黄芪注射液对大鼠扭转复位后睾丸组织的保护作用

目的:探讨黄芪注射液对雄性Wistar大鼠扭转复位后睾丸的保护作用。方法:30只大鼠随机分为假手术组(A组)、睾丸扭转复位组(B组)、黄芪注射液治疗组(C组),每组10只,Turner法建立单侧睾丸扭转复位模型,原位缺口末端标记法检测各组睾丸组织中生殖细胞凋亡,化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪注射液治疗组与睾丸扭转复位组比较,SOD含量明显升高,MDA含量明显降低,生精细胞凋亡指数明显降低。睾丸扭转复位组、黄芪注射液治疗组与假手术对照组比较,SOD含量明显降低,MDA含量明显升高,生精细胞凋亡指数明显升高。结论:黄芪注射液可减少大鼠睾丸扭转复位后睾丸组织的双侧睾丸生殖细胞凋亡,对扭转复位后睾丸生殖细胞有保护作用。其机理可能与提高抗氧化酶活性及减少氧自由基的产生从而减轻大鼠睾丸扭转复位后的缺血再灌注损伤有关。     

原花青素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用及机制研究

[目的]探讨原花青素对大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的保护作用.[方法]SD大鼠随机分为假手术组(A组)、脊髓打击损伤组(B组)、原花青素治疗组(C组).A组行T8椎板切除术,不伤及脊髓.B、C组采用改良Allens撞击法制备大鼠T8急性SCI模型.C组术后立即腹腔注射原花青素100 mg/kg,A、B组术后立即腹腔注射等量的生理盐水.分别于术后不同时间点评价大鼠后肢运动功能,检测脊髓匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量改变,观察脊髓组织病理学变化.[结果]术后A组大鼠后肢运动功能恢复.术后C组大鼠后肢运动功能较B组均有所改善,72 h后肢运动功能恢复更为显著(P＜0.01).术后48 hB组脊髓组织SOD活性较A组明显降低(P＜0.01),而MDA含量较A组明显增加(P＜0.01);应用GSPE后,术后48hC组脊髓组织SOD活性较B组明显升高(P＜0.01),脊髓组织MDA水平较B明显降低(P＜0.01);SCI后脊髓组织TNF-α含量、MPO活性均随时间推移逐渐增高;各时间点C组脊髓TNF-α含量、MPO活性较B组均有统计学意义(P＜0.01);A组大鼠各检测点脊髓组织形态结构均正常;B、C两组72 h切片变化最为显著;B组可见神经组织多灶性出血、大量神经元坏死、尼氏体溶解消失、核固缩变小及炎性细胞浸润;C组可见局部出血点、细胞轻度肿胀,胞质均匀及少量炎性细胞浸润.[结论] GSPE可明显改善大鼠运动功能,抑制氧化应激、炎症反应和细胞凋亡等,对SCI有神经保护作用.     

生脉注射液对不同周龄大鼠睾丸扭转复位后睾丸损伤影响的研究

目的:探讨生脉注射液对不同周龄大鼠睾丸扭转复位后睾丸损伤影响的差异。方法:3、6、12周龄健康雄性SD大鼠各16只,随机分成睾丸扭转复位+注射生脉注射液组(实验组)和睾丸扭转复位+注射生理盐水组(对照组),每组8只,建立睾丸扭转动物模型(左侧阴囊切开,绕精索顺时针扭转睾丸720°2h),并于手术后24h处死,测定各组大鼠睾丸组织内总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量。结果:与各自对照组比较,3、6周实验组大鼠左侧睾丸组织中T-AOC、SOD活性和MDA含量均无显著性改变(P>0.05);12周实验组大鼠左侧睾丸组织中SOD、T-AOC明显升高,而MDA含量显著降低,差异均具有显著性(P<0.05)。结论:生脉注射液对睾丸扭转复位后的缺血再灌注急性损伤有保护作用,但对不同周龄大鼠的再灌注损伤保护作用不同,存在年龄相关性差异,对较大周龄大鼠的急性保护作用较为明显。     

低温对大鼠睾丸扭转后睾丸抗氧化能力影响的研究

目的:探讨低温对睾丸扭转后其抗氧化能力的影响。方法:24只健康青春期SD雄性大鼠随机分为3组:A组为睾丸扭转组,B组为睾丸扭转加低温组,C组为对照组,每组8只。建立单侧睾丸扭转模型。术后第14d采集睾丸。化学比色法测定其总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的含量。光镜观察睾丸组织学变化。结果:B组T-AOC明显高于A组(P<0.01),而低于C组(P<0.01);B组MDA含量低于A组(P<0.01),而高于C组(P<0.05)。结论:低温可抑制睾丸扭转复位后氧自由基的产生及其引发的脂质过氧化反应,提高扭转睾丸的生存力。     

大鼠睾丸扭转损伤后白藜芦醇对损伤睾丸的保护和修复的研究

目的探讨不同白藜芦醇(resveratrol,Res)剂量对大鼠睾丸扭转损伤复位后的超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(CAT),丙二醛(MDA),白介素-6(IL-6)及睾丸脑红蛋白(neuroglobin,NGB)的影响。方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为扭转复位组为A组;白藜芦醇低剂量(25mg/kg)为B组;白藜芦醇高剂量(50mg/kg)为C组;对照组为(D)组。按Turner法建立单侧睾丸扭转模型。每组根据设定处理方式的不同分别进行处理。扭转复位术后48h,采集左侧睾丸并进行指标(SOD、cAT、MDA及IL-6含量)检测;采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡指数(AI);HE染色及Johnsen评分评估睾丸组织病理改变;电镜观察睾丸组织内生精小管及生精细胞超微改变;RT-PCR法检测睾丸组织中NGB mRNA的表达情况。结果睾丸扭转损伤后,MDA为(2.890±6.5I)mg/L,IL-6为(31.221±7.02)u g/L明显升高,SOD为(240.985±8.19)mg/L,CAT为(1.006±0_31)mg/L及NGB mRNA为(0.35±0.01)明显减少,睾丸组织细胞人量凋亡。应用白藜芦醇后能改善上述改变,且随剂量增大,炎症改变叫显减轻:脑红蛋白基因表达量明显增高,其中A组;B组;C组;D组NGB mRNA含量分别为0.35±0.01;0.42±0.13;0.81±0.19;0.55±0.41,且组间两两比较均有统计学意义(P0.05)。结论白藜芦醇埘大鼠睾丸扭转具有保护作用,随剂量增中,其保护作用更加显著,同时具有提高抗氧化酶系统的抗氧化及降低血清炎症因子能力,其机制可能是通过诱导NGB mRNA表达而实现。     

低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后ICAM1表达的影响及生精功能的保护作用

目的:探讨低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后的生精功能的保护作用,以及对细胞间粘附分子1(ICAM1)表达的影响。方法:将100只青春期的雄性SD大鼠(体重140~160 g)随机分为4组,每组25只。4组大鼠分别扭转左侧睾丸720°2 h,建立单侧睾丸扭转动物模型,各组做如下处理,A组:常温+生理盐水;B组:低温+生理盐水;C组:常温+地塞米松;D组:低温+地塞米松;术后48 h采集睾丸,通过HE染色光镜观察睾丸组织病理学改变、TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡、Western印迹检测ICAM1的表达。结果:HE染色光镜下见4组大鼠扭转侧睾丸组织均有不同程度损伤,其中A组睾丸损伤最为明显,其余3组扭转侧睾丸得到不同程度保护;睾丸组织ICAM1 Western印迹检测结果:A组扭转侧(左侧)睾丸组织ICAM1蛋白表达量(0.68±0.03)高于B组(0.49±0.06)、C组(0.46±0.09)、D组(0.17±0.08),差异具有显著性(P0.05、P0.05、P0.01);凋亡细胞染色:细胞核呈深棕黄色或棕褐色,A组扭转侧睾丸可见大量生精细胞凋亡,凋亡指数AI[(33.13±3.21)%]明显高于B组[(17.12±5.23)%](P0.05)、C组[(14.13±2.03)%](P0.05)及D组[(9.05±1.03)%](P0.01)。结论:低温联合地塞米松能显著增强睾丸组织抗损伤能力,较好地保护扭转复位后睾丸的生精功能及降低ICAM1的表达。     

低温对大鼠睾丸扭转复位后生殖细胞凋亡的影响

目的 探讨低温对大鼠睾丸扭转复位后生殖细胞凋亡的影响。方法 24只健康青春期SD雄性大鼠随机分为三组:A组为睾丸扭转组,B组为睾丸扭转加低温组,C组为对照组。建立单侧睾丸扭转模型。术后第14天采集睾丸。原位缺口末端标记法(TUNEL)检测其生殖细胞凋亡指数(AI),光镜下观察睾丸组织学变化。结果 B组AI明显低于A组(P<0.01),而高于C组(P<0.01)。结论 低温能够提高扭转睾丸耐缺血能力,减少睾丸扭转复位后生殖细胞凋亡。     

他达拉非对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨5型磷酸二酯酶抑制剂他达拉非在大鼠睾丸缺血再灌注模型中的保护作用。方法:将84只健康成年雄性SD大鼠随机分成4组,A组:假手术组;B组:小剂量他达拉非组;C组:大剂量他达拉非组;D组:安慰剂组。每组21只,B、C、D组建立右侧睾丸扭转复位模型(720°,2 h)。术后立即予A、B组按他达拉非剂量为0.5 mg/(kg·d)灌胃,C组按他达拉非剂量为2 mg/(kg·d)灌胃,D组用等剂量的生理盐水灌胃,用药3、7、14 d后,取各组7只大鼠扭转侧睾丸,检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并光镜检测睾丸组织病理学参数。结果:B组[3 d:(254.46±7.43)n U/mg prot;7 d:(278.49±8.33)n U/mg prot;14 d:(317.99±3.31)n U/mg prot]、C组[3 d:(277.12±8.80)n U/mg prot;7 d:(309.40±2.14)n U/mg prot;14 d:(320.39±4.72)n U/mg prot]SOD活性均显著高于同期D组[3 d:(223.21±4.65)n U/mg prot;7 d:(231.45±4.16)n U/mg prot;14 d:(248.28±5.74)n U/mg prot],MDA含量均显著低于同期D组。C组3、7 d的SOD活性显著高于同期B组(P0.01),而MDA含量显著低于同期B组(P0.01),14 d时的SOD与MDA两组间没有显著性差异(P0.05)。睾丸组织的病理学改变:A组睾丸组织未见明显损伤,B组3、7、14 d之间病理学参数(生精上皮层数、睾丸结构得分、生精小管直径)存在显著差异(P0.01),B组14 d时和C组7 d时测得的生精上皮层数、睾丸结构评分、生精小管直径与A组14 d时没有显著性差异。结论:他达拉非可明显改善睾丸扭转后的缺血再灌注损伤,改善程度与用药时间、用药剂量呈明显的相关性。     

低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后eNOS表达及生精细胞凋亡的影响

目的:探讨低温联合地塞米松对睾丸扭转复位后的保护作用,以及对eNOS表达及生精细胞凋亡的影响。方法:将80只青春期SD大鼠随机分为4组,每组20只。4组大鼠分别扭转左侧睾丸720°2 h,建立单侧睾丸扭转模型,随后各组做如下处理,A组:常温+生理盐水、B组:低温+生理盐水、C组:低温+地塞米松、D组:常温+地塞米松;术后48 h采集睾丸,通过HE染色光镜观察睾丸组织病理学改变、免疫组化法检测eNOS表达、TUNEL法检测睾丸生精细胞凋亡。结果:HE染色光镜下见4组大鼠扭转侧睾丸组织均有不同程度损伤,其中A组睾丸损伤最明显,其余3组扭转侧睾丸得到不同程度保护;睾丸组织eNOS免疫组化检测结果:A组扭转侧(左侧)睾丸组织阳性细胞数及阳性细胞着色强度明显强于B、C、D 3组,差异具有显著性(P<0.05、P<0.01、P<0.01);凋亡细胞染色:细胞核呈深棕黄色或棕褐色,A组扭转侧(左侧)睾丸可见大量生精细胞凋亡,凋亡指数AI(31.12±4.68)明显高于B组(16.58±6.22)(P<0.05)及C(8.60±1.15)、D组(13.52±3.06)(P<0.01)。结论:睾丸扭转复位后的缺血再灌注损伤可导致生精细胞凋亡增加、睾丸生殖能力下降;应用低温联合地塞米松能显著增强睾丸组织的抗损伤能力,较好地保护了扭转复位后睾丸的生精功能。     

姜黄素对受X线辐射损伤雄性大鼠睾丸组织保护作用的研究

目的探讨姜黄素（CUR）对大鼠睾丸受X线辐射损伤的保护作用。方法选取雄性SD大鼠60只,体重160～180g,随机分为4组。B组（单纯辐射组）、C组（辐射＋溶剂对照组）及D组（辐射＋CUR组）大鼠进行剂量为2.0Gy X射线一次性全身照射,对照组（A组）不进行照射。C组大鼠于辐射开始1h后给予腹腔注射二甲基亚砜;D组于辐射开始1h后给予腹腔注射姜黄素溶液。照射1周后将所有大鼠处死。采用TUNEL法检测生殖细胞凋亡;检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSHPx）活性及丙二醛（MDA）含量。结果 B组及C组SOD和GSHPx活性明显降低,MDA含量明显升高,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。而CUR能有效升高SOD和GSHPx活性并降低MDA含量（P〈0.01）。B组及C组睾丸脏器系数明显低于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。CUR能有效增加睾丸脏器系数（P〈0.01）。B组及C组凋亡指数明显高于A组（P〈0.01）,而CUR可以使凋亡指数显著下降（P〈0.01）。结论本实验为CUR作为治疗睾丸辐射损伤的有效物质提供了组织学及生化依据,为临床预防和治疗睾丸辐射损伤提供了理论依据。