电针治疗椎间盘退变疾病的实验研究进展

电针对椎间盘退变疾病有治疗作用,目前其实验研究较广泛。电针治疗椎间盘退变疾病起效机制主要包括抑制细胞凋亡,调控细胞外基质合成和分解代谢,影响炎症因子代谢和调节生长因子表达,从细胞分子水平干预蛋白酶类激活、炎症因子、生长因子等抑制椎间盘退变,延缓椎间盘疾病发展。     

中医药对退行性椎间盘各结构相关信号通路影响的实验研究进展

从椎间盘的不同结构:髓核、纤维环、终板三个方面,分别总结中医药对退行性椎间盘相关信号通路的影响.中医药治疗包括中药提取物、经典方剂、针刺、针刀等手段,在椎间盘退变过程中发挥减少细胞外基质降解、降低炎症反应、促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,进而延缓椎间盘退变的作用,而在3种椎间盘结构中均参与调节的信号通路包括MAPK、Wnt/β-catenin、NF-κB等经典信号通路.从分子水平研究椎间盘退变的机制,为实现椎间盘退变的中医药精准医疗提供依据.     

基于NF-κB通路探究椎间盘退变及中药治疗椎间盘退变的机制

目的 探讨NF-κB信号通路在椎间盘退变及中药治疗椎间盘退中的作用。方法 查阅近年来公开发表的相关文献,通过研究NF-κB信号通路、椎间盘退变及其中医治疗的相关资料,总结NF-κB信号通路在椎间盘退变及相关中药治疗椎间盘退中的作用。结果 椎间盘退变主要体现在髓核细胞数量的减少和细胞外基质代谢失衡,炎性反应细胞因子氧化应激反应等因素能通过激活NF-κB信号通路加速椎间盘退变;补肾活血类中药方能通过抑制NF-κB信号通路降低炎性反应和氧化应激反应,从而保护髓核细胞及细胞外基质,延缓椎间盘退变。结论 NF-κB信号通路的激活会加速椎间盘退变,补肾活血类中药方能通过抑制NF-κB信号通路缓解椎间盘退变进程。但目前研究仍存在一定的局限,还需要开展并深入相关实验以及临床研究,为实现椎间盘退变的精准治疗做好基础及临床准备。     

溶髓方对大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响

目的：观察溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板细胞凋亡的影响。方法：选取36只winstar大鼠,鼠龄6周,体质量为（100±20）g,随机分成假手术组、模型对照组、溶髓方实验组,每组12只。建立大鼠颈椎动办平衡失调模型,诱导椎间盘退变,造模1周后实验组予溶髓方中药灌胃1月,假手术组和模型对照组喂等量生理盐水。在术后9周、18周、36周处死每组四只动物,HE染色观察腰椎间盘细胞凋亡状况,TUNEL检测法计算细胞凋亡指数,评估椎间盘退变程度。结果：对照组中椎间盘细胞数量减少、细胞形态变化明显,细胞外基质中胶原水平减少,并出现大量裂隙,溶髓方可部分延缓这一过程：溶髓方可以部分抑制椎间盘细胞凋亡,随着培养时间延长,对照组各组椎间盘软骨终板的细胞凋亡指数明显升高,溶髓方则可抑制软骨终板凋亡细胞的增加。结论：溶髓方可抑制椎间盘软骨终板细胞的凋亡,对椎间盘具有保护作用。     

益气活血法对兔退变髓核中Fas/FasL的表达及基质代谢的影响

目的:观察益气活血法中药对兔退变髓核中Fas/FasL的表达及基质代谢的影响。方法:建立兔腰椎间盘退变的动物模型,随机分为益气活血法中药治疗组和生理盐水治疗的对照组,治疗后用病理切片观察髓核的组织学变化;测量髓核中蛋白多糖含量;应用逆转录PCR法检测治疗后髓核中Fas/FasL基因mRNA表达。结果:①两组动物治疗后病理切片显示髓核退变均明显,但治疗组软骨终板退变较轻,血管芽较多;②治疗组1、2月和对照组1、2月蛋白多糖含量均减少,两组间对比无显著差异(P>0.05);各治疗组内1、2月蛋白多糖含量的组内对比(P>0.05),具有显著差异。③治疗组和对照组的随时间延长Fas/FasL基因mRNA表达均增强,治疗组和对照组对比无显著差异(P>0.05);各组组内对比Fas/FasL基因mRNA表达增强,具有显著差异(P<0.05)。结论:本实验提示益气活血法中药在一定程度上能延缓椎间盘软骨终板退变的发展,但不能根本抑制或逆转髓核形态学退变的发生;不能抑制髓核内Fas/FasL基因的表达;不能抑制基质中蛋白多糖含量的减少。     

软骨终板退变机制的相关因素及其治疗的研究进展

终板分为骨性终板和软骨终板,软骨终板是与椎间盘相邻的透明软骨薄层,除了提供结构支持外,还调节椎间盘中的营养和代谢交换,将间盘所需的营养渗透入椎间盘。腰椎软骨终板退变对椎间盘的退变甚至腰椎间盘突出有重要影响,近年来软骨终板退变的相关研究成为国内外研究热点,深入研究软骨终板退变机制的相关因素可以为软骨终板及椎间盘退变的预防、治疗提供良好的思路。     

手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响

目的:观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。方法:建立兔颈椎间盘退变模型,25只成年新西兰家兔随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用光镜观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。结果:与正常对照组比较,模型组颈椎间盘中软骨下骨内的血窦数目明显减少,髓核中活细胞数目减少、排列紊乱。手法治疗、预防组均能不同程度地延缓软骨下骨内血窦数目及髓核活细胞数目的减少,但不能完全逆转椎间盘的退行性改变,且手法早期干预效果优于晚期干预。结论:手法干预能不同程度地延缓椎间盘组织结构的退行性改变。     

手法对实验性退变兔颈软骨终板超微结构的影响

为观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。选25只成年新西兰家兔建立颈椎间盘退变模型并随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用透射电镜观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。结果模型组软骨终板中出现大量的空泡变性软骨细胞及固缩软骨细胞,甚至溶解消失;胶原纤维排列极不规整,甚为松散,出现大量胶原溶解等病变。手法干预(手法预防组、手法治疗组)能不同程度地延缓软骨终板中软骨细胞和胶原的上述病变,并且手法早期干预的效果优于晚期干预。提示改善软骨终板营养可能是手法防治椎间盘退变的主要途径之一。     

中药复方延缓椎间盘退变体外实验研究进展

目的 综述近5年来中药复方延缓椎间盘退变(interverbral disc degeneration, IDD)体外实验的研究进展。方法 查阅CNKI、万方、PubMed(截止于2022年7月)公开发表的相关文献,从细胞选择、培养方式和作用机制三方面进行阐述。结果 中药复方延缓IDD体外实验对象主要集中在人、大鼠和兔的髓核、纤维环和终板细胞上。施加因素多取自临床常用的经方、验方,尤以补益肝肾及活血化瘀类为主。实验均取得了较为理想的结果,中药对IDD影响的机制多是从促进椎间盘细胞增殖与自噬、抑制其凋亡、抑制炎性因子释放与细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的降解等方面进行阐释,涉及的信号通路包括Wnt/β-catenin、NF-κB、MAPK、Fas/FasL、mTOR、PI3K/Akt等。结论 体外实验表明中药复方对IDD模型有明确的影响,其主要作用机制通过影响与IDD密切相关的信号通路、细胞增殖、凋亡与自噬、炎性因子释放与ECM的降解等得到阐释,但研究仍存在一定局限性。     

针刺对颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板结构及交界面血管芽的影响

目的观察针刺对颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板结构及交界面血管芽的影响。方法将60只SD雄性大鼠随机分为3组,空白组、模型组及针刺组,每组各20只。除空白组外,模型组及针刺组均建立颈椎间盘退变模型。针刺组采用电针治疗,其余2组不做处理。治疗3个疗程后,处死全部大鼠,对大鼠进行组织学观察,并观察软骨终板钙化层、非钙化层厚度,以及交界面血管芽数量。结果模型组软骨终板交界面血管芽数量较空白组减少(P0.01),说明造模成功;针刺组软骨终板交界面血管芽数量较模型组增加(P0.05)。模型组大鼠软骨终板钙化层厚度高于空白组(P0.05),非钙化层厚度低于空白组(P0.05),说明造模成功。针刺组大鼠软骨终板钙化层厚度低于模型组(P0.05),非钙化层厚度高于模型组(P0.01)。结论针刺可延缓颈椎间盘退变大鼠颈椎软骨终板钙化,减轻软骨终板钙化程度,增加血管芽数量,提高髓核营养供应,起到缓解疼痛、延缓椎间盘退变的作用。     

伸筋活血汤对低氧诱导因子-1α缺失小鼠椎间盘退变的影响

目的:观察伸筋活血汤对低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α缺失小鼠椎间盘退变的影响。方法:通过杂交繁殖获得同窝HIF-1α缺失小鼠和正常小鼠。取2、4、8周龄HIF-1α缺失小鼠及正常小鼠,每个时间点2种小鼠各取5只,处死后取L3~L5节段腰椎组织制备切片,分别进行HE染色和番红-固绿染色。取16只4周龄HIF-1α缺失小鼠,随机分为2组,每组8只,分别以伸筋活血汤和生理盐水灌胃。灌胃每次0.12 m L,每天1次,共30 d。处死小鼠取L3~L5节段腰椎组织制备切片,分别进行HE染色、番红-固绿染色及免疫组化染色后观察。结果:HE染色显示,与正常小鼠相比,2周龄HIF-1α缺失小鼠髓核占整个椎间盘组织的比例减少,髓核中的细胞仍以含有大液泡的脊索细胞为主,但已有大量髓核细胞变小,髓核内细胞结构排列稍紊乱;4周龄HIF-1α缺失小鼠椎间盘内的细胞种类和数量迅速下降,髓核细胞排列紊乱;8周龄HIF-1α缺失小鼠髓核细胞数量减少十分明显,纤维组织填充于髓核中,细胞外基质增加。番红-固绿染色显示,与正常小鼠相比,2周龄HIF-1α缺失小鼠椎间盘中聚集蛋白聚糖减少,4周龄HIF-1α缺失小鼠椎间盘中聚集蛋白聚糖减少更加明显,8周龄HIF-1α缺失小鼠髓核出现裂痕及钙化,髓核骨化明显。4周龄HIF-1α缺失小鼠经药物干预30 d后,HE染色结果显示,伸筋活血汤组小鼠椎间盘终板无明显破损和骨化,髓核细胞数量较多,排列较整齐;生理盐水组小鼠椎间盘髓核内细胞呈梭形,体积变小,数量明显减少,排列严重紊乱,细胞外基质增加,髓核中出现裂痕,纤维组织填充于髓核中,甚至出现终板破坏。番红-固绿染色结果显示,伸筋活血汤组小鼠骨和软骨终板染色明显,椎间盘髓核内细胞数量较多,椎间盘骨化现象不明显;生理盐水组骨和软骨终板染色较浅,出现裂痕及钙化,细胞数量极少。免疫组化染色结果显示,伸筋活血汤组聚集蛋白聚糖阳性染色的细胞数量明显较多,阳性信号多分布在细胞内;生理盐水组聚集蛋白聚糖阳性染色的细胞数量较少,阳性信号多分布在细胞外。生理盐水组聚集蛋白聚糖阳性染色细胞的灰度值小于伸筋活血汤组(129.889±9.839,154.333±9.622,t=0.200,P=0.000)。结论:HIF-1α缺失可导致小鼠椎间盘退变,伸筋活血汤能够延缓HIF-1α缺失小鼠的椎间盘退变。     

溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL-1β的影响

目的:观察溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL-1β的影响。方法:选取36只wista大鼠,鼠龄6周,体重为(100±20)g,随机分成假手术组、模型对照组、溶髓方实验组,每组12只。建立大鼠颈椎动力平衡失调模型,诱导椎间盘退变(假手术组仅作颈背后正中皮切开缝合),造模1周后实验组予以溶髓方中药灌胃1月,假手术组和模型对照组喂等量生理盐水。在术后9周、18周、36周处死每组四只动物,用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测椎间盘中白介素-1β含量,并在形态学上评定椎间盘退变程度。结果:对照组中椎间盘中白介素-1β含量明显升高,椎间盘细胞数量减少、细胞形态变化明显,细胞外基质中胶原水平减少,并出现大量裂隙,溶髓方可部分延缓这一过程:溶髓方可以部分抑制椎间盘细胞减少,随着培养时间延长,对照组各组椎间盘软骨终板的白介素-1β含量明显增加,溶髓方则可抑制IL-1β含量的增加。结论:溶髓方可抑制炎性因子白介素-1β含量的增加,阻止椎间盘细胞数量的凋亡,对椎间盘具有保护作用。     

补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板Fas/FasL表达的影响

目的：观察补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板凋亡基因Fas/FasL表达的影响,探讨其对椎间盘退变的防治作用。方法：参照文献＂异常应力负荷及椎间失稳法＂建立兔腰椎间盘退变模型,并用病理切片确认造模是否成功。将造模后兔随机分成模型组和治疗组,分别予生理盐水和补阳还五汤治疗;治疗后1、2月各处死4只兔取腰4/5椎间盘下位软骨终板,RT-PCR测定其中Fas/FasL的表达水平。结果：造模后2个月,椎间盘病理切片见纤维环结构破坏、髓核突出,证明造模成功。模型组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐增强,治疗组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐减少;与模型的比较具有显著差异（P〈0.05）。结论：补阳还五汤具有防治椎间盘退变的作用,抑制Fas/FasL基因在退变椎间盘软骨终板中的过度表达,抑制软骨终板内细胞凋亡是部分作用机制。     

独活寄生汤提取物治疗椎间盘退变性疾病机理实验研究

目的：探讨独活寄生汤治疗腰椎间盘退变性疾病的机理。方法：选取6-8月龄雄性新西兰白兔24只,随机分为3组各8只。退变组和中药组白兔制作椎间盘退变模型,中药组给予独活寄生汤的水煎剂喂养,退变组、对照组不予中药喂养,8周后,每组取1只白兔对其进行椎间盘切片观察;24周后,对每组剩余的白兔取L4-L5椎间盘染色观察,培养软骨终板细胞,进行细胞形态学的观察,并测其上清液中的白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。结果：对照组软骨终板矢面观,周边较厚而中央较薄,中央部血管芽较多且较膨大,周边部血管较少且较细小。对照组软骨终板结构,可见深层软骨细胞胞体较大,胞核相对较小,呈圆形或椭圆形而表层软骨终板细胞胞体扁平,胞核亦呈扁平状,在软骨终板与椎体股之间可见潮标。中药组软骨终板厚,细胞数目较多,血管芽直接与软骨终板接触,潮标未见前移。退变组软骨终板较对照组明显变薄,细胞数亦减少,潮标明显前移,血管芽周围钙化,包裹血管芽大部分。退变组软骨终板变薄,细胞数减少,染色较淡。中药组软骨终板细胞培养液中IL-6和TNF-α的含量均高于对照组和退变组（P〈0．05）,IL-1β的含量高于对照组（P〈0．05）,但低于退变组（P〈0．05）。结论：独活寄生汤提取物对腰椎间盘退变模型白兔腰椎间盘IL-1β、IL-6、TNF-α有促进作用,可能为其治疗腰椎间盘退变性疾病的机制之一。     

椎间盘退变中自噬与凋亡的分子关系研究进展

正椎间盘退变(IDD)是各种脊柱退行性疾病的病理基础,包括椎间盘突出症,椎体滑脱,椎管狭窄等,也是导致慢性腰背痛(LBP)的一个重要原因~([1-2])。一般认为细胞外基质(ECM)的丢失,椎间盘细胞减少和炎症反应在椎间盘退变中起重要作用~([3-4])。髓核细胞的减少是导致椎间盘退变的直接原因,随着髓核(NP)细胞过度凋亡,细胞外基质合成减弱,导致正常椎间盘结构和生理功能的破坏,进而加重椎间盘退变~([5-7])。近年来通过诱导髓核细胞自噬来拮抗凋亡,     

复方芪麝片对双前肢去势大鼠直立模型退变椎间盘的影响

目的：研究复方复方芪麝片对双前肢去势大鼠直立模型退变椎间盘形态及细胞外基质的影响。方法：1月龄SD大鼠双前肢90只（雌雄各半）,随机分为模型组、复方芪麝片组、空白对照组,每组30只（雌雄各半）,分别在术后4、6、8月随机提取10只复方芪麝片组大鼠进行灌胃给药一个月,并于术后5、7、9月处死三组大鼠,取下腰部椎间盘,并进行藏红和天狼猩红形态学染色、免疫组化分析以及实时定量Realtime．PCR检测。结果：形态学藏红染色显示复方芪麝片增加椎间盘高度,防止纤维环撕裂和板层紊乱情况,增加软骨终板非钙化层胶原基质,防止其排列紊乱;免疫组化染色见到,复方芪麝片可以明显增加椎间盘髓核细胞外基质中Ⅱ型胶原的蛋白表达,降低软骨终板x型胶原表达;实时定量Realtime．PCR分析发现复方芪麝片在各时间点可以均显著增加Col2almRNA的表达,在术后7月和9月降低Colloal,MMP3,MMP13和IL．1betamRNA表达。结论：本研究证实复方芪麝片可以改善直立造成的腰椎间盘的退变情况。     

芪麝颈康方对兔退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响

目的；观察芪麝颈康方对退变颈椎骨赘形成部位碱性磷酸酶活性的影响。方法：选用１０月龄新西兰兔，通过切除动态Ｃ２－Ｃ７棘上韧带，棘间韧带和分离椎旁两侧肌肉，建立颈椎退行性改变物动物模型。组织学观察颈椎椎体骨赘形成的部位，采用生物化学法分别检测颈椎间盘中软骨终板，髓核和纤维环中碱性磷酸酶的活性。结果：证实骨赘来源于软骨终板，中药组退变椎间盘软骨终板中磷酸酶的活性明显低于模型组。结论：芪麝颈康方可降低骨赘     

中医药干预基质金属蛋白酶表达治疗椎间盘退变研究进展

椎间盘退变是导致发生慢性腰痛的常见原因之一,作为脊柱疾患的常见病,其临床症状主要以腰背部疼痛及功能受限为主,严重影响着人类的身心与健康。因其发病机制复杂,目前尚未充分阐明,对于椎间盘退变的治疗一直是科学研究者及临床工作者关注的焦点。目前关于椎间盘退变的治疗方式主要包括非手术疗法及手术疗法,这些治疗方式可在一定程度上减轻患者的临床症状,但易诱发新的并发症,难以将椎间盘恢复至正常生理功能。近年来,随着基质金属蛋白酶在椎间盘退变组织中的研究不断深入,发现基质金属蛋白酶可作为椎间盘分子治疗靶标,通过降解椎间盘细胞外基质的含量及成分,调节其在椎间盘组织中的表达水平,以此来达到减缓椎间盘退变的进程甚至逆转椎间盘退变的发生。此治疗方式有望延缓因细胞外基质成分或含量改变而造成的椎间盘退变发生。近年来随着网络药理学及生物信息学研究的不断发展,大量研究者对中医药治疗椎间盘退变进行探究,发现中医药可通过抑制基质金属蛋白酶的表达,以此来减少细胞外基质的降解,从而减轻椎间盘退变的症状及减缓椎间盘退变发病进程。笔者就中医药干预基质金属蛋白酶表达治疗椎间盘退变的研究进展作一综述,以期为中医药应用于防治椎间盘退变提供...     

中性蛋白酶在椎间盘退变中的作用

中性蛋白酶在椎间盘退变中的作用彭宝淦贾连顺王拥军施杞＊上海长征医院骨科（２００００３上海）关键词椎间盘退变中性蛋白酶椎间盘退变已被公认为是引起脊柱退行性变的根本原因，但引起椎间盘本身退变的机理目前仍不清楚，椎间盘由纤维环、髓核及软骨终板构成，其主要...     

椎间盘退行性疾病的生物学治疗研究进展

椎间盘退行性变是引起下腰痛的一个主要原因。在椎间盘退变的早期,生物化学上的改变主要出现椎间盘内细胞数量减少、功能降低,细胞外基质降减增加,诱导椎间盘退变。生物学治疗方法主要包括直接注射生物活性因子、基因治疗、细胞或髓核移植及结合组织工程学方法治疗。主要目标是恢复椎间盘的正常生理功能。直接注射生物活性因子可增强椎间盘细胞的活性,阻止椎间盘退变,但作用效应期较短。基因治疗则是将适当的调节基因导入椎间盘细胞,对椎间盘基质代谢可起到长效的调节作用。组织工程学是应用生物相容性良好的载体回植替代原有退变的椎间盘,以达到治疗目的。本文就生物学治疗椎间盘退行性变技术的原理、目前应用情况及今后发展动态作一综述。