油茶籽提取物对体外培养不同肿瘤细胞增殖的抑制作用

目的：观察油茶籽不同溶剂提取物（95％乙醇提取物、水提取物、60％丙酮-水提取物）对体外培养肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法：常规传代培养人肺癌细胞株（A549）、人胃癌细胞株（SGC-7901）和人黑色素细胞瘤（A375）．采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞活性。结果：油茶籽丙酮-水提取物、醇提取物和水提取物对体外培养的A549、SGC-7901和A375细胞在7．8125-500μg／mL范围内均具有剂量依赖性的抑制作用。阳性对照药甲氨蝶呤和硫酸长春新碱在0．1-10μg／mL时亦呈剂量依赖性地抑制3种细胞的增殖。结论：3种肿瘤细胞体外增殖抑制作用强弱为油茶籽丙酮-水提取物〉油茶籽醇提取物〉油茶籽水提取物。     

黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞及其耐药细胞株体外抑制作用的研究

目的：研究黄独乙素（Diosbulbin B）对人胃癌SGC-7901细胞与其耐药细胞株的体外抑制作用。方法采用药物浓度递增法诱导人胃癌SGC-7901细胞,分别建立其顺铂、5-FU、阿霉素的耐药细胞株,应用MTT法检测黄独乙素对SGC-7901、SGC-7901/顺铂、SGC-7901/5-FU及SGC-7901/阿霉素的增殖抑制率,比较黄独乙素对以上四种细胞株的增殖抑制率是否有差异。结果黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞及其顺铂、5-FU、阿霉素耐药细胞株均表现出一定程度的剂量依赖性的增殖抑制作用（P＜0.05）,加入黄独乙素后人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率与其顺铂、5-FU、阿霉素耐药细胞株的增殖抑制率近似（P＞0.05）。结论黄独乙素对人胃癌SGC-7901细胞株表现出较低的交叉耐药性,能够在该细胞对顺铂、5-FU、阿霉素产生耐药后同样发挥增殖抑制作用。     

黄芪多糖与顺铂联合对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的研究

目的：研究黄芪多糖和顺铂联合应用对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察黄芪多糖和顺铂对胃癌SGC-7901细胞的抑制作用。结果：黄芪多糖能抑制人胃癌SGC-7901细胞株的增殖,并呈浓度及时间依赖性,黄芪多糖和顺铂联合应用应用对胃癌细胞的抑制作用显著高于单用黄芪多糖、顺铂组。结论：黄芪多糖在体外对胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用,黄芪多糖和顺铂联合应用效果强于单独用药组。     

尖吻蝮蛇毒小分子多肽对人胃癌细胞株SGC-7901的抑制作用

目的探讨尖吻蝮蛇毒小肽对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞株的增殖抑制作用及作用机制。方法用MTT法观察尖吻蝮蛇毒小肽对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响；采用光镜、电镜观察细胞形态及超微结构变化；荧光染色法测定和观察尖吻蝮蛇毒小肽对SGC-7901细胞凋亡影响；采用结晶紫染色法测定尖吻蝮蛇毒小肽对SGC-7901与FN黏附作用的影响。结果MTT显示尖吻蝮蛇毒小肽呈剂量与时间依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞株的增殖，电镜观察给药组细胞出现明显凋亡，荧光显微镜下可见细胞形态发生改变，尖吻蝮蛇毒小肽对SGC-7901细胞在FN基质上的黏附有一定的抑制作用，并呈浓度依赖关系。结论尖吻蝮蛇毒小肽对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞株有较显著的抑制作用，该作用与诱导细胞凋亡和抑制细胞和细胞外基质黏附的能力有关。     

尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的:体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:采用MTT法、流式细胞仪(FCM)、电镜等技术,体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和影响及可能的机制.结果:MTT显示尼美舒利(12.5～400μmol/L)呈时间-剂量依赖方式抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖.FCM显示,DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰".S期、G2/M期细胞比例升高,G1期细胞比例下降,阻止细胞周期的进展.电镜下见典型的细胞凋亡形态特征:细胞核染色质致密浓缩,凋亡小体形成等.结论:尼美舒利体外能显著抑制人胃癌细胞株SGC-7901生长,可能与诱导细胞凋亡阻止细胞周期进展有关.     

BSO对体外人体肿瘤细胞株作用的实验研究

用体外实验方法,以人红白血病K562,人胃癌细胞株SGC-7901为靶细胞,研究丁胱亚磺酰亚胺(BSO)对人体肿瘤细胞的直接杀伤及BSO与顺氯氨铂(DDP)或5-氟尿嘧啶(5Fu)联合应用的增敏作用。结果表明BSO单用或与DDP、5Fu联合应用对K562和SGC-7901均有明显的杀伤作用。     

洛铂对胃癌细胞SGC-7901中Akt、PTEN、ERK mRNA表达的影响

目的:探讨洛泊对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖抑制作用及Akt、PTEN、ERK mRNA的表达。方法:体外培养胃癌细胞SGC-7901,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度不同时间洛铂对胃癌细胞株的生长抑制率;RT-PCR法检测Akt、PTEN、ERK mRNA表达的变化。结果:洛铂体外能抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖,检测发现PTEN mRNA的表达增高,AKT、ERK mRNA的表达减少,且呈剂量时间依赖性(P<0.05)。结论:胃癌SGC-7901细胞对洛泊具有药物敏感性,洛铂能诱导体外培养的胃癌细胞凋亡,其作用机制可能与洛铂诱导胃癌细胞中PTEN-mRNA的表达增高AKT、ERK mRNA的表达减少有关。     

β-咔啉类生物碱对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及PTEN、ERK mRNA表达的影响

目的探讨β-咔啉类生物碱对体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901细胞的凋亡作用及PTEN、ERK m RNA表达的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,用CCK-8法测定不同浓度、不同时间β-咔啉类生物碱对胃癌细胞株的生长抑制率;用流式细胞技术检测细胞的凋亡;RT-PCR法检测PTEN、ERK m RNA表达的变化。结果β-咔啉类生物碱体外能抑制人胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖,促进了人胃癌SGC-7901细胞凋亡。不同浓度的对β-咔啉类生物碱作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48 h后,PTEN m RNA的表达增高,ERK m RNA的表达减少,且呈剂量时间依赖性(P<0.05)。结论人胃癌SGC-7901细胞对β-咔啉类生物碱具有药物敏感性,β-咔啉类生物碱能诱导体外培养的胃癌细胞凋亡,其作用机制可能与β-咔啉类生物碱诱导胃癌细胞中PTEN-m RNA的表达增高和ERK m RNA的表达减少有关。     

人胃癌耐羟基喜树碱细胞株SGC-7901／HCPT的建立及其生物学性状

目的建立人胃癌耐羟基喜树碱细胞株即SGC-7901／HCPT，并对其生物学特性进行研究。方法采用浓度梯度递增法建立SGC-7901／HCPT；用细胞计数法描绘SGC-7901／HCPT和亲代细胞株即SGC-7901的生长曲线和群体倍增时间；用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测SGC-7901／HCPT对多种常用抗肿瘤药物的耐药特性；用流式细胞仪检测SGC-7901／HCPT与SGC-7901的细胞周期分布。结果历时9个月建成人SGC-7901／HCPT；SGC-7901／HCPT增殖减慢，倍增时间比SGC-7901延长8．2h；SGC-7901／HCPT对HCPT的耐药指数为9．583，与丝裂霉素（MMC）、5-氟脲嘧啶（5-Fu）、顺铂（CDDP）、长春新碱（VCR）、阿霉素（ADM）、柔红霉素（DNR）、足叶乙苷（VP-16）均无交叉耐药；SGC-7901／HCPT的S期和G2～M期的细胞比例比SGC-7901增多。结论本课题建立了SGC-7901／HCPT，其生物学特性不同于SGC-7901，具有耐药细胞株的基本生物学特性。     

氯丙嗪对体外培养人宫颈癌Hela细胞株的生长抑制作用

目的：探讨氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株的体外抑制作用。方法：采用MTT测定法，观察不同浓度氯丙嗪(0μmol／L，3．0μmol／L，6．0μmol／L，12．5μmol／L，25．0μmol／L，50．0μmol／L，100．0μmol／L)作用后体外培养的人宫颈癌Hela细胞的细胞增殖抑制率，并于用药后不同时间点观察细胞形态学变化。结果：不同浓度的氯丙嗪对Hela细胞生长均有抑制作用，随药物浓度的增加，抑制作用加强。氯丙嗪浓度为3．0μmol／L即呈现明显的生长抑制作用，抑制率为7．91％；浓度为100．0μmol／L时抑制率最高，达59．39％。用药4h后镜下即可见部分细胞贴壁性降低，肿胀呈球形，核膜溶解，不见核的轮廓；部分细胞裂解呈碎片状；用药8h后碎片明显增多。结论：氯丙嗪对人宫颈癌Hela细胞株具有体外生长抑制作用。     

上皮生长因子及其抗体对人癌细胞系生长的影响

本研究观察了上皮生长因子(EGF)抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对3个目建的人胰腺癌细胞系(PC-1,PC-2,PC-3)和3个其它人癌细胞系(肺腺癌LETP,乳腺癌BCP37和胃腺癌SGL7901)生长的影响。结果表明:EGF仅对PC-1和LETP2个细胞系有轻度刺激生长的作用,对其它4个细胞系无明显作用。在有EGF存在的条件下,抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对PC-1,LETP和SGL7901 3个细胞系有生长抑制作用。 用Northern核酸杂交技术研究表明这6个人癌细胞系中均有EGF受体mRNA的表达。结果表明:虽然这些细胞系中均有EGF受体的基因表达,但不一定对外源性EGF处理有反应。     

三氧化二砷在肺癌治疗中的研究进展

肺癌是当今发病率及死亡率极高的恶性肿瘤之一,日益威胁着人类的健康。化疗效果不理想,寻求新的化疗药物,或者提高肺癌对化疗药物的敏感性,是目前研究的热点之一。三氧化二砷是中药砒霜的主要成分,主要通过抑制肿瘤细胞的增殖和诱导细胞凋亡发挥抗癌作用,并且具有逆转肿瘤细胞对化疗药物耐药的作用,近来引起了国人对其抗肿瘤作用的重视。因其在祖国医学中应用已久,具有安全、相对低毒的特点,有望成为新的高效、低毒的抗癌药物。     

平阳霉素的体外抗癌谱

采用集落形成试验法,对平阳霉素(pingyangmycin,PYM)的体外抗癌谱进行研究,结果10种人癌细胞系对PYM的敏感性存在差异,ID_(50)为0.03～0.82μg/ml。食管癌Eca109和CaEs17细胞、鼻咽癌CNE细胞及肝癌BEL-7402细胞对PYM敏感,ID_(50)<0.2μg/ml,与PYM的临床疗效一致;2种起源于宫颈癌的细胞系对PYM明显抗拒,ID_(50)>0.7μg/ml,与临床疗效不一致;2种胃腺癌细胞系(MGc80-3和BGC-823)对PYM的敏感性较低,ID_(50)为0.21和0.47μg/ml;肺鳞癌LTEP-78为PYM敏感细胞,ID_(50)仅为肺腺癌SPC-A-1细胞的1/7,但其临床意义尚不清楚。     

肝素对人乳腺癌细胞生长及Hyase、HA和CEA表达的影响

目的探讨肝素是否具有肿瘤细胞毒性作用以及对肿瘤侵袭、转移相关因子如透明质酸酶(hyaluronidase,Hyase)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和癌胚抗原(CEA)的表达有何影响。方法用MTT法测定肝素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231生长的影响;酶联吸附法测定8株人乳腺癌细胞培养上清液中Hyase、HA和CEA的表达。结果肝素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长无显著影响,但能降低人乳腺癌细胞Hyase的表达(P<0.05),对HA和CEA的表达无显著影响(P>0.05)。结论肝素是一种非细胞毒性药物,不能直接杀灭肿瘤细胞,但能降低肿瘤侵袭、转移相关因子Hyase的表达。     

重组复合高效干扰素抗人乳腺癌细胞的体外实验研究

目的 了解重组复合高效干扰素(rSIFN-co)在体外抗乳腺癌细胞的作用,以及与抗肿瘤药物合用的协同抗肿瘤作用,并初步探讨其可能的作用机理.方法 采用MTT比色法和流式细胞仅技术,检测rSIFN-co、干扰素(干复津)、抗肿瘤药物(盐酸表柔比星),以及联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞及人乳腺癌阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞增殖、凋亡的影响,采用免疫组化SABC法检测经过各药物处理的MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞中P53、Bcl-2、CerbB-2蛋白的表达.结果 rSIFN-co对MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞均具有增殖抑制、促进凋亡作用,作用强于干复津,且有剂量依赖性及时间依赖性倾向;rSIFN-co与盐酸表柔比星联用具有协同增效的作用;rSIFN-co可下调MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平.结论 rSIFN-co诱导MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞凋亡、抑制其增殖作用可能与下调肿瘤细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平有关.     

Hedgehog通路阻滞剂GANT61对胰腺癌细胞株的抑制作用

目的：探讨Hedgehog信号通路特异性阻滞剂GANT61抑制本通路在胰腺癌细胞株中的表达,观察胰腺癌细胞株增殖、迁移等能力的改变,为胰腺癌的治疗提供基础实验数据。方法：采用多株胰腺癌细胞,半定量RT-PCR法从中检测出Hedgehog通路表达相对活跃的细胞株,采用不同浓度的GANT61处理细胞株后,MTT法检测细胞株增殖活力改变,细胞划痕实验检测细胞迁移能力改变。结果：采用GANT61处理后,随着浓度的增加,胰腺癌细胞株增殖活力下降,迁移能力降低。结论：GANT61可通过抑制Hedgehog信号通路的表达,有效抑制胰腺癌细胞株的增殖、迁移等,为GNAT61药物在临床治疗胰腺癌提供扎实的理论基础。     

肺癌细胞裂解物刺激树突状细胞诱导产生免疫应答的实验研究

目的采用肺癌细胞裂解物致敏树突状细胞（DCs）的方法制备肺癌疫苗并进一步通过实验验证其疗效。方法利用外周血的单个核细胞经粒细胞-巨嗜细胞集落刺激因子（GM-CSF）和人白细胞介素4（IL-4）体外诱导产生树突状细胞,用A549（人肺腺癌细胞系）细胞冻融抗原对其进行冲击诱导自体细胞毒T淋巴细胞（CTLs）产生。通过细胞毒试验及ELISA测定细胞因子的分泌和CTLs杀伤活性。制备荷瘤裸鼠模型,不同分组裸鼠经过一次或多次皮下注射CTLs。结果 A549冻融抗原致敏的DCs增加CTLs增殖,诱导的CTLs对A549细胞产生特异性杀伤,经过一次及多次接种后荷瘤裸鼠肿瘤生长减缓,并且肿瘤变小及生存时间较对照组明显延长,起到抑制肿瘤生长和延长生存时间的作用。结论通过实验证实了肺癌细胞裂解物抗原来刺激树突状细胞治疗肺癌A549荷瘤裸鼠模型是安全有效、可行的。为临床应用以树突状细胞为基础的肺癌疫苗免疫治疗提供了实验依据。     

肺癌全细胞高、低转移株中uPA基因启动子的序列和活性

目的　分析人肺巨细胞癌高、低转移株中uPA基因启动子序列差异和这种差异对启动子活性的影响。方法　用PCR分段扩增人肺巨细胞癌高 (95D)和低 (95C)转移细胞株中uPA基因启动子序列 ,将uPA启动子亚克隆到荧光素酶为报告基因的 pGL3 Basic载体上 ,转染 95D或 95C细胞 ,分析启动子活性。 结果　 95D与 95C细胞uPA基因启动子序列中有 3个位点碱基的差别 ,95D分别是 - 1933bp为“T” ,- 4 2 4bp为“C” ,- 96bp为“G” ,而 95C分别为“C”、“T”、“T”。这些不同对启动子活性的影响未见差别。在 - 2 14 3/ - 182 4之间存在uPA基因启动子的增强子序列 ,在 - 182 4 / - 4 0 8之间存在uPA启动子的负性调控序列。结论　uPA在 95D与 95C细胞中表达的差别不是直接由于启动子序列差别引起的 ,而可能是由于两种细胞中存在转录因子量的差别     

Protein Expression of BLM Gene and Its Apoptosis Sensitivity in Hematopoietic Tumor Cell Strains

Patients with Bloom syndrome （BS） show an immunodeficiency, an enhanced sister chromatid exchanges （SCEs）, a strong genetic instability and an increased predisposition to all. In order to investigate the differential expression of BLM protein in hematopoietic tumor cell strains and study the effects of BLM gene on ultraviolet （UV）- or hydroxyurea （HU）-induced apoptosis, Western blot was used to detect the expression of BLM protein in normal human bone marrow mononuclear cells and 4 kinds of hematopoietic tumor cell strains. The 4 kinds of hematopoietic tumor cells were exposed to UV light with a germicidal UV lamp or treated with 2 mmol/L hydroxyurea and the apoptotic rate was detected by using AnnexinV-FITC. The results showed that these tumor cells expressed BLM protein higher than the normal human bone marrow mononuclear cells （P〈0.01）. In the 4 hematopoietic tumor cells, BLM protein was all specially cleaved in response to UV- or HU-induced apoptosis. The increase of BLM protein expression may play an important role in the development of these tumors, and BLM proteolysis is likely to be a general feature of the apoptotic response.     

涤痰化瘀汤对人胃癌SGC—7901细胞生长影响的研究

目的 研究涤痰化瘀汤及其药物血清（剂量为临床等效果 量）对体外培养的人胃癌SGC－7901细胞株的抑制作用。方法 采用MTT法,观察细胞抑制率,结果 涤痰化瘀汤大、中、小剂量组及其药物血清组对人胃癌SGC－7901细胞的抑制率分别为78.5％、41.4％、27.8％和23.9%。结论 涤痰化瘀汤及其药物血清对人胃癌SGC－7901细胞生长均有明显的抑制作用。