异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的 :探讨异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病的疗效。方法 :用异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病 4例 ,预处理方案用TBI 8- 9Gy(分 2d) CTX 12 0mg/kg。预防移植物抗缩主病 (GVHD)用CSA 短程MTX。结果 :全部患者移植后重建造血 ,DNA序列分析表明 1个月内移植物植入 ,4例患者均出现不同程度的GVHD ,1例出现Ⅳ度aGVHD ,移植后 2个月死于颅内出血 ,其余 3例仍完全缓解 (CR) ,最长者达 16个月。结论 :ALLO -PBSCT是目前治疗恶性血液病最有效的方法之一 ,防治GVHD仍然是临床移植中的一个重要问题。     

异基因外周造血干细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo—PBSCT)对儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效。方法8例接受allo—PBSCT治疗的SAA 患儿均为血缘供体移植,男6例,女2例,7～14岁,中位年龄为11岁。4例患儿为急性SAA I型,其中2例移植前合并重型感染且未能完全控制;另4例患儿为SAA Ⅱ型,患儿移植前大多经包括环孢菌素A(CSA)在内的多种治疗无效。诊断至移植的时间为1～45个月,中位时间为13个月。预处理方案由低剂量环磷酰胺（CTX）和抗淋巴细胞球蛋白（ALG）或抗胸腺细胞球蛋白（ATG）组成,采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD)。以DNA短串联重复序列多态性分析(STR PCR)检测学植入依据。结果患者移植后均获造血重建,中性粒细胞绝对值≥0.5×109／L和血小板计数≥20×109／L的中位时间分别为移植后+12.75d(+10～+15d)和+19.88d(+15～+32d)。8例患儿均为完全供体型植入,其中1例移植后10个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降,STR PCR显示移植排斥,经ATG、CsA 等药物治疗逐渐恢复自身造血。1例患儿出现Ⅱ度急性GVHD,1例出现局限性慢性GVHD。随访15～50个月,中位数为29个月,8例SAA患儿均存活。结论采用以免疫抑制为主的ATG/ALG+CTX预处理方案进行allo—PBSCT能够有效治疗儿童SAA,移植相关并发症少,值得临床推广应用。     

抗CD20单抗在致敏受者异基因造血干细胞移植中的应用

目的:探讨抗CD20单抗(美罗华)在致敏受者造血干细胞移植预处理中应用后的脱敏效果。方法:5例致敏患儿中3例在造血干细胞移植预处理前应用美罗华。对比观察脐血移植后造血重建、供受体DNA短串联重复序列多态性分析嵌合度及有无移植物抗宿主病(GVHD)发生。结果:5例患儿造血干细胞移植后造血完全重建,编号2(未用美罗华)造血重建时间(造血干细胞移植后65 d)明显晚于预处理前使用美罗华患儿(编号3、4、5);其中2例出现血小板植入延迟,编号1(未用美罗华)血小板植入时间较编号4(经美罗华处理患儿)明显延长;5例供受体稳定嵌合;编号1(未用美罗华)出现极重度a GVHD,造血干细胞移植前应用美罗华患儿未出现或仅出现轻至中度a GVHD,编号4出现轻度c GVHD,累及胃肠道,经FK506调整后已明显好转。目前随访中位时间7.5个月,病情稳定。结论:美罗华在致敏受者异基因造血干细胞移植前应用对降低敏感性有一定疗效。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

目的 评价异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效.方法 10例接受allo-PBSCT治疗的SAA患者中,8例为血缘供体移植,2例为无关供体移植.男、女各5例,年龄18～42岁,中位年龄为27岁.3例患者为急性SAA(SAA-Ⅰ型),其中2例患者移植前合并重型感染且未能完全控制;7例患者为慢性SAA(SAA-Ⅱ型),患者移植前大多经包括环孢素(CsA)在内的多种治疗无效.诊断至移植的时间为1～240个月,中位时间为12个月.采用兔抗人T淋巴细胞球蛋白(ATG)+环磷酰胺(CTX)方案;移植前-5～-1 d静脉缓慢滴注ATG 4～5/μg·kg-1"·d-1,移植前-4 d～-3 d静脉滴注CTX 60 mg·kg-1·d-1;采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD).结果 患者移植后均获造血重建.中性粒细胞绝对值≥0.5×109/L和血小板计数≥20×109/L的中位时间分别为移植后+13.2 d(+11～+15 d)和+14.3 d(+13～+15 d).8例患者为完全供体型植入;2例为嵌合状态,其中1例亲缘供体患者予冻存外周血干细胞输注1次即转为完全供体型,另1例无关供体患者移植后3个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降,DNA短串联重复序列多态性分析(STR-PCR)显示移植排斥,再次行同一供体移植后逐渐恢复自身造血.1例患者出现Ⅱ度急性GVHD,2例出现局限性慢性GVHD.3例患者移植后出现纯红细胞再生障碍,经血浆置换后红系恢复正常造血.随访3～92个月,中位数为33个月,10例SAA患者均存活.结论 采用以免疫抑制为主的ATG+CTX的减低剂量预处理方案进行allo-PBSCT能够有效治疗SAA,移植相关并发症少,值得临床推广应用.     

NK细胞对小鼠H-2单倍体相合骨髓移植后GVHD及造血重建的影响

目的:研究自然杀伤(NK)细胞在单倍体相合骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)及造血重建的影响. 方法: 以近交系Balb/c(H-2d)×C57BL/6(H-2b)杂交F1代小鼠(H-2d/b)为供鼠、Balb/c(H-2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行半相合骨髓移植,根据临床表现、病理检查及外周血白细胞(WBC)数,比较不同移植组GVHD发生及造血重建情况. 结果: 骨髓 T细胞组中90%的小鼠出现GVHD,外周血WBC平均在移植后4 wk恢复正常;而骨髓 T 低浓度NK细胞组中20%小鼠出现GVHD, 外周血WBC平均在移植后3 wk恢复正常;骨髓 T 高浓度NK细胞组中仅10%出现GVHD,外周血WBC也平均在移植后3 wk恢复正常. 后两组较骨髓 T细胞组GVHD发生率显著下降(P＜0.01),外周血WBC恢复时间显著提前(P＜0.01). 结论:在小鼠单倍体相合骨髓移植中,同种反应性NK细胞可降低GVHD发生率,促进造血重建.     

非T细胞去除HLA单倍体匹配造血干细胞移植治疗白血病

目的：探讨相关HLA单倍体匹配造血千细胞移植治疗白血病的疗效及移植相关并发症。方法：4例白血病患者接受单倍体相合未去T细胞造血干细胞移植，3例为HLA-A、B、DR3个位点不合亲缘骨髓移植，1例为HLA-DR位点不合外周血造血干细胞移植，3例移植时处于完全缓解(CR)期，1例处于慢性粒细胞白细病(CML)急变期，预处理采用阿糖胞苷 环磷酰胺(CTX) 全身照射(TBI)，Graft versus host disease(GVHD)预防联合使用环孢菌素A(CsA)、甲氨喋呤(MTX)、兔抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)、抗CD25单抗、霉酚酸酯(MMF)。结果：4例均获得造血重建，植入直接证据检测证实完全供者造血，3例无aGVHD，1例发生Ⅱ度肠道aGVHD，1例移植后3个月复发，2例在行供者淋巴细胞输注治疗后均并发了Ⅲ度肠道和Ⅱ度肝脏aGVHD．免疫重建延迟。至今，3例存活( 70天- 19个月)，均为持续完全缓解(CCR)，1例 11个月因感染死亡。讨论：未去T细胞单倍体相合HSCT造血重建稳定，移植相关并发症较少，重症GVHD发生率可能低。     

HLA单倍体外周血联合骨髓干细胞移植治疗急性混合细胞白血病的临床观察

目的 探索急性混合细胞白血病人类白细胞抗原(HLA)单倍体造血干细胞移植治疗方法及疗效观察.方法 对4例急性混合细胞白血病患者进行HLA单倍体外周血造血干细胞联合骨髓移植治疗,观察移植疗效及相关并发症.结果 所有患者均成功重建造血.中性粒细胞及血小板恢复中位时间分别为16.5d(14～21d)、16.5d(15～30d).1例PR患者移植后完全缓解,其余3例持续缓解.2例移植过程中发生急性GVHD,未观察到慢性GVHD的发生.1例患者在移植过程中发生单一的APTT延长.中位随访时间181d(129～337d),1例于移植后190d死于真菌感染,1例CR2和1例PR分别于移植后183d和129d病情复发,另1例无病存活337d.结论 HLA单倍体外周血造血干细胞联合骨髓移植治疗急性混合细胞白血病切实可行,但需积累更多的资料以进一步观察疗效.     

21例异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病中GVHD防治的研究

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(ALLO-PBSCT)治疗白血病过程中移植物抗宿主病(GVHD)的发生状况防治方法及疗效.方法Allo-PBSCT治疗白血病21例,预防GVHD发生主要采用环孢霉素A(CsA)加短程甲氨碟呤(MTX)等.结果21例患者经ALLO-PBSCT后均获得造血功能重建,GVHD的发生率为38%,3例重度急性GVHD(aGVHD)死亡2例,GVHD组的复发、死亡率较未出现GVHD组低.结论CsA加短程MTX预防GVHD的发生可获得较好的疗效,GVHD组患者的复发、死亡率低于未出现GVHD组,提示GVHD过程中伴有移植物抗白血病效应(GVL).     

异基因造血干细胞移植术治疗自体造血干细胞移植术后复发的恶性淋巴瘤17例效果分析

目的 观察异基因造血干细胞移植治疗自体造血干细胞移植后复发的恶性淋巴瘤的临床效果.方法 本科2000-2011年采用异基因亲缘造血干细胞移植术治疗自体造血干细胞移植术后复发的恶性淋巴瘤患者17例,HLA配型全相合(6/6相合)10例,5/6相合5例,4/6相合2例.预处理方案采用环磷酰胺120 mg/kg分2d静滴,马利兰12～ 14 mg/kg分4d口服,氟达拉滨30 mg/m2×5 d.全相合供体采用CsA+ MTX+ MMF预防移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD),不全相合供体采用ATG+ CsA+ MTX+ MMF预防GVHD.移植物均为外周血造血干细胞加骨髓.结果 17例患者均获造血重建,发生急性GVHD 9例(52.94％),发生慢性GVHD 11例(64.71％).随访12 ～ 120个月,6例患者分别于移植后8、11、15、19、21、34个月疾病复发而死亡,3例患者死于GVHD合并感染,余8例健康存活.结论 异基因造血干细胞移植是治疗自体造血干细胞移植后复发的恶性淋巴瘤患者的有效方法.     

外周造血干细胞移植后及出现GVHD时T细胞β链CDR3谱型分析

目的 初步探讨外周造血干细胞(PBSC)移植后以及出现移植物抗宿主疾病(GVHD)时,外周血T细胞a链的CDR3谱型变化和特征.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,监测1例重型β-地中海贫血移植前、移植后23 d、GVHD时(移植后28 d)患者外周血单核细胞(PBMC)及供者PBSC标本T细胞a链的CDR3谱型变化,基因扫描(GeneScan)和测序分析克隆性增生T细胞TCR分子特征.结果 患者移植前PBMC的24个TCR BV家族CDR3谱型均呈高斯分布,部分家族在移植后23 d、和GVHD时呈现为寡峰和单峰,同时部分家族消失,单克隆增生T细胞TCR beta链的测序结果 显示不同的CDR3区组成,设计特异的CDR3引物进一步分析提示其可能来源于干细胞移植后的分化.结论 PBSC移植后23 d,PBMC中的多数24TCRBV家族CDR3谱型表现为多克隆,GVHD时,部分家族出现明显的单、寡克隆增生,这些特异T细胞可能在GVHD中发挥重要作用.对移植前后TCRCDR3谱型和特异TCR分子特征的分析将有助于PBSC移植后免疫重建的评估和出现排斥反应时的特异性治疗.     

8例输血后移植物抗宿主病的临床分析

移植物抗宿主病 (GVHD)是同种异基因干细胞移植常见的严重并发症 ,也是干细胞移植失败的重要原因。6 0年代中期Hathaway首先报道了两例免疫缺陷病儿童输注富含白细胞的血浆和全血后引起 GVHD,导致患儿死亡以来 ,输血后GVHD在国外文献中不乏报道 ,但国内文献报道较少。现将我院 1994年以来确诊的 8例输血后 GVHD报告如下。1　资料和方法1.1　一般资料　 8例患者均为 1994年 9月至 2 0 0 0年 10月 6年间的住院患者 ,占同期输血患者的 0 .5 2 %。男 5例 ,女 3例 ,年龄 13～ 74岁 ,中位年龄 5 1岁。包括急性白血病 4例 ,慢性白血病 3例 ,…     

外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病临床研究

目的 观察外周血造血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)对恶性血液病的临床疗效.方法 恶性血液病39例患者中,31例行异基因造血干细胞移植(allogeneic PBSCT)治疗,8例行自体造血干细胞移植(autologous PBSCT)治疗.allo-PBSCT采用粒细胞集落刺激因子(colony-stimulating factor,G-CSF)、Auto-PBSCT采用化疗联合G-CSF动员外周血造血干细胞.Auto-PBSCT患者接受CD34+细胞中位数为4.4×106·kg-1[(3.2～9.9)×106·kg-1)],allo-PBSCT患者接受CD34+细胞中位数为5.4×106·kg-1[(3.0～11.5)×106·kg-1)],预处理方案采用改良的白消安/环磷酰胺或全身照射/环磷酰胺方案,allo-PBSCT患者移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的预防采用环孢素A联合短疗程甲氨喋呤,部分患者加用麦考酚酉青,4例HLA不全相合患者再加用抗胸腺细胞球蛋白.结果 全部患者均成功植入并快速重建造血,中性粒细胞恢复至≥0.5×109/L、血小板恢复至≥20×109/L的天数在auto-PBSCT分别为13 d(9～20 d)和19 d(14～24 d);在allo- PBSCT中分别为17 d(14～21 d)和23 d(16～29 d).allo-PBSCT中急性GVHD的发生率为35.5%,慢性GVHD的发生率为61.3%.中位随访17个月,总病死率(10/31)32.3%.结论 auto-PBSCT和allo-PBSCT均能很快重建造血,是治疗恶性血液病最有效的手段之一.预防和治疗GVHD仍然是临床移植中的重要问题.     

异基因外周血造血干细胞移植后细胞免疫的重建

目的 研究异基因外周血造血干细胞移植后细胞免疫的重建,探讨免疫治疗应用于造血干细胞移植后的残留病灶清除,并将其与化疗有机结合,以延长患者无病生存率的方法.方法 采用流式细胞仪,检测14例异基因外周血造血干细胞移植患者移植前后外周血中T、B、NK细胞的含量.结果 异基因外周血造血干细胞移植后1月内,患者血循环中CD3+细胞明显减少,至移植后3月逐渐恢复至正常;CD3+CD4+细胞移植后持续减少,至移植后6月甚至更长时间后才逐渐恢复;CD3+CD8+细胞于移植后1月内很快恢复.CD19+细胞于移植后1 ～ 3月降低,移植后3 ～ 6月逐渐恢复.NK细胞于移植后2月恢复,较T或B淋巴细胞恢复速度快.结论 异基因外周血造血干细胞移植后3月T细胞才逐渐恢复至正常水平;B细胞于移植后1 ～ 3月绝对及相对计数降低,移植后3 ～ 6月逐渐恢复;NK细胞于移植后2月恢复,较T或B淋巴细胞恢复速度快.     

ATG用于异体造血干细胞移植前预防移植物抗宿主反应

目的 分析异体造血干细胞移植前加用抗T淋巴细胞球蛋白(ATG)预防移植物抗宿主反应(GVHD)的疗效.方法 27例白血病患者分为两组,每组移植供体来源及病种类似,分别有同胞兄妹、无关供体和人类白细胞抗原(HLA)半相合供体.A组(n=12):采用经典的CsA+MTX预防GVHD;B组(n=15):采用CsA + MTX+ATG预防GVHD.结果 B组15例患者全部存活,除4例出现Ⅱ°急性GVHD(aGVHD)外,其余11例均在移植后30 d左右仅出现Ⅰ° GVHD,并很快控制.A组12例患者中,3例HLA半相合移植患者分别在移植后第7、9和10天即出现Ⅳ°超急性GVHD,另有1例无关供体患者出现Ⅲ° aGVHD,该4例患者由于重度GVHD继发肺部感染而死亡;其余8例同胞之间的移植分别出现Ⅱ°～Ⅲ°aGVHD.结论 在异体造血干细胞移植前应用ATG可以有效预防GVHD的发生或减轻GVHD的严重度,明显减少移植相关死亡率.     

托珠单抗联合芦可替尼治疗造血干细胞移植后激素耐药的移植物抗宿主病患儿六例

6例患儿在造血干细胞移植后出现激素耐药的移植物抗宿主病（GVHD）,其中急性GVHD 4例,慢性GVHD 2例。4例急性GVHD患儿主要表现为大面积皮疹、发热2例,主要表现为腹痛、腹泻2例;2例慢性GVHD患儿主要表现为大面积皮肤苔藓样变1例,主要表现为反复口腔溃疡、张口受限1例。6例患儿均采用托珠单抗联合芦可替尼治疗,给药方案为托珠单抗8 mg/kg静脉注射,每3周一次;芦可替尼5～10 mg/d口服,连续28 d,至少完成两个疗程治疗。6例患儿的治疗反应率为100%,其中5例患儿接受两个周期治疗后完全缓解,中位缓解时间为26.7 d。中位随访11(7～25)个月,未观察到明显治疗相关的不良反应。     

Cy-VP16-fTBI预处理的干细胞移植治疗恶性血液病的长期疗效

目的 Cy-VP16-fTBI预处理方案的造血干细胞移植治疗血液系统恶性疾病的长期疗效观察. 方法 造血干细胞移植治疗16例恶性血液病患者,其中异基因外周血干细胞移植8例,异基因骨髓移植5例,自体外周血干细胞移植3例.所有患者均予环磷酰胺(Cy)+依托泊苷(VP16)+标准分次全身放疗(fTBI)预处理方案. 结果 所有患者均成功植活,白细胞、血小板植入中位时间分别为第15(10～22)天和第20(10～65)天.Ⅱ-Ⅳ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)3例(19%),慢性GVHD(cGVHD)7例(43%).11例(68.75%)患者长期生存,中位生存期75(34～82)个月.6年总体生存率(OS)68.75%,其中第一次完全缓解或慢性粒细胞白血病慢性期患者6年OS为78.75%.6年复发率14.29%,移植满2 a后无患者复发. 结论 Cy-VP16-fTBI预处理方案的造血干细胞移植安全、有效,其长期疗效明显优于常规化疗.aGVHD发生率较低,但cGVHD在异基因外周血干细胞移植中发生率较高;其他毒副作用较少.     

异基因外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

目的：探索异基因外周血造血干细胞移植(allo—PBSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效及其长期造血重建，分析其治疗过程中移植物抗宿主病(GVHD)的发生状况，探讨其有效治疗方法。方法：1例SAA患者，男性，26岁，供者为其胞妹，HLA配型完全相合。预处理采用全身照射(TBI) 环磷酰胺(CTX) 抗胸腺细胞球蛋白(ATG)方案；GVHD预防采用常规环胞菌素，A(CsA) 短程甲氨蝶呤(MTX)方案；治疗慢性GVHD(cGVHD)采用霉酚酸酯(MMF) CsA 硫唑嘌吟(6—MP) 泼尼松 酞咪哌啶酮(反应停，Thalido-mide)。结果：移植后23d造血重建。同时检测染色体核型为46，XX(G)，第63天血型由B型转变为O型。移植133d发生cGVHD，随访28个月，cGVHD已控制。结论：异基因外周血造血干细胞移植可有效治疗重型再障。本例造血重建迅速，cGVHD有效治疗后可被控制。     

冷冻保存小鼠胎肝细胞移植治疗急性辐射损伤

造血干细胞是造血重建的主要来源,而移植低温保存的骨髓、外周血造血干细胞治疗辐射损伤、再生障碍性贫血、综合免疫缺陷病、淋巴瘤等患者均有较好疗效。但同种异体移植易引起严重移植物抗宿主病(GVHD)。人们对胎肝细胞和自体骨髓移植寄予很大希望,它不仅可获得满意的造血重建,而且避免了GVHD的发生。目前冷冻保存技术已成为造血干细胞移植的一个重要组成部分。     

小鼠单倍体相合外周血移植模型的建立

目的 建立单倍体相合外周血移植小鼠模型,探讨移植后造血及免疫重建特性.方法 经大剂量全身照射预处理BDF1小鼠后,经尾静脉输注新生第一天DBA/2小鼠的外周全血,移植后动态观察受体鼠的造血重建及急性移植物抗宿主病(GVHD)发生情况,并用流式双染色法进一步检测粒系、淋巴系造血细胞的长期植入水平.结果 移植后小鼠的白细胞、血小板、血红蛋白分别在第18、21、18天明显回升,其中白细胞和血小板分别于第29天和36天恢复正常,而血红蛋白至第50天仍为部分恢复.受体鼠90%长期存活,且不发生明显的GVHD.移植后第50天流式细胞仪检测供鼠来源的造血细胞占总有核细胞的88.81%,其中含供者来源的粒细胞33.92%,T细胞16.83%.结论 单份新生小鼠外周血含有足够的造血干细胞,能重建单倍体相合小鼠的造血及免疫系统而不引起明显的GVHD,并可形成稳定的以供者细胞为主的嵌合体,其中粒细胞为完全嵌合.     

环磷酰胺预处理脐血移植小鼠模型的建立及其对骨髓龛位的影响

【目的】建立环磷酰胺 (CTX)预处理脐血移植 (UCBT)小鼠模型 ,并探讨预处理后骨髓龛位腾出的特点和机制。【方法】分别以 10 0 ,2 0 0 ,380mg/kg 3种剂量CTX腹腔注射BALB/c小鼠 ,检测注射后 1周内外周血象、骨髓及外周血CD34 细胞含量、骨髓细胞凋亡及病理学改变。用C5 7BL/ 6鼠脐血 (FNPB)作供体移植经“致死量”CTX预处理的BALB/c鼠 ,动态观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及移植物抗宿主病 (GVHD)情况。【结果】在CTX处理后 3～ 4d内 ,骨髓造血细胞损伤渐加重 ,血窦结构紊乱 ,细胞碎屑弥漫分布 ,外周血与骨髓CD34 细胞水平进行性降低至最低值 ,下降的速度和程度与CTX剂量呈正比。骨髓细胞凋亡发生率的峰值出现在第 1天 ,第 3天恢复正常。FNPB移植能明显提高受鼠存活率 ,重建部分造血与免疫功能 ,未见明显GVHD表现 ,并在受体内检出供体细胞的植入。【结论】成功建立CTX化疗预处理小鼠脐血移植模型。干细胞占据的龛位是在化疗预处理后 4d逐渐完成腾空 ,凋亡是参与此过程的机制之一。