基于Probit回归的核酸检测系统分析灵敏度验证

目的:基于Probit回归,计算核酸血液检测系统所能检测到的分析物最低浓度,以验证核酸检测试剂在血站实验室常规使用中的分析灵敏度与试剂说明书中声明的一致性,保证核酸检测的质量。方法:使用核酸试剂对核酸系列分析灵敏度血清盘进行检测,统计HBV-DNA,HIV-RNA,HCV-RNA等每个浓度样本的重复检出率,应用SPSS统计学软件的Probit模块,计算出每个项目的95%检出限。结果:HBV-DNA的95%检出限为4.568IU/ml,HIV-RNA的95%检出限为46.000IU/ml,HCV-DNA 95%检出限为46.600IU/ml,均优于试剂说明书中声明的95%检出限。结论:基于Probit回归,使用核酸试剂对核酸系列分析灵敏度血清盘进行检测,能够准确计算出检测项目的95%检出限,直观判断实验室分析灵敏度是否在可接受范围之内。     

无偿献血者标本血清学和核酸检测情况分析

目的:分析无偿献血者标本血清学检测和核酸检测情况,为制定血液筛查策略提供依据,降低输血传播性病原体漏检率。方法:分别用2种ELISA试剂对无偿献血者标本进行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体检测,用荧光定性PCR方法对HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA检测结果阴性、0.5≤S/CO≤5.0、S/CO5.0的标本进行HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA检测。对190份HBsAg(-)/HBV-DNA(+)献血者标本进行化学发光补充实验。结果:187 791例血清学检测阴性的无偿献血者标本中检出1例HIV-RNA病毒,194例HBV-DNA病毒,未检出HCV RNA病毒。科华和罗氏核酸检测系统拆分阳性率和阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)。HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA双试剂阳性(S/CO10.0)标本HBV-DNA、HCV-RAN和HIV-RNA阳性检出率分别为88.89%、84.62%和100%,0.5≤S/CO≤10.0 ELISA双试剂阳性标本的HBV-DNA、HCV-RAN和HIV-RNA阳性检出率分别为69.44%(25/36)、0和0;HBsAg ELISA检测双试剂阳性结果不同组间(S/CO10.0和0.7≤S/CO≤10.0)核酸阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)。对194例HBsAg(-)/HBV-DNA(+)中的190例标本进行化学发光补充实验,检出1例HBsAg阳性,HBcAb阳性检出率为90.00%。结论:HBsAg ELISA检测后HBV输血风险仍然较高(103/10万)。NAT技术的应用,降低了血液病毒窗口期、OBI等输血残余风险。HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA阳性反应的HBV-DNA、HCV-RAN、HIV-RNA检出率与ELISA检测S/CO值的高低及2种ELISA试剂检测结果一致程度有一定关联。采用灵敏度高的血清学方法和核酸检测技术,可进一步降低输血传播病原体的漏检率,保障输血安全。     

两种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的检测效能评价

比较两种国产不同核酸提取方法定量检测乙型肝炎病毒（HBV）核酸试剂的检测效能。方法选择经抗病毒治疗且HBV DNA 载量在﹤1×10^4 IU/ml的乙型肝炎患者血清标本36份,采用两种国产HBV核酸定量检测试剂盒平行检测HBV DNA,对阳性血清进行梯度稀释后再检测,从定量线性范围、准确性、灵敏度、特异性等方面比较两种试剂的差异。结果在36例临床血清中,14份经科华试剂检测的结果为﹤500 IU/ml,而圣湘试剂检测的结果仍﹥1.00×10^3 IU/ml;对其中获得检测数据的31份标本进行两种试剂检测结果的相关性分析,发现一致性较好（r=0.817,P﹤0.05）;两种方法检测乙型肝炎患者血清HBV DNA的阳性率分别为55.6％和94.4％,差异具有统计学意义（x2=12.07,P=0.000）;对强阳性血清进行梯度稀释后定量检测显示,两种试剂检测水平的平均值与理论水平的线性相关性较好（湖南圣湘r=0.999,上海科华r=0.992）,但圣湘所有检测的相对偏差均在±0.3logIU/ml之内,而科华有两次检测的相对偏差超出了±0.3logIU/ml范围,提示圣湘试剂检测结果更稳定,使用纳米磁珠核酸提取法的检测结果较煮沸法更加准确。结论以纳米磁珠为提取核酸方法不仅具有更广的线性范围,同时可显著提高国产HBV DNA检测试剂的灵敏度和准确性。     

3种HBsAg血液筛查试剂的检测效能评估

目的:对使用的3种HBsAg(2种酶免试剂+1种化学发光试剂)进行检测效能评估。方法:通过分析这3种HBsAg试剂对9个HBsAg血清盘(792个标本)的检测结果,分析3种试剂的批间精密度、批内精密度及其灵敏度、特异度及其正确率、假阳性例数和假阴性例数,最终比较3种试剂检测效能。结果:对于强阳性质控标本,3种试剂的批间精密度良好,变异系数在5.1%～10.2%。由于ELISA2对于弱阳性质控标本未能检出,因此ELISA2在批间精密度和批内精密度的统计中不计入内。对于弱阳性质控,ELISA1与CLIA的批间精密度分别为16.2%和21.7%。批内精密度的变异系数分别为10.9%和12.6%。对于亚型标本的分析,ayw1亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.18IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.36IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.09IU/mL。adw2亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.09IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.09IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.05IU/mL。adrq亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.05IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.09IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.05IU/mL。对于突变标本,3种试剂的检出率为42.3%～88.5%,其中CLIA检出率为88.5%。在611例常规血清盘标本,3种HBsAg试剂灵敏度为78.7%～87.5%,特异性为96.3%～98.4%,准确率为84.9%～90.2%,其中ELISA2的正确率最低为84.9%,假阳性例数为3～6例,假阴性例数为41～88例,其中CLIA的假阴性例数最少为6例。结论:CLIA试剂对于突变标本和亚型标本具有很好的检出能力。HBsAg试剂在使用前及使用中均要进行必要的评估,化学发光试剂在HBsAg检测中具有一定优势。     

3种HBsAg血液筛查试剂的检测效能评估

目的:对使用的3种HBsAg(2种酶免试剂+1种化学发光试剂)进行检测效能评估。方法:通过分析这3种HBsAg试剂对9个HBsAg血清盘(792个标本)的检测结果,分析3种试剂的批间精密度、批内精密度及其灵敏度、特异度及其正确率、假阳性例数和假阴性例数,最终比较3种试剂检测效能。结果:对于强阳性质控标本,3种试剂的批间精密度良好,变异系数在5.1%～10.2%。由于ELISA2对于弱阳性质控标本未能检出,因此ELISA2在批间精密度和批内精密度的统计中不计入内。对于弱阳性质控,ELISA1与CLIA的批间精密度分别为16.2%和21.7%。批内精密度的变异系数分别为10.9%和12.6%。对于亚型标本的分析,ayw1亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.18IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.36IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.09IU/mL。adw2亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.09IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.09IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.05IU/mL。adrq亚型的标本ELISA试剂1的检出下限是0.05IU/mL,ELISA试剂2的检出下限是0.09IU/mL,CLIA试剂的检出下限是0.05IU/mL。对于突变标本,3种试剂的检出率为42.3%～88.5%,其中CLIA检出率为88.5%。在611例常规血清盘标本,3种HBsAg试剂灵敏度为78.7%～87.5%,特异性为96.3%～98.4%,准确率为84.9%～90.2%,其中ELISA2的正确率最低为84.9%,假阳性例数为3～6例,假阴性例数为41～88例,其中CLIA的假阴性例数最少为6例。结论:CLIA试剂对于突变标本和亚型标本具有很好的检出能力。HBsAg试剂在使用前及使用中均要进行必要的评估,化学发光试剂在HBsAg检测中具有一定优势。     

HIV 1/2抗体快速诊断试剂分析灵敏度评价

目的对艾滋病病毒(HIV)抗体快速检测试剂盒进行分析灵敏度的评估,为今后试剂的质量提高及用户选择提供参考。方法用构建的性能血清盘和稀释系列血清盘来评价8种快速检测试剂,通过免疫层析判读仪进行结果的读值,然后对结果进行统计分析。结果 A、B、C、D、E、F、G、H 8种试剂检测性能血清盘结果显示:C、D、E、F、G、H 6种试剂的阳性检出率均达到20/20,且GOD值均较高(反应强度较高);2种试剂存在漏检的现象,GOD值均较低(反应强度较弱)。检测稀释系列血清盘结果显示,4种试剂对稀释后的弱阳性样本分析灵敏度较高,其他4种试剂分析灵敏度较低。随着样本稀释倍数的增加,抗体浓度的降低,检测出的GOD值也逐渐下降。当抗体浓度相同时,各个试剂之间的GOD值呈现差异;GOD值较高的试剂检测弱阳性样本的灵敏度更高。结论不同HIV抗体快速检测试剂盒在分析灵敏度方面存在差异。试剂在使用前,使用者应加强对试剂性能的验证,选择分析灵敏度较高的HIV抗体快速诊断试剂,提高实验室阳性检出率,及早发现HIV感染者。     

HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的方法学评价北大核心CSCD

目的构建艾滋病病毒（HIV）口腔黏膜渗出液（OMT）快速检测试剂（RDTs）评价盘,评价HIV OMT RDTs的质量。方法采集健康志愿者的口腔黏膜渗出液,用稀释液稀释HIV抗体阳性和阴性的血浆样本,分别构建实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室线性稀释系列盘和实验室精密度盘。用6家HIV OMT RDTs（编号：试剂AF）分别检测构建的评价盘和HIV抗体口腔黏膜渗出液快速试剂的国家参考品,肉眼判读检测结果并测定GOD值。结果根据肉眼判读,试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,分析灵敏度≥3/5;试剂D的批内精密度高于其他试剂,试剂F的线性范围为28214。根据GOD值,试剂AE的特异性,阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,敏感性≥92.50%（37/40）,阳性参考品符合率≥95.00%（19/20）,分析灵敏度≥3/5,线性范围分别为28216、27217、26216、26215、25212,批内精密度介于4.91%34.28%之间。结论试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、分析灵敏度、分析特异性较好,试剂BD的线性范围较宽,但饮食因素可能造成试剂D、E出现假反应性,试剂的批内精密度差别较大。     

定值核酸质控品用于血液核酸筛查分析灵敏度验证结果分析

目的:通过采用定值核酸质控品进行相应稀释形成低、中、高3种浓度规格的样本进行核酸混样检测,以验证核酸筛查系统分析灵敏度是否符合要求。方法:通过对购置的商品化定值核酸室内质控品进行适当稀释制备成相应核酸检测系统检测下限(LOD)0.5倍LOD、1倍LOD、4倍LOD 3种低、中、高浓度规格,进行和献血者检测模式相同的混样检测,统计3种规格下HBV-DNA、HCV-RNA、HIV 1-RNA阳性检出率,阳性结果 Ct值平均值、标准差、变异系数以评价验证选用核酸检测系统的分析灵敏度。结果:0.5LOD范围的样本HBVDNA、HCV-RNA、HIV 1-RNA阳性检出率分别达50%、100%、95%,1LOD和4LOD范围的样本HBV-DNA、HCV-RNA、HIV 1-RNA检出率均达到100%。阳性样本的Ct值统计变异系数均小于5%。结论:采用定值核酸质控品进行核酸筛查系统分析灵敏度验证结果是可行的,对保证血液核酸筛查的质量是有意义的。     

HBsAgELISA灰区、弱反应标本与FQ-PCR检测结果对比分析

目的:探讨乙肝表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测呈灰区、弱阳性样本采用荧光定量PCR(FQ-PCR)的复检情况。方法:选取2012-01-2014-12无偿献血者血液标本为研究对象,将献血者分为3组,A组:ELISA检测HBsAg阴性(S/CO0.3)标本200例;B组:ELISA检测HBsAg灰区(0.7≤S/CO1)标本792例;C组:ELISA检测HBsAg弱反应性(1≤S/CO3)标本417例。结果:B组FQ-PCR复检21例(2.65%)HBV-DNA浓度100IU/ml;C组FQ-PCR复检20例(4.80%)HBV-RNA浓度100IU/ml;ELISA双试剂灰区HBV-DNA FQ-PCR阳性率高于单试剂灰区,差异有统计学意义(P0.05);ELISA双试剂弱反应性HBV-DNA FQ-PCR阳性率与单试剂弱反应性比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:ELISA检测HBsAg为灰区、弱反应性标本存在一定的HBV-DNA阳性标本漏检和误诊,这部分血样采用FQ-PCR检测可提高输血安全,避免血源浪费。     

HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的方法学评价

目的构建艾滋病病毒(HIV)口腔黏膜渗出液(OMT)快速检测试剂(RDTs)评价盘,评价HIV OMT RDTs的质量。方法采集健康志愿者的口腔黏膜渗出液,用稀释液稀释HIV抗体阳性和阴性的血浆样本,分别构建实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室线性稀释系列盘和实验室精密度盘。用6家HIV OMT RDTs(编号:试剂A~F)分别检测构建的评价盘和HIV抗体口腔黏膜渗出液快速试剂的国家参考品,肉眼判读检测结果并测定GOD值。结果根据肉眼判读,试剂A~F的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%(39/41),分析灵敏度≥3/5;试剂D的批内精密度高于其他试剂,试剂F的线性范围为2~8~2~(14)。根据GOD值,试剂A~E的特异性,阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%(39/41),敏感性≥92.50%(37/40),阳性参考品符合率≥95.00%(19/20),分析灵敏度≥3/5,线性范围分别为2~8~2~(16)、2~7~2~(17)、2~6~2~(16)、2~6~2~(15)、2~5~2~(12),批内精密度介于4.91%~34.28%之间。结论试剂A~F的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、分析灵敏度、分析特异性较好,试剂B~D的线性范围较宽,但饮食因素可能造成试剂D、E出现假反应性,试剂的批内精密度差别较大。     

血液/口腔黏膜渗出液/尿液HIV抗体快速检测试剂的性能评价

目的构建血液、口腔黏膜渗出液(OMT)、尿液HIV抗体快速评价盘,评价3种血液,2种OMT和1种尿液HIV抗体快速检测试剂的性能。方法用血液、OMT、尿液国家参考品,实验室评价盘(包括实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室稀释系列盘、实验室精密度盘),商业阳转血清盘,对6种(3种血液,2种OMT和1种尿液)HIV抗体快速检测试剂进行评价,肉眼判读结果,并用金标免疫层析试纸读数仪测定相应的GOD值。结果 1)6种试剂的阴性参考品符合率均为20/20,HIV-1阳性参考品符合率均为18/18,3种血液和2种OMT试剂的HIV-2阳性参考品符合率均为2/2。2)3种血液试剂的阳性样本符合率和阴性样本符合率均为40/40,2种OMT试剂的阳性样本符合率均为40/40,阴性样本符合率分别为40/40和38/40。尿液试剂的阳性样本符合率和阴性样本符合率为30/30。3)3种血液试剂的分析灵敏度均为2/3,2种OMT试剂的分析灵敏度分别为3/5和0/5,尿液试剂的分析灵敏度为3/5。4)3种血液试剂的分析特异性均为45/45,2家OMT试剂的分析特异性分别为45/45和36/45,尿液试剂的分析特异性为45/45。5)GOD结果显示6家试剂的批内精密度在7.8%～44.0%之间。结论 6家试剂的阴性参考品符合率,阳性参考品符合率,阳性样本符合率、阴性样本符合率均较好。1家OMT试剂的分析灵敏度和分析特异性较差,6种试剂的批内精密度存在差异。     

四种国产乙型肝炎表面抗原定量检测试剂对弱阳性样本检测结果的一致性比较

目的 比较4种国产HBsAg定量检测试剂与ARCHITECT i2000免疫检测系统对HBsAg弱阳性样本检测结果的一致性及检测值之间的相关性.方法 采用4种国产发光法检测系统和i2000检测系统分别检测185例HBsAg弱阳性血清标本以及不同浓度HBsAg的标准品.应用描述性统计和相关分析计算不同试剂分析结果的精密度、一致性和相关性.结果 4种国产发光法检测系统对i2000检测系统定量为0.05～1.00 IU/ml的弱阳性结果判断的符合率分别为25.93%、35.19%、51.85%和18.52%;对定量为＞1.00～10.00IU/ml的弱阳性结果判断的符合率分别为71.76%、87.79%、95.42%和69.47%.4种国产试剂均检测阴性的标本为i2000检测值在0.05～0.80IU/ml的低值阳性标本;i2000检测结果≥7.93 IU/ml的样本,4种国产发光法检测系统符合率为100%.国产试剂检测结果之间的相关性分析结果显示,其相关系数为0.8629～0.9265.结论 国产检测系统的分析灵敏度略低于i2000检测系统,检测值≤0.80IU/ml的样本不能给出与i2000一致的检测结果;对于≥7.93 IU/ml的样本,国产试剂均可给出与i2000一致的结果.

Abstract：

Objective To evalue the coincidence and correlation between the four domestic quantity assay reagents and with ARCHITECTi2000 immunoassay system.Methods 185 weak-reactive serum samples and standard materials of different concentrations were tested by four domestic quantity assay reagents for HBsAg test and ARCHITECTi2000 immunoassay system.The coincidence,the precision and the correlations between different systems were analyzed.Results The coincidence rates of the results of 0.05-1.00 IU/ml samples between the four domestic quantity assay reagents and ARCHITECTi2000 immunoassay system were 25.93%,35.19%,51.85% and 18.52% respectively,and for those results of ＞ 1.00-10.00 IU/ml samples the coincidence rates were 71.76%,87.79%,95.42% and 69.47% respectively.The samples of 0.05-0.80 IU/ml weak-reactive serum samples detected by the i2000 system were all negative detected by the four domestic systems.The coincidence rates of＞7.93 IU/ml serum samples detected by i2000 system were 100%detected by the four domestic systems.The correlations of the four domestic quantity assays were around 0.8629-0.9265.Conclusions The analysis sensitivity of the four domestic quantity assay reagents were below the i2000 system.The results of under 0.80 IU/ml samples detected by i2000 system were disaccord with the results detected by the four domestic systems,whereas for the sapmples over 7.93 IU/ml the results were consistent.     

两种乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的检验重复性与一致性比较

目的评估罗氏与国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的检验重复性与一致性分析,为临床应用提供参考。方法采用原装进口罗氏与国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒检测滴度为60、170、1 700、17 000 IU/mL的WHO标准HBV DNA样本各20次,评估两种试剂的可溯源性和可重复性。再检测曾经或正在接受乙肝抗病毒治疗的患者9组(HBV DNA载量分别为50、50~200、~102、~103、~104、~105、~106、~107、~108IU/mL),每组20例,评估两种试剂的一致性。结果 WHO标准HBV DNA样本检测得到罗氏检测试剂ICC值为0.93(F=12.51,P0.0001),国产检测试剂为0.82(F=8.72,P0.0001),可得罗氏检测重复性优于国产组。通过两组临床血清检测的检测结果进行相关性分析结果得两者相关系数r=0.849,P0.0001,相关性良好。两组临床血清检测的Bland-Altman图,可见两种检测试剂结果差值90%的位点位于95%置信区间参考范围内,说明两种检验方法间一致性良好。结论罗氏乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的检测结果与国产试剂相比,一致性良好,但罗氏乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的重复性优于国产试剂,是乙肝患者抗病毒治疗过程中病毒载量监控的金标准。     

互联网上销售的HIV抗体快速检测试剂物理性能和灵敏度调查

目的了解互联网上销售艾滋病病毒(HIV)抗体快速检测试剂的现状,评价试剂的物理性能和分析灵敏度,分析用于自我检测时可能存在的问题。方法通过比较互联网上购买HIV抗体快速检测试剂的包装、预期用途、样本类型等,评价其物理性能;通过检测最低检出限样本,评价其分析灵敏度。结果 32种互联网上销售的HIV抗体快速检测试剂包装中9种有图片式说明材料(9/32),31种有样本采集装置(31/32)。说明书中2种的预期用途为无偿献血现场初筛(2/32),5种为自愿咨询检测(5/32),1种为消费者自检(1/32);25种结果解释中没有后续处理方法(25/32);13种互联网销售的HIV抗体血液快速检测剂没有指尖血采集步骤(13/18),1种只能检测血清和血浆(1/18)。29种互联网上销售HIV抗体快速检测试剂检测最低检出限样本均为反应性结果(29/29)。结论专业实验室使用的试剂用于自我检测时存在的问题:HIV血液抗体快速检测试剂没有配备采血针、没有指尖血采集步骤;没有图片式说明材料;结果解释中没有介绍后续处理方法等。     

磁珠吸附法定量检测乙型肝炎病毒的效能

目的建立磁珠吸附定量检测HBV DNA的方法,并评价该方法的检测效率。方法将病毒载量为10~7IU/mL的血清样本,倍比稀释成不同浓度的HBV DNA作为血清标准品(理论值),分别用磁珠吸附定量法(试剂1)、磁珠法(试剂2)、煮沸法(试剂3)3种方法提取HBV DNA,从灵敏度、定量线性关系方面比较本实验方法与国产磁珠法核酸自动提取法和传统煮沸法的提取效果,并对本实验方法进行稳定性验证。结果灵敏度:HBV DNA定量的检测下限理论值为10~1IU/mL,试剂1为3.520×10~1 IU/mL,试剂2为9.123×10~3 IU/mL,试剂3为6.195×10~1 IU/mL。相关性:试剂1、试剂2、试剂3提取HBV DNA定量与理论值相关性分析的r值分别为0.986、0.950、0.979(均P0.01)。稳定性:3种方法检测的相对偏差均值分别为0.243±0.405(试剂1)、1.189±0.855(试剂2)、-0.439±0.618(试剂3),试剂1对同一样本在不同时间检测结果的相对偏差均值为0.505±0.659。结论本实验所设计的血清HBV DNA提取方法灵敏,定量线性关系好,结果稳定准确,为定量检测HBV DNA奠定了基础。     

第4代HIV抗原抗体酶联检测试剂质量评估

目的:探讨第4代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体酶联检测试剂在血液筛查中的质量。方法:分别使用第3代酶联试剂和第4代试剂检测HIV1 0.5NCU/ml质控血清、卫生部HIV室间质评标本及72 693例无偿献血者标本的HIV标志物。结果:对质控血清的检测显示第4代试剂灵敏度大于第3代;对72 693例献血者标本HIV初筛检测,第3代试剂初筛阳性32例,阳性率0.044 0%,第4代试剂初筛阳性为53例,阳性率0.072 9%,显示2种试剂初筛阳性结果差异有统计学意义(χ2=5.18,P0.05),但2种试剂的敏感性均为100%。在特异性方面,第4代试剂(99.94%)略低于第3代试剂(99.97%)。结论:未开展核酸检测的采供血机构,使用第4代HIV抗原抗体酶联试剂用于血液的常规筛查,能有效降低HIV传播风险,保证血液安全。     

HBsAg和抗-HCV酶联免疫检测与血液病毒核酸筛查技术之间的相关性分析

目的探讨HBsAg和抗-HCV酶联免疫检测方法与血液病毒核酸筛查技术之间的相关性。方法对我院血液科2011年12月到2013年12月血样标本12 300个,首先进行HBsAg和抗-HCV ELISA检测,再利用中和试验和重组免疫印迹试验(RIBA)进行确认检测,并对确认检测阳性和阴性样本行血液病毒核酸筛查,分析ELISA检测与血液病毒核酸筛查之间的相关性。结果经过HBsAg ELISA国产试剂和进口试剂检测血样标本12 300个,221个为阳性,占1.80%,国产和进口试剂检测一致率为99.72%,经过配对卡方检验,两种试剂间差异无统计学意义(P0.05);抗-HCV ELISA检测阳性112个,占0.91%,国产和进口试剂检测一致率为99.60%,两种试剂间差异无统计学意义(P0.05);HBsAg经过再次确认检测其中阳性201个,阴性20个,再次确认检测与国产和进口试剂检测一致率为90.95%;抗-HCV再次确认检测其中阳性55个、阴性43个、可疑14个,再次确认检测与国产和进口试剂检测一致率为61.61%;经过核酸检测技术(NAT)检测HBV DNA阳性和阴性分别为203个、18个,HCV RNA阳性和阴性分别为70个、42个。将两种因素合并计算,ELISA检测联合再次确认检测灵敏度为97.44%、特异度93.33%。结论 HBsAg和抗-HCV ELISA检测具有较高的灵敏度和特异度,但是由于使用ELISA试剂盒不同,常存在误检,而血液病毒核酸筛查技术可以减少这种误检,再次提高检出率。     

应用全自动核酸检测系统MPLC-COBAS筛查献血员HIV-1 RNA

目的建立一套全自动核酸检测系统筛检献血员艾滋病病毒1型(HIV-1)核糖核酸(RNA)。方法应用MagNAPureLC(MPLC)系统提取核酸,COBASAmplicor系统进行基因扩增与检测,再应用国际标准品和临床标本验证MPLC-COBAS系统。结果该系统的检测灵敏度(95%CI)HIV1RNA病毒为45～67IU/ml,5124份标本混样检测结果为阴性,81份HIV抗体(抗HIV)酶联免疫吸附试验(ELISA)假阳性混样检测结果及6份追踪样本核酸检测结果均为阴性。结论该系统具有全自动检测、灵敏度高、特异性好的特点,可进一步扩大临床标本检测量,探索出切实有效的核酸检测系统进行献血员筛查HIV1RNA。     

不同HCV抗体检测试剂效果的比较

目的对不同种类的实验室HCV抗体检测试剂进行比较。方法选取天门市第一人民医院采用国内实验室常用的HCV抗体筛查试剂(科华﹑新创﹑万泰和雅培)检测呈阳性的205份样本作为研究对象,进行HCV RNA核酸扩增检测(NAT),若NAT检测为阴性,再进行重组免疫印迹实验(RIBA)进一步确认。对4种筛查试剂的检测结果进行比较,并对其S/CO值和真阳性率进行分析。结果任一筛查试剂检测结果呈阳性反应的205份样本中,4种筛查试剂均为阳性的有191份(93.2%),4种筛查试剂结果不一致的有14份(6.8%)。新创、科华、万泰及雅培试剂的阳性预测值分别为88.2%(180/204)、93.8%(180/192)、91.4%(180/197)及90.0%(180/200)。筛查试剂阳性预测值≥95%的S/CO阈值分别为:新创9.0、科华4.0、万泰5.0及雅培7.0。结论科华、新创、万泰和雅培4种筛查试剂阳性预测值≥95%的S/CO阈值之间相差较大,与国内其他实验室比较相差也较大。当前各实验室应建立适用于自身的阳性预测值≥95%的S/CO阈值,以减少确证试验样本数量。