端粒酶活性和VEGF在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 :探讨端粒酶活性、血管内皮生长因子 (VEGF)在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法 :对 70例NSCLC肺癌组织采用端粒末端重复序列扩增 -酶联免疫试验法检测端粒酶活性和免疫组化法检测VEGF的表达 ,比较二者的表达与生存率的关系。结果 :端粒酶和VEGF在NSCLC中的阳性表达率分别为 74 .3%和 70 .0 % ;二者呈正相关 (P =0 .0 32 ,r=0 .2 5 7) ;端粒酶、VEGF表达阳性者生存时间明显低于阴性表达者 (P <0 .0 5 )。结论 :端粒酶与VEGF在NSCLC组织中的表达呈正相关 ;二者联合检测对患者化疗疗效、预后的判断具有指导作用     

端粒酶活性及p53蛋白在肺癌47例中的表达及其与预后的关系

目的:探讨支气管肺癌中端粒酶活性和p53蛋白表达的意义及其与预后的关系。方法:采用PCR检测端粒酶活性,免疫组化SABC检测p53蛋白表达。并观察其5年的生存期。结果:肺癌组织中端粒酶活性与p53蛋白表达分别为80.9%和59.6%,而正常组织无表达。端粒酶活性、p53蛋白表达均与肺癌临床分期、病理类型、淋巴结转移无显著性相关。肺癌p53蛋白表达与无p53蛋白表达的5年生存率比较无显著性差异,端粒酶活性表达与无端粒酶活性表达的5年生存率比较有显著性差异,有端粒酶活性表达的患者,其生存率较低。结论:端粒酶活性和p53蛋白表达与肺癌发生有关,两者均可作为肺癌早期肿瘤标志物;p53蛋白与肺癌临床预后无明显相关,有端粒酶活性表达肺癌患者预后较差。     

Bcl-2,p53表达及端粒酶活性三者在非小细胞肺癌发生中的相关性

目的 :研究Bcl 2 ,p5 3及端粒酶异常在非小细胞肺癌 (nonsmallcelllungcancer,NSCLC)中的表达及相互关系并探讨其与NSCLC临床病理特征的关系 .方法 :用改良的端粒重复扩增法 (telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP) .方法 :(TRAP PCR ELISA)检测NSCLC组织端粒酶表达 ,用免疫组织化学法检测NSCLC组织Bcl 2和 p5 3蛋白表达 .结果 :在 6 2例NSCLC中 ,Bcl 2及p5 3蛋白阳性表达率分别为4 5 .2 %和 5 3.2 % .无淋巴结转移者Bcl 2表达明显高于有淋巴结转移者 (5 9.4 %vs2 4 .0 % ,P <0 .0 5 ) ;Ⅱ +Ⅲ期Bcl 2表达阳性率为 2 0 % ,明显低于Ⅰ期 (P <0 .0 5 ) .p5 3表达与肿瘤的类型、大小及 pTNM分期显著相关 (P <0 .0 5 ) .Bcl 2与p5 3表达活性无明显相关性 (P >0 .0 5 ) .端粒酶活性阳性率为 89.6 % ,端粒酶活性与肿瘤大小 (P <0 .0 1 ) ;淋巴结有无转移 (P <0 .0 5 )显著相关 .不同pTNM分期端粒酶活性阳性率差异有显著性 (P <0 .0 5 ) .端粒酶活性与Bcl 2表达无相关性(P >0 .0 5 ) ,而端粒酶活性与p5 3蛋白表达有显著相关性 ,在p5 3阳性组织中端粒酶活性较高 (P <0 .0 1 ) .结论 :p5 3,Bcl 2及端粒酶异常参与了NSCLC的发生、发展 ,其表达变化的综合分析对临床早期诊断及判断预后有重要意义     

端粒酶活性检测应用于诊断肺癌的研究进展

肺癌是人类最常见恶性肿瘤 ,发病率和死亡率在许多国家和地区均居首位 ,主要原因为尚缺乏有效的早期诊断手段 ,大多数患者发现时己属中晚期。近年来的研究表明 ,端粒酶活性与肿瘤密切相关 ,80 %以上的肺癌可检测到端粒酶活性[1 ,2 ] ,故认为端粒酶在肺癌组织的表达有很高的敏感性和特异性 ,检测患者的端粒酶活性可有效地提高肺癌的诊断率 ,且对患者的预后判断也有重要临床价值。1.端粒酶的结构与功能1.1　粒酶的结构人端粒酶是由蛋白质与核糖核酸(RNA)构成的一种复合物 ,主要包括三个亚单位 :①人端粒酶RNA(hTR) ;②人端粒酶相关蛋白 (h…     

脂质体介导端粒酶反义RNA对人乳腺癌细胞MCF-7活性及增殖的影响

目的:探讨经脂质体介导转染端粒酶反义RNA对MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法:用脂质体介导法将pBBS212-hTR(反义端粒酶RNA真核表达载体)导入人乳腺癌细胞MCF-7中,采用TRAP-PCR-ELISA法测定端粒酶活性,四唑盐比色(MTT)法检测MCF-7细胞的增殖,FCM分析等方法观察其对MCF-7细胞的增殖影响。结果:端粒酶反义RNA能显著抑制MCF-7细胞的端粒酶活性,抑制MCF-7细胞的增殖并诱导其凋亡。结论:脂质体转染反义端粒酶RNA在封闭细胞端粒酶活性表达的同时,可促进MCF-7细胞凋亡。     

肺癌组织端粒酶活性测定

①目的　探讨端粒酶作为肺癌诊断标记物的可行性及临床意义。②方法　用TRAP法检测 2 9例肺癌组织、2 7例癌旁组织和 35例正常组织标本中端粒酶活性表达。③结果　 2 9例肺癌组织中 2 1例 (72 .4 % )端粒酶活性表达阳性 ,2 7例癌旁组织中 6例 (2 2 .2 % )端粒酶活性表达阳性 ,35例正常组织均不表达端粒酶活性。癌组织、癌旁组织与正常组织标本端粒酶活性比较有显著差异 (χ2 =34.0 13、3.937,P <0 .0 1、0 .0 5 )。④结论　端粒酶表达与肿瘤发生有关 ,其癌旁组织中端粒酶活性有可能成为判定肿瘤复发和预后的指标。     

肺癌组织端粒酶阳性表达的临床意义

目的　探讨肺癌组织细胞端粒酶活性表达在肿瘤恶性度评估 ,预测预后的临床意义。方法　用银染 -TRAP法检测 31例肺癌组织切除标本的端粒酶活性 ,分为端粒酶阳性与端粒酶阴性两组 ,通过病理检查、细胞周期DNA倍体分析、PTNM分期 ,对端粒酶阳性与端粒酶阴性两组结果进行分析对比。结果　 31例肺癌组织切除标本中 ,有 1 1例端粒酶活性表达阳性 ,其阳性率为 35 % (1 1 / 31 )。 1 1例端粒酶活性表达阳性病例在病理分型、细胞周期DNA倍体分析、PTNM分期指标中均显示较高恶性度 ,提示预后不良。但各组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　肺癌组织细胞端粒酶活性表达是提示肿瘤恶性度高、预后不良的一个有价值的综合性指标。值得临床作进一步观察研究     

端粒酶反义寡核苷酸对膀胱癌端粒酶活性及细胞增殖的影响

目的 :探讨端粒酶反义核苷酸对膀胱癌的治疗作用。方法 :以端粒酶 RNA模板区为靶点 ,不同剂量的序列为 TAGGGTTAGACAA的硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸 ( PS- ASON)作为实验组 ( A、B、C) ,以硫代磷酸修饰 1 3个核苷酸的随机引物作为对照组 ( D) ,仅加入培养基作为空白对照组 ( E) ,与人膀胱癌细胞株 BIU87细胞共同孵育 ,TRAP- ELISA方法检测端粒酶活性变化 ,计数1～ 30 d细胞数 ,计算细胞倍增时间 ,MTT法测定 ASON对细胞的抑制率。结果 :2 5例膀胱癌组织中 ,2 4例 ( 96% )表达端粒酶活性 ,4例癌旁组织无端粒酶活性表达。与随机引物及空白对照组比较 ,实验组的 ASON能明显降低端粒酶活性 ,减少细胞增殖数目 ,增加抑制率及延长倍增时间 ,并显示剂量的依赖性 ( P<0 .0 1 )。结论 :以端粒酶 RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸引起膀胱癌 BIU87细胞端粒酶活性下降 ,增殖抑制 ,引起细胞退化 ,对膀胱癌的治疗有潜在的意义。     

甲状腺癌端粒酶活性检测及其临床应用

目的 :研究甲状腺癌组织端粒酶活性检测的临床应用价值 ,探讨其作为甲状腺癌诊断和预后评价指标的可行性。方法 :用原位杂交法检测了 2 0例甲状腺乳头状癌、2 0例甲状腺滤泡状癌、2 0例相应癌旁甲状腺组织及 9例甲状腺腺瘤组织端粒酶逆转录酶(TERT)亚基的 m RNA。结果 :40例甲状腺癌组织端粒酶水平明显高于甲状腺腺瘤组织及癌旁组织。 2 0例甲状腺乳头状癌阳性检出率为 90 %,2 0例甲状腺滤泡状癌阳性检出率为85 %,2 0例癌旁组织端粒酶均为阴性 ,9例甲状腺腺瘤阳性检出率为 1 1 .1 %。端粒酶活性与甲状腺的类型、分化程度及分期无关。结论 :端粒酶可以成为一种用于甲状腺癌辅助诊断、预后判断的重要标志 ,物并且在甲状腺癌的基因治疗中发挥作用。     

凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达与不同临床病理特征的关系及二者在肺癌发生过程中可能存在的相关性。方法:采用免疫组化法的链霉菌抗生物素过氧化酶(S-P)法检测80例NSCLC组织和20例正常肺组织中Survivin、bcl-2蛋白表达情况。结果:非小细胞肺癌组织中Survivin、bcl-2蛋白阳性表达率分别为61.3%、50%,而在肺良性病变组织中阳性表达率分别为0%、10%,两者在两组中的表达均有显著性差异(P<0.05);Survivin蛋白在～期肺癌组织中阳性表达率72.0%显著高于I～II期肺癌组织的43.3%(P<0.05),bcl-2蛋白在鳞癌组的阳性表达率62.2%高于腺癌组的34.3%(P<0.05);Survivin、bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达呈正相关关系。结论:Survivin蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关,Survivin、bcl-2可以作为判断病情和评价预后的指标。     

S100A_4、MMP_9和TIMP_1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:观察S100A4、MMP9和TIMP1在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨其与NSCLC的发生、发展、浸润转移的关系。方法:采用免疫组织化学的方法,检测了41例非小细胞肺癌及6例正常肺组织切片中S100A4、MMP9和TIMP1蛋白的表达情况,对NSCLC发生、发展及浸润转移的关系进行分析。结果:在41例NSCLC中、S100A4、MMP9和TIMP1蛋白的阳性表达率分别为70.7%、65.9%和85.4%,与正常肺组织比较有显著性差异(P<0.05)。S100A4的阳性表达率在组织类型,肿瘤大小,淋巴结转移,TNM分期有显著性差异;MMP9的阳性表达率在组织类型,淋巴结转移,病理分级,TNM分期有显著性差异;TIMP1的阳性表达率在腺癌组为100%,在鳞癌组为71.4%,经统计学分析有显著性差异(P<0.05)。S100A4表达与MMP9表达在NSCLC中呈正相关,相关分析有显著性差异(r=0.363,r=0.004)。结论:S100A4蛋白作用于NSCLC发展晚期阶段,与NSCLC的发展、浸润和转移密切相关。MMP9与NSCLC的恶性程度和浸润转移密切相关。腺癌中S100A4、MMP9及TIMP1蛋白阳性表达率均明显高于鳞癌,提示腺癌较鳞癌恶性程度高,易于转移。S100A4与MMP9蛋白在NSCLC中的表达呈正相关,联合检测S100A4和MMP9可为临床评估NSCLC恶性程度提供客观依据,及早发现NSCLC的浸润和转移。     

端粒酶在膀胱肿瘤中活性表达及临床意义

目的:探讨端粒酶在膀胱癌中活性表达及其与膀胱肿瘤临床生物学行为的关系。方法:利用TRAP银染法对32例膀胱癌组织和10例正常膀胱粘膜端粒酶活性进行检测,并结合临床资料分析。结果:32例膀胱肿瘤中有26例表达阳性(81.25%),而10例正常膀胱组织均无端粒酶表达。差异有显著性(χ2=18.018,P<0.05)。G 1级肿瘤阳性结果为7/11,G 2级为12/13,G 3级为7/8;T a~T 1期阳性者为15/20,T 2~T 4期为11/12,统计学分析证实与分期分级不相关。结论端粒酶活性表达与膀胱肿瘤的发生有关,是一个重要的肿瘤标记物。     

非小细胞肺癌端粒酶活性的相对定量检测

OBJECTIVE: To investigate the telomerase activity in human non-small-cell lung cancer (NSCLC) and to investigate the possibility of telomerase as a tumor biological marker. METHODS: The semi-quantitative assay and expression of PCR-based telomeric repeats amplification Protocol ELISA (TRAP-PCR-ELISA) and PAGE (TRAP-PCR-PAGE) were detected in 15 NSCLC tissues and 15 tumor-adjacent tissues, 3 normal lung tissues. RESULTS: No telomerase activity in 15 tumor-adjacent tissues and 3 normal lung tissues was detected, However, of 15 NSCLC tissues, 13 were positive for telomerase activity with a 86.7% positive rate, telomerase activity was significantly higher in NSCLC than in Tumor-adjacent tissues and normal lung tissues (P < 0.001). CONCLUSION: The results suggest that telomerase is a tumor specific gene marker.     

端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌中表达的研究

目的研究端粒酶和erbB4基因在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与肺癌临床、病理的关系。方法应用TRAP法测定56例肺癌组织标本中端粒酶的表达。同时应用免疫组化法检测56例肺癌石蜡组织中erbB4的表达。记录56例肺癌患者5年生存情况。结果NSCLC组织中端粒酶和erbB4阳性表达率分别为75%（42/56）及89.3%（50/56）。端粒酶、erbB4表达与不表达在临床分期组间的差异有统计学意义（P=0.004、0.005）,端粒酶表达与不表达患者5年生存率差异有统计学意义（P=0.0005）。结论检测端粒酶及erbB4表达有助于判断NSCLC临床特点及预后。     

应用PCR技术检测肺癌中端粒酶活性

目的：探讨肺癌组织端粒酶（ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ）活性的表达，进一步从分子生物学水平认识端粒酶与肺癌发生的关系，并为应用端粒酶抑制剂控制肺癌提供一定的理论根据。方法：应用ＰＣＲ技术对３５名肺癌患者行端粒酶活化表达检测。结果：肺癌组织３０例（８６％）表达阳性，癌旁组织６例（１７％）表达阳性（Ｐ＜０．００５），Ⅰ、Ⅱ期肺癌２５例（９３％）表达阳性，Ⅲ、Ⅳ期肺癌５例（６３％）表达阳性，两者间无差异。结论：端粒酶活化与肺癌发生过程有关，为今后寻找一条通过抑制端粒酶活性来控制肺癌的发生、进展及治疗提供一定的理论依据。     

Expression of telomerase activity， telomerase RNA component and telomerase catalytic subunit gene in lung cancer

目的：探讨hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关,深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法：采用TRAP-PCR和RT-PCR方法分别检测68例肺癌组织、68例癌旁组织端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERT的表达。结果：68例肺癌组织中端粒酶阳性率79%,HTR阳性率为98.5％,HTERT阳性率为91.2%。68例癌旁组织中,无一例表达端粒酶阳性,且大多数癌旁组织均表达HTR(91.2%),而HTERT在68例癌旁组织中仅7例为阳性。结论：肺癌组织中表达高频率的端粒酶活性而癌旁组织无一例表达端粒酶阳性说明了端粒酶的活性是肺癌发生发展所必须的。与HTR相比,HTERT同端粒酶具有更市制一致性,其一致率为88.9％。HTR与HTERT可能是在转录后或翻译水平对端粒酶进行调控的。     

非小细胞肺癌中MMP-9、TIMP-1的表达与临床病理关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理学特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测41例NSCLC标本及19例癌旁组织中MMP-9、TIMP-1的表达水平,并探讨其与NSCLC的临床病理学特征之间的关系。结果:41例NSCLC中,MMP-9和TIMP-1的阳性表达率分别为65.9%和58.5%,MMP-9和TIMP-1的高表达与淋巴结转移、病理类型显著相关(P<0.05)。结论:MMP-9、TIMP-1与NSCLC侵袭转移密切相关。     

肺癌组织中hTERT和P16基因的表达

目的 :研究端粒酶逆转录酶 (hTERT)和P16基因在肺癌组织中的表达 ,探讨肺癌发生过程中端粒酶激活的分子机制。方法 :应用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和端粒重复序列扩增法 (TRAP)分别对 4 7例肺癌及相应癌旁肺组织中hTERTmRNA与端粒酶活性进行检测 ,采用免疫组化SP法测定上述组织标本中P16蛋白表达。结果 :hTERTmRNA与端粒酶活性在肺癌组织中阳性表达率分别为 78.7%和 72 .3% ,均明显高于相应癌旁肺组织 (P <0 .0 1)。肺癌中hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈明显正相关 (r=0 .70 2 ,P <0 .0 1)。P16蛋白在肺癌中阳性表达率为 2 9.8% ,显著低于癌旁肺组织 (93.6 % ,P <0 .0 1)。P16蛋白表达与hTERTmRNA表达及端粒酶活性均呈显著负相关 (r分别为 - 0 .74 5 ,- 0 .70 2 ,P均 <0 .0 1)。结论 :hTERTmRNA表达上调和P16蛋白表达缺失与肺癌的发生密切相关 ,并可能在肺癌端粒酶活性调节中发挥重要作用。