环氧化酶-2反义核酸对膀胱癌细胞株裸鼠成瘤的影响

目的探讨环氧化酶-2反义核酸对膀胱癌细胞株裸鼠成瘤的影响。方法应用脂质体介导获得了稳定表达人环氧化酶-2反义核酸、空载体的膀胱癌细胞T24-AS、T24-P。BALB/c裸鼠27只分为3组,每只皮下分别接种0.2mLT24-AS、T24-P、T24膀胱癌细胞(2.5×107/mL)。30d后处死裸鼠,取瘤块称重、测量肿瘤体积。免疫组化、半定量RT-PCR、Wester blot检测移植瘤COX-2表达。结果裸鼠成瘤试验T24-P、T24组中,细胞接种裸鼠后第5天可见肿瘤长出,T24-AS组接种后第7天可见肿瘤长出。T24、T24-AS、T24-P组移植瘤重分别为(965.5±84.9)mg、(66.7±45.1)mg、(1 023.5±40.2)mg。免疫组化染色、RTPCR、Western blot结果均显示T24、T24-P组COX-2表达明显,而T24-AS组少量表达。结论环氧化酶-2反义核酸在实验中表现出良好的抗肿瘤特性。     

环氧合酶-2基因多态性与膀胱癌的易感性

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)基因多态性与膀胱癌易感性的关系.方法 采用病例对照研究方法,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)及错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PIRA-PCR)分别检测180例膀胱癌患者和180例非肿瘤患者COX-2基因-765G/C、-1195G/A和-8473T/C 3个多态位点,采用x2检验比较不同基因型与膀胱癌风险的关系.结果膀胱癌组和对照组COX-2-765G/C及-1195G/A 2个位点的3种基因型频率分布差异无统计学意义(P=0.582,P=0.270);2组间COX-2-8473T/C位点的3种基因型分布差异有统计学意义(P=0.041),携带突变等位基因C的个体(-8473TC+CC)患膀胱癌的风险显著降低(OR=0.56,95%CI=0.35～0.88).结论 COX-2-765G/C以及-1195G/A可能与膀胱癌易感性无关,COX-2-8473T/C与膀胱癌易感性相关.     

转染环氧合酶-2反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞侵袭性的抑制作用

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)反义寡核苷酸(ODNs)对人骨肉瘤细胞株OS-732侵袭性的抑制作用及其机制.方法 设计和合成COX-2反义寡核苷酸,体外转染骨肉瘤OS-732细胞,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot证实转染效果.改良Boyden-transwell方法观察肿瘤细胞侵袋抑制率,RT-PCR方法研究转染COX-2反义ODNs对OS-732细胞尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA、uPAR)mRNA表达的影响.结果 转染COX-2反义ODNs的细胞COX-2核酸、蛋白表达水平显著降低.转染组细胞侵袭能力显著降低,呈浓度依赖性.转染组细胞uPA、uPAR的mRNA表达水平显著降低(P<0.01).结论 COX-2反义ODNs对OS-732细胞侵袭能力有明显抑制作用,其对uPA、uPAR表达的下调是主要作用机制.     

环氧合酶-2抑制剂与肝细胞癌的关系

近年来，流行病学研究发现，长期服用阿斯匹林(Aspirin)等非类固醇抗炎药(non-steroidal anti-inflarmnatory drugs,NSAIDs)可降低结直肠癌、胃癌及食管癌等恶性肿瘤的发病率。初期研究主要集中在对结直肠癌的化学预防作用的研究。最近关于环氧化合酶-2(cyelooxygenase-2，COX-2)抑制剂与肝细胞癌(Hepatoeellular carcinoma，HCC)的关系受到关注。     

膀胱移行细胞癌环氧合酶-2表达与肿瘤微血管生成的关系

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)及微血管密度(MVD)与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系及其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法对103例膀胱移行细胞癌、21例慢性膀胱炎、13例正常膀胱组织标本中COX-2进行检测,同时对上述标本中微血管进行计数.结果 膀胱移行细胞癌组织COX-2阳性表达率70.9%(73/103),慢性膀胱炎及正常膀胱组织COX-2表达均为阴性.低分化、浸润性、有淋巴转移以及复发癌组织中COX-2阳性表达率显著高于对应组(P<0.05).103例膀胱移行细胞癌组织中MVD为36.57±10.12,并与COX-2表达正相关(P<0.05),但COX-2表达及MVD与肿瘤的数量、大小无明显相关(P>0.05).结论 COX-2表达在膀胱移行细胞癌的发生、发展、转移及复发过程中起重要作用.膀胱移行细胞癌COX-2表达与肿瘤间质微血管的形成密切相关.     

环氧合酶-2与乳腺癌研究进展

环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶。COX2在多种肿瘤中表达上调,通过多种机制参与肿瘤的发生、发展和转移。近年来,COX2与乳腺癌的关系研究逐渐增多,COX2抑制剂逐渐成为乳腺癌治疗的新靶点。本文就其新进展进行综述。     

环氧合酶2在胰腺癌中表达及其抑制剂对肿瘤生长的抑制作用

目的　研究胰腺癌组织中环氧合酶 2 (COX 2 )的表达及其与临床分期的关系 ;探讨选择性COX 2抑制剂对胰腺癌生长的体内外抑制作用。方法　分别应用免疫组织 (细胞 )化学染色、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot等研究胰腺癌组织和细胞株PC 3及PANC 1中COX 2表达。分析胰腺癌组织COX 2表达与临床TNM分期的关系。应用四唑氮蓝还原法 (MTT)研究选择性COX 2抑制剂Celebrex和NS 3 98对胰腺癌细胞生长的体外抑制作用。观察Celebrex对裸鼠移植瘤 (接种PC 3细胞 )生长的体内抑制作用。结果　COX 2免疫组织 (细胞 )化学染色结果显示 :2 4例胰腺癌组织阴性 3例 ,弱阳性 10例 ,强阳性 11例 ,阳性率 87 5% ;3例慢性胰腺炎组织 1例弱阳性 ,2例阴性 ;胰腺癌细胞株PC 3和PANC 1均为阳性。RT PCR结果显示两株胰腺癌细胞株和胰腺癌组织COX 2mRNA的表达较正常胰腺组织明显上调。Westernblot显示胰腺癌细胞株PC 3、PANC 1中COX 2蛋白表达阳性。胰腺癌组织COX 2表达程度与临床TNM分期呈正相关 (P <0 0 5)。NS3 98和Celebrex体外均呈剂量依赖性地抑制胰腺癌细胞株PC 3的增殖 ,以Celebrex的抑制作用较为显著。而Celebrex体内抑瘤率达 51 6%。结论　COX 2在胰腺癌中表达显著上调 ,其表达程度与胰腺癌临床TNM分期有关。     

环氧合酶-2在预测结直肠癌肝转移中的价值

目的研究环氧合酶-2（COX-2）在结直肠癌组织中的表达,探讨其与结直肠癌肝转移的关系。方法免疫组化法检测无肝转移、术时合并肝转移和术后发生肝转移的各30例结直肠癌组织以及30例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的COX-2表达水平,分析其与性别、年龄、Dukes分期等临床特征之间的联系,比较无肝转移、术时肝转移、术后肝转移的结直肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中的COX-2表达水平。结果COX-2表达情况：在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常黏膜组织（P〈0．05）;在术时肝转移组和术后肝转移组中的表达均显著高于无肝转移组（P〈0．05）;在结直肠癌组织中的表达与性别、年龄、分化等级、病理类型、术前癌胚抗原（CEA）和糖链抗原19-9（CA19-9）无关,与Dukes分期、淋巴结转移有关。结论COX-2过度表达与结直肠癌发生、发展、肝转移相关,对结直肠癌肝转移早期诊断有一定的应用价值。     

环氧合酶-2在胆管癌中的研究进展

胆管癌发生机制复杂,近几年研究发现环氧合酶2(COX2)在胆管癌细胞中高度表达,说明COX2可能在胆管癌的发生、发展中起一定的作用。     

环氧合酶-2与大肠癌研究进展

环氧合酶（cyclooxgenase，COX）又称前列腺素合酶（PGs），是花生四烯酸（arachidonic acid，AA）代谢的关键限速酶。目前已发现至少存在两种亚型：结构型（consititutive）COX-1和诱导型（inducible）COX-2。近年来研究发现，COX-2不仅在肿瘤组织中有较高表达，并可能参与肿瘤的增殖、转移及分化。传统的非甾体类消炎药（NSAIDs）和选择性COX-2抑制剂已被证实可防治大肠癌、胃癌和家族性结肠息肉病（FAP）。随着COX-2与肿瘤关系的深入研究必将为肿瘤防治提供又一新途径。我们就COX-2的生物学特性、与大肠癌的关系及其可能的机制予以综述。     

全反式维甲酸诱导人膀胱癌细胞T24凋亡的研究

目的　探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ） 诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 凋亡的可能性。方法　应用细胞和分子生物学技术检测不同浓度ＡＴＲＡ 对Ｔ２４ 细胞生长和凋亡的影响。结果　３ ×１０－５ ～３ ×１０－ ７ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ可显著抑制Ｔ２４ 细胞增殖。用３×１０－５ ｍｏｌ／Ｌ和３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 作用细胞６ 天,可出现典型凋亡特征;３ ×１０－５ 、３×１０－ ６ ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ 组及对照组的细胞凋亡率分别为２０ ．１６ ％ 、１５ ．３１％和１ ．４９ ％ ;ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性的ＤＮＡ 梯形带。结论　ＡＴＲＡ对人膀胱癌细胞Ｔ２４ 有剂量生长抑制作用,且可成功地诱导人膀胱癌细胞Ｔ２４ 发生凋亡。     

不同类型膀胱癌组织中环氧化酶-2的表达及意义

目的探时环氧化酶-2（COX-2）在不同类型膀胱癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化染色方法检测52例膀胱移行细胞癌组织（其中T，18例、T2 14例、T3 14例、T4 6例，G1 13例、G2 25例、G3 14例，肿瘤单发37例、多发15例）、20例膀胱腺癌组织、10例膀胱鳞状细胞癌组织及17例正常膀胱黏膜组织中COX-2蛋白表达情况，根据染色阳性细胞所占比例，分为（-）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）4个等级，用等级资料x^2检验进行统计学分析。结果82例肿瘤组织COX-2蛋白表达率（82．9％，68／82）高于正常黏膜（23．5％，4／17）（P〈0．05），不同类型肿瘤COX-2蛋白表达率也有差别，鳞状细胞癌最强（100％，10／10），腺癌次之（90．0％，18／20），移行细胞癌相对较弱（76．9％，40／52）（P〈0．05）；在52例移行细胞癌标夺中，COX-2表达率与肿瘤分级、分期相关（P〈0．05）。结论COX-2在不同类型膀胱癌组织中呈岛表达，在鳞状细胞癌表达最强，可能成为膀胱癌化学预防的一个靶点。     

反义bcl-2 RNA促进膀胱癌BIU-87细胞的凋亡

为探讨反义ｂｃｌ２对膀胱癌ＢＩＵ８７细胞凋亡的作用，应用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ将插有反义ｂｃｌ２基因片段的重组逆转录病毒载体转染ＢＩＵ８７细胞，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果显示：Ｇ期细胞比率增高，细胞周期分析可见凋亡峰，细胞形态学观察凋亡细胞增多，ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带。结果提示：反义ｂｃｌ２瞬时表达可促进ＢＩＵ８７细胞凋亡     

转Fas基因对膀胱癌细胞的作用

目的　探讨Fas基因转染对膀胱癌细胞的作用。　方法　将人FascDNA通过脂质体导入膀胱癌细胞EJ中 ,并利用Northernblot、原位杂交、流式细胞术检测细胞的FasmRNA和分子表达。用流式细胞仪、DNA梯形带和MTT法分析顺铂对转染前后的EJ细胞抑制增殖和诱导凋亡的能力。　结果　Fas基因转染可明显增强膀胱癌细胞EJ的Fas表达 ,顺铂对转染后的EJ细胞抑制细胞增殖和诱导凋亡的能力明显增强。　结论　转染的Fas基因可显著上调膀胱癌细胞EJ的Fas表达 ,促进细胞凋亡 ,联合应用Fas基因转染和顺铂可获得协同的细胞毒作用     

纤溶酶原激活物在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

采用免疫组化法检测３２例膀胱移行细胞癌组织及１０例正常膀胱组织中尿激酶型纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）表达，另用底物发色法测定２４例膀胱移行细胞癌组织和１０例正常膀胱组织中组织型纤溶酶原激活物（ｔＰＡ）活力。结果显示膀胱肿瘤组织中ｕＰＡ呈不同程度阳性染色，并与膀胱肿瘤分期分级有关（Ｐ＜０．０５），正常膀胱组织染色阴性。正常膀胱组织和膀胱肿瘤组织之间及不同分期、分级的膀胱肿瘤组织之间ｔＰＡ活力无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ｕＰＡ可作为判断膀胱肿瘤恶性程度指标之一。     

膀胱癌细胞凋亡检测方法的比较研究

目的 比较几种检测羟基喜树碱（ＨＰＴ）诱导的膀胱癌细胞凋亡的方法。方法 通过流式细胞分析观察ＨＰＴ诱导Ｔ２４膀胱癌细胞凋亡的量效关系;通过荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析;直接使用苏木素染色进行细胞凋亡的检测;应用ＤＮＡ分析进行ＤＮＡｌａｄｄｅｒ检测。结果 （０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰＴ在体外能够诱导Ｔ２４细胞凋亡,其最佳诱导时间在３小时以后。流式细胞（０．０１￣１０）μｇ／ｍｌ的ＨＰ     

膀胱癌原癌基因c－erbB－2蛋白产物的表达

采用免疫组化ＰＡＰ方法对６３例膀胱癌癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２表达产物进行检测，２９例显示表达阳性，且阳性率在恶性度低、浅表性肿瘤中较高，Ⅰ与Ⅲ级、１＋Ⅱ与Ⅲ级、Ｔｉｓ－Ｔ１与Ｔ２～Ｔ４比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达与膀胱癌细胞分化程度、浸润程度及预后关系不大。     

蝮蛇抗栓酶与肝素对膀胱肿瘤细胞与血小板粘附影响的实验研究

目的提高防治膀胱肿瘤复发和转移的效果。方法通过ＭＴＴ法观察蝮蛇抗栓酶与肝素在体外抑制膀胱肿瘤ＢＩＵ８７细胞系对血小板粘附的影响。结果蝮蛇抗栓酶组抑制膀胱肿瘤ＢＩＵ８７细胞粘附血小板作用优于混合组（蝮蛇抗栓酶＋肝素），混合组抑制作用优于肝素组。蝮蛇抗栓酶组、混合组和肝素组抑制作用明显优于空白对照组（ｔ检验Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。结论蝮蛇抗栓酶与肝素临床综合用药对于防止膀胱癌细胞转移与复发具有重要意义。     

HyTK基因转移联合丙氧鸟苷对人膀胱癌细胞株EJ体外杀伤作用

为探索ＨｙＴＫ基因转移对人膀胱癌的治疗作用，采用单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＴＫ）基因转移联合丙氧鸟苷（Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ，ＧＣＶ）对通过逆转录病毒载体转导了ＨｙＴＫ基因的人膀胱癌细胞株ＥＪ细胞（ＥＪ／ＴＫ）进行体外杀伤。对分别培养及混合培养的ＥＪ细胞及ＥＪ／ＴＫ细胞，用不同浓度ＧＣＶ进行处理，然后观察细胞形态改变及测定活细胞数量。结果：在ＧＣＶ作用下，ＥＪ细胞形态及数量与对照组无明显变化；而ＥＪ／ＴＫ细胞受到ＧＣＶ明显杀伤，细胞形态破坏，细胞数量明显减少，含１０％ＥＪ／ＴＫ的混合培养细胞就可观察到很明显的杀伤作用。表明：转导ＨｙＴＫ基因的ＥＪ细胞获得了对ＧＣＶ的敏感性，并存在很强的“旁观者效应”。提示ＨｙＴＫ基因转移联合ＧＣＶ可能适用于人膀胱癌治疗。     

低剂量丝裂霉素短时加药诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

目的探讨低剂量丝裂霉素（MMC）短时处理,诱导膀胱癌细胞凋亡的可能性。方法应用细胞和分子生物学技术检测各MMC处理条件对靶细胞生长和凋亡的影响。结果低剂量MMC处理EJ细胞1小时或2小时,均出现典型凋亡特征．其中,100mg／L,和20mg／L,MMC对凋亡的诱导作用最佳且处理时间的长短,对抑癌结果无明显影响。结论以一半的临床MMC用药剂量和时间即可有效诱导膀胱癌EJ细胞凋亡,为拟定更合理的膀胱癌腔内化疗方案提供可靠的实验佐证。