人成骨肉瘤细胞系OS-732细胞周期的研究

本文应用放射自显影技术研究人成骨肉瘤细胞系OS-732的细胞周期。实验结果表明,细胞周期T_c为18.7小时,平均核分裂指数为3.73‰。T_s=13.1小时,T_M=1小时,T_(G1)=3.6小时,平均标记指数为35.96％,生长指数为51.34％。这些结果提示OS-732细胞系保持其生长特性,对人成骨肉瘤的各种实验研究是较好的模型。     

锗-132对体外培养人二倍体细胞的作用

本工作应用细胞培养、放射自显影及扫描电子显微镜等多种技术研究了锗的有机化合物—Ge-132对体外培养人二倍体细胞的作用,实验结果表明:Ge-132的毒性极低,当二倍体细胞在含有1mmol/LGe-132的培养基中培养24h后,细胞的表面结构未发生异常变化,细胞的分裂活性及DNA合成均有增强;随着Ge-132浓度的减小,对人二倍体细胞的分裂活性及DNA合成均具有明显的促进作用,尤以0.01mmol/L更为显著:此外,并将Ge葡萄糖及GeO_2与Ge-132对体外培养人二倍体细胞的作用进行了比较。     

羟基脲对体外Hela细胞周期同步化作用的研究

目的 探讨利用羟基脲(HU)对Hela细胞进行细胞周期同步化.方法 培养Hela细胞,采用Hu处理Hela细胞24 h,然后除去HU,让Hela细胞进入细胞周期G1、S、G2/M期,通过流式细胞术确认.结果 流式细胞仪检测证实Hela细胞在HU祛除后3.5 h处于S期,8.5 h处于G2/M期,18 h处于G1期.结论 HU处理可以有效地将Hela细胞同步化于特定的细胞周期,而且方法简单,易于操作.     

前列腺素E_2(PGE_2)对离体培养动脉平滑肌细胞(SMC)增殖、蛋白质合成和形态变化的影响

本文采用7～13代离体培养的新西兰白兔胸主动脉中膜SMC,对照组培液不含PGE_2,实验组每毫升培液加PGE_2的浓度分别为5μg、10μg和20μg。生长曲线、代表蛋白质合成的P/D值和放射自显影法显示的~3H-TdR标记率随加进培液中PGE_2浓度递增而下降,结果表明PGE_2对培养的SMC增殖和蛋白质合成有显著的抑制作用。电镜观察亦有相应的形态变化。     

锗-132对体外培养人癌细胞作用的研究

本文报道了锗的有机化合物—Ge-132对体外培养人癌细胞的作用。实验结果表明Ge-132的毒性极低,当人癌细胞在含有1mmol/L的营养液中培养24h后,对人癌细胞的分裂活性无抑制作用,对细胞的表面结构均无破坏作用,0.1～0.01mmol/L时,细胞的分裂活性,DNA与RNA合成均增强;细胞内琥珀酸脱氢酶细胞色素氧化酶及酸性磷酸酶活性均未发生明显变化。此外,还将Ge-132、GeO_2及Ge-葡萄糖对体外培养人癌细胞的作用进行了比较。     

重组人生长激素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的 :探讨重组人生长激素 (r- h GH )对人乳腺癌细胞株 MCF- 7(MCF- 7)增殖和分化的影响。方法 :以不同浓度 r- h GH分别加入处于对数生长期的 MCF- 7进行体外培养 ,4 8h后用流式细胞仪检测细胞周期的百分比构成变化 ,并与对照组进行比较。结果 :不同浓度的 r- h GH作用于 MCF- 7后 ,其细胞周期的 G0 ～ G1 期、S期、G2 ～ M期的细胞百分比变化 ,差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :r- h GH对 MCF- 7的细胞周期无明显影响 ,既无促进 MCF- 7细胞增殖作用 ,也无抑制 MCF- 7细胞的作用。     

用放射自显影术观察异种抗胃腺癌iRNA对人胃腺癌细胞的作用

本文用放射自显影观察了自羊提取的抗人胃腺癌免疫核糖核酸对人胃腺癌细胞株(7901)的作用,结果表明,抗胃腺癌免疫核糖核酸能通过致敏淋巴细胞对胃腺癌细胞的生长代谢起明显的抑制作用。     

氯喹对体外培养人肝癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的：探讨氯喹对体外培养人肝癌细胞HepG2增殖和细胞周期的影响,为氯喹作为肝癌治疗药物的研究提供依据。方法： 对数生长期人肝癌HepG2细胞分为对照组、氯喹 (8.00、16.00、32.00、64.00和128.00 mmol•L^-1 )处理组,用MTT法检测不同培养时间（24、48和72 h）细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果：与对照组比较,32.00~128.00 mmol•L^-1氯喹处理HepG2细胞24 h和8.00~128.00　 mmol•L^-1氯喹处理HepG2细胞48 h~72 h,细胞增殖活性随着剂量和时间增加而逐渐下降( P< 0.01),以72 h、128.00 mmol•L^-1氯喹抑制作用最强( P< 0.01);与对照组比较,氯喹处理组（32.00~128.00 mmol•L^-1）G₂/M期细胞比率及细胞凋亡率随着剂量增加而上升( P< 0.01),以128.00 mmol•L^-1组最为明显。结论：氯喹具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖作用,可诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,并可使人肝癌HepG2细胞周期阻滞在G₂/M期而抑制细胞活性,可能作为肝细胞癌的治疗药物。     

重组人生长激素与5-FU联合应用对人乳腺癌细胞株 MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的探讨重组人生长激素（r-hGH）对人乳腺癌细胞株MCF-7（MCF-7）有无促进增殖和分化作用,以及r-hGH与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用对MCF-7的化疗协调作用.方法以不同浓度r-hGH,以及不同浓度的r-hGH联合不同浓度的5-FU分别加入处于对数生长期的MCF-7中进行体外培养,48 h后流式细胞仪检测细胞周期的变化,与对照组进行比较.结果①不同浓度的r-hGH与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期、S期、G2～M期的细胞百分比变化,差异均无统计学意义（P＞0.05）;②不同浓度的5-FU与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期细胞百分比显著增高（P＜0.05）,S期显著下降（P＜0.01）,G2～M期差异无统计学意义（P＞0.05）;③不同浓度的r-hGH联合不同浓度的5-FU与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期细胞百分比显著增高（P＜0.01）,S期和G2～M显著降低（P＜0.01,P＜0.05）.结论单独应用r-hGH对MCF-7的细胞周期无明显影响;r-hGH与5-FU联合应用对MCF-7的化疗具有协调作用,r-hGH能增强5-FU对MCF-7的化疗效果.     

草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的调控

目的：探讨草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的影响。方法：以不同浓度的草分枝杆菌制剂（商品名乌体林斯,Utilin S）体外处理人结肠癌细胞株Lovo,48h后以流式细胞仪检测细胞周期动力学指标的变化。结果：4种不同浓度的药物均能调控Lovo细胞的细胞周期,使G0－G1期细胞数率非常显著地上升（P＜0．01）,G2－M期细胞数率显著地上升（P＜0．05）,同时使S期细胞数率非常显著地下降（P＜0．01）。结论：乌体林斯能直接抑制结肠癌细胞株Lovo增殖,并可能通过G2－M期细胞阻滞而促进Lovo癌细胞凋亡的发生。     

辣椒素诱导人膀胱癌RT4细胞细胞周期阻滞的实验观察

目的 了解辣椒素对膀胱癌RT4细胞生长的影响及可能机制.方法 采用细胞计数kit-8(CCK-8)试剂盒观察辣椒素(50、100、150、200、250μmol/L)对膀胱癌RT4细胞生长的影响,以辣椒素(0 μmol/L)为对照组;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫荧光检测瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)的表达;Western印迹检测细胞周期蛋白P53、P21、细胞周期依赖性激酶(CDK)2表达水平.结果 100 μmol/L辣椒素明显抑制RT4细胞生长,细胞成活率为82.0%±6.2%,低于对照组(100.0%±12.4%,P=0.036),且生长抑制呈剂量依赖性,250μmol/L时细胞成活率仅为7.8%±2.9%(P=0.000).辣椒素能诱导RT4细胞G0/G1期阻滞,同样呈剂量依赖性,对照组G0/G1期细胞比例为37.4%±5.6%,而250 μmol/L时达到72.4%±5.3%(P=0.000).RT4细胞表达TRPV1受体mRNA和蛋白.与对照组比较,辣椒素处理后48 h,P53、P21表达上调,而CDK2表达下调.结论 辣椒素可以通过TRPV1受体调节P53、P21、CDK2表达以诱导人膀胱癌RT4细胞G0/G1期阻滞而抑制其生长.     

Cyclin D1调控U87胶质瘤细胞周期研究

目的探讨细胞周期蛋白D1（Cyclin D1,CCND1）在U87胶质瘤细胞周期调控中的作用。方法根据NCBI GenBank中cyclin D1序列设计双链siRNA,利用Western blotting技术验证设计的siRNA序列的有效性,并通过流式细胞术检测抑制CCND1对U87胶质瘤细胞周期进程的影响。结果经Western blotting检测,成功抑制了CCND1的表达。并且抑制CCND1后,U87细胞周期停滞在G1期,抑制了U87细胞的G1／S期转换。结论U87细胞中抑制CCND1可以显著抑制细胞周期进程,使细胞周期停滞在G0／G1期,为进一步研究胶质瘤的靶向治疗奠定了理论基础。     

槲皮素对系膜细胞增殖、凋亡及细胞周期影响的初步研究

目的观察槲皮素对系膜细胞增殖及凋亡的影响。方法用M IT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果在5~30μm o l/L浓度范围内槲皮素能时间、剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖,可使G0~G1期细胞增多,S期细胞减少,而高浓度的槲皮素能诱导系膜细胞的凋亡。结论槲皮素可显著抑制系膜细胞增殖,使系膜细胞阻滞于G0~C1期;并且槲皮素有诱导系膜细胞凋亡的作用。     

槲寄生对人大肠癌HCT116细胞细胞周期作用的研究

目的探讨槲寄生对人大肠癌HCT116细胞细胞周期的影响。方法采用MTT法测定槲寄生对HCT116增殖的影响,瑞特-姬姆萨染色和吖啶橙荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪进行细胞周期分析。结果槲寄生对HCT116细胞的生长有明显抑制作用,显微镜下肿瘤细胞体积缩小,核染色质固缩,部分发生核偏位,并使人大肠癌HCT116细胞周期阻止在G2/M期。结论槲寄生对HCT116细胞有明显的生长抑制和细胞周期阻滞作用。     

放射敏感性不同的鼻咽癌细胞DNA倍体及细胞周期分布

目的　研究不同放射敏感潜能的人鼻咽癌细胞亚克隆株F1、S1的DNA倍体及细胞周期分布,并探讨与放射敏感性异质性的关系。方法　采用细胞培养及裸鼠体内实验,用Feulgen染色法和图像分析方法观察F1、S1细胞及其裸鼠移植瘤的DNA倍体及细胞周期的分布情况。结果　F1、S1细胞及其裸鼠移植瘤均为异倍体细胞或肿瘤。F1细胞及裸鼠移植瘤DNA含量、5C、>5C比S1组高(P<0.01),F1细胞及裸鼠移植瘤3-4C比例低于相应S1组(P<0.01)。F1细胞及其裸鼠移植瘤G2M比例均高于相应S1组,G0G1期低于S1组(P<0.05-0.01),F1细胞的S期比例低于S1细胞(P<0.01)。结论　F1DNA含量较高、倍体分布较广而右移,较多细胞处于对放射线敏感的G2M期,S1DNA含量较低、倍体分布较窄,较多细胞处于G0G1期和S期。DNA倍体及细胞周期分布地不同可能是F1、S1存在放射敏感性差异的原因之一。     

蟾毒灵对CAPAN-2胰腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的 研究蟾毒灵在胰腺癌CAPAN-2细胞系中的抗肿瘤作用,探讨其在胰腺癌中的抗肿瘤分子机制。方法 CCK-8法测定蟾毒灵对人胰腺癌CAPAN-2细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测蟾毒灵对细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blotting法检测蟾毒灵作用于CAPAN-2细胞后Caspase-3酶原(pro-caspase-3)、Bcl-2、Bax、CDC25C、cyclinB1、CDC2蛋白表达水平的变化情况。结果 蟾毒灵对胰腺癌CAPAN-2细胞有抑制增殖的作用,并呈现出时间和浓度依赖性;蟾毒灵未能诱导CAPAN-2细胞凋亡,但经蟾毒灵处理后,CAPAN-2细胞周期被阻滞在G2/M期;经蟾毒灵处理后,CAPAN-2细胞中CDC25C、cyclinB1、CDC2等关键周期蛋白的表达量显著下降,但是pro-caspase-3、Bcl-2、Bax等凋亡相关蛋白的表达没有发生明显改变。结论 蟾毒灵可显著抑制胰腺癌CAPAN-2细胞增殖,通过诱导G2/M细胞周期阻滞而非诱导细胞凋亡,在CAPAN-2细胞中发挥抗肿瘤作用。     

白细胞介素-17对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究白细胞介素-17(IL-17)对肝星状细胞的增殖及其对细胞周期变化的影响。方法以体外培养的肝星状细胞为研究对象,分别以200、400、600、800、1 000μg/L(终质量浓度)的IL-17刺激,并设空白对照组,分别培养24、48、72 h。用细胞计数法观察细胞的生长情况,MTT法检测IL-17刺激后肝星状细胞的增殖,流式细胞术检测不同浓度的IL-17对肝星状细胞增殖周期的影响。结果 IL-17对细胞的刺激增殖作用在一定的程度和范围内呈现剂量和时间依赖性,200μg/L的IL-17对细胞无明显的刺激作用(P>0.05),800μg/L的IL-17在细胞培养72 h后对细胞的刺激增殖作用最明显(P<0.01),1 000μg/L的IL-17对细胞则有抑制作用(P<0.01)。IL-17刺激肝星状细胞后能促使细胞由G0/G1期进入S期,细胞增殖以S期细胞比例为主。在一定范围内,细胞增殖指数随着IL-17浓度的增长而增加,而1 000μg/L的IL-17则抑制细胞周期,使细胞周期停滞于G1期(P<0.01)。结论 IL-17能刺激肝星状细胞的增殖,在一定的程度和范围内呈现剂量和时间依赖性,IL-17能够促进肝星状细胞由G0/G1期进入S期。     

槐耳清膏联合顺铂改变胃癌SGC7901细胞周期分布的实验研究

目的观察槐耳清膏联合顺铂（DDP）作用于人胃腺癌SGC7901细胞后细胞周期的变化,并探讨其可能的作用机制。方法通过细胞流式实验,观察不同浓度槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞24h后细胞周期的变化情况,并通过Westernblot检测不同浓度的槐耳清膏、DDP及两药联合作用于胃癌SGC7901细胞后,细胞周期相关蛋白ATM、H2AX、cdc-2、CyclinB1等的表达情况。结果细胞流式实验结果显示,槐耳清膏能够阻滞SGC7901细胞于G2/M期,DDP能够阻滞SGC7901细胞于S期,而两药联用后S期和G2/M期都有阻滞。Westernblot实验结果显示,槐耳清膏、DDP均可上调p-ATM、γ-H2AX蛋白表达,同时下调CyclinB1蛋白表达,且两药联用后效果更加明显。结论槐耳清膏、DDP能够通过调节细胞周期相关蛋白的表达改变细胞周期,抑制细胞增殖,与槐耳清膏联用可提高DDP对胃癌的疗效。