烫伤大鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群及细胞凋亡变化

严重烧(创)伤后肠道细菌、内毒素可经淋巴、血液途径移位,肠集合淋巴结生发中心大量淋巴细胞凋亡[1],提示肠道免疫屏障受损.笔者拟观察细菌经淋巴途径移位最后一个环节--肠系膜淋巴结(MLN)T淋巴细胞亚群及细胞凋亡情况,以了解肠源性感染时淋巴途径免疫状态.     

烫伤大鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群及细胞凋亡变化

严重烧(创)伤后肠道细菌、内毒素可经淋巴、血液途径移位,肠集合淋巴结生发中心大量淋巴细胞凋亡[1],提示肠道免疫屏障受损.笔者拟观察细菌经淋巴途径移位最后一个环节--肠系膜淋巴结(MLN)T淋巴细胞亚群及细胞凋亡情况,以了解肠源性感染时淋巴途径免疫状态.     

肠道部分缺血再灌注损伤诱发外周血淋巴细胞凋亡

目的：观察肠道部分缺血再灌注(I/R)损伤过程中外周血淋巴细胞凋亡及其在植物血凝素(PHA)刺激下增殖能力的变化。方法：大耳白兔55只,分为肠部分I/R组、假手术对照组、正常对照组,用自行设计的血流阻断器阻断SMA血流50%,维持4h,制作肠道部分缺血再灌注损伤动物模型。采用流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)测定外周血淋巴细胞凋亡变化,采用免疫组织化学方法观察外周血淋巴细胞caspase-3蛋白的表达,采用MTT比色法测定外周血淋巴细胞增殖能力。结果：肠道缺血期外周血淋巴细胞凋亡率明显升高,肠道再灌注期后外周血淋巴细胞凋亡比例骤然减少;外周血淋巴细胞caspase-3表达与凋亡改变呈相同趋势;肠部分I/R损伤后外周血淋巴细胞增殖能力明显降低。结论：肠道部分I/R损伤后,外周血T-淋巴细胞增殖功能明显受抑,外周血淋巴细胞凋亡变化与细胞内caspase-3的表达有关。     

高功率微波对小鼠免疫组织淋巴细胞影响的初步研究

目的：观察不同强度高功率微波(HPM)对小鼠免疫组织和外周血淋巴细胞的影响及其作用机制。方法：应用TUNEL和FCM(Annexin—V/PI双标法)技术研究小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和外周血淋巴细胞凋亡的发生规律。结果：①10～30mW/cm~2 HPM辐照后,C57小鼠外周血WBC出现降低,而淋巴细胞凋亡率明显升高,与WBC的变化呈较好的对应关系,且在0～15mW/cm~2内呈一定的剂量效应关系。②照后7d,C57小鼠免疫组织淋巴细胞凋亡率均出现明显升高,而在0～15mW/cm~2范围内与辐照剂量呈一定的量效关系。③不同剂量辐照后3d,129小鼠免疫组织淋巴细胞凋亡率均出现明显升高,而以脾组织淋巴细胞凋亡率与剂量呈一定的量效关系。淋巴结经15mW/cm~2辐照后3、7和14 d,其凋亡率的升高与照后时间显示一定的时效关系。结论：虽然对非热效应的生物学影响及其机制仍存在争议,然而本研究结果明确指出,微波对机体免疫机能影响的非热效应还是比较明显的,有关机制尚需进一步阐明。     

睾丸肿瘤与腹膜后淋巴结清扫术

睾丸的淋巴引流途径是经腹膜后、乳糜池、纵隔向上.睾丸非精原细胞生殖细胞肿瘤(NSGCTT)的主要转移途径是经淋巴转移,腹膜后是其主要转移部位,2/3的NSGCTT初诊时已有腹膜后转移,故腹膜后淋巴结清扫术(RPLND)是NSGCTT的必要治疗手段。     

中低强度电磁脉冲诱发大鼠淋巴细胞凋亡及其机制的研究

目的探讨中低强度EMP对大鼠淋巴细胞的损伤效应及其机制,为其防护提供依据.方法用本院动物中心饲养的Wistar大鼠(体重154±20g)共24只,随机分为对照、0.6×5、2.0×5和6.0×5万伏/m 4个组,每组6只.用本实验室建立的电磁脉冲发生源进行照射,每个剂量组在2min内重复照射5次.于照后24和48h分别取大鼠胸腺、脾脏和淋巴结制取细胞悬液并制成离心涂片,用原位末端标记法和麦格-姬姆萨染色检测凋亡细胞,用免疫组化技术检测Bax和Bcl-2凋亡相关蛋白的表达.结果①照后24h,0.6万伏组淋巴细胞即出现凋亡;随着照射场强增加,凋亡率持续升高,在6万伏组达到峰值,胸腺、脾脏和淋巴结淋巴细胞凋亡率分别为对照值的6.7、4.7和8.2倍.照后48h,亦出现相同的变化趋势,三种免疫组织经6万伏照射后其凋亡率分别为对照值的6.4、4.9和8.0倍,与照后24h相同,亦显示较好的剂量效应关系.②0.6万伏照后48h,胸腺、脾脏和淋巴结三种组织Bax阳性淋巴细胞数即出现明显升高,随照射剂量增大Bax蛋白表达逐渐增强,在6万伏时达到峰值,其阳性细胞数分别为对照值的6.6,8.6和4.2倍.与Bax表达呈现相反趋势,0.6万伏照射后,Bcl-2蛋白在三种免疫组织中的表达呈减弱趋势,且随照射场强增加下降愈明显,在6.0万伏时达最低值,其阳性细胞数分别为对照值的30%、24%和23%.结论①中低强度EMP照射后可引起大鼠淋巴组织出现明显的细胞凋亡,表明此种强度EMP亦同样能损伤淋巴细胞,导致机体免疫功能的降低.②EMP照射后,Bax和Bcl-2蛋白也出现规律性改变,表明二者在该强度EMP诱发的大鼠淋巴细胞凋亡调控中起着重要作用.上述实验为进一步探讨低水平的电磁辐射对人体的危害作用提供了一定参考.     

同种大鼠骨髓间充质干细胞诱导调节性B淋巴细胞的免疫负调节作用

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSC)诱导调节性B淋巴细胞(Breg细胞)的免疫负调节作用.方法 取DA大鼠MSC和Lewis大鼠B淋巴细胞共培养后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MSC和B淋巴细胞混合培养组上清液中白细胞介素10(IL-10)的水平和分泌因子的变化;采用流式细胞技术分析B淋巴细胞增殖、凋亡、表型的变化和对抗原特异性T淋巴细胞增殖的影响,采用激光共聚焦显微镜观察Breg细胞对免疫复合物吞噬能力的变化.结果 MSC成功诱导产生高分泌IL-10的Breg细胞产生,表型为CD19+ CD1d+ CD5+,MSC显著抑制B淋巴细胞的增殖,Breg细胞能抑制抗原特异性T淋巴细胞的增殖,并增加对免疫复合物的吞噬能力.结论 MSC诱导的Breg细胞具有明显的免疫负调节作用.     

肠饲保存肠粘膜免疫力不管体内MAdCAM-1阻断淋巴细胞回归

淋巴细胞对小肠粘膜下集合淋巴结的抗原敏感 ,移走经肠系膜淋巴结而回归至肠固有层 ,凡种粘附分子 ,包括粘膜地址素 (addressin)细胞分子 1(MAd-CAM- 1)、L 选择素、α4 β7整合素、淋巴细胞功能相关抗原 - 1(LFA- 1)和细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)等 ,调控粘膜免疫系统中淋巴细胞的运输 ,其中 MAd CAM-1是最关键分子之一 ,位于内皮细胞表面。设想缺乏肠饲的刺激可减少在肠相关淋巴组织 (GALT)和其他粘膜区的 MAd CAM- 1表达 ,导致淋巴细胞数减少和粘膜免疫功能的损害。作者观察不同营养途径对 MAd-CAM- 1表达的影响及 MAd C…     

肠淋巴途径与细菌移位

在严重应激状态下,肠道通透性增高,肠屏障功能发生障碍,可引起细菌及内毒素透过肠黏膜发生移位,导致全身性炎性反应综合征( systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、MODS甚至死亡.因此,阻断肠淋巴途径能够减轻由细菌移位引起的一系列组织损伤.本文对肠淋巴途径与肠道细菌移位的研究现状作一综述.     

烧伤早期家兔小肠细胞凋亡的研究

目的　探讨严重烧伤早期家兔小肠粘膜上皮细胞、淋巴细胞以及蚓状突淋巴细胞凋亡及其意义。　方法　采用日本大耳白兔 2 5只 ,随机分成 5组 :正常对照组、严重烧伤 3、6、12、2 4h组 ,每组均为 5只。各烧伤组制作成 30 %TBSAⅢ度烧伤动物模型 ,于伤后相应时相点对 5个部位的肠组织取材 ,行HE染色、电镜检查及用DNA切口末端标记技术 (TUNEL)行原位细胞凋亡检测 ,TUNEL切片作统计分析。　结果　HE染色烧伤组见较多凋亡细胞单个分散在小肠及蚓状突粘膜上皮层、粘膜固有层 (部分延伸到粘膜下层 )的淋巴小结和散在淋巴组织中 ;伤后 2 4h组有少数肠粘膜断裂 ;所有切片未见明显炎症及坏死现象。电镜显示凋亡小体形成。TUNEL法见大量呈蓝黑色的阳性细胞核 ,分布位置同HE染色。伤后 3h小肠及蚓状突细胞凋亡数较对照组已有明显增多 (P<0 .0 1) ,到 6和 12h显著升高达峰值 (P <0 .0 1) ,伤后 2 4h已下降接近 3h水平 ,但仍高于对照组 (P <0 .0 1) ;烧伤组家兔中段及远端小肠粘膜上皮细胞凋亡数均高于近端小肠 (P <0 .0 5 )。　结论　严重烧伤早期家兔小肠粘膜上皮细胞、淋巴细胞以及蚓状突淋巴细胞大量凋亡 ,中远端小肠粘膜上皮细胞凋亡较近端小肠显著 ,这些变化可能是烧伤后肠道细菌及内毒素移位的细胞学基础。     

进展期胃癌围手术期的淋巴免疫化疗

目的 研究淋巴免疫化疗对进展期胃癌的治疗作用。方法 实验组：术前经内镜胃粘膜下注射加手术时胃浆膜下注射化疗药及生物制剂与活性炭的混悬液。对照组：术前经股动脉插管灌注化疗药及生物制剂的水溶液（检测治疗前后外周血细胞免疫功能指标）。结果 淋巴免疫化疗后，两组外周血细胞免疫功能之间的差异有显著性（P＜0．05）。结论 经淋巴途径的免疫化学治疗能促进淋巴转移癌细胞凋亡的发生，提高机体的免疫功能。     

烫伤大鼠肠内毒素移位对淋巴细胞凋亡的影响

目的 探讨烫伤大鼠脾脏和肠系膜淋巴结（mesenteric lymph nodes,MLNs)淋巴细胞凋亡与肠道LPS移位的关系。方法 30％TBSAⅢ度烫伤Wistar大鼠及对照组,取门、腔静脉血用鲎基质显色法定量LPS;脾脏和MLNs切片以TUNEL－POD法染色,应用Cooldccd成象系统、Spot和IPP（Imagine proplus)4.10a软件进行凋亡细胞计数和透射光光密度分析。结果 烫伤后大鼠门、腔静脉血LPS水平显增加（P＜0．01）,伤后6h达峰值;门静脉LPS 3－48h显高于腔静脉（P＜0．01）。TUNEL－POD染色结果,MLNs伤前几乎未见凋亡淋巴细胞,但伤后显增多（P＜0．01）,以3h为明显;脾脏伤前凋亡淋巴细胞多集中在皮质,伤后显减少（P＜0．01）,24h后略有恢复。透射光光密度值分析表明,伤后24h内脾脏凋亡淋巴细胞的光密度值较伤前明显降低（P＜0．01）;伤后48h内MLNs凋亡淋巴细胞光密度值较伤前显增高（P＜0．01）。结论 大鼠严重烫伤早期即发生肠源性LPS血症;肠道移位LPS可诱导MLNs淋巴细胞大量凋亡,脾脏中凋亡淋巴细胞数量显减少,提示大鼠严重烫伤后可能存在脾脏免疫功能异常。     

CD14基因多态性与严重烧伤患者T淋巴细胞免疫功能的相关性研究

目的 探讨严重烧伤患者CD14基因多态性与T淋巴细胞免疫功能的关系.方法 采集77例烧伤体表总面积大于30%患者血标本,通过聚合酶链反应.限制性片段长度多态性方法检测CD14-159C/T基因多态性,观察其外周血T淋巴细胞增殖反应和白细胞介素-2(IL-2)的产生能力,并通过流式细胞仪检测T淋巴细胞CD4+/CD8+的比值、CD4+细胞的凋亡率.结果 严重烧伤后患者T淋巴细胞增殖能力明显下降,与CC纯合子患者比较,TT、TC基因型患者伤后第5、21、28天T淋巴细胞对丝裂原刺激增殖反应显著受抑(P<0.05或P<0.01).烧伤后携带TC、TT型患者IL-2产生一直处于较低水平,而CC型在伤后14 d分泌IL-2逐渐上升.与CC型患者比较,携带TT、TC型患者T淋巴细胞比值均降低,尤其在伤后第1、3、14、21、28天差异明显(P<0.05或P<0.01).三型CD3+CD4+T淋巴细胞凋亡率比较,TT型患者伤后第5、7、21天凋亡率显著高于CC型患者(P<0.05),TC型患者伤后7、14 d其凋亡率高于CC型患者(P<0.05),而,TT、TC型之间上述免疫功能指标比较均无显著差异(P>0.05).结论 CD14-159C/T多态性可影响大面积烧伤患者T淋巴细胞免疫功能状态,进而参与了严重感染并发症的发生与发展过程.     

微波烘疗调节肢体慢性淋巴水肿免疫的研究

目的　研究局部及全身免疫反应在淋巴水肿患者中的作用特点及微波烘疗对免疫反应的影响。方法　应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶聚合物 (APAAP)和亲和素 -生物素 -过氧化物酶 (ABC)免疫组织化学法 ,对2 7例慢性肢体淋巴水肿患者微波烘疗前后全身及局部浸润淋巴细胞表型进行检测。结果　淋巴水肿患者有外周血CD4 T淋巴细胞 ,以及 CD4 / CD8 比例的降低和真皮层血管周围 T淋巴细胞浸润 ;经两个疗程的微波烘疗后 ,CD4 T淋巴细胞上升 ,CD4 / CD8 比例恢复正常 ,真皮层小血管周围 T淋巴细胞浸润明显消退。结论　微波烘疗可调节慢性肢体淋巴水肿患者全身及局部免疫失衡。     

细胞凋亡与移植免疫(文献综述)

细胞凋亡是细胞和组织生理学的基础。近年来发现细胞凋亡在移植免疫中发挥重要作用 ,通过多种信号途径导致机体反应性 T淋巴细胞的凋亡诱导免疫耐受 ,或导致移植物细胞凋亡诱导免疫排斥。某些免疫抑制剂正是通过细胞凋亡途径起作用的。     

细胞凋亡与移植免疫(文献综述)

细胞凋亡是细胞和组织生理学的基础 ,近年来发现细胞凋亡在移植免疫中发挥重要作用 ,通过多种信号途径导致机体反应性 T淋巴细胞的凋亡诱导免疫耐受 ,或导致移植物细胞凋亡诱导免疫排斥。某些免疫抑制剂正是通过细胞凋亡途径起作用的。     

肝硬化肠道细菌移位的机制与防治

细菌移位（bacterial translocation）是指细菌与细菌产物从肠腔进入肠系膜淋巴结（mesenteric lymphnodes,MLN）和其他肠外器官与部位。革兰氏阴性细菌（如大肠杆菌和克雷白杆菌）、肠球菌和其他的链球菌在肠道细菌移位中发挥重要作用。肠道细菌移位发生通常经过三种途径：1）淋巴途径：     

免疫抑制与外科创伤的关系

感染并发症常常起因于外伤宿主免疫机能不全。本文旨在研究动物模型致伤后免疫反应受损的机制及其性质。材料和方法:淋巴细胞用梯度离心法取自C_(57) BL/6J(H-2b)和DBA/2J(H-2d)雄鼠脾脏。不同类型的淋巴细胞经各种分离技术进一步纯化。通过混合淋巴细胞培养,观察淋巴细胞增殖和诱发细胞毒性淋巴细胞的能力,以研究其免疫活力。     

养胃抗瘤冲剂对胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA的转录活性和凋亡相关蛋白影响的研究

目的 :观察养胃抗瘤冲剂对胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化的影响及在肿瘤转移中的意义。 方法 :采用KL型肿瘤免疫图像分析系统和流式细胞仪测定正常人和胃癌患者养胃抗瘤冲剂治疗前后外周血T淋巴细胞rDNA的转录活性和调亡相关蛋白 (Fas/FasL)的表达变化。 结果 :胃癌患者外周血T淋巴细胞rDNA转录活性明显降低 ,凋亡相关蛋白Fas表达升高 ,与健康人相比 ,差异显著 (P <0 0 1) ,随着病情的进展 ,这种趋势更为明显。养胃抗瘤冲剂治疗后外周血T淋巴细胞的Ag -NORs升高、Fas表达降低 ,与治疗前比较差异显著 (P <0 0 1)。 结论 :养胃抗瘤冲剂可以降低外周血T淋巴细胞的凋亡能力 ,对增殖能力则有增强作用 ,从而提高机体的细胞免疫功能。外周血T淋巴细胞rDNA转录活性和凋亡相关蛋白变化可以从淋巴细胞增殖和凋亡活性两方面评价肿瘤患者的免疫状态 ,在胃癌转移的临床监测中具有重要意义。     

细胞凋亡与移植免疫（文献综述）

细胞凋亡是细胞和组织生理滨基础。近年来发现细胞凋亡在移植免疫中发挥重要作用，通过多种信号途径导致机体反应性Ｔ淋巴细胞的凋亡诱导免疫耐受，或导致植物细胞凋亡诱导免疫排斥。某些免疫抑制剂正是通过细胞凋亡途径起作用的。