加味身痛逐瘀汤调控Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨质疏松症的防治作用

目的:探讨加味身痛逐瘀汤防治去卵巢大鼠骨质疏松症(OP)的疗效及其可能作用机制。方法:将60只SD大鼠,体重(245±25)g,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇组、加味身痛逐瘀汤高、中、低剂量组,每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,戊酸雌二醇组大鼠给予戊酸雌二醇(剂量为 0.09 μg/g)灌胃; 加味身痛逐瘀汤治疗组大鼠给予加味身痛逐瘀汤(剂量为 32、16、8 g/kg)灌胃; 假手术组和模型对照组大鼠给予等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃给药2个月。利用双能 X 线骨密度检测仪、HE染色法及Western blot分别测定骨密度,观察骨组织病理形态变化,分析大鼠股骨组织中Wnt、Wnt1、β-catenin、cyclin D1蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型对照组骨密度明显降低(P<0.05),骨微结构遭到严重破坏,股骨组织中Wnt、Wnt1、β-catenin、cyclin D1蛋白的表达量显著降低(P<0.05)。与模型对照组相比,戊酸雌二醇组、加味身痛逐瘀汤高、中、低剂量组骨密度显著升高(P<0.05),骨微结构明显改善,股骨组织中Wnt、Wnt1、β-catenin、cyclin D1蛋白的表达量显著升高(P<0.05),且加味身痛逐瘀汤高剂量组和戊酸雌二醇组对骨密度及蛋白表达量的影响最为显著。结论:加味身痛逐瘀汤可能通过调节 Wnt/β-catenin 信号通路提高骨质疏松症大鼠的骨密度以及改善骨组织形态,从而发挥抗骨质疏松的作用。     

左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察左归丸对去势骨质疏松大鼠模型骨代谢和Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨左归丸防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用双侧卵巢切除法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,60只雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,雌二醇组(戊酸雌二醇片0.05 mg·kg^-1·d^-1),左归丸低、中、高剂量组(5.5,11,22 g·kg^-1·d^-1)。从造模成功后(第13周)开始,每日灌胃(ig)1次,共持续12周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠股骨组织结构变化;双能X射线仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC);MTS Acumen3型生物力学测试系统检测各组大鼠骨生物力学性能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP),骨钙素(BGP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)等骨代谢标志物含量及雌二醇(E2)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胫骨组织中Wnt2,β-catenin,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)水平及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD,BMC,最大载荷和刚度显著降低(P<0.01),血清E2和PINP含量显著降低(P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著升高(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5和β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),股骨骨小梁稀疏变细,数量减少;与模型组比较,雌二醇组和左归丸各组BMD,BMC,最大载荷和刚度明显升高(P<0.05,P<0.01),血清E2和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著降低(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5,β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),股骨骨小梁较模型组变粗,数量增加,结构基本清晰。结论:左归丸对去势大鼠骨质疏松症具有一定的防治作用,其机制可能与提高雌激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,上调Wnt2和LRP5蛋白表达,抑制GSK-3β的活性,减少β-catenin的降解,协调骨形成与骨吸收的动态耦联平衡,纠正骨代谢紊乱,从而改善骨组织形态相关。     

壮骨止痛方对体外培养成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的观察壮骨止痛方对体外培养成骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法取新生SD大鼠颅骨进行成骨细胞原代培养,传代后随机分为4组:假手术组、模型组、对照组、中药组。培养3代后进行鉴定,加入相应含药血清干预48 h。测定各组成骨细胞Wnt3a、β-catenin、LRP5、GSK3βmRNA及蛋白的表达情况。结果与假手术组比较,模型组β-catenin、LRP5蛋白及mRNA降低(P0.05),GSK3β蛋白及mRNA升高(P0.05)。与模型组比较,对照组和中药组β-catenin、LRP5蛋白及mRNA表达升高(P0.05),GSK3β蛋白表达降低(P0.05),中药组GSK3βmRNA表达降低(P0.05)。与对照组比较,中药组β-catenin蛋白及mRNA表达升高(P0.05),GSK3βmRNA表达降低(P0.05)。结论壮骨止痛方可通过上调Wnt3a、β-catenin、LRP5蛋白的表达,下调GSK3β的表达调控Wnt/β-catenin信号通路。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin 信号通路、血清 Sclerostin 水平的影响

目的:探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-catenin信号通路以及Sclerostin含量的影响。方法:将实验动物分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量治疗组、壮骨止痛方低剂量治疗组、雌二醇组5组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、Sclerostin的水平。结果:模型组大鼠血清β-catenin降低、Sclerostin水平上升,经壮骨止痛方药物干预后,大鼠血清β-catenin水平明显升高、Sclerostin水平明显下降。结论:壮骨止痛方药物可以提升Wnt/β-catenin信号通路的表达,降低血清Sclerostin的水平,达到预防治疗骨质疏松的作用。     

不同补肾方对卵巢摘除术后骨质疏松大鼠Wnt信号表达的影响

目的：比较3种补肾方对卵巢摘除骨质疏松大鼠Wnt通路β-Catenin mRNA表达的影响。方法：雌性SD大鼠70只,随机分为假手术组、模型组、龟鹿二仙胶组、二仙汤组、补肾活血组、雌二醇组、仙灵骨葆组,每组10只。双侧卵巢摘除术复制骨质疏松模型,术后30天进行相应的给药实验,假手术组和模型组给予灌服等量的生理盐水。12周后测定各组大鼠血清中I型胶原羧基端肽（β-Crosslaps）、I型前胶原氨基端延长肽（P1NP）含量;以双能X线骨密度测定仪测定大鼠股骨的骨密度;用RT-PCR检测右侧股骨髓LRP5、Wnt2、β-Catenin mRNA表达,用Western blot方法检测LRP5、Wnt2、β-Catenin蛋白表达。结果：与sham组比较,模型组股骨骨密度、血液PINP浓度、β-Catenin mRNA、LRP5 mRNA、Wnt2 mRNA表达均显著降低（P<0.01）,β-Crosslaps 浓度显著增高（P<0.01）。与模型组比较,3组中药组骨密度、血液PINP浓度、LRP5 mRNA、β-Catenin mRNA、Wnt2 mRNA及蛋白表达显著增高（P<0.05）,血液β-Crosslaps浓度显著降低（P<0.01）,补肾活血组骨密度及β-Catenin mRNA及蛋白表达高于其他两补肾方剂组。结论：补肾方通过Wnt信号通路促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖而改善骨质疏松症,补肾活血组方效果更为明显。     

续断皂苷VI调控Wnt/β-Catenin通路对骨质疏松的影响机制＊

目的 探讨续断皂苷VI调控Wnt/β-Catenin通路对骨质疏松的影响并分析其作用机制。方法 构建SPF级Wistar大鼠骨质疏松症模型与健康大鼠共同饲养形成对照组，将50只雌性大鼠随机分为4组。依次设置为：续断皂苷VI治疗组，模型对照组，假手术组，空白对照组。使用不同双侧卵巢摘除手术法处理实验组大鼠。除空白对照组外，模型对照组与假手术组以及续断皂苷VI处理组的大鼠均制成骨质疏松症大鼠模型，将续断皂苷VI组的大鼠连续给药12周。使用X线骨密度仪骨密度（BMD， bone mineral density）测定法检测各组大鼠BMD，观察给药前后大鼠BMD变化情况；使用生物力学测定仪测定各组大鼠后肢股骨的最大载荷差异；使用RT-PCR实验和Western Blotting实验以检测不同组Wnt3a、β-catenin、LRP5、Runx2、SOST和Osx转录组与蛋白组表达各自发生的差异。结果 续断皂苷VI治疗12周可显著提高骨质疏松症大鼠模型股骨的BMD，并提高椎体在最大负荷和弹性模量下的生物力学能力，降低了骨质疏松症在骨组织中造成的致病性。对于组织形态学方面的考察发现，续断皂苷VI治疗组在治疗持续12周后，小梁排列整齐，小梁稍变薄，股骨没有明显的轻微骨折。在进行续断皂苷VI治疗处理的情况下，经典Wnt /β-catenin信号通路中涉及的LRP5、β-catenin、Runx2和Osx的表达显著上调，而在该通路中SOST的表达下调（P <0. 05）。结论 续断皂苷VI可显著提高骨质疏松模型大鼠的骨密度，其保护机制与激活Wnt/β-catenin 信号通路，上调骨质疏松大鼠骨中β-catenin、LRP5的mRNA表达有相关。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)信号通路的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量组、壮骨止痛方低剂量组、雌二醇组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、OPG、RANKL的水平。结果模型组大鼠血清β-catenin明显降低,RANKL/OPG比值升高,经壮骨止痛方药物干预后,β-catenin水平明显升高,RANKL/OPG比值明显下降。结论壮骨止痛方可能通过提升大鼠血清β-catenin的含量,降低RANKL/OPG的比值,从而激活Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路,起到防治骨质疏松的作用。     

二至丸对绝经后骨质疏松鼠的作用观察及可能机制研究

目的:观察二至丸对绝经后骨质疏松模型鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将100只雌性SD鼠随机分为空白组(n＝20)和造模组(n＝80),造模组大鼠均接受双侧卵巢切除术致骨质疏松模型,将成模大鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组,每组20只,造模12 h低剂量组、中剂量组及高剂量组分别予3、6、12 g/kg二至丸灌胃,1次/d。模型组与空白组均予1 mL生理盐水灌胃,连续干预8周,比较各组骨组织病理学、组织形态计量学、骨密度生物力、血脂代谢、组织Wnt/β-catenin通路标志性因子的改变。结果:与空白组比较,模型组脂肪细胞明显增大,脂肪细胞密度、面积、FLAW、PPARγ显著增加,外周血TC、TG和LDL-C含量上调(P<0.01)。与模型组比较,二至丸中剂量组和高剂量大鼠上述指标表达下调(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠BV/TV、Tb.Th,Joint、骨密度、弹性模量、最大载荷、Wnt3a、β-catenin、LRP5表达均减少(P<0.05);与模型组比较,二至丸中剂量组和高剂量组上述指标表达均显著增加(P<0.05)。结论:二至丸可明显改善骨质疏松症,其作用机制可能与激活Wnt/LRP5/β-catenin通路有关。     

地黄饮子水煎剂对去势骨质疏松大鼠骨强度和股骨病理形态结构的影响

目的:研究地黄饮子水煎剂对去势大鼠骨强度和骨病理形态结构的影响,进一步探讨其作用机制。方法:采用去卵巢法制备大鼠骨质疏松症模型,将大鼠随机分为假手术组,模型组,地黄饮子水煎剂低、中、高剂量组,西药组(戊酸雌二醇片),每组10只,分别予相应药物灌胃4周,股动脉采血处死大鼠。观察大鼠的一般状况,称量体重,比色分析法检测血清钙(calcium,Ca),磷(phosphorus,P)含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清骨钙素(osteocalcin,BGP)含量和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,tr ACP)含量,双能X射线吸收测量仪平台上测定右股骨部位骨密度(bone mineral density,BMD),用AG-IX生物力学万能实验机检测股骨最大载荷,定位-伸长位移及苏木素-伊红(HE)染色法观察股骨的病理形态学变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD,Ca,P,BGP,最大载荷,定伸长-位移均显著降低(P0.05),而模型组大鼠体重和tr ACP的含量及地黄饮子水煎剂各干预组大鼠体重则显著增加(P0.05),同时模型组骨小梁结构不完整、丢失、断裂严重。与模型组相比,地黄饮子水煎剂各干预组大鼠BMD,BGP,Ca,最大载荷,定伸长-位移均显著升高(P0.05),其高、中剂量组大鼠P含量显著升高,而其高剂量组大鼠体重和tr ACP的含量则显著降低(P0.05),并且地黄饮子水煎剂高剂量组骨小梁排列规则,数目增多、增宽。结论:地黄饮子能够提高绝经后骨质疏松大鼠的骨密度,促进骨形成、抑制骨吸收,对绝经后骨代谢异常具有积极的防治作用。     

寿胎丸对去势大鼠骨组织内BMP和TGF-β表达的影响

目的观察寿胎丸对去势大鼠骨组织内骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein,BMP)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)的影响。方法 40只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、寿胎丸组和戊酸雌二醇组,行双侧卵巢切除术,寿胎丸组予寿胎丸13.4 g/kg/d灌胃,戊酸雌二醇组予补佳乐0.104 mg/kg/d灌胃,假手术组与模型组予等量生理盐水灌胃。于术后12周处死动物,切取大鼠股骨标本分别检测股骨近端骨组织形态学、骨组织中BMP和TGF-β含量及相关调控基因的表达。结果寿胎丸可明显改善卵巢切除所引起的骨组织微观结构的破坏。模型组骨组织中BMP2、BMP4和TGF-β含量明显低于假手术组(P0.05);与模型组相比,寿胎丸组BMP2、BMP4和TGF-β,戊酸雌二醇组BMP2的含量均明显增加(P0.05)。同时,模型组骨组织中,BMP2、BMP4和TGF-β的基因表达明显降低(P0.05);与模型组相比寿胎丸组BMP2、BMP4和TGF-β,戊酸雌二醇组BMP2相关调控基因的表达均明显增加(P0.05)。结论寿胎丸可明显改善卵巢切除引起的骨组织微观结构的破化,这可能与寿胎丸提高骨组织内BMP2、BMP4和TGF-β蛋白含量和相关调控基因的表达有关。     

基于Wnt/β-连环素通路探讨补骨脂素对骨质疏松症大鼠的影响

目的：探讨补骨脂素基于Wnt/β-连环素（β-Catenin）信号通路对骨质疏松症（OS）大鼠的影响。方法：将78只SD大鼠随机分为对照组13只及造模组65只。造模组用双卵巢切除法建立OS模型,对照组予以假手术。造模成功者分为模型组、阿仑膦酸钠组及补骨脂素低、中、高浓度组,每组13只。模型组及对照组给予双蒸水,阿仑膦酸钠组给予0.2 mg/mL阿仑膦酸钠,补骨脂素低、中、高浓度组分别予0.4 mg/mL、0.8 mg/mL、1.6 mg/mL补骨脂素;各组灌胃剂量5 mL/kg,连续12周。检测比较骨密度（BMD）,骨小梁厚度（Tb.Th）、数量（Tb.N）及分离度（Tb.Sp）,血清及骨组织护骨因子（OPG）、骨钙蛋白（BGP）水平,以及骨组织低密度脂蛋白受体相关蛋白6（Lrp6）、糖原合酶激酶3β（GSK-3β）、β-catenin、Runt相关转录因子2（Runx2）mRNA表达水平。结果：与模型组比较,各组第4腰椎及左、右股骨BMD较高,Tb.Th、Tb.N较高、Tb.Sp较低,血清及骨组织OPG水平较高,BGP较低,骨组织Lrp6、β-catenin、Runx2 mRNA水平较高、GSK-3β mRNA较低,且补骨脂素组呈一定量效关系,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：补骨脂素能剂量依赖性地提高OS大鼠BMD,提高血清及骨组织OPG水平,降低BGP水平,增加骨组织骨小梁厚度和数量,降低骨小梁分离度,其作用可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

壮骨止痛方提取物对去势雌鼠Dkk1蛋白的影响

目的:观察壮骨止痛方提取物对去势大鼠Dkk1蛋白的影响,并探究其治疗骨质疏松症的具体机制。方法:60只3月龄的健康雌性SD大鼠,随机分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组、空白组,每组15只。壮骨止痛方组、模型组去势(去卵巢)后建立绝经后骨质疏松大鼠模型,假手术组去除卵巢周围相应体积脂肪。术后5d开始给药,13周后取血和骨组织,测定血清中雌激素(E2)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)含量变化、骨组织病理变化、骨小梁密度,以及骨组织中Dkk1、β-catenin蛋白的表达情况。结果:与模型组相比,壮骨止痛方能降低去势雌鼠血清BGP、CT含量,差异具有统计学意义(P0.05);壮骨止痛方组E2与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。壮骨止痛方组相比模型组,骨髓腔扩大不明显,且骨小梁形态较为正常;与模型组相比,壮骨止痛方组骨小梁密度有明显升高,具有显著性(P0.05);与模型组比较,壮骨止痛方组骨组织中骨组织Dkk1蛋白的表达降低、而β-catenin蛋白的表达增多,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:壮骨止痛方可能是通过下调去势雌鼠体内Dkk1蛋白表达,进一步直接影响β-catenin的表达,间接影响雌激素、降钙素等激素的变化,从而达到改善骨代谢紊乱来治疗骨质疏松症。     

补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组。空白组加入基础培养基(3.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);模型组加入诱导培养基(4.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5%洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5%补肾舒脊颗粒含药血清(0.2 ml)。28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P<0.05)。结论补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用。     

清热活血方药对CIA大鼠Wnt信号通路成骨细胞相关因子的影响

目的:分析清热活血方(QRHX)对类风湿关节炎大鼠Wnt信号通路相关因子表达的影响,探讨清热活血方药对CIA大鼠骨破坏的保护机制。方法:SD大鼠40只按随机数字表法分为正常组、模型组、清热活血方药组、依那西普组。通过滑膜病理切片观察各组大鼠关节滑膜病理改变,采用RT-PCR方法对各组大鼠滑膜DKK-1、β-catenin基因mRNA表达水平进行对比分析,通过ELISA检测各组大鼠血清DKK-1、β-catenin、TCF、LRP5的蛋白含量。结果:滑膜病理显示清热活血方药组大鼠滑膜中的炎症水平较模型组明显减轻,清热活血方药组大鼠滑膜中DKK-1mRNA表达水平和血清中DKK-1含量较模型组明显减少,β-catenin mRNA表达水平及血清β-catenin、TCF、LRP5含量与模型组比较显著升高。结论:清热活血方药能降低滑膜炎症水平,抑制Wnt信号通路中DKK-1细胞因子的表达,促进β-catenin、TCF、LRP5的表达,可能通过作用于Wnt/β-catenin通路在CIA大鼠骨破坏过程中发挥骨保护作用。     

补骨脂素对去势骨质疏松雌鼠TGF-β的影响

目的:探讨补骨脂素对去势骨质疏松模型大鼠转化生长因子-β(TGF-β)的影响。方法:将雌性SD大鼠72只随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇阳性对照组、壮骨止痛胶囊组、补骨脂素高剂量组、补骨脂素低剂量组,每组各12只。除假手术组外,其余各组大鼠制备去卵巢骨质疏松症病理模型,术后5d拆线后连续给药13周,每10d称体质量1次,根据体质量调整用药剂量。给药结束后处死大鼠,采用ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、TGF-β含量,提取股骨组织mRNA样本进行PCR反应,检测TGF-β基因的表达。结果:与假手术组比较,模型组血清E2水平明显降低(P0.01),表明造模成功;与模型组比较,假手术组、戊酸雌二醇阳性对照组、壮骨止痛胶囊组、补骨脂素高剂量组血清TGF-β水平及股骨组织TGF-β基因表达均增加,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:补骨脂素可能通过提高血清TGF-β水平、骨组织TGF-β基因表达发挥抗绝经后骨质疏松症作用。     

肺纤方对博来霉素诱导肺纤维化大鼠wnt3a、β-catenin、WIF1和LRP表达的影响

目的观察肺纤方对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠wnt3a、β-catenin、WIF1、LRP表达的影响,探讨其抗肺纤维化的作用机制。方法采用气管插管滴注博来霉素制作肺纤维化大鼠模型。将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、泼尼松组和肺纤方高、中、低剂量组,造模次日给予相应药物灌胃。于造模后第14、28日分2批进行动物处理,Western blot检测wnt3a、β-catenin、WIF1的蛋白表达,RT-PCR检测LRP的m RNA表达。结果与假手术组比较,第14、28日模型组大鼠肺组织wnt3a、β-catenin、LRP表达均显著升高(P0.05,P0.01),第28日WIF1表达显著降低(P0.05);与模型组比较,肺纤方中剂量组第14、28日大鼠肺组织wnt3a、β-catenin、LRP表达显著降低(P0.05,P0.01),WIF1表达显著升高(P0.05,P0.01)。结论肺纤方具有抗肺纤维化的作用,其机制可能与抑制模型大鼠wnt3a、β-catenin、LRP的过表达和增加WIF1的低表达有关。     

地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠学习记忆及海马基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨地黄饮子对慢性脑低灌注大鼠学习记忆及海马基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、地黄饮子大剂量组、地黄饮子小剂量组及养血清脑颗粒组,每组各10只。采用双侧颈总动脉结扎制作大鼠慢性脑缺血模型,假手术组同样分离双侧颈总动脉,但不予结扎。每日灌胃给药1次,给药容积10 mL/kg,地黄饮子大、小剂量组分别为20、10 g/kg,养血清脑颗粒为2 g/kg,连续8周。假手术组和模型对照组灌胃等容积蒸馏水。采用Morris水迷宫法进行大鼠学习记忆功能的测定。并免疫组织化学法测定MMP-2、MMP-9表达。结果以大鼠逃避潜伏期和跨越平台次数代表学习记忆能力,逃避潜伏期越短,跨越平台次数越多,记忆能力越强。模型对照组逃避潜伏期较假手术组长（P〈0.05）,跨越平台次数较假手术组少（P〈0.05）,说明结扎双侧颈总动脉模型可导致学习记忆功能下降。与模型对照组比较,地黄饮子组、养血清脑颗粒组逃避潜伏期均缩短（P〈0.05,P〈0.01）,跨越平台次数均增加（P〈0.05,P〈0.01）。与地黄饮子小剂量组比较,地黄饮子大剂量组、养血清脑颗粒组逃避潜伏期缩短（P〈0.05）,跨越平台次数增加（P〈0.05）。模型对照组海马组织MMP-2、MMP-9表达较假手术组增高（P〈0.01）。地黄饮子组、养血清脑颗粒组海马组织MMP-2、MMP-9表达均低于模型对照组（P〈0.05,P〈0.01）。地黄饮子大剂量组海马组织MMP-2、MMP-9表达低于地黄饮子小剂量组（P〈0.05）,养血清脑颗粒组海马组织MMP-2、MMP-9表达低于地黄饮子大剂量组（P〈0.05）。结论地黄饮子能改善慢性低灌注大鼠学习记忆力功能,可能与抑制炎症反应及细胞凋亡有关。     

寿胎丸对去势大鼠雌激素水平及骨形态计量学的影响

目的 观察寿胎丸对去势大鼠血清雌激素水平和骨形态计量学参数的影响。方法 84只雌性SD大鼠随机分为6组,除假手术组外,其余5组建立去势模型（均行双侧卵巢切除术）,寿胎丸高、中、低剂量组每天灌胃剂量分别为26.8,13.4,6.7 g·kg-1的药液,阳性对照药戊酸雌二醇组灌胃剂量为0.104 mg·kg-1的药液,假手术组与模型组予等量生理盐水灌胃。于术后12周处死动物,取静脉血检测血清雌二醇（E2）水平;获取右侧胫骨标本测定骨形态计量学参数。结果 与假手术组比较,模型组血清E2水平下降且差异具有统计学意义（P ＜0.05）;与模型组比较,寿胎丸高、中、低剂量组及戊酸雌二醇组血清E2水平均有明显升高（P ＜0.05）;寿胎丸高、中剂量组及戊酸雌二醇组血清E2水平与寿胎丸低剂量组比较差异均有统计学意义（P ＜0.05）。与假手术组及模型组比较,各给药组在骨矿化沉积率无明显变化（P \> 0.05）;与模型组比较,各给药组骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁密度、骨表面骨形成率、骨体积骨形成率升高,骨小梁分离度及破骨细胞数则降低,差异均有统计学意义（P ＜0.05）。血清E2水平与骨形态计量学中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁密度骨小梁分离度、骨表面骨形成率、骨体积骨形成率、破骨细胞数明显相关（P ＜0.05）。结论 雌激素水平与绝经后骨质疏松骨组织的微观结构改变密切相关。寿胎丸中、高剂量可提高血清E2水平,改善骨组织微观结构、抑制骨结构退化、促进骨形成、抑制骨吸收。     

瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死大鼠Wnt信号通路中β-链蛋白表达的影响

目的观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌梗死大鼠Wnt信号通路中β-链蛋白(β-catenin)表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死模型,造模成功的大鼠随机分为心肌梗死模型组和瓜蒌薤白半夏汤组,每批次每组10只。心肌梗死模型组大鼠给予0.9%氯化钠注射液2 m L/次,每日1次灌胃,瓜蒌薤白半夏汤组大鼠给予浓煎中药2 m L/次,每日1次灌胃。分别干预1、5、10、15 d共4个批次。另取健康清洁级雄性SD大鼠10只,未行手术治疗,留为假手术组。免疫组化的方法检测β-catenin,IPWIN软件检测β-catenin表达率。结果心肌梗死模型组及瓜蒌薤白半夏汤组大鼠的β-catenin表达在心肌梗死后1、5、10、15 d均较假手术组升高,并且这2组大鼠在心肌梗死后分别干预5、10、15 d的β-catenin表达与假手术组比较差异均有统计学意义(P0.01)。与心肌梗死模型组大鼠比较,心肌梗死后给予瓜蒌薤白半夏汤干预1、5、10、15 d 4批次大鼠的β-catenin表达差异无统计学意义(P0.05)。结论大鼠的Wnt/β-catenin信号通路可被心肌梗死激活。短期使用瓜蒌薤白半夏汤未见到显著的促进心肌梗死大鼠心肌细胞β-catenin表达的作用。     

桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠肾组织中Wnt系列因子影响的研究

目的通过桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号通路中的Wnt系列因子影响的动物实验观察,探讨该方治疗CRF的作用机理。方法 Wistar大鼠100只,7周龄,随机分为空白组、假手术组、模型组、治疗组,每组各25只。模型组与治疗组采用5/6肾切除手术的方法建立实验动物模型,空白组不予处理,假手术组仅做双肾被膜剥离。造模成功后,治疗组予桃核承气汤灌胃,其余各组予等量生理盐水灌胃,连续用药8周。Western blot技术检测大鼠肾组织中Wnt3a、Wnt5a、Wnt5b、Wnt8b、Wnt9b、β-catenin、E-cadherin的蛋白含量,HE染色光镜观察各组大鼠肾组织的病理变化。结果治疗组与模型组对比,肾组织中Wnt3a、Wnt5a、β-catenin蛋白含量显著降低(P0.05),Wnt5b、E-cadherin的蛋白含量显著升高(P0.05),Wnt8b、Wnt9b的蛋白含量无显著差异(P0.05),光镜下肾纤维化程度较模型组减轻。结论桃核承气汤可以延缓肾组织纤维化进程,该方治疗CRF的机制可能是调节Wnt系列因子抑制Wnt3a、Wnt5a、β-catenin蛋白和促进Wnt5b、E-cadherin蛋白的表达而实现。