肠道病毒71型IgM抗体检测在手足口病早期诊断中的价值

目的 评估人肠道病毒71型(EV 71)IgM抗体在手足口病早期诊断中的价值.方法 自发病后连续每日采集2010年我院收治的38例手足口病患儿血清及咽拭子标本,分别检测EV 71IgM抗体、肠道病毒核酸、EV 71特异核酸.结果 38例手足口病患儿IgM抗体,按发病天数累加阳性率分别为:第1天60.5%、第2天71.1%、第3～4天81.5%、第5天92.1%、第6天92.1%;肠道病毒核酸阳性率为73.6%;EV 71特异核酸阳性率为60.5%.结论 EV 71 IgM抗体在手足口病发病的第1天即可出现,至第5天阳性率达到峰值,可作为手足口病早期诊断指标之一.     

肠道病毒71型IgM抗体检测在手足口病早期诊断中的价值

目的评估人肠道病毒7l型（EV71）IgM抗体在手足口病早期诊断中的价值。方法自发病后连续每日采集2010年我院收治的38例手足口病患儿血清及咽拭子标本,分别检测EV 71 IgM抗体、肠道病毒核酸、EV71特异核酸。结果38例手足口病患儿IgM抗体,按发病天数累加阳性率分别为：第1天60．5％、第2天71．1％、第3～4天81．5％、第5天92．1％、第6天92．1％;肠道病毒核酸阳性率为73．6％;EV71特异核酸阳性率为60．5％。结论EV 7l IgM抗体在手足口病发病的第1天即可出现,至第5天阳性率达到峰值,可作为手足口病早期诊断指标之一。     

菏泽市手足口病儿童病例肠道病毒71型抗体水平分析

目的分析手足口病低龄儿童病例的肠道病毒71型（EV71）感染状况。方法采集手足口病（HFMD）病例的血样,通过ELISA间接法检测EV71 IgG和IgM抗体并分析年龄、性别分布情况。结果收集到159例HFMD儿童病例的血样和资料,年龄为1—5周岁,平均EV71 IgG抗体阳性率为63．5％,无性别差异,平均IgM抗体阳性率为12．0％;EV71 IgG阳性率随着年龄增长而呈降低趋势,男童的IgM阳性率显著高于女童。结论本次HFMD疫情的病原体是EV71,男性儿童的EV71感染发病率高于女性儿童,结果可为HFMD防治提供参考依据。     

肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察

目的 筛选安全有效新型EV71候选疫苗,为将来EV71疫苗开发应用奠定基础.方法 以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点,不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB/c雌性小鼠,在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾静脉血,16周处死小鼠,收集小鼠脾脏细胞,检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能,筛选评价候选疫苗的疗效和安全性.结果 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高,4周后明显升高,8周后达高峰,至少维持16周以上;IgG亚类以IgG2a和IgG1为主.三种疫苗能诱导以γ-IFN和IL-4为主的细胞免疫反应.灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗,未发现疫苗相关不良反应.结论 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应,以灭活病毒疫苗疗效较好,需要将来攻毒实验可进一步验证其免疫力.     

IgM抗体检测对肠道病毒71型感染者诊断价值的探讨

目的 探讨IgM抗体检测对肠道病毒71型(EV71)感染者的诊断价值,并与核酸检测和中和试验方法进行比较分析.方法采用EV71 IgM抗体酶免检测试剂盒(EV71 -IgM试剂)、EV71核酸检测试剂盒(EV71-PCR试剂)和中和试验方法,检测115例EV71感染者的EV71 RNA、中和抗体和IgM抗体的水平,并进行比较性研究分析.结果 对115例EV71感染者,EV71 -IgM试剂对患者首份血清的检出率为80.9％ (93/115,95％ CI:72.5～87.6),对228份健康儿童血清,EV71 -IgM试剂的检出率为2.6％.同时,对病发1～2d采集的54份血清检出率为70.4％(38/54),显示了较好的早期诊断价值.EV71-PCR试剂对患者咽拭子标本的检出率为82.6％(95/115,95％ CI:74.4-89.0),与EV71-IgM试剂相比,差异无统计学意义.此外,EV71-IgM试剂与EV71-PCR试剂具有很好的互补性,两种方法联合使用可提高检测灵敏度约10个百分点达到92.2％.结论 EV71 -IgM试剂具有良好的早期诊断价值,与EV71-PCR试剂联用可提高诊断率.     

肠道病毒71型实验室诊断研究进展

人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)属于小RNA病毒科,基因组为单股正链RNA,最早是于1969 -1970年间在美国加利福尼亚州发生中枢神经系统症状的婴儿粪便中分离得到[1],之后世界上许多国家相继报道了EV71感染的流行,HFMD与EV71感染的关系也受到了广泛的重视.EV71与柯萨奇病毒(coxsackievirus)引起的手足口病不同,其感染性强、致病率高,是目前除脊髓灰质炎病毒以外导致婴幼儿神经系统疾病感染最重要的病原体,感染后可导致手足口病、无菌性脑膜炎、肺炎、疱疹性咽峡炎等,以上症状在患者中所占的比例分别为83％、11.1％、0.6％和1.2％[2].     

宁夏2009年肠道病毒71型基因特征分析

目的 分析2009年宁夏回族自治区手足口病（Hand-Foot-and-Mouth Disease,HFMD）患者中肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV71）分离株的基因特征.方法 2009年,从宁夏自治区344例HFMD病例中采集的385份标本,用人横纹肌肉瘤（Human Rhabdomyosarcoma,RD）细胞对标本进行肠道病毒分离培养;采用型特异性RT-PCR对阳性分离物中的EV71病毒进行鉴定;对鉴定的EV71毒株VP1编码区进行核苷酸序列测定分析.结果 共分离到肠道病毒126株,其中58株为EV71（46%）,对其中46株EV71的VP1编码区序列进行测定和分析.宁夏分离株与EV71的A和B基因型代表株核苷酸序列同源性分别为81.7%～82.8%和83.1%～85.2%,氨基酸序列同源性分别为93.9%～95.9%和96.2%～97.9%;与C基因型的C1、C2、C3、C4a、C4b和C5亚型代表株核苷酸序列同源性分别为88.3%～90.6%、88.3%～90.1%、87.8%～89.0%、94.2%～98.9%、91.8%～94.1%和86.7%～89.1%;氨基酸序列同源性分别为97.9%～99.6%、97.9%～99.3%、97.6%～98.9%、97.9%～100%、98.6%～99.6%和97.9%～98.9%.在系统发生树上,这46株毒株与C4基因型代表株聚为一簇,属于C4亚型中的C4a分支.结论 2009年EV71的C4a亚型在宁夏有较广泛的流行,是宁夏流行的绝对优势基因亚型,C4a也是我国2005年以来流行的优势基因亚型.     

深圳5例肠道病毒71型手足口病病毒株遗传衍化分析

目的调查来源于2008年深圳5例EV71（Enterovirus71,EV71）型手足口病患者的5株肠道病毒71型的分子流行病学特点及其分子进化关系。方法通过病毒分离培养得到5株肠道病毒71型分离株,并对其进行全基因组核苷酸序：列测定,通过生物信息学软件分析,与既往其他国家地区分离株进行全基因序列分析比较,以及进化树分析。结果通过对VP1和VP4基因序列分析,5株病毒株均属于C4基因亚型。5株EV71分离株在全长核苷酸和氨基酸水平上差异都较小,其核苷酸和氨基酸同源性分别高于93．0％和98．0％,进化树分析提示2008深圳分离株与2004深圳株同源性最为接近,与2008安徽阜阳流行株和1998深圳株亦相距很近,死亡病例株与2008安徽阜阳株距离同源性最近（同源性为99．1％和96％）。结论推测这起疫情是由同一个病毒传播链引起的,本次流行株可能系1998深圳株演变而来。     

青海省分离到肠道病毒71型及其VP1区基因特征分析

目的 研究2008年青海省手足口病（Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD）的致病病原体中肠道病毒71型（Human Enterovirus 71,HEV71）的VP1区基因特征.方法 采集青海省HFMD患者的粪便、疱疹液和咽拭子标本共335份,并进行病毒分离,然后对阳性分离株病毒进行肠道病毒血清型别的分子定型.对分离到的HEV71阳性分离株进行VP1编码区基因扩增,核苷酸序列测定和同源进化分析.结果 在335份临床标本中,共分离到45株阳性病毒分离物,其中30株鉴定为HEV71（占66.7%）,是主要病原体.对30株HEV71进行VP1区核苷酸序列测定后,分析发现它们在VP1区核苷酸水平和氨基酸水平上有一定差异,同源性分别在95.2%～100.0%和96.6%～100%之间.它们与1998年以来在我国分离的HEV71在核苷酸和氨基酸水平上的同源性都较高.与其他35株各基因型和基因亚型的HEV71代表株构建的亲缘进化树中显示,青海省HEY71分离株与C4亚型代表株聚为一簇,属于C4基因亚型C4a进化分支.结论 青海省从HFMD病例中分离到HEV71,也确认了青海省HFMD的病原体HEV71流行株的基因型为C4基因型中的C4a进化分支,并且存在多个传播链.     

我国深圳地区手足口病患者肠道病毒71型的分离与鉴定

肠道病毒７１型（Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ７１;ＥＶ－７１）自１９７４年首次从患有中枢神经系统疾病的患者标本中分离后［１］,世界上许多国家和地区相继报道了该病毒的流行。近年来,ＥＶ－７１病毒的流行（特别是在亚洲地区的流行）、呈逐渐上升的趋势,日益...     

北京地区与手足口病相关的非EV71、非CoxA16型肠道病毒的分子特征分析

目的 了解北京地区引起手足口病的非EV71、非CoxA16型肠道病毒的病原构成及优势型别VP4区遗传特征分析.方法 收集2009年4月-12月检测为非EV71、非Cox16型肠道病毒的手足口病患者咽拭子标本共45份.提取病毒核酸,用巢式RT-PCR法扩增病毒VP4区序列,对PCR阳性扩增产物进行测序,通过与GenBan...     

Clinical features of severe cases of hand,foot and mouth disease with EV71 virus infection in China

Introduction

Hand, foot and mouth disease (HFMD) caused by EV71 infection has become one of the major public health issues in China, which deeply affects children''s health. The prevention and control of EV71 is a challenge currently because there is no safe and effective vaccine or antiviral medications available.

Material and methods

A case control study was conducted in a designated hospital to compare severe and mild cases of patients infected with the EV71 virus. Demographic information along with clinical features of HFMD was collected through a standardized questionnaire. Multi-factorial logistic regression was used to analyze independent associations between potential risk factors and severe HFMD.

Results

There were 120 cases (60 cases and 60 controls) collected. The male-to-female ratio was 1.3: 1 in the case group and 1.7: 1 in the control group. Multi-factorial logistic regression revealed that the main risk factors for severe cases were highest body temperature being ≥ 38.5°C (OR = 9.45, 95% CI: 2.07–43.11, p < 0.05), first visited a village level clinic (OR = 4.72, 95% CI: 1.15–19.45, p < 0.05), etc.

Conclusions

Close surveillance combined with laboratory testing should be in place during the epidemic period of HFMD. Grass root level medical facilities and training of clinical and laboratory staff should be reinforced so that the diagnostic and treatment capacity can be improved.     

手足口病患儿血浆循环DNA水平的变化

目的 探讨循环DNA能否作为手足口病（hand foot and mouth disease,HFMD）重要脏器早期损害的实验室指标.方法 采集78例HFMD患儿发病3日内和恢复期静脉血,采用双重荧光定量PCR技术检测血浆DNA水平,同时检测血糖、超敏C反应蛋白（high-sensitive CRP,hs-CRP）及血白细胞.同期采集30例健康体检儿童静脉血作为对照组.结果 健康儿童血浆循环DNA水平为（6.57±4.67） ng/ml,普通病例和重症病例HFMD患儿治疗前循环DNA水平分别为（11.51±7.75）和（ 20.59±10.67） ng/ml.普通病例和重症病例循环DNA水平均显著高于健康儿童（P =0.021;0.000）,而且重症病例显著高于普通病例（P=0.011）.重症HFMD患儿治疗后循环DNA水平显著降低（P=0.033）,而普通型患儿治疗后循环DNA水平无显著变化.重症HFMD患儿血糖和hs-CRP 水平在治疗前均显著高于普通病例（P=0.045,0.011）,普通病例血白细胞、血糖和hs-CRP水平在治疗前后均无显著变化.HFMD患儿外周循环DNA水平与hs-CRP呈显著正相关（P =0.021）,但与血糖、白细胞无显著相关性.结论 血浆循环DNA不但可以作为重症HFMD病例早期识别的指标,也可作为重症病例疗效的监测指标.     

菏泽市2011年手足口病病原学检测分析

目的 明确2011年引起菏泽市手足口病(HFMD)的病原体型别及分布特征.方法 采集临床诊断为手足口病病例的粪便或咽拭子样本,用Real-time PCR方法进行肠道病毒通用(EV)型、EV71型、CoxA16型的核酸检测,并对结果进行分析.结果 389例HFMD临床诊断病例样本检测,肠道病毒核酸阳性376例,检出率9...     

维C银翘片对小儿手足口病治疗效果的临床分析

目的 观察维C银翘片对小儿手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的临床治疗效果.方法 选取来我院儿科就诊并确诊为手足口病的患儿100例为研究对象,按完全随机原则分为两组:研究组和对照组,每组50例.对照组采用利巴韦林进行治疗,研究组则采用维C银翘片进行治疗,比较两组患儿的流行病学资料和临床治疗效果指标.结果 此次研究共收集男性手足口病患儿65例,女性患儿35例.患者的年龄范围为10个月～7岁,平均年龄为(2.8±1.8)岁,所有患儿中均有皮疹的发生,其中研究组患儿皮疹持续时间为(2.5±1.6)天,对照组患儿皮疹持续时间为(2.2±1.0)天.两组患儿中仅有48名在皮疹出现时伴随着发热症状,其中研究组有28名,发热持续时间为(2.2±1.1)天,对照组有20名,发热持续时间为(2.1±1.0)天.两组患儿在年龄、皮疹持续时间和发热持续时间上均无统计学差异(P＜0.05).经治疗后两组的有效治愈率无统计学差异(X2=1.382,P＞0.05).研究组患儿的退热时间(t=-4.734,P＜0.05)和退疹时间(t=-3.311,P＜0.05)均要短于对照组,但两组在口腔溃疡的痊愈时间上无明显的统计学差异(t=-1.169,P＞0.05).结论 在取得和抗病毒西药产生的同样治疗效果的基础上,维C银翘片可以明显缩短患儿退热和退疹时间,但在患儿口腔溃疡痊愈时间方面无明显优势.     

2008年深圳地区手足口病病原学调查

目的 研究2008年深圳地区手足口病病原体EV71和CoxA16感染情况,为手足口病的防治提供依据.方法 应用RT-PCR技术检测307例手足口病患儿标本病原体EV71、CoxA16基因,将PCR产物测序,并应用ChstaIW2在线分析软件进行序列分析、进化树分析.结果 不同标本中EV71的阳性率分别为:大便标本24.4%(75/307)、咽拭子为7.8%(24/307)、外周血12.5%(1/8);CoxA16的阳性率分别为,大便13.8%(28/203),咽拭子11.0%(20/181),其中EV71和CoxA16同时为阳性的有3份(0.98%);脑脊液标本未检测到EV71和CoxA16.与标准株BrCr序列比对分析,测序的14例标本中,8例的EV71新出现多个位点变异,其中2例标本的A2528G变异导致氨基酸改变,即N595D,1例标本的A2714G变异引起氨基酸改变,即1658V.进化树分析显示,有2例标本的病毒株与anhui毒株亲缘关系较近,与标准株BrCr及深圳株SHH02-6、SHZH02-40、SHZH03-58等亲缘关系较远;而其余12株与上述毒株亲缘关系较远.根据文献报道的EV71基因分型方法分析,测序的14株EV71基因型为C型.结论 在引起2008年深圳手足口病病原体中相当的比例是EV71,且可能部分是anhui病毒株的入侵.     

烟台地区手足口病931例流行病学及临床特征分析

目的 了解烟台地区手足口病住院病例的流行病学及临床特征.方法 回顾性分析我院2009-2010年住院的手足口病患儿的流行病学及临床资料.结果 931例中,5岁以下儿童881例,占94.6％,男女之比为1.5∶1;全部患儿(100.0％)均有皮疹,840例(90.2％)患儿发热,神经系统受累者121(13.0％)例.病例集中就诊于4-9月份,共计828例,占88.9％;月病例数与月平均气温呈正相关(r =0.887,P＜0.001).单因素分析显示,22(2.4％)例重症病例中农村儿童比例、发热持续时间、血清CRP水平和空腹血糖水平均显著高于普通病例;多因素分析发现,只有发热持续时间和空腹血糖水平是重症病例的独立预测因素,其比值比OR(95％ CI)分别为1.491(1.170～1.901)和1.124(1.016～1.245),P值分别为0.001和0.024.结论 本地区手足口病好发于5岁以下儿童,发病高峰为4～9月份,与本地区月平均气温正相关;发热持续时间和空腹血糖水平是重症病例的独立预测因素.多数患儿只要早诊断、早治疗,预后一般良好.