阻断交感神经对小鼠胚胎植入和子宫局部免疫的影响

目的探究交感神经对小鼠妊娠早期胚胎发育作用的机制。方法利用组织学、免疫组织化学和酶联免疫吸附（ELISA）方法观察化学阻断剂6．羟多巴胺（6．OHDA）损毁交感神经对小鼠妊娠早期子宫局部免疫水平和早期胚胎发育的影响。结果化学损毁交感神经后，小鼠受孕率下降，胚胎植入数减少约64．4％；妊娠鼠子宫内膜固有层不发达，微血管分布少；子宫CD4^＋T细胞略有增多，而CD8^＋T细胞明显增加，特别在E3和E5，与对照组比较差异极显著（P〈0．01）；细胞因子IL-2含量升高，尤其E5升高最明显，达3．6倍，而IL-4含量仅在E5有明显升高，1L-2，1L-4比值显著升高。结论交感神经对孕小鼠子宫内膜组织学结构和子宫CD4^＋／CD8^＋T细胞与Th1／Th2细胞比值的影响可能是调控胚胎植入和早期发育的机制之一。     

小鼠胚胎与子宫内膜中整合素α_5的表达

目的:观察整合素α5在小鼠早期胚胎和子宫内膜中的表达分布状况,探讨整合素在胚胎着床中的可能作用。方法:用免疫组织化学ABC法染色,对发育不同时期的小鼠胚卵和妊娠2 d～6 d、8 d、13 d以及非妊娠期的子宫内膜中整合素α5的表达分布进行形态学观察与半定量分析。结果:整合素α5的阳性反应物质在小鼠早期胚卵胞浆内;非妊娠期子宫内膜和妊娠期的脱膜上皮与基质细胞内均有整合素α5表达,植入前表达相对较弱,植入后随妊娠的进展逐渐增强。结论:提示整合素α5在小鼠胚卵着床中起重要作用:推测它不参与胚卵对母体子宫内膜的识别和粘附,而是参与了粘附后的侵入及胚胎发育过程。     

妊娠早期小鼠卵巢、输卵管及子宫内诱导型一氧化氮合酶的分布

目的　了解胚泡着床前后妊娠昆明系小鼠卵巢、输卵管及子宫内诱导型一氧化氮合酶 (inducible ni-tric oxide synthase,i NOS)的分布。　方法　免疫细胞化学 L SAB法。　结果　妊娠 2～ 5 d小鼠的卵巢内 ,黄体细胞上有 i NOS的阳性表达 ;输卵管粘膜上有 i NOS的分布 ,肌层则为阴性 ;妊娠 2、3d的小鼠子宫内 ,阳性标记主要出现在子宫内膜上皮以及子宫内膜中的子宫腺上皮 ,内膜基质细胞为阴性 ;妊娠 4d的子宫内 ,子宫腺及蜕膜部分均有 i-NOS的分布 ,妊娠 5 d时 ,在小鼠胚泡的表面也检测到了 i NOS的存在。　结论　小鼠胚泡着床前后 ,在其卵巢、输卵管及子宫内均有 i NOS的存在 ,提示 i NOS在小鼠胚胎早期发育及着床过程中起作用。     

小鼠胚胎与子宫内膜中整合素α5的表达

目的：观察整合素α5在小鼠早期胚胎和子宫内膜中的表达分布状况，探讨整合素在胚胎着床中的可能作用。方法：用免疫组织化学ABC法染色，对发育不同时期的小鼠胚卵和妊娠2d-6d、8d、13d以及非妊娠期的子宫内膜中整合素内的表达分布进行形态学观察与半定量分析。结果：整合素α5的阳性反应物质在小鼠早期胚卵胞浆内；非妊娠期子宫内膜和妊娠期的脱膜上皮与基质细胞内均有整合素α5表达，植入前表达相对较弱，植入后随妊娠的进展逐渐增强。结论：提示整合素α5在小鼠胚卵着床中起重要作用：推测它不参与胚卵对母体子宫内膜的识别和粘附，而是参与了粘附后的侵入及胚胎发育过程。     

妊娠早期小鼠卵巢,输卵管及子宫内诱导型一氧化氮合酶的分析

目的 了解胚泡着床前后妊娠昆明系小鼠卵巢、输卵管及子宫内诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ｉＮＯＳ）的分布。方法 免疫细胞化学ＬＳＡＢ法。结果 妊娠２～５ｄ小鼠的卵巢内,黄体细胞上有ｉＮＯＳ的阳性表达;输卵管粘膜上有ｉＮＯＳ的分布,肌层则为阴性;妊娠２、３ｄ的小鼠子宫内,阳性标记主要出现在子宫内膜上皮以及子宫内膜中的了宫腺上皮,内膜基质细胞为阴性;妊娠４ｄ的子宫内,子宫腺及蜕膜部分均有ｉＮＯＳ的分布,妊娠５ｄ时,在小鼠胚泡的表面也检测到了ｉＮＯＳ的存在。结论 小鼠胚泡着床前后,在其卵巢、输卵管及子宫内均有ｉＮＯＳ的存在,提示ｉＮＯＳ在小鼠胚胎早期发育及着床过程中起作用。     

T淋巴细胞侵袭转移诱导蛋白1在小鼠子宫内膜基质细胞-胚泡共培养体系中对胚泡黏附的影响

目的:检测不同浓度T淋巴细胞侵袭转移诱导蛋白1 (Tiaml)抗体下,小鼠着床窗子宫内膜基质细胞内的Tiaml蛋白表达及其对基质细胞-胚泡共培养体系中胚泡黏附的影响,探讨Tiaml对小鼠胚胎着床的影响.方法:提取着床窗小鼠子宫内膜基质细胞并构建基质细胞-胚泡共培养体系;分别用免疫细胞化学和免疫印迹法检测不同浓度抗Tiaml抗体时着床窗基质细胞Tiaml蛋白的表达及其对胚泡黏附的影响.结果:抗体干预后着床窗基质细胞内的Tiaml蛋白表达水平降低;在不同抗体浓度下胚泡黏附率有差异.结论:随Tiaml抗体浓度增加,着床窗小鼠子宫内膜基质细胞Tiaml蛋白表达量及胚泡黏附率降低.表明Tiarnl可能在胚泡植入过程起重要的作用.     

妊娠早期小鼠子宫巨噬细胞分布和活性的变化

目的:通过研究妊娠早期子宫CD14+巨噬细胞数量、分布及酸性磷酸酶(ACP)活性变化,探讨巨噬细胞与母胎免疫耐受的关系.方法:用免疫组织化学方法和酶细胞化学研究小鼠妊娠早期子宫CD14+巨噬细胞及ACP的变化.结果:对照组CD14+巨噬细胞主要分布在子宫内膜.小鼠妊娠后内膜中数目减少,第3日最少;肌膜和外膜巨噬细胞增加,第2日达到高峰.CD14免疫反应阳性面积变化趋势与此类似.第3～5日期间ACP的活性下降并维持在较低的水平.结论:巨噬细胞在着床期抗原识别和处理能力受到了抑制,参与了妊娠早期母胎免疫耐受的形成.     

孕酮拮抗物RU486对妊娠小鼠子宫巨噬细胞的影响及与妊娠相关性的研究

目的　研究孕酮拮抗物RU4 86对妊娠小鼠子宫巨噬细胞的影响及与妊娠的相关性。　方法　取孕4、10d的小鼠 ,皮下注射RU4 86 (每只 15 0mg L) ,对照组以等量生理盐水代替。在注射后 12、2 4、36h密切观察妊娠结果 ,并用免疫组织化学方法检测子宫内的巨噬细胞。　结果　孕 4d ,注射RU4 86可以完全阻止胚泡的着床 ,且注射后 12～ 36h有大量的巨噬细胞涌入子宫内膜、肌层和肌间血管层 ,细胞数量极显著地高于对照组 (P <0 0 0 1)。孕 10d ,RU4 86处理可以导致大多数胚胎吸收 ,并在处理后 4～ 36h子宫巨噬细胞的数量和分布发生急剧的变化 ,尤其是 12～ 36h细胞数量极显著地高于对照组 (P <0 0 0 1)。　结论　RU4 86诱导小鼠妊娠早期的着床失败和妊娠中期的胚胎吸收与大量巨噬细胞侵入子宫有密切的关系 ,拮抗孕酮的免疫抑制功能可能是RU4 86的抗孕机制之一     

CD57+自然杀伤细胞在妊娠早期小鼠子宫壁内的分布

目的　探索ＣＤ５７＋ 自然杀伤细胞（ＮＫ细胞,ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓ）在小鼠妊娠早期子宫壁内的意义。方法　用小鼠抗人ＮＫ细胞ＣＤ５７单克隆抗体,对未经产小鼠妊娠早期子宫壁内ＮＫ细胞进行免疫组织化学标记。结果　孕０ｄ,小鼠子宫壁内见少量ＣＤ５７＋ 细胞,孕２ｄ 时ＮＫ细胞数量剧增,孕４ｄ 时稍下降。孕６ｄ、孕８ｄ 时数量更少（低于０ｄ 值）。孕６ｄ 和８ｄ 均出现妊娠失败个体,其子宫壁内ＮＫ细胞很多,显著高于正常妊娠６ｄ 和８ｄ 小鼠的数量（Ｐ＜ ０．０１）。从分布区域看,胚胎着床（４．５ｄ）前,ＮＫ细胞多位于子宫肌层,胚胎着床后仅存在于着床点以外的子宫内膜和肌层。在妊娠失败个体,ＮＫ细胞广泛存在于子宫内膜和肌层中。　结论　小鼠交配后子宫ＮＫ细胞增多与子宫炎性反应有关。着床期以后子宫ＮＫ 细胞增多与妊娠失败有一定的相关性。     

精子膜抗原SA—30诱导的妊娠小鼠子宫免疫反应

目的 检测SA－30抗原免疫后妊娠小鼠子宫内免疫细胞的变化,以了解SA－30免疫对早期胚胎发育的影响。方法 利用免疫组织化学LSAB法,对SA－30免疫后的小鼠子宫内CD4^＋、CD8^＋及CD57^＋阳性细胞进行了检测。结果 妊娠第3d时,和对照组小鼠相比,SA－30免疫后的小鼠子宫内CD4^＋、CD8^＋及CD57^＋细胞均明显增多,阳性细胞在子宫肌层和内膜都有分布,而对照组小鼠子宫内的阳性细胞只限局于肌层,内膜中没有。结论 SA－30免疫可以诱导妊娠第3d小鼠子宫内的细胞免疫反应,从而可能对早期胚胎产生细胞毒性作用。     

Cells bearing granulocyte-macrophage and T lymphocyte antigens in the rat uterus before and during ovum implantation.

There is little detailed information on the distribution of granulocytes-macrophages and lymphocytes at the pre- and peri-implantation period of the embryo in the uterus. Using two monoclonal antibodies (MAS-099C and MRC-OX41) we found that cells labelled with antibodies specific to either T lymphocytes and thymocytes or granulocytes-macrophages were present in the endometrium and myometrium before ovum implantation. Both types of labelled cells appeared to migrate from the uterine lumen to the deep endometrium, where their number peaked on day 4. At the early implantation period (days 5 to 7), there was a total lack of labelled cells around the conceptus. Specific changes before ovum implantation in the distribution or activation state of T lymphocytes and granulocyte macrophages may favour early embryo acceptance.     

RhoA在小鼠胚胎围着床期子宫内膜的表达及其意义

目的探讨RhoA在小鼠胚胎植入过程中的表达及其生物学作用。方法取胚胎围种植期（D0至D6天）昆明小鼠子宫作切片，用免疫组织化学方法和图像分析方法对RhoA在子宫内膜中的表达进行定位和半定量分析。结果RhoA主要分布于小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮和基质细胞。受精后，RhoA在子宫内膜的含量高于未孕组（P＜0．05）；受精后第4d（植入期），小鼠子宫内膜腔上皮中RhoA的含量明显增多，明显高于未孕及植入前各时间组（P＜0．05），并逐渐向基质细胞延伸，第5d广泛分布在蜕膜细胞和基质细胞，到第6天大部分子宫内膜基质区域及腺上皮的细胞中有大量的RhoA分布。RhoA在小鼠子宫内膜组织中的表达强度在受精后呈逐渐上升趋势。结论①RhoA可能参与了胚胎的种植和子宫内膜容受性的建立；②还可能间接参与植入后胚胎的滋养层扩展、分化及子宫内膜蜕膜化反应。     

Lymphocyte Subsets in the Endometrium of Patients With Endometriosis Throughout the Menstrual Cycle

PROBLEM: Comparison and characterisation of different lymphocyte subsets in the endometrium of endometriosis patients and in healthy women on every day of the menstrual cycle with special emphasis on the CD4:CD8 ratio in the endometrium. METHOD: Immunohistochemical staining of 253 endometrial biopsies of infertile women with and without endometriosis with Anti-Leu4 (CD3), Anti-Leu3a (CD4), Anti-Leu2a (CD8), Anti-Leu7 and Anti-Human-B-cell (CD22) using the immune peroxidase reaction. Identification and counting of positive lymphocytes were performed on cryostat sections. RESULTS: Endometrial lymphocyte subsets show equal quantity and distribution in endometriosis patients and in the control group. After a peak in the early proliferative phase the absolute number of T lymphocytes decreases while a predominance of T-suppressor/cytotoxic T lymphocytes (CD8) compared to T-helper/inducer lymphocytes (CD4) occurs towards the end of the menstrual cycle. CONCLUSION: Endometrium as the potential parent epithelia of endometriosis lesions seems not to be altered in its lymphatic cell content compared to healthy women. Furthermore, endometrium is clearly characterised as part of the mucosa associated lymphatic tissue (MALT). T lymphocytes show specific quantitative changes due to different phases of the menstrual cycle.     

E-选择素在胚胎着床过程中小鼠子宫内膜的表达规律

目的：研究E-selectin在胚胎着床及早期分化中的作用。方法：用RT—PCR、Immunoblot、Western blot法检测小鼠胚胎着床前后蜕膜组织E-selectin的表达。结果：E-选择素在孕4天的小鼠子宫内膜中的表达出现升高，第5天达到峰值，随后妊娠第6、第7天E-selectin蛋白的表达则逐渐下降至正常水平。结论：提示E-选择素可能参与了胚胎着床过程。     

溶血磷脂酸受体3在小鼠胚胎围着床期子宫内膜的表达及意义

目的 探讨溶血磷脂酸受体3(LPA-R3)nRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中表达的动态变化. 方法 将78只雌性昆明小鼠随机分为真孕组(36只)、假孕组(36只)和对照组(6只),应用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting以及免疫组织化学SP法,检测胚胎围着床期(0～6d)LPA-R3 mRNA和蛋白在小鼠子宫内膜的表达和定位. 结果 LPA-R3主要分布于小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和部分基质细胞的胞质.LPA-R3 mRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中,3d时开始上升,4d时达峰值.5d、6d骤然下降至基础水平.假孕组子宫内膜LPA-R3mRNA和蛋白表达水平及变化规律与相应同期真孕组一致. 绪论 LPA-R3可能参与了胚胎的着床和子宫内膜容受性的建立过程.     

交感神经对小鼠小肠T淋巴细胞亚型及其增殖的影响

采用化学阻断剂6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁交感神经,研究了交感神经对小鼠小肠局部细胞免疫作用的内在机理。将30只雄性昆明小鼠随机分为2组,一组连续5d腹腔注射6-OHDA,另一组用作对照。采用免疫组织化学染色和细胞培养方法检测两组动物小肠CD4+、CD8+T淋巴细胞数量及肠系膜淋巴结T淋巴细胞体外增殖能力。结果表明,试验组的CD4+T细胞数量比对照组少6.5%～51.5%,十二指肠、空肠段差异极显著(P<0.01);CD8+T细胞数量比对照组增加5.6%～22.7%,十二指肠段差异显著(P<0.01);CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值总体呈下降趋势。肠系膜淋巴结T淋巴细胞转化率降低,在ConA浓度为3μg/ml时比对照组降低了9.2%,差异显著(P<0.05)。以上结果提示:交感神经通过调节小鼠小肠T淋巴细胞增殖以及亚型CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量,影响肠黏膜细胞免疫的调控。