不同临床类型小鼠肝炎模型T细胞亚群的初步研究

目的 探讨3型鼠肝炎病毒(MHV-3)感染不同品系小鼠所致不同临床疾病类型小鼠肝炎模型后体内T细胞亚群的动态变化.方法 取Balb/cJ和A/J小鼠各8只,腹腔注射100 pfu 3型鼠肝炎病毒(MHV-3),采用流式细胞仪检测感染后0、24、48、72 h外周血、脾细胞悬液以及肝脏组织中T淋巴细胞亚群包括CD3 CD4 CD8-、CD3 CD4-CD8 及CD3 CD4-CD8-T(DN T) 细胞的细胞数及各自在T淋巴细胞中所占比率.结果 Balb/cJ小鼠于感染后24 h外周血、脾脏以及肝脏T淋巴细胞中DN T细胞比率明显升高直至小鼠3 d后全部死亡,CD3 CD4 CD8-和CD3 CD4-CD8 T淋巴细胞比率相应下降;A/J小鼠感染后24～96 h外周血和脾脏T细胞各亚群变化不明显.结论 两种不同品系小鼠感染MHV-3 后的不同转归及DN T 细胞比率的不同改变提示DN T 细胞可能在病毒性肝炎发生、发展中起着一定的作用.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞移植对自身免疫性脑脊髓膜炎大鼠的保护作用

目的观察输注CD4~+CD25~+调节性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型大鼠后脑和脊髓组织的保护作用及相关机制。方法取SD大鼠30只,随机均分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(CD4~+CD25~+调节性T细胞输注),对EAE大鼠进行神经功能评分及体质量测量,通过病理学HE染色和免疫组化观察脑和脊髓炎症浸润,实时荧光定量PCR(qPCR)检测鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 m RNA水平表达。结果实验组SD大鼠神经功能评分明显改善,体质量明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻,鼠脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23 mRNA表达下降,而Foxp3 mRNA表达增加(P0.05)。结论 CD4~+CD25~+调节性T细胞通过调节免疫系统的脑和脊髓IFN-γ、IL-17、IL-23和Foxp3 mRNA水平的表达对EAE起保护作用。     

微囊化异种坐骨神经组织移植对脊髓损伤大鼠T淋巴细胞亚群的影响及行为学观察

目的观察移植微囊化兔坐骨神经组织对脊髓损伤大鼠外周血中T淋巴细胞亚群的影响及后肢运动功能恢复情况。方法88只成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为微囊组、细胞悬液组和正常对照组。于术后第1、3、7、14、28d,运用流式细胞仪检测大鼠外周血中T淋巴细胞亚群变化及通过BBB评分法进行后肢运动功能评价。结果细胞悬液组大鼠外周血中CD4+T细胞数于术后第3、7、14和28d较正常对照组有升高,于术后第7、14和28d较微囊组有明显升高;该组大鼠外周血中CD8+T细胞数于术后第7、14和28d较正常对照组和微囊组有升高。而术后微囊组各时相CD4+T细胞数与CD8+T细胞数较正常对照组均无明显变化。术后第14及28d时,微囊组大鼠后肢BBB评分高于细胞悬液组。结论微囊化异种坐骨神经组织移植可以有效地阻止大鼠CD4+T细胞和CD8+T细胞的激活和增值,并能促进后肢运动功能恢复。     

人羊膜间充质干细胞对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的疗效及免疫调节作用

目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型的治疗效应和免疫调节作用。方法分离、培养hAMSCs,流式细胞术(FCM)检测其免疫表型;用豚鼠脊髓匀浆+完全弗氏佐剂+百日咳毒素复制大鼠EAE模型;模型动物随机分为正常对照组、模型组、培养基组、hAMSCs治疗组和泼尼松治疗组,每组6只。hAMSCs治疗组经双侧侧脑室移植5×105个hAMSCs;采用Kono评分法动态观察行为学变化;采用HE染色、免疫荧光染色观察脑和脊髓病理改变以及hAMSCs在脑和脊髓内的分布;采用FCM检测外周血淋巴细胞亚群,采用流式微球阵列法(CBA)检测血浆细胞因子的含量。结果 hAMSCs治疗后EAE大鼠行为学评分逐渐减低(P0.01),脑和脊髓炎性细胞浸润减轻。hAMSCs移植第3周,大鼠脑和脊髓组织可见较多人细胞核抗原阳性细胞即hAMSCs存活;与模型组和培养基组相比,hAMSCs治疗组外周血Treg、Th2、Tc1、Tc2淋巴细胞百分比明显升高(P0.01或P0.05),而Th17细胞显著减少(P0.01);血浆Th2型细胞因子IL-4和IL-10含量升高(P0.05或P0.01),而Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ含量降低(P0.05或P0.01)。结论 hAMSCs能改善大鼠EAE的神经功能,减轻神经组织的免疫损伤,其机制可能主要与上调FoxP3+Treg细胞和下调Th17细胞有关。     

高丽参提取液对大鼠自身免疫性脑脊髓膜炎的保护作用

目的:探讨高丽参提取液(Korean red ginseng extract,KRG)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用及相关免疫调节机制。方法:取SD 大鼠30 只,随机分为空白对照组、模型组(实验性自身免疫性脑脊髓炎模型)和实验组(高丽参提取液治疗),每组10 只,对EAE 大鼠进行神经功能评分及体重测量,通过病理学HE 染色和免疫组化观察25 d 脑和脊髓炎症浸润,流式细胞术检测大鼠脊髓和淋巴结CD4+ 、CD4+ / IFN-β+(Th1)、CD4+ / IL-17+(Th17)和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量,实时荧光定量q-PCR 检测大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 和Foxp3 mRNA 水平的表达。结果:治疗组大鼠神经功能评分明显改善,体重明显增加;与模型组比较,实验组神经症状和病理改变减轻;与模型组相比,治疗组中大鼠脊髓和淋巴结 CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+ T 细胞数量减少,而CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量增多(P<0.05);大鼠脊髓和淋巴结IFN-β、IL-17、IL-23 mRNA 表达下降,而Foxp3 mRNA 表达增加(P<0.05)。结论:高丽参提取液通过调节免疫系统的CD4+ 、CD4+ / IFN-β+ 、CD4+ / IL-17+和CD4+ / Foxp3+ T 细胞数量和CD4+ T 细胞分泌细胞因子的水平对EAE 起保护作用。     

黄芩茎叶总黄酮调节EAE大鼠Th17/Treg平衡的研究

目的观察黄芩茎叶总黄酮(Scutellaria baicalensisstem-leaf total flavonoids,SSTF)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠疾病严重程度和Th17、Treg细胞的影响,初步探讨黄芩茎叶总黄酮对多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的治疗作用。方法将50只大鼠随机分为正常组、模型组、黄芩茎叶总黄酮高剂量组(200 mg/kg)、黄芩茎叶总黄酮低剂量组(100 mg/kg)和醋酸泼尼松组(6 mg/kg),建模后分别行神经功能评分。灌胃给药16 d后,大鼠脊髓组织行HE染色,ELISA法测定大鼠血清中IL-17、TGF-β水平,流式细胞术检测大鼠外周血Th17、Treg细胞数量。结果与模型组大鼠比较,治疗组大鼠平均神经功能评分降低(P0.05),炎性细胞浸润减少(P0.05);血清中IL-17水平显著降低(P0.05),而TGF-β水平显著升高(P0.05);外周血中Th17细胞比例明显降低(P0.05),而Treg细胞比例显著升高(P0.05)。结论黄芩茎叶总黄酮灌胃给药可以调节CD4+T淋巴细胞亚群Th17/Treg细胞平衡,对EAE大鼠有一定的保护作用。     

宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

为探讨宫颈癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性检测的临床意义,采用流式细胞仪测定宫颈癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性,以正常人作对照分析。结果表明,宫颈癌患者外周血CD3＋、CD3＋CD4＋、NK细胞数量及CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值较正常对照组均明显下降（P〈0.05）,而CD3＋CD8＋细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与宫颈癌临床病理分期有关,分期越晚,CD3＋细胞、CD3＋CD4＋细胞、CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋细胞比值及NK细胞数量越低,CD3＋CD8＋细胞水平越高;Ⅰ、Ⅱ期宫颈癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间有显著差异（P〈0.05）。实验结果提示,宫颈癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于宫颈癌患者的免疫监测。     

促红细胞生成素模拟肽对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的治疗作用及机制

目的研究促红细胞生成素模拟肽(erythropoietin mimetic peptide,EPO-P)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠的治疗作用及机制。方法将Lewis大鼠共12只随机分为EPO-P治疗组6只和PBS对照组6只,使用合成肽段MBP68-84诱发大鼠急性EAE模型,每天测量神经功能评分至实验结束,免疫后第7天开始进行EPO-P治疗。在第13天(高峰期),取大鼠脊髓腰段,用HE染色观察单个核细胞炎症浸润;用流式细胞术分析CD4+T细胞在外周血中的数目;取淋巴结,用荧光定量PCR方法检测IFN-γ、IL-4、IL-17和Foxp3的相对表达。使用放射性3H-TdR掺入法检测淋巴细胞增殖实验中EPO-P的抑制作用。结果 EPO-P治疗后大鼠EAE严重程度显著降低;HE染色显示治疗组脊髓腰段单个核细胞炎症浸润减少;细胞流式分析显示治疗组外周血CD4+T细胞减少;荧光定量PCR结果显示治疗组淋巴结中IFN-γ和IL-17表达减少,而IL-4和Foxp3表达增加;淋巴细胞增殖实验表明EPO-P剂量依赖性抑制淋巴细胞增殖。结论 EPO-P对EAE有明显治疗作用,这种治疗作用可能与EPO-P抑制T细胞的炎症浸润和增殖反应,抑制Th1/Th17类细胞因子炎症损伤,促进Th2/Treg类细胞因子免疫抑制作用有关。     

抗甲状腺治疗对Graves病患者外周血T、B淋巴细胞亚群及部分协同刺激分子表达的影响

为了研究抗甲状腺药物对Graves病患者外周血T、B淋巴细胞亚群及协同刺激分子的表达影响,探讨其在Graves病免疫病理机制中的作用,运用流式细胞术测定20例初发Graves病患者、11例硫脲类药物治疗的患者及16例正常对照外周血淋巴细胞CD19、CD40、HLA-DR、CD80、CD3、CD4、CD8、CD28等表面分子的表达水平。发现Graves病患者CD19+、CD19+CD40+、CD19+HLA-DR+、CD80+细胞比率高于正常对照组;CD3+CD8+细胞比率低于正常对照组,CD3+CD4+/CD3+CD8+比值升高,CD3+HLA-DR+细胞比率高于正常对照组。硫脲类药物他巴唑或丙基硫氧嘧啶治疗2~4月后缓解患者CD80+细胞恢复正常。与正常对照比较治疗缓解后患者CD3+CD8+、CD8+CD28+细胞比率降低,CD3+HLA-DR+、CD4+HLA-DR+升高,CD3+CD4+/CD3+CD8+比值升高。上述结果提示Graves病患者体液免疫处于较高水平,外周血活化T细胞升高,硫脲类药物可以调节部分免疫指标,其改变同临床症状的改善并非同步。     

自发性高血压大鼠外周血CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比率增加且连接子蛋白40(Cx40)和炎症因子水平升高

目的探讨连接子蛋白40(Cx40)与自发性高血压大鼠(SHR)外周血CD4~+T细胞和CD8~+T淋巴细胞亚群及炎症因子之间的关系。方法采用流式细胞术检测Wistar京都(WKy)大鼠和SHR外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞及其表面Cx40的表达;采用ELISA检测炎症因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-6表达。结果 SHR收缩压显著高于WKy大鼠,SHR外周血CD4~+T细胞百分率、CD4~+/CD8~+T细胞比率显著高于WKy大鼠,而CD8~+T细胞百分率显著低于WKy大鼠;SHR血清IL-2、IL-4、IL-6水平均显著高于WKy大鼠,IFN-γ无明显差异;SHR外周血CD4~+T细胞和CD8~+T细胞中Cx40表达均显著高于WKy大鼠。结论 SHR外周血CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比率增加,且Cx40和IL-2、IL-4、IL-6水平明显升高。     

Experimental allergic encephalomyelitis in rhesus monkeys: I. Immunological parameters in EAE resistant and susceptible rhesus monkeys.

Immunological parameters in rhesus monkeys, resistant and susceptible to experimental allergic encephalomyelitis (EAE), were studied. Monkeys immunized with complete Freund's adjuvant (CFA) alone and EAE resistant monkeys immunized with a low dose of bovine brain homogenate emulsified in CFA did not show significant fluctuations in numbers of granulocytes, lymphocytes and lymphocyte subsets (CD4; CD8; GM13, a subset of CD8) and anti-brain homogenate antibody titres remained low. EAE susceptible monkeys immunized with a high dose of myelin developed EAE significantly faster than monkeys immunized with a low dose of brain homogenate. During the induction phase all EAE susceptible monkeys, in contrast to the CFA controls and EAE resistant monkeys, showed an increase in the numbers of granulocytes and the CD4/CD8 ratios and had high antibody titres specific for the immunizing antigens. The most significant disease-related changes were observed after the onset of clinical signs. These included a granulocytosis, a lymphopenia and a decrease in the CD4/CD8 ratio, indicating a selective loss of CD4+ lymphocytes. A major difference between monkeys immunized with myelin and brain homogenate was the significant increase in the percentage of GM13+ lymphocytes after the onset of clinical signs in the latter group. Increases in the CD4/CD8 ratio and antibody titres during the induction phase may be prognostic factors for the subsequent development of EAE.     

淋巴结外恶性淋巴瘤外周血T淋巴细胞亚群与免疫指标测定分析

目的：检测原发性淋巴结外恶性淋巴瘤（Primary extranodal lymphoma，PENL）患者外周血T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白（Ig）水平的变化。方法：分别应用流式细胞术（FCM）和免疫速率比浊法测定T淋巴细胞亚群比例和免疫球蛋白（Ig）以及补体C3、C4含量。结果：PENL组CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋明显降低（P〈0．01），原发性结性恶性淋巴瘤（结性组）CD4^＋／CD8^＋比值和NK细胞比较其他两组有显著意义（P〈0．01）；提示PENL组、结性组中CD3^＋、CD4^＋和NK细胞与IgA、IgG、C3比较有显著的相关性（P〈0．01）。结论：结外恶性淋巴瘤患者免疫功能的改变，在其发病机制中的作用不容忽视，可以作为病情进展的免疫学指标。     

COPD患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及乌体林斯的调节作用

目的:探讨COPD患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及乌体林斯治疗COPD的作用机制.方法:100例COPD患者随机分为治疗组和对照组,每组各50例,在我院体检的健康成人50例作为健康体检组.对照组根据病情需要给予抗感染、止咳、祛痰、平喘等综合治疗.治疗组在对照组治疗基础上加用乌体林斯1.72 μg/次,肌肉注射,每周1次...     

柳氮磺胺吡啶和氢化泼尼松对大鼠结肠炎模型调节性T细胞的影响

目的 探讨CD4^＋ CD25^＋和CD8^＋ CD28^-调节性T细胞在2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱发的大鼠实验性结肠炎模型的外周血、脾脏、结肠的改变及其作用。方法 建立TNBS实验性结肠炎大鼠模型。设对照组、建模后1周及3周组、柳氮磺胺吡啶（SASP）和氢化泼尼松（PSL）治疗组（在建模1周后分别每日给予SASP及PSL灌胃，治疗2周）共5组，用流式细胞仪检测各组外周血、脾脏和结肠黏膜上皮细胞内单个核细胞中CD4^＋ CD25^＋和CD8^＋ CD28^-调节性T细胞比例的变化；肠道积分评定组织学变化。结果 成功建立了TNBS大鼠模型。CD4^＋ CD25^＋ T细胞：建模后第1周在外周血、脾、结肠均较对照组升高，至第3周已恢复至对照组水平，SASP治疗后无变化，PSL治疗后在外周血、脾、结肠均明显低于建模后3周组。CD8^＋ CD28^- T细胞：建模第1周在外周血、脾、结肠均较对照组升高，至第3周仍高于对照组水平，SASP治疗后在脾、结肠中较建模后3周组下降。PSL治疗后在外周血、脾、结肠均明显低于建模后3周组。结论 CD4^＋ CD25^＋和CD8^＋ CD28^-这两种调节性T细胞可能在实验性结肠炎发病的不同阶段中起着一定作用，且以局部作用为主。CD8^＋ CD28^- T细胞可能与慢性炎症变化成正相关。PSL、SASP对大鼠实验性结肠炎均有明显疗效，PSL可减少CD8^＋ CD28^- T细胞量，较SASP疗效更显著。     

非霍奇金淋巴瘤患者T细胞亚群、NK细胞检测的临床意义

目的：研究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测结果的变化与该病的关系及与慢性淋巴腺炎患者细胞免疫功能的不同变化。方法：采用流式细胞仪（FCM）检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者、慢性淋巴腺炎及正常人外周血T淋巴细胞亚群比例、NK细胞的变化。结果：非雹奇金淋巴瘤患者与正常人比较总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显下降（P〈0．05），细胞毒性T淋巴细胞明显升高（P〈0．05），NK细胞则无明显变化（P〉0．05）。非霍奇金淋巴瘤患者与慢性淋巴腺炎患者比较，细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞明显升高（P〈0.05），而总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞无明显改变（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比值略有下降但无明显统计学意义。结论：非霍奇金淋巴瘤患者细胞免疫功能明显受到抑制，T细胞亚群及NK细胞的检测对NHL的诊断、治疗、预后判断有一定的临床价值。     

不同年龄、性别的健康成年人21项淋巴细胞亚群分析

建立健康成年人外周血21项淋巴细胞亚群正常参考值,并分析不同年龄、性别健康成年人淋巴细胞亚群之间的差异.用三标荧光抗体对102例健康成年人外周血进行标记,流式细胞仪检测并分析结果,SPSS 10.0软件进行统计学处理.结果显示:21～89岁健康成年人外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8...     

FTY720, sphingosine 1-phosphate receptor modulator, ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis by inhibition of T cell infiltration

FTY720, a sphingosine 1-phosphate receptor modulator, induces a marked decrease in the number of peripheral blood lymphocytes and exerts immunomodulating activity in various experimental allograft and autoimmune disease models. In this study, we evaluated the effect of FTY720 and its active metabolite, （S）-enantiomer of FTY720-phosphate [（S）-FTY720-P] on experimental autoimmune encephalomyelitis （EAE） in rats and mice. Prophylactic administration of FTY720 at 0.1 to 1 mg/kg almost completely prevented the development of EAE, and therapeutic treatment with FTY720 significantly inhibited the progression of EAE and EAE-associated histological change in the spinal cords of LEW rats induced by immunization with myelin basic protein. Consistent with rat EAE, the development of proteolipid protein-induced EAE in SJL/J mice was almost completely prevented and infiltration of CD4^＋ T cells into spinal cord was decreased by prophylactic treatment with FTY720 and （S）-FTY720-P. When FTY720 or （S）-FTY720-P was given after establishment of EAE in SJL/J mice, the relapse of EAE was markedly inhibited as compared with interferon-β, and the area of demyelination and the infiltration of CD4^＋ T cells were decreased in spinal cords of EAE mice. Similar therapeutic effect by FTY720 was obtained in myelin oligodendrocyte glycoprotein-induced EAE in C57BL/6 mice. These results indicate that FTY720 exhibits not only a prophylactic but also a therapeutic effect on EAE in rats and mice, and that the effect of FTY720 on EAE appears to be due to a reduction of the infiltration of myelin antigen-specific CD4^＋ T cells into the inflammation site. Cellular ＆ Molecular Immunology. 2005;2（6）：439-448.     

不同临床期多发性骨髓瘤患者细胞免疫功能流式细胞术分析

本文应用流式细胞仪（ＦＣＭ）分析了２３例不同临床期多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者Ｔ细胞亚群、ＮＫ细胞及ＣＤ１９＋Ｂ淋巴细胞变化。结果显示：初诊未化疗ＭＭ患者ＣＤ４、ＣＤ２５、ＣＤ１９细胞百分率ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，ＣＤ８细胞百分率升高；稳定期ＭＭ患者除ＣＤ２５、ＣＤ１９细胞百分率下降外，其他指标均正常；进展期ＭＭ患者ＣＤ３、ＣＤ４细胞百分率和ＣＤ４／ＣＤ８比值下降，ＣＤ８、ＣＤ１９细胞百分率升高；不同临床期ＭＭ患者ＮＫ细胞与正常人比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。研究结果表明：不同临床期ＭＭ患者细胞免疫功能不同，细胞免疫调节异常在ＭＭ发病机制及稳定期脱逸过程中可能起一定作用。     

Expression of CD11b (Leu15) antigen on CD3+, CD4+, CD8+, CD16+ peripheral lymphocytes. Estimation of CD3+8+11b+ and CD3+4-8-11b+ T-cell subsets using a single laser flow cytometer.

CD11b (Leu15) epitope is expressed on 20-30% of peripheral blood lymphocytes, including CD16+ large granular lymphocytes and CD8+ cells. This study confirms that 30% of CD8+ lymphocytes and virtually all CD16+ NK cells from healthy subjects express this determinant. In parallel, our data show that various proportions of CD3+4-8-, TCR-delta cytotoxic T lymphocytes and occasionally CD4+ lymphocytes subsets could also express this epitope. The CD8+11b+ phenotype is associated with suppression of T-cell proliferative response and has been extensively used to characterize suppressor T lymphocytes. Since about 25% of CD8 lymphocytes are non-T (CD3-) and express the CD16 NK antigen (CD8+16+3-), the expression of CD11b was also studied on CD8+3+ T-cell and CD8+16+ NK-cell subsets. To this end, we developed three methods using a flow cytometer equipped with a single laser and two fluorescence detectors. Results showed that T CD8+3+11b+ and NK CD8+16+11b+ lymphocytes account for 30% and 70% of CD8+11b+ cells respectively. Consequently, the CD8+3+11b+ phenotype would be more specific for suppressor T lymphocytes than the total CD8+11b+ phenotype which includes high proportions of CD16+ NK cells.     

Marked increase in L-selectin-negative T cells in neonatal pertussis. The lymphocytosis explained?

The detailed immunophenotype of peripheral blood lymphocytes from a neonate with pertussis was determined by flow cytometry and compared with results from cord blood from healthy newborns. Most (72%) of the lymphocytes were CD3+ T cells with a normal CD4/CD8 ratio (2.5). The T cells were largely HLA-DR negative and CD45RA+, consistent with unstimulated na?ve T cells. Almost all of the CD4+ T cells were Leu8 (L-selectin, CD62L) negative, while almost all of the CD8+ T cells were CD28+. There was no increase in CD7- CD4+ T cells (Th2-like). No relative increase in CD16/56+ NK cells (5%) or CD19/20+ B cells was seen. The most dramatic finding in this case was the remarkable lack of expression of L-selectin by the T cells. L-selectin expression is associated with homing of peripheral blood lymphocytes to lymph nodes. The dramatic reduction in L-selectin expression of the T lymphocytes in pertussis, perhaps induced by pertussis toxin, likely prevents homing of the T cells to peripheral lymphoid tissues and provides a likely explanation for the marked lymphocytosis noted in this disease.