.05)。提示冷冻保存对卵巢组织卵泡有一定的损伤,但仍能保存大部分始基卵泡的活性,经体外培养后可进一步发育并具有分泌功能,在3种冷冻方案中,慢速程序冷冻法和液氮直投法的冷冻效果优于二甲基亚砜玻璃化冷冻法,液氮直投法操作简便,冷冻效果稳定。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

调Q激光与液氮冷冻治疗扁平疣临床对比观察

目的探讨调Q激光与液氮冷冻治疗扁平疣的临床疗效。方法选取2013年4月~2015年10月在我院皮肤科进行就诊的70例扁平疣患者作为研究对象,将其随机分为两组,观察组和对照组,每组各35例。观察组患者采用调Q激光治疗,对照组患者应用液氮冷冻治疗,对比分析两种方式的治疗效果。结果治疗后对照组患者的临床总有效率为77.1%,低于观察组的97.1%,差异有统计学意义(P0.05);观察组患者的不良反应率为20.0%,低于对照组的88.6%,差异有统计学意义(P0.05)。结论调Q激光比液氮冷冻治疗扁平疣的临床效果好,可以减少不良反应的发生,安全可靠,值得在临床应用中广泛推广。     

胶原-壳聚糖制备仿生多层结构软骨支架

目的制备结构与天然软骨结构相似的仿生多层软骨支架。方法采用先后于-20℃和液氮中冷冻的预冻方式,冷冻干燥法制备双层支架。采用-20℃冷冻后,部分熔融再液氮重冻的预冻方式,冷冻干燥制备了厚度约2mm的仿生多层软骨支架。采用XRD和红外光谱观察胶原和壳聚糖的复合情况。采用SEM观察支架的形貌。对比了纯壳聚糖支架、纯胶原支架、胶原壳聚糖复合材料单层支架和仿生多层支架在干燥和湿润两种状态下的力学性能。结果胶原和壳聚糖的复合存在化学反应,复合材料形成更好的孔结构,仿生多层支架从上至下分别具有致密层结构,圆形孔结构和垂直孔结构。支架材料在干燥和湿润状态下的力学性能有很大差别,仿生多层支架在湿润状态下各层具有不同的力学性能。结论仿生多层软骨支架的结构接近于天然关节软骨多层结构,且在湿润状态下各层的力学性能有差异,有望更好地维持软骨细胞表型和提高软骨损伤修复效果。     

液氮冷冻治疗炎症的实验观察

液氮冷冻作为治疗学中的一项新疗法,目前已广泛用于临床多种疾病的治疗,取得了可喜的疗效。但有关液氮冷冻的抗炎作用的实验研究国内尚未见详细报道。为了探讨液氮冷冻的抗炎效应,我们进行了动物实验,现报道如下。     

低温冷冻皮肤组织仿真实验结果分析

目的：低温液氮冷冻是治疗色斑、疱疹、鸡眼、疣、血管瘤等各种皮肤疾病的有效手段,然而。液氮冷冻的临床应用大多凭经验进行,无法根据不同的病灶特点实现对冷冻区域、冷冻面积、冷冻时间、冷冻复温循环次数等的精确控制,为此,对液氮冷冻皮肤组织进行仿真分析。方法：根据皮肤组织的解剖模型,建立皮肤组织分层的三维模型,采用Pennes生物传热方程,借助于Fluent有限元软件,模拟皮肤组织在液氮冷冻条件下的温度变化,对液氮冷冻皮肤组织的温度变化特性进行研究。结果：给出了稳态条件下的温度分布云图及温度分布曲线。由于有效冷冻温度为-40℃,稳态时．在水平方向有效冷冻半径约为0．75mm,竖直方向上有效冷冻半径为1．25mm;在记录一定时间内不同点不同时刻的温度时,对比了不同位置处温度的变化趋势,即在离冷源相同距离的情况下,由于表面皮肤与空气换热的影响．竖直方向的温度普遍低于水平方向的温度。结论：模拟了皮肤组织在液氮冷冻条件下的温度变化情况,并找出最佳冷冻区域,对临床治疗和液氮冷冻装置的研发提供了理论依据。     

不同化学方法改性的牛心包体外降解规律的研究

牛心包材料是一种以胶原蛋白为主要成分的天然生物材料。为了研究牛心包作为组织工程材料的可能，本实验通过采用失重法、蛋白质检测法及氨基酸测定法定量地研究和对比了几种不同改性方法处理过的牛心包的体外降解规律，力求找到一种改性方法使材料既有可控的降解性，又有较小的抗原性，以使牛心包成为一种良好的可降解性GTR材料。研究结果显示，用乙醇封端处理的心包相对于戊二醛及环氧交联处理的心包，在降解性方面更易满足可降解GTR材料的要求。蛋白质检测法及氨基酸测定法也为以后建立控制心包降解速率的数学模型奠定了良好基础。     

原花青素交联牛心包材料的研究

本研究针对天然交联剂原花青素处理牛心包材料的性能进行研究.采用原花青素交联牛心包组织,制备人工生物心脏瓣膜材料,并对其交联特性、力学特性、抗酶降解性能、亲疏水性能、细胞毒性试验以及溶血试验等进行分析.结果显示:原花青素或戊二醛处理的牛心包组织变性温度、力学特性、表面亲水性能和抗酶降解能力都明显提高;与传统交联剂戊二醛相比组织稳定性、亲水性能和抗酶降解能力未见显著性差异,但是最大断裂强度显著提高(原花青素交联组织最大断裂强度(13.863 0 MPa)明显高于戊二醛交联组织(10.784 2 MPa);溶血试验结果表明原花青素处理固定组织的溶血率(2.61%)远低于戊二醛处理的组织(12.54%);细胞毒性试验结果表明原花青素交联组织在1、3、5 d的细胞增殖率分别为76.19%、88.96%、100.12%,而戊二醛在相同的时间点的细胞增殖率分别为63.15%、57.28%、48.74%.原花青素交联的瓣膜材料组织结构稳定、亲水性好、毒性小且能维持较好的力学性能,作为人工生物瓣膜材料具有很好的研究前景.     

EDC交联改性的脱细胞异种(猪)肌腱生物学特性研究

目的探讨EDC交联的脱细胞异种(猪)肌腱生物学特性,为其作为肌腱移植材料的应用研究提供依据。方法猪肌腱脱细胞后进行EDC改性处理,进行组织形态学、生物力学、体外降解性能、免疫性能和细胞相容性检测,并与新鲜肌腱、深低温冷冻肌腱和单纯脱细胞肌腱进行比较。结果 EDC改性的脱细胞肌腱免疫原性最低,且力学性能、体外降解特性显著优于单纯脱细胞肌腱,而与新鲜肌腱、冻存肌腱无显著性差异,各组之间的细胞相容性无显著性差异。结论 EDC改性的脱细胞肌腱具有较低的免疫原性和较好的生物学力学特性,是一种具有潜在应用价值的肌腱支架材料。     

共价-离子结合肝素改性对牛心包膜抗凝血性能的影响

目的在碳化二亚胺交联的去细胞牛心包膜上采用3种方式进行肝素改性,即共价键合肝素、离子结合肝素以及共价-离子联合负载肝素,比较这3种肝素化方式对牛心包膜抗凝血性能的影响,并筛选出最佳肝素化方式。方法通过溶血试验、血小板黏附实验、体外凝血测试以及复钙时间测定观察3种方式肝素化的基质抗凝血性能和血栓形成情况,以评价其血液相容性。结果综合上述4项检测的结果,共价-离子联合负载肝素改性的抗凝血性能优于共价键合肝素、离子结合肝素这2种单独负载肝素方式,溶血率〈5％,电镜照片无血小板黏附,体外生理盐水浸泡15d后,仍保持良好的抗凝血活性。结论共价-离子联合负载肝素,将离子结合肝素活性好、共价键合肝素稳定性强的优点结合起来,取长补短,使这种方式肝素改性的牛心包具有良好的血液相容性。     

用六次甲基二异氰酸酯(HDI)作为牦牛心包材料交联剂的探索实验

为寻求一种优于戊二醛(GA)的新型生物瓣膜材料交联剂,作者从可行性探索的角度,用气态六次甲基二异氰酸酯(HDI)处理川西牦牛心包材料。通过对心包材料的收缩温度(T_s)和氮基酸组成的测定,对气态HDI与心包胶原组织的反应作了初步分析。此外还评价了材料的生物相容性和缓钙化性能,测定了材料的力学性能。实验结果表明:HDI可以作为心包材料的交联剂,但必须防止HDI与心包作用的同时,也与心包中含有的水份反应。经HDI处理的牦牛心包材料具有良好的生物相容性和力学性能。与戊二醛处理的牦牛心包材料相比,其缓钙化能力有所提高,证明HDI有可能成为一种生物瓣膜材料的交联剂。     

无支架四叶心包二尖瓣的应力分析

目的研究一种改进的无支架四叶心包二尖瓣的力学性能,通过数值模拟获得该种瓣膜的变形和应力分布.方法考虑材料非线性,大变形和接触条件建立有限元模型,采用有限元法进行应力分析.结果分析表明,数值模拟结果的瓣膜开启和闭合形态与体外流体动力学实验所观察到的相当接近,瓣叶闭合良好,瓣叶应力分布较均匀,应力大小在合理的范围内.结论有限元模型合理且有效,其分析结果可以作为评价该种瓣膜生物力学性能的参考.