大鼠中脑导水管周围灰质—中缝大核—三叉神经脊束核尾侧亚核通…

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴－树突触，另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内它神经元之间形成多种触联系，本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行     

大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶酚胺能投射

本文应用ＨＲＰ逆行追踪与酪氨酸羟化酶样免疫细胞化学结合法研究了大鼠中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部的儿茶酚胺能投射。在中脑导水管周围灰质内，ＨＲＰ逆标并呈酪氨酸羟化酶样阳性的双标记细胞分别占由中脑导水管周围灰质向中缝大核和巨细胞网状核α部投射细胞的１８％和２０％，这些双标记细胞亘中脑导水管周围灰质全长存在于其腹外侧区和内侧区腹侧部。结合生理学研究的结果，讨论了这些儿茶酚胺能投射细胞的性质和机能。     

糖尿病大鼠中脑导水管周围灰质nNOS免疫阳性神经元的变化

糖尿病患者常并发慢性周围神经病变,表现为感觉异常。一氧化氮(NO)缺乏导致周围神经供血不足以及由此引起的感觉传导异常可能与之有关。但对于中枢神经是否参与感觉障碍?与糖尿病时感觉传导异常的关系如何,仍有许多未知。中脑导水管周围灰质(PAG)是内源性镇痛系统的关键结构,其背外侧区富含神经元型一     

大鼠丘脑束旁核和外侧缰核向中脑导水管周围灰质和中缝大核…

将Ｆａｓｔ Ｂｌｕｅ（ＦＢ）和Ｄｉａｍｉｄｉｎｏ Ｙｅｌｌｏｗ（ＤＹ）分别定向注入中脑导水管周围灰质和中缝大核，在丘脑束旁核和外侧缰核内侧部见到ＦＢ单标、ＤＹ单标及ＦＢ／ＤＹ双标神经元。在丘脑束旁核，双标神经元占该核三种标记神经元总数的１３．１％；在外侧缰核内侧部，双标神经元占三和中标记神经元总数的１８．６％。双标记神经元呈梭形、三角形和椭圆形，胞体的直径约为１５￣３０μｍ。     

高血压大鼠中脑导水管周围灰质内nNOS样阳性神经元的变化

目的：观察高血压大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)样阳性神经元数量的变化。方法：用双肾双夹法建立高血压大鼠模型,ABC法显示PAG内nNOS样阳性神经元并进行定量分析。结果：nNOS样阳性神经元分布于PAG的背外侧区。PAG内nNOS样阳性神经元的数量、光密度在对照组各时期无明显变化;在高血压大鼠7d时的数量略减少,光密度略下降;而在30d、70d则数量、光密度逐渐减少,与对照组比较差异显著。结论：中脑PAG内nNOS样阳性神经元及阳性产物的减少可能与其对心血管功能活动、感觉信息传导的影响以及高血压的形成和发展有关。     

高乌甲素在大鼠中脑导水管周围灰质的镇痛机制

目的观察高乌甲素(LA)能否通过上调中脑导水管周围灰质(PAG)中P2X3受体表达和功能,对烧伤疼痛产生镇痛作用。方法建立Ⅱ°烧伤大鼠模型,给予腹腔注射LA 6mg/kg·24h,Von Frey测痛仪检测机械痛阈值(MWT);Western blot检测P2X3受体蛋白表达;观察干预P2X3受体蛋白的表达和功能后对LA镇痛作用的影响。结果大鼠烧伤后MWT下降(P0.001),经LA治疗后MWT上升(P0.001),PAG中P2X3受体蛋白表达上调(P0.001)。下调P2X3受体蛋白表达后减弱LA镇痛作用;P2X3受体激动剂和拮抗剂分别增强和减弱LA的镇痛作用。结论 LA通过上调PAG中P2X3受体表达和增强P2X3受体功能,促进机体内源性镇痛,对烧伤疼痛大鼠产生镇痛作用。     

大鼠中脑导水管周围灰质向终纹床核投射的5—羟色胺能神经元…

本文将ＨＲＰ注入一侧终纹床核，又将Ｆｏｒｍａｌｉｎ导入胃内造成损伤，通过ＨＲＰ呈色、抗５－ＨＴ免疫组化染色，在中脑导水管周围灰质发现七种不同标记或免疫反应阳性细胞，即ＨＲＰ逆行标记、５－ＨＴ样阳性和ＦＯＳ样阳性细胞，ＨＲＰ－５ＨＴ、５－ＨＴ／ＦＯＳＨＲＰ／ＦＯＳ双重标记或免疫反应阳性细胞以及ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ三重标记或免疫反应阳性细胞。ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ细胞数量很少，出现于中脑导水管周     

自发性高血压大鼠中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的变化

目的观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverats,SHR)中脑导水管周围灰质内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元的变化。方法取SHR和京都种威斯特大鼠(Wistar-Koytorats,WKY)大鼠各30只,分别于3月(14周)龄,6月龄和12月龄测血压并处死,ABC免疫细胞化学方法显示nNOS阳性神经元。结果SHR血压随鼠龄的增长逐渐升高,于12～14周龄时血压在高位稳定,且均高于WKY大鼠(P<0.05)维持在[(20.8±1.1)～(26.3±1.0)]kPa(P<0.05);WKY大鼠各时期血压无明显差异,维持在[(13.7±1.6)～(15.1±1.7)]kPa。中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元以小细胞为主,突起有2-4个,许多朝中脑水管方向延伸。定量结果显示,SHR大鼠nNOS阳性神经元随着血压升高呈逐渐减少的趋势,12月龄与3月龄和6月龄相比均有显著差异(P<0.01),而各个时期WKY大鼠PAGnNOS阳性神经元均无明显变化。结论SHR中脑导水管周围灰质nNOS阳性神经元的减少可能通过影响延髓的血压调节中枢调控高血压的发生,并有可能与高血压的痛觉过敏有关。     

一氧化氮合酶神经元在大鼠中脑导水管周围灰质和中缝核簇内的定位研究

研究用一氧化氮合酶在组织化学方法对大鼠中脑导水管周围灰质和中缝核簇一氧化氮合酶阳性神经元的精确定位分布进行了系统的观察，一氧化氮合酶阳性神经元胞本和纤维主要密集分布于中脑导水管周围灰质脑段的背外侧核以及中段和尾段的腹外侧核，中缝背核以及线形核内也观察到大量的一氧化氮合酶阳性胞体和纤维，在中缝正中核和中缝隐核的内可见中等量的一氧化氮合酶阳性神经元胞体和纤维，在中缝大核内仅见到少量的一氧化氮合酶阳必酶     

大鼠中缝大核向脊髓投射神经元与神经降压素能终末的突触联系

神经降压素(NT)是中枢下行抑制系统的重要神经活性物质。本研究运用免疫组织化学与逆行追踪法相结合的双标技术,在电镜下观察NT能终末与中缝大核(NRM)向脊髓投射神经元的突触联系。在光镜下可见NT阳性纤维和终末散在分布于NRM,但未见NT阳性神经元;将HRP注入腰髓背角后,在NRM内可见比较密集的HRP逆标神经元。在电镜下可见NT阳性终末与HRP逆标神经元的胞体和树突形成以非对称性为主的轴-体突触和轴-树突触。上述结果说明NT可能调控NRM向脊髓背角投射神经元的活动,借此对伤害性信息向中枢的传递发挥抑制效应。     

大鼠丘脑束旁核和外侧缰核向中脑导水管周围灰质和中缝大核的分枝投射──荧光素双标记法研究

将ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）和ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）分别定向注入中脑导水管周围灰质和中缝大核，在丘脑束旁核和外侧缰核内侧部见到ＦＢ单标、ＤＹ单标及ＦＢ／ＤＹ双标神经元．在丘脑束旁核，双标神经元占该核三种标记神经元总数的１３．１％；在外侧缰核内侧部，双标神经元占三种标记神经元总数的１８．６％．双标记神经元呈梭形、三角形和椭圆形，胞体的直径约为１５～３０μｍ．     

大鼠中缝大核下行投射纤维与三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑投射神经元之间的突触联系

本研究分别用逆行和顺行追踪相结合及逆行追踪与免疫组织化学反应相结合的双标记技术对中缝大核下行投射纤维和５ ＨＴ 样阳性终末在三叉神经脊束核尾侧亚核内的分布及其与向丘脑投射神经元之间的突触联系进行了观察。将ＨＲＰ注入丘脑腹后内侧核,证明ＨＲＰ逆标神经元主要见于三叉神经脊束核尾侧亚核的Ⅰ、Ⅲ层;将顺行标记物ＰＨＡ Ｌ 注入中缝大核,证明ＰＨＡ Ｌ顺标纤维和终末也主要见于尾侧亚核的Ⅰ层,Ⅱ层内仅有少量ＰＨＡ Ｌ 顺标终末;免疫组织化学反应的结果显示５ ＨＴ 样阳性终末也主要存在于尾侧亚核的Ⅰ和Ⅱ层,其它部位仅散在分布。在电镜下观察到：（１）三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅰ层的ＨＲＰ逆标神经元的胞体和树突分别与ＰＨＡ Ｌ顺标终末形成轴 体突触和轴 树突触,其中大部分为对称性突触,非对称性突触较少;（２）尾侧亚核Ⅰ层ＨＲＰ逆标神经元的胞体和树突也分别与５ ＨＴ 样阳性终末形成轴 体突触和轴 树突触,这些突触联系也以对称性突触为主。本研究的结果表明：中缝大核的下行投射纤维主要终止于三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅰ层,对此层内向丘脑投射的神经元可能主要发挥抑制作用,而５ ＨＴ 是中缝大核下行投射纤维的主要神经活性物质。     

大鼠中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核通路的电镜研究

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴树突触。另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内其它神经元之间形成多种突触联系。本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行投射的终末与中缝大核内的神经元成分之间还形成比较复杂的突触联系，并对之进行了讨论。     

大鼠腰骶髓后连合核SP受体免疫阳性神经元与SP免疫阳性终末的突触联系

应用免疫组织化学双重反应的方法研究了大鼠腰骶髓后连合核内ＳＰ受体免疫阳性神经元在光、电镜下的特征及其与ＳＰ免疫阳性终末的突触联系。结果证明，ＳＰ免疫阳性终末和ＳＰ受体阳性胞体及树突均密集分布于后连合核区。在光镜下双重免疫反应阳性结果显示二者重叠分布，且可见大量的ＳＰ样免疫阳性终扣与ＳＰ受体阳性胞体或树突紧密接触。电镜下证明ＳＰ受体免疫阳性产物不仅位于突触后部位而且分布于胞体和树突的非突触部位，有４２％的ＳＰ受体阳性树突与ＳＰ阳性终末形成突触连接。在此未发现ＳＰ受体免疫阳性终末。通过一系列实验证明：腰骶髓后连合核神经元接受由ＳＰ介导的外周伤害性信息的传入，且其主要为盆腔脏器内脏初级传入成分。     

大鼠中脑导水管周围灰质-大中缝核-脊髓通路——顺行溃变和HRP逆行追踪结合法的电镜观察

本文用海人酸注入中脑导水管周围灰质(PAG)和HRP注入脊髓(SpC)相结合的方法在电镜水平对PAG-NRM-SpC通路进行了研究。在大中缝核(NRM)内可见四种突触:(1)溃变轴突终末与HRP逆标胞体形成轴-体突触;(2)溃变轴突终末与非HRP标记的远端树突形成轴-树突触;(3)HRP顺标轴突末梢与非HRP标记的树突和HRP逆标胞体形成轴-树和轴-体突触。我们认为:PAG-NRM-SpC间接通路在NRM中可能有单突触和通过中间神经元两种联系方式。NRM和SpC之间有往返联系。     

脊髓灰质向中缝大核的纤维投射——HRP法

本实验用微玻管将50％HRP 0.02微升注入12例大白鼠中缝大核,从颈髓到骶髓均可见到标记细胞,腰段较多;分布于双侧Ⅱ板层至Ⅹ板层,以Ⅶ板层为最多,其次为Ⅴ板层,Ⅳ板层居第三位,总的分布为Ⅶ层>Ⅴ层>Ⅳ层>Ⅲ层>Ⅷ层>Ⅹ层>Ⅵ层>Ⅸ层>Ⅱ层。标记细胞形态有圆形、卵圆形、多角形及梭形等。多数在20—40微米之间,占标记细胞总数的61％,大于40微米者占12％,小于20微米者占27％。本实验证明脊髓灰质向中缝大核的投射较为广泛,为中缝大核针刺镇痛的机理提供了形态学依据,同时讨论了脊髓灰质—中缝大核纤维联系的生理意义。     

大鼠中脑中央灰质和中缝背核向伏核和三叉神经脊束核尾侧亚核的分支投射——荧光素双标记法研究

将碘化丙啶(PI)和双苯甲胺(Bb)分别注入同侧的伏核和三叉神经脊束核尾侧亚核,在中脑中央灰质和中缝背核内见到双标和2种单标神经元。双标神经元占3种标记神经元总数的9％,PI单标神经元占58％,Bb单标神经元占33％。双标神经元多位于中脑中央灰质中、尾段的腹外侧区、内侧区腹侧部和中缝背核内;PI单标神经元的分布同双标神经元;Bb单标神经元除位于上述区域外,还可见于背外侧区和背侧区。位于注射区同侧的标记神经元多于对侧,标记神经元以中型梭形和三角形为主。     

大鼠中缝背核及中缝正中核内的VIP、GABA样触液神经元

本文将ＣＢ－ＨＲＰ注入侧脑室，用ＣＢ－ＨＲＰ逆行迫踪与免疫细胞化学相结合的方法，对大鼠脑干内的中缝背核及中缝正中核的远位触液神经元进行了定性研究。结果表明：中缝背核内存在ＶＩＰ样、ＧＡＢＡ样免疫反应阳性的触液神经元；中缝正中核内亦存在少量ＶＩＰ样、ＧＡＢＡ样免疫反应阳性触液神经元。它们的形态和数量各异。本文首次报道中缝背核和中缝正中核内远位触液神经元的化学性质，为探索其机能意义提供了形态学依据。