自噬在心脏疾病中的研究

自噬是一个高度保守的蛋白质和细胞器分解过程,这个过程可使蛋白质再循环及清除衰老的细胞器,自噬与细胞内环境稳定及组织器官发育等多种细胞活动有关。近年来有研究表明自噬与多种疾病有关,如神经肌肉变性疾病、癌症及心脏疾病。在正常心脏中,存在着低水平的自噬活动,若自噬缺陷可引起心功能不全甚至心力衰竭,在心脏后负荷过重、缺血及缺血再灌注损伤中也可观察到自噬活动的增加,自噬的缺陷与增多都与疾病的进展有关,该文就自噬在心脏疾病中的相关研究作一综述。     

自噬在心脏疾病中的研究

自噬是一个高度保守的蛋白质和细胞器分解过程,这个过程可使蛋白质再循环及清除衰老的细胞器,自噬与细胞内环境稳定及组织器官发育等多种细胞活动有关。近年来有研究表明自噬与多种疾病有关,如神经肌肉变性疾病、癌症及心脏疾病。在正常心脏中,存在着低水平的自噬活动,若自噬缺陷可引起心功能不全甚至心力衰竭,在心脏后负荷过重、缺血及缺血再灌注损伤中也可观察到自噬活动的增加,自噬的缺陷与增多都与疾病的进展有关,该文就自噬在心脏疾病中的相关研究作一综述。     

自噬与糖尿病心脏病变

自噬是一种细胞应激和自我防御的机制,其主要生理作用是吞噬、降解变性的大分子物质及受损的细胞器,从而实现物质的再循环及细胞内环境的稳定.近年来有研究显示,自噬与糖尿病心脏病变发病有密切关系,自噬小体的生成及自噬与溶酶体解离功能紊乱在心肌细胞物质代谢紊乱、微血管病变、心肌纤维化等的发生、发展中发挥重要作用,被认为是糖尿病心脏病变发病机制之一.     

自噬和凋亡在脑缺血中的相互作用

自噬和凋亡是脑缺血时神经元死亡的2种重要方式,二者在缺血半暗带的相互作用可减轻或加重脑缺血损伤.文章对自噬和凋亡在脑缺血中的作用及其相互作用的潜在调节机制进行了综述.     

脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展

脊髓损伤是脊柱外科常见的严重疾患之一,其治疗一直是世界性难题。脊髓损伤后继发性损伤所引起的后果更严重,细胞自噬与凋亡在其调控过程中起重要作用。该文对近年来脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展作一综述。     

脂多糖对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响

目的研究脂多糖（LPS）对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法取处于对数期生长的INS-1细胞用于实验,分别用0．1、1．0、10．0mg／LLPS处理细胞,24h后用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测LPS对INS-1细胞增殖的影响,用二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）作为荧光探针检测细胞内活性氧的水平变化,应用Western blotting法检测细胞自噬体膜上自噬标志分子微管相关蛋白1的轻链3-Ⅱ（Map1LC3-Ⅱ）和凋亡标志蛋白聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶（PARP）切割带的变化。将INS-1细胞的自噬必需基因7（A增7）通过siRNA介导的RNA干扰手段进行沉默,然后以1．0mg／LLPS处理细胞,24h后应用Western blotting检测细胞中Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割带的水平。先用400μmoL／L的活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）处理INS-1细胞,1h后加入10．0mg／L的LPS,24h后应用Western blotting法检测细胞Map1LC3-Ⅱ蛋白和PARP切割蛋白的水平。组间数据比较采用方差分析和t检验。结果与对照组（0．755±0．030）比较,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组INS-1存活率降低,差异有统计学意义（分别为0．658±0．042、0．658±0．015、0．634±0．029,F=30．98,P〈0．01）;与对照组（0．447±0．012）相比,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组Map1LC3-Ⅱ蛋白水平增加,差异有统计学意义（分别为0．992±0．030、0．949±0．020、0．982±0．013,F=525．79,P〈0．01）;与对照组（0．055±0．001）相比,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组PARP切割蛋白水平增加,差异有统计学意义（分别为0．313±0．007、0．390±0．011、0．500±0．033,F=327．09,均P〈0．01）;与对照组比较,10mg／LLPS组活性氧产生明显增多。与对照组比较,转染Atg7siRNA组Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降,差异均有统计学意义（t=156．069、123．154、103．246,均P〈0．01）。与LPS10．0mg／L组比较,LPS10．0mg／L＋NAC组Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降,差异均有统计学意义（t=66．37、26．84,均P〈0．01）。结论LPS可诱导INS-1细胞的自噬和凋亡,且其所诱导的凋亡依赖于自噬的发生;活性氧参与了LPS诱导的INS-1细胞的自噬和凋亡。     

拓扑替康对食管癌EC9706细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨拓扑替康(TPT)对食管鳞癌细胞株(EC9706)自噬和凋亡的影响。方法使用20 mg/L TPT和(或)5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理人食管鳞癌细胞EC9706,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测TPT对食管癌EC9706细胞生长的抑制作用,单丹磺酰尸胺(MDC)法检测TPT对EC9706细胞自噬水平的影响,采用流式细胞仪技术检测TPT对EC9706细胞凋亡的影响,Western印迹测定TPT对EC9706细胞自噬相关蛋白Beclin1和凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响。结果流式细胞仪检测结果显示,TPT作用于EC9706细胞48 h后,TPT组、3-MA组及TPT+3-MA组细胞凋亡结率分别为(32.45±2.79)%、(7.58±1.12)%及(48.69±3.51)%。MDC染色结果显示TPT能够诱导细胞内自噬囊泡的出现,而3-MA能显著抑制这一现象。Western印迹结果显示对照组、TPT组、3-MA组及TPT+3-MA组Beclin1和Caspase-3蛋白的相对灰度值分别为0.62±0.06、0.91±0.12、0.47±0.04、1.04±0.08和0.54±0.05、0.84±0.11、0.42±0.03、0.71±0.07。结论 TPT康可以诱导食管鳞癌细胞自噬和凋亡的发生,而3-MA能够通过抑制自噬上调Caspase-3的表达增强对食管癌细胞的杀伤作用。     

TRPM7在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡和自噬的影响

目的 探究TRPM7在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡和自噬的影响。方法 收集2018年1月至2021年6月在张家港市中医医院进行手术治疗的46例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织标本,并选择胃黏膜上皮细胞株GES-1,以及胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901、HGC-27和MKN-45作为研究对象。采用实时荧光定量PCR法检测TRPM7在胃癌组织、癌旁组织、GES-1细胞及各胃癌细胞株中的表达水平,分析TRPM7的表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。将TRPM7小干扰RNA(TRPM7-siRNA,设为si-TRPM7组)和阴性对照（siRNA-NC,设为si-NC组）转染至MGC-803细胞,将空白质粒（设为Vector组）和TRPM7过表达质粒（设为TRPM7组）转染至MKN-45细胞。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用蛋白质印迹法检测各组细胞中LC3-Ⅱ和p62的表达水平,以及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）磷酸化水平。结果 与癌旁组织比较,TRPM7 mRNA在胃癌组织中的表达水平较高,差异有统计学意义（P&l...     

Sca-1~+心肌干细胞的研究进展

干细胞抗原1(Sca-1)是干细胞的一种重要表面标记物,体内许多干细胞都表达Sca-1。同样,心肌干细胞也表达Sca-1。目前研究发现,Sca-1+心肌干细胞能够分化为心肌细胞,对心肌梗死后心室重构与心肌再生具有明显作用,能够促进心脏的修复。因此,Sca-1+心肌干细胞有可能使心肌梗死的临床治疗取得实质性的进展。现综述了Sca-1+心肌干细胞的来源、分化、作用等方面。     

In Vitro Study on Mesenchymal Stem Cells： Anti-apoptotic Effects on Cardiac Myocytes

Objectives To investigate the anti-apoptotic effects of mesenchymal stem cells （MSCs） on hypoxic injured cardiac myocytes in vitro. Methods MSCs were isolated from bone marrow of Sprague-Dawley （SD） rats, and cardiac myocytes from neonatal rats. The rat cardiac myocytes were co-cultured with MSCs or MSC-conditioned media in anoxia （95% N2 ±5% CO2） for 72 hours. Cell apoptosis was measured by Hoechst 33258 staining. The expression of Bcl-2 and Bax in cardiac myocytes was tested by Western Blot. Results The apoptotic rate was 51.6% ± 2.4% when cardiac myocytes were cultured in continuous hypoxia and was significantly decreased when cardiac myocytes were cocultured with MSCs or MSC-conditioned media （ 15.1% ± 5.4% and 24. 0% ± 4.2% respectively, P 〈 0. 001 ）. The decreased expression of Bax in the cardiac myocytes was greatly related to the decreasing of apoptosis, but there was no difference in Bcl-2 expression among these groups. Conclusions Co-cultured MSCs showed significant anti-apoptotic effects on cardiac myocytes in continuous hypoxia. The mechanism may be the interact of cell to cell and paracrine of cytokines which effected the expression of Bax in the cardiac myocytes.     

纤维蛋白胶对骨髓源性心肌干细胞增殖、迁移和缺血缺氧后的保护作用

目的探讨纤维蛋白胶(FG)对骨髓源性心肌干细胞(MCSC)增殖、迁移和存活的作用,为临床应用干细胞移植治疗心肌梗死等缺血性疾病提供实验手段和理论依据。方法将MCSC接种于FG中制备FG-MCSC,经AO/EB染色选择合适浓度的FG,用细胞计数法检测MCSC在FG中的增殖,通过损伤和自然迁移实验评价MCSC从FG中的迁出。建立细胞缺血缺氧模型(OGD),用AO/EB染色和乳酸脱氢酶(LDH)泄漏法检测FG对MCSC的保护作用。结果 MCSC在低浓度FG中保持较高的活力和增殖能力。接种后1d和2d,仅有少量细胞从FG的刮除线边缘迁出。在接种后3d,有大量细胞从FG中迁出。经缺血缺氧处理后,MCSCOGD组中存活、凋亡和坏死细胞数目分别为14.09±2.05、61.11±5.20和24.80±4.99。与MCSC OGD组相比,FG-MCSC OGD组MCSC的存活数目(61.01±8.86)较高,凋亡(31.67±8.27)和坏死(7.33±2.70)细胞数目较低。MCSC经缺血缺氧处理后,FG-MCSC OGD组LDH的水平明显低于MCSC OGD组。结论低浓度FG作为一种天然生物材料可以为MC-SC的生长提供良好的微环境。在缺血缺氧条件下,低浓度FG能够保护MCSC免受缺血缺氧损伤,促进细胞存活。     

消瘤汤含药血清对人肝癌细胞Bel-7402增殖和凋亡的影响

[目的]观察消瘤汤含药血清对人肝癌细胞Bel-7402增殖和凋亡的影响。[方法]采用消瘤汤含药血清,应用血清药理学方法,选择不同浓度的含药血清体外培养人肝癌细胞Bel-7402 96 h。通过MTT法和细胞形态学观察检测细胞的增殖抑制率和细胞凋亡。[结果]MTT法检测表明,消瘤汤高、中、低剂量组与0.95%氯化钠（对照）组相比,对人肝癌细胞增殖均有抑制作用（P〈0.01）。细胞形态学检测表明消瘤汤各剂量组含药血清均可诱导细胞凋亡。[结论]消瘤汤能明显抑制肝癌Bel-7402细胞的增殖,其抑瘤作用有细胞毒作用和诱导细胞凋亡2种途径。     

Successful Treatment of Primary Cardiac Lymphoma by Rituximab-CHOP and High-Dose Chemotherapy with Autologous Peripheral Blood Stem Cell Transplantation

Primary cardiac lymphoma (PCL) is defined as lymphoma involving only the heart and/or pericardium, or with an intrapericardial location of the main tumor mass. It is an extremely rare type of lymphoma and has a poor prognosis because of diagnostic delay and the disease site. PCL is histologically characterized by a mostly diffuse large B-cell lymphoma. The median survival time has been reported to be 7 months. We present the case of a 55-year-old woman who presented with chest oppression and dyspnea on effort. Following a close examination, PCL with a high International Prognostic Index was diagnosed. She received 6 courses of R-CHOP therapy (rituximab, cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine, and prednisolone) and achieved complete remission. The patient then underwent a consolidation therapy consisting of high-dose chemotherapy including rituximab, followed by autologous peripheral blood stem cell transplantation. There were no complications, such as pulmonary embolism, fatal arrhythmia, or acute heart failure, throughout chemotherapy. Our experience indicates that this therapy is safe and effective and can improve the outcome of high-risk PCL.     

缺血缺氧性脑损伤对新生鼠脑内神经干细胞的影响

目的观察新生鼠缺血缺氧性损伤后皮层及海马神经干细胞的变化。方法采用新生7d龄SD大鼠制作新生鼠缺血缺氧性脑病模型（HIE），行免疫组化染色，巢蛋白（Nestin）标记神经干细胞。结果正常SD大鼠新生早期的皮层及海马存在一定数量的Nestin阳性细胞，随年龄增加而减少；缺血缺氧后．新生SD大鼠皮层损伤区及其周围、对侧镜区和双侧海马都出现Nestin阳性细胞增多，并以病灶边缘曼加突出，在皮层伤后3d即出现高峰，而海马的高峰期在伤后7d，然后都逐渐减少，至伤后28d均与正常组无差别。结论缺血缺氧能促使新生SD大鼠皮层及海马的神经干细胞增多。