心理应激小鼠脑区核团原癌基因蛋白表达的规律及加味逍遥丸调节作用的实验研究

目的 探讨心理应激后小鼠脑区原癌基因（c—Fos、c—Jun）蛋白表达的规律及加味逍遥丸对该蛋白表达的调节作用。方法 利用电刺激心理应激箱诱发小鼠心理应激动物模型,加味逍遥丸（2mg／g体重）灌胃给药,免疫组化法检测c-Fos、c-Jun蛋白,观察不同脑区核团：海马1—4区（hippocampusCA1—4）、杏仁中央核（central amygdaloid nucleus,CAN）、下丘脑室旁核（paraventricular nucleus,PVN）、下丘脑视上核（supraoptic nucleus,SON）的表达变化。结果 与正常组比较,应激1次后3h组、应激3次后3h组、应激5次后3h组各脑区c-Fos、c—Jun蛋白表达均增强（P〈0．01）;与应激1次后3h组比较,应激1次后1h组和应激1次后6h组表达减弱（P〈0．05或P〈0．01）;与不服药组比较,服药组应激3次后3h组和应激5次后3h组c—Fos、c—Jun蛋白表达均减弱（P〈0．05或P〈0．01）。结论 心理应激后1h c—Fos、c-Jun蛋白开始升高,3h达高峰,c—Fos蛋白6h已回落近正常水平,c—Jun蛋白6h仍维持在较高水平,多次应激后在同一高峰点未见表达减弱现象;加味逍遥丸对应激后c—Fos、c—Jun蛋白的高表达有明显下调作用。     

积雪草甙合大黄素对TNFα诱导肾小管上皮细胞C3上调的干预作用

目的：探讨积雪草甙合大黄素对肿瘤坏死因子α（TNFα）诱导的BALB／C小鼠肾小管上皮细胞（mTEC）补体核心成分GmRNA及蛋白表达的干预作用。方法：采用BALB／C原代mTCE,模型组TNFα5ng／ml诱导24小时,治疗组在TNFα诱导的同时,分别以积雪草甙1、2、4μg／ml合大黄素0．1、0．2、0．4μg／ml进行干预,于24小时后分别提取细胞上清及RNA,应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和酶联免疫方法（ELISA）分别检测mTEC C3 mRNA和蛋白的表达水平。结果：正常BALB／C小鼠肾小管上皮细胞具有一定的GmRNA和蛋白表达,经TNFα诱导后,c3mRNA和蛋白表迭均明显上调,积雪草甙合大黄素干预后,mTEC C3mRNA及蛋白表达水平均出现不同程度的下调,呈一定的剂量依赖关系。结论：积雪草甙合大黄素能够抑制炎性细胞因子TNFα所致的肾局部G3过度产生,具有一定的免疫抑制作用。     

旋覆代赭汤及其倍用甘补方对混合性反流性食管炎模型大鼠延髓神经核团c—Fos蛋白表达的影响

目的：观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠延髓神经核团c—Fos蛋白表达的影响。方法：采用“食管十二指肠端侧吻合术”制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药（莫沙必利）对照组、旋覆代赭汤原方组、原方倍用甘补组,给予相应处理或用药后,取延髓组织,用免疫组化的方法测其c—Fos的表达。结果：旋覆代赭汤原方倍用甘补组能显著提高反流性食管炎模型大鼠c—Fos的表达,与正常组、假手术和模型组相比,c—Fos的表达率显著升高（P〈0．01）,与原方组和西药组相比,c—Fos的表达率升高（P〈0．01）,而原方组与西药组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：旋覆代赭汤原方倍用甘补组可明显升高混合性反流性食管炎延髓神经核团c—Fos蛋白表达,从而反映该药物对增强中枢神经系统的迷走一迷走反射强度,能够更高程度地激活胆碱能抗炎通路,发挥其对食管炎大鼠积极的保护作用。     

蒙药制剂"三花散"对小鼠免疫水平影响的研究

目的：研究蒙药制剂“三花散”对小鼠免疫水平的影响，进一步探讨蒙药制剂“三花散”的免疫药理机制。方法：常规方法制备蒙药“三花散”醇提液为实验药物，以小鼠为试验动物，通过灌胃法连续给药，观察不同剂量的蒙药制剂“三花散”分别对小鼠淋巴细胞转化率、腹腔巨噬细胞吞噬功能影响，RT—PCR技术检测对免疫分子Fas配体及穿孔素等表达水平的影响。结果：实验结果表明，蒙药制剂“三花散”：（1）能够提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数，与正常对照组比较差异显著（P〈0．01）；（2）能够促进小鼠体内淋巴细胞的转化与增殖，实验组小鼠的淋巴细胞转化率较正常对照组显著提高（P〈0．01）；（3）实验组小鼠脾脏免疫分子Fas配体及穿孔素为阳性表达，实验组与对照组比较差异显著（P〈0，01）。结论：蒙药制剂“三花散”不仅能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞活性增强，并能增强小鼠脾组织免疫分子Fas配体及穿孔素的表达水平，提示蒙药制剂“三花散”能够有效的促进小鼠的免疫功能。     

重组白细胞介素18对肺炎链球菌肺炎小鼠免疫平衡的调节

目的研究重组白细胞介素18（rIL-18）对肺炎链球菌肺炎小鼠Th1／Th2免疫应答的影响。方法建立小鼠肺炎链球菌肺炎模型,将BALB／c小鼠24只随机分为三组,分别为对照组（NC）,肺炎组（PP）和肺炎rIL-18干预组（PIL-18）（n=8）,RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中IFN-γ、IL-4mRNA的表达,同时BALF进行有核细胞分类计数。结果1）PIL-18组BALF中性粒细胞和巨噬细胞计数显著高于PP组和NC组（P〈0．001）;2）PIL-18组肺组织IFN-γ mRNA表达上调而IL-4mRNA表达下调（P〈0．001）。结论在小鼠肺炎链球菌肺炎早期给予rIL-18可诱导IFN-γ的合成,促进Th1免疫应答,使Th1／Th2免疫平衡向Th1免疫偏移、促进宿主对肺炎链球菌的防御。     

放射线对小鼠T细胞分化相关蛋白T—bet、GATA-3、RORγt、Foxp3表达的影响

目的：观察放射线对小鼠脾脏T细胞分化特异性转录因子T—bet、GATA-3、RORlt、Foxp3蛋白表达水平的影响。方法：60Coγ射线（1．0Gy,5．5min）照射Balb／c小鼠,分别于照射后第4、8、12及20天检测小鼠外周血象;骨髓病理切片观察骨髓造血组织增生情况;WesternBlot法检测脾脏T细胞分化特异性转录因子T_bet、GATA-3、RORγt、Foxp3蛋白表达水平。结果：吖射线照射后小鼠外周血白细胞和血小板数量显著降低;骨髓造血细胞显著减少,脂肪细胞明显增多;放射线照射Balb／c小鼠,脾脏GATA-3、RORγt、Foxp3蛋白表达下降,于照射后第4天表达水平最低,之后逐渐升高但低于正常对照组水平（P〈0．05）;脾脏T—bet蛋白表达水平明显高于对照组水平（P〈0．05）;T—bet／GATA3、RORγt／Foxp3比值明显增大（P〈0．05）,于照射后第4天比值最大。结论：放射线抑制Balb／c小鼠骨髓造血,同时导致脾脏T细胞分化异常;骨髓造血功能低下可能与T细胞分化异常相关。     

滋肾清热利湿化瘀方对来曲唑诱导的PCOS小鼠性激素水平及C/EBPβ蛋白的影响

目的：探讨滋肾清热利湿化瘀方（ZQLHP）对来曲唑（letrozole,LET）诱导的多囊卵巢综合征（PCOS）小鼠性激素水平以及转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)信号的影响。方法：将40只4周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为正常组（Normal）、模型组（LET）、滋肾清热利湿化瘀方组（LET+ZQLHF）、枸橼酸氯米芬（clomiphene citrate,CC）组（LET+CC），各10只。除正常组外，其余各组采用来曲唑诱导PCOS小鼠模型，造模成功后，连续给药14 d后，称重后麻醉处死小鼠取血，分离卵巢组织，观察小鼠体质量、卵巢质量、计算卵巢质量指数；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中血清黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）和雄激素（T）的表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织中C/EBPβ的表达。结果：经滋肾清热利湿化瘀方治疗后，小鼠体质量、卵巢质量和卵巢质量指数降低（P<0.05或P<0.01）；血清中LH及T水平显著降低，FSH水平显著升高（P<0.05,P<0.01或P<0.001）...     

蒙药那如-3水提取液对脊髓损伤后神经细胞FOS表达的影响

目的：观察脊髓损伤后神经细胞FOS的表达及蒙药那如-3水提取液对其表达的影响。方法：sD大鼠60只,动物分实验组和对照组。在无菌条件下显露胸11—12段脊髓,打击法损伤11-12段脊髓,损伤后,实验组灌胃蒙药那如-3水提取液2mL／kg,对照组灌胃生理盐水2mL。用药后不同时问取出伤段脊髓标本,免疫组化染色,观察FOS免疫反应的阳性细胞。结果：对照组可见大量FOS免疫阳性细胞,随时间的延长而增加。实验组各时间,FOS免疫阳性细胞数较对照组明显减少（P〈0．05）,差异显著。结论蒙药那如-3水提取液对脊髓损伤后对神经细胞FOS表达有抑制作用,提示蒙药那如-3水提取液参与神经损伤的调控过程。     

32例新生儿败血症降钙素原和C反应蛋白检测结果分析

目的：探讨降钙素原（PCT）C反应蛋白（CRP）浓度检测在新生儿败血症诊治中的应用价值。方法：回顾性分析我院收治的32例新生儿败血症患者（观察组）血清降钙素原和c反应蛋白检测结果,并与同期40例正常新生儿（对照组）血请降钙素原和C反应蛋白检测结果作对比分析。结果：观察组血清降钙素原和c反应蛋白浓度及血清降钙素原和c反应蛋白阳性率均明显高于对照组（P〈0．05）。结论：血清降钙素原和c反应蛋白检测对新生儿败血症的早期诊断有一定应用价值。     

红免灵对小鼠红细胞免疫功能的影响

目的：探讨中药红免灵对小鼠红细胞免疫功能的影响，为该药的临床应用提供实验依据。方法：用丝裂霉素诱导红细胞功能抑制小鼠模型，观察红免灵对RC3bR(红细胞C3b受体花环），RICR（红细胞免疫复合物花环率），RFER（血清红细胞C3b受体花环促进率），RFIR（血清红细胞C3b受体抑制率），NTRR（红细胞自然免疫粘附肿瘤细胞结合率）的影响，结果:模型小鼠的RC3bR和RFER较正常对照组均降低，红免灵则对RFER有恢复作用，结论：红免灵能促进小鼠红细胞免疫功能的恢复。     

柴胡皂苷-d对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

目的探讨柴胡皂苷-d（saikosaponin—d,SSd）对脂多糖（1ipopolysaccharides,LPS）作用后肾小球系膜细胞（mesangialcell,MC）增殖及细胞外基质（extracellular matrix,ECM）的异常增生的影响,为肾小球硬化的防治提供实验依据。方法体外培养、鉴定大鼠肾小球MC。利用MTT、LDH释放实验、流式细胞技术观察SSd对LPS刺激后MC增殖的作用,ELISA法检测细胞外基质Ⅳ型胶原（type1Vcollagen,ColⅣ）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）及转化生长因子（transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1）。细胞免疫化学法检测细胞素依赖性蛋白激酶4（cyclin—dependentkinase4,CDK4）、c—Jun、c—Fos。结果SSd对MC增殖有抑制作用,可使Go／G1期细胞增多,并诱导细胞凋亡;SSd可抑制MC分泌ColⅣ、FN、TGF-β1,并抑制了CDK4、c-Jun、C—Fos的表达。结论SSd对肾小球硬化（glomerulosclerosis,GS）的抑制作用是通过抑制CDK4、c—Jun、c-Fos的表达实现的。     

积雪草苷对脂多糖诱导急性肺损伤的白细胞介素-10和血红素氧合酶-1影响研究

目的观察积雪草苷对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）白细胞介素-10（IL-10）、血红素氧合酶（HO-1）影响。方法40只Balb／c小鼠随机分为空白组，模型组，积雪草苷5，15，45mg&#183;kg。5组，每组8只。脂多糖（2．5mg&#183;kg^-1）气管滴注造急性肺损伤模型，24h后处死小鼠，免疫印迹法检测肺组织HO—1蛋白表达，ELISA法检测血浆IL-10表达。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性增加脂多糖所致急性肺损伤模型肺组织HO-1蛋白和IL-10表达。结论积雪草苷对LPS诱导急性肺损伤保护效应可能与促进HO-1表达和IL-10含量有关。     

泽泻汤对高热量饮食诱导认知功能损害模型小鼠的认知功能及脑组织神经炎症的影响

目的 探究泽泻汤对高热量饮食介导的认知功能损害的影响及可能机制。方法 将27只C57BL/J小鼠随机分成对照组、模型组和泽泻汤组,每组9只。模型组和泽泻汤组小鼠均采用高脂饲料喂养建立高热量饮食诱导认知功能损害小鼠模型,泽泻汤组在高脂饲料喂养的同时给予0.36 g/（kg·d）泽泻汤灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水灌胃,持续8周。每周同一时间记录小鼠体质量;干预结束后,各组小鼠进行口服葡萄糖耐量测试、胰岛素耐量测试;利用莫利斯水迷宫实验、旷场实验、新物体识别实验、Y迷宫测试对小鼠进行认知行为学检测;核磁共振波谱检测小鼠左侧海马、下丘脑、皮层神经代谢物质N-乙酰天门冬氨酸（NAA）、胆碱（CHO）、乳酸（Lac）、肌酸（Cr）、脂质（Lip）、肌醇（mI）的表达;蛋白质免疫印迹法检测小鼠脑组织突触素（SYN）、突触体相关蛋白25 (SNAP-25)、突触后致密蛋白95 (PSD-95)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、核转录因子κB p65 (NF-κB p65)及磷酸化核转录因子κB p65 (p-NF-κB p65)的表达;尼氏染色检测海马神经元的形态变化。结果 与对照组比较...     

异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞胶原的影响

目的探讨不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞（MC3T3-E1）增殖、I型骨胶原及AP-1亚基c—Jun表达水平的影响及其与原发性骨质疏松症的关系。方法细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。分别采用MTT法检测成骨细胞（MC3T3-E1）增殖、天狼星红染色法测定细胞层的胶原含量、Western—Blot检测c—Jun及RT—PCR检测I型胶原mRNA的表达。结果不同浓度异补骨脂素刺激,可明显促进MC3T3-E1增殖,细胞层胶原含量增加,c—Jun蛋白表达逐渐增强及I型胶原mRNA的表达增高,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论异补骨脂素可能通过促进核转录因子c-Jun表达,进而促进骨胶原合成,从而发挥其预防与治疗骨质疏松症的作用。     

葶苈子醇沉组分免疫调节作用研究

目的：研究葶苈子醇沉组分的体内外免疫调节作用。方法：采用体外淋巴细胞增殖实验考查葶苈子醇沉组分对正常小鼠脾脏中T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖的影响;采用碳廓清实验、血清溶血素实验、迟发型超敏反应实验,考察葶苈子醇沉组分对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫的影响;考察葶苈子醇沉组分对免疫低下小鼠免疫器官和血清中细胞因子含量的影响。结果：葶苈子醇沉组分能够促进刀豆蛋白A（Con A）诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖（LPS）诱导的B淋巴细胞的增殖（P<0.01）;提高免疫低下小鼠碳廓清指数K、吞噬指数α、半数溶血值HC50和耳廓肿胀度（P<0.05或P<0.01）;缓解免疫低下小鼠体质量的降低及胸腺和脾脏的萎缩（P<0.05或P<0.01）,提高血清中IL-2、IFN-γ和IL-4的含量（P<0.05或P<0.01）。结论：葶苈子醇沉组分能够促进体外淋巴细胞的增殖,保护免疫低下小鼠的免疫器官,增强免疫低下小鼠的非特异性免疫和特异性免疫,具有免疫促进作用。     

清化颗粒对db/db糖尿病小鼠肠道1型味觉受体及其下游信号因子影响的研究

目的 观察清化颗粒对db/db糖尿病小鼠肠道1型味觉受体及其下游信号因子的影响。方法 将db/db小鼠分为模型组、阳性对照组、中药组,每日分别予等量0.9%NaCl溶液、果糖、清化颗粒灌胃,持续4周。ELISA法分析小鼠血清胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和糖化血红蛋白（HbA1c）浓度;qRT-PCR、Western blot法分别检测小鼠回肠组织GLP-1、1型味觉受体亚型（TAS1R1、TAS1R2、TAS1R3）及其下游信号因子转导素α(α-gustducin)、磷脂酶Cβ2(PLCβ2)和瞬时感受器电位阳离子通道蛋白5(TRPM5)mRNA和蛋白表达;免疫组化技术检测空肠组织GLP-1蛋白水平,同时观察小鼠空腹血糖和体质量变化。结果与模型组比较,中药组可提高小鼠血清GLP-1的血清浓度、回肠组织GLP-1 mRNA和蛋白表达,上调小鼠回肠组织TAS1R2及其下游信号因子PLCβ2、TRPM5 mRNA和蛋白表达（P<0.05）,上调小鼠回肠组织TAS1R1及下游信号因子α-gustducin mRNA和蛋白水平（P<0.05）。在GLP-1外周效应方面,与模型组比...     

左归丸对间充质干细胞向软骨细胞分化过程中Ⅱ型胶原及蛋白多糖基因表达的影响

目的观察左归丸含药血清对间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）向软骨细胞定向分化过程中MSCs增殖、Ⅱ型胶原及蛋白多糖基因表达的影响。方法分离培养大鼠MSCs,体外诱导其向软骨细胞分化,诱导同时分别以高（57 g/kg）、中（28.5 g/kg）、低（9.5 g/kg）浓度左归丸含药血清及大鼠空白血清刺激细胞。CCK-8法检测各组对MSCs增殖的影响。将第3代MSCs分为空白对照组（加入大鼠空白血清）、诱导对照组（加入诱导液及大鼠空白血清）及左归丸含药血清组（加入诱导液及中浓度左归丸含药血清）,采用RT-PCR、免疫组织化学和Real-time PCR检测诱导分化软骨细胞中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达。结果与空白对照组比较,不同浓度左归丸含药血清均能促进MSCs增殖（P〈0.05）,其中以中浓度组最为明显（P〈0.05）。诱导第21天RT-PCR和免疫组织化学显示诱导对照组和左归丸含药血清组MSCs中均可见Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达,其中左归丸含药血清组中Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于诱导对照组。Real-time PCR结果显示,诱导第21天左归丸含药血清组蛋白多糖mRNA相对表达定量分别约是第7、14天表达量的16倍和3倍（P〈0.05）,并明显高于同期诱导对照组（P〈0.05）。结论左归丸含药血清能促进MSCs增殖、Ⅱ型胶原和蛋白多糖基因表达,可能是其软骨保护作用的分子基础之一。     

关节灵对小鼠体液免疫功能影响的实验研究

目的：为进一步探讨关节灵注射液对类风湿关节炎的治疗机理。方法：BALB／C小鼠经不同抗原免疫后，用ELISA测定并分析比较实验组（用关节灵组）和对照组（未用关节灵组）BALA／C小鼠血清IgM,IgG,IgE含量。结果：试验组血清ＩgM,IgE含量显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），血清ＩgC含量与对照组比较，无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论：关节灵能选择性抑制实验动物异常增高的ＩgE，IgM产生；而对发挥主要免疫作用的ＩgG的产生无明显影响，结果表明关节灵具有良好的免疫调节作用。     

逍遥散对LPS诱导抑郁样小鼠JNK通路的作用机制

目的：基于c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路探索逍遥散对脂多糖（LPS）诱导抑郁样小鼠的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组（腹腔注射，50 mg·kg-1）、氟西汀组（灌胃，2.6 mg·kg-1）、逍遥散低、中、高剂量组（灌胃，6.012 5、12.025、24.050 g·kg-1），给药14 d后，模型组和各给药组腹腔注射2 mg·kg-1 LPS，正常组腹腔注射等体积生理盐水。通过旷场、O迷宫实验检测小鼠抑郁样行为；高效液相色谱法（HPLC）检测小鼠海马去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）的含量。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)含量；免疫组化检测离子钙接头蛋白-1(Iba-1)、原癌基因（c-Fos）、c-Jun蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠海马IL-1β、c-Jun、c-Fos、JNK3 mRNA表达水平；全自动蛋白表达分析系统（Western）检测小鼠海马JNK、磷酸化（p）-JNK蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠中...     

通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除高脂血症小鼠血脂的影响

目的：观察通心络胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠[ApoE（-／-）]血脂的影响。方法：将40只ApoE（-／-）小鼠作为实验组,建立高脂血症模型,随机分为模型组以及治疗组4组,后者分别给予辛伐他汀及高、中、低荆量的通心络胶囊进行干预8周;另选8只同系的小鼠作为正常对照组。对胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL—c）、低密度脂蛋白（LDL—C）等指标进行检测分析。结果：模型组血清TC、TG和LDL—C均明显增高,HDL—C水平下降,与正常组相比均有统计学意义（P〈0．05）;通心络胶囊中、高剂量组小鼠的血清TC、TG和LDL—C均明显低于模型组,HDL—C水平高于模型组,与模型组相比具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;与辛伐他汀组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：通心络胶囊中、高剂量组具有良好的调节ApoE（-／-）高脂血症小鼠血脂的作用。