淋巴细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果影响的研究

目的 探讨单克隆抗体SPA红细胞花环法(McAb-A-E法)检验T淋巴细胞亚群时,淋巴细胞分离液对阳性花环细胞计数结果以及非T淋巴细胞阳性花环计数结果的影响.方法 选择淋巴细胞分离液法分离的单个核细胞(PBMC)和不加任何物质的抗凝血用自然沉降法分离的混合细胞,用10倍量稀释液洗涤1次.两种细胞用McAb-A-E直接法...     

解离红细胞致敏抗体的3种方法比较

目的　寻找一种快速、简便、敏感的放散试验方法。方法　分别用氯仿和传统加热、乙醚法对 1 3例被IgG和IgM血型抗体同时致敏的红细胞进行放散试验 ,检测放散液中红细胞抗体效价。 结果　在 3种放散方法中 ,氯仿法不仅所获的放散液量多、颜色浅而透明 ,而且敏感性也不低。结论　氯仿法放散试验操作简便快速 ,安全 (试剂不易燃烧 ) ,且可同时放散出吸附在红细胞上的IgG和IgM抗体     

酸放散方法对弱D抗原的筛选研究

目的 目的确定用盐水抗D检测为D阴性的红细胞标本中是否存在Del型红细胞标本。方法 将待检红细胞样本与人血清抗D抗体混合吸收。采用酸放散方法将致敏在红细胞上的抗D抗体放散下来，用微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡及试管法检测放散液中是否存在抗体。结果 51份由盐水抗D确定为D阴性的红细胞样本中有3人用传统试管法抗人球蛋白实验检测为弱凝集；经酸放散实验后，检测放散液，此3人放散液中均存在较强的抗D抗体，以此确定此3人红细胞抗原为Del型。结论 酸放散实验在临床输血中可做为确定红细胞上是否存在弱D抗原的敏感方法。     

乙型肝炎病人T淋巴细胞亚群的检测

近年来，我定对住院的乙型肝炎（乙肝）病人进行了外周血T淋巴细胞亚群检测，以了解其免疫功能的变化，现将结果报告如下．1对象与方法1．1对象病人组：36例，男用树，女8例，年龄19～72岁，对照组：正常人26例，男16例，女10例，年龄23～65岁。1．2方法中国科学院血液届研究所免疫组提供隼克隆抗体（McAb）致敏SPA花环试剂进行检测．2结果T淋巴细胞亚群检测结果见附表。3讨论检测结果显示：乙肝病人总T细胞（CD3）正常，辅助性T细胞（CO4）明显低于正常人（P＜0．001），抑制性T细胞（CD4）明显高于正常人（P＜0．001），CD4／CD8…     

免疫检验学试题参考答案

一、名词解释1、间接凝集抑制试验：将引起致敏载体发生凝集反应的抗原或抗体，用相应的抗体或抗原中和后再加入致敬载体，此时致敬我体不发生凝集，故称间接凝集抑制试验。2、29℃花环试验：将淋巴细胞与绵羊红细胞况和离心沉淀后，放置29C并温1小时所形成的T淋巴细胞花环．称谓29℃花环试验。3、葡萄球菌A蛋白：葡萄球菌A蛋白（SPA）是金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种特殊的蛋白质。具有与人和某些动物的IgGFc段结合的特性，同时仍保留IgG与相应抗原结合的Fab段的反应特住。4、多克隆抗体：每一种抗原分子常有多个抗原决定读，可刺激…     

与白细胞有关的红细胞抗体

一些血清在抗球蛋白试验中与某些供者红细胞发生弱反应,但却不能根据配组红细胞确定其抗体型别。这些弱反应可以单独发生或与确实的红细胞抗体的反应并存,由于这些血清也常有淋巴细胞毒性反应,因而被认为与白细胞有关。作者用15个O型供者的红细胞和淋巴细胞作为配组细胞,配组时尽量包括HLA的低频率抗原,对含有未知红细胞抗体的27份血清作了鉴定。每份血清均与15个供者红细胞和淋巴细胞反应。与淋巴细胞反应用NIH微量淋巴细胞毒试验,与红细胞反应用改良的毛细管法抗球蛋白试验,方法是血清与等量的22%牛白蛋白溶液混合,充注于0.4×90mm毛细管内约2/3高度,再加入50%的试剂红细胞盐水悬液。毛细管插     

微量板比色试验的应用评价

红细胞同种抗体在体内是否引起红细胞的破坏 ,用常规的血清学方法不能完全检测出来。致敏RBC在网状内皮组织系统内主要是被单核吞噬细胞破坏 ,在这些细胞上有可结合 Ig G1、Ig G2 、Ig G3和补体 C3 或 C4成分的特殊受体。单核细胞结合了致敏 RBC后 ,通过吞噬作用或依赖抗体细胞介导的细胞毒试验 ( ADCC)可破坏 RBC。由于这类试验较常规血清学试验更接近人类自然免疫过程 ,因而在预测结果方面就更具有准确性和灵敏性。材料与方法1　单核细胞提纯　将 5 ml从全血中分离的白膜层 ( 2 h内 )加入到 3ml淋巴细胞分离液 (上海产 )中 ,用 1…     

两种方法检测双份T淋巴细胞CD抗原误差的对比

目前检测T淋巴细胞及其亚群CD抗原的方法多种多样，本文报告采用间接荧光法和抗体致敬红细胞花环法进行检测的结果。1．检测对象正常健康者（包括献血员）100例．风湿性心脏病、SLE等临床标本45份。抽血后按常规分离单个核细胞待检。2．方法间接荧光法采用北京军科院药企（批号89-9-6）抗体致敏红细胞花环法用武汉生物制品研究所药企（批号900619），全部严格按说明书操作。专人用同一方法每份标本检测两次，两次测定差值用下列公式计算双份测定标准差（Edt62n）1／2，d：为双份测定值之差，n：为测定标本数，两法的双份洲金标准美结果如…     

红细胞上IgG的定量测定:每个红细胞上IgG分子的数目与直接和间接抗人球蛋白试验强度间的关系

本文以放射免疫法测定红细胞上的IgG分子数目,其敏感度达每个细胞12个以内,且能使非特异性结合降至最低限度,故可用于各种抗体的间接抗人球蛋白试验(IAGT)研究和大量直接抗人球蛋的试验(DAT)阳性病例。试剂:AHG试剂为单一特异性的抗IgG,用盐水稀释并进行标化,再以氯胺T标以~(125)I,吸附于胰蛋白酶处理的细胞上。抗体致敏细胞:取正常人或病人抗血清2体积,加10%红细胞盐水悬液1体积,37℃孵育1小时,洗涤4次,配制成适当浓度。抗人球蛋白试验:在12×75mm试管中,加入5%红细胞悬液及AHG试剂各1体积,120g离心1分钟,     

粒细胞性白血病细胞上的Fc受体:花环形成试验的比较

急性粒细胞单核细胞性白血病(以下简称粒单细胞性白血病)与急性粒细胞性白血病的区别在于前者的原始细胞可与包被抗Rh抗体的人Rh(D)阳性红细胞形成花环。根据这特点,似乎粒单细胞性白血病的原始细胞有Fc受体,而原粒细胞无Fc受体。由于包被兔抗羊红细胞抗体的羊红细胞可与成熟粒细胞形成花环,显然,正常粒细胞是有Fc受体的。白血病的原粒细胞不能和人抗体形成花环的一个原因,可能是与结合到指示红细胞的Ig的密度有关。与此有关的事实是,只有用超免疫的抗CD(Ripley)血清致敏的Rh阳性红细胞才能与人粒细胞发生花环形成。作者想知道不能查出原粒细胞上的Fc受体的     

酶联抗球蛋白试验检测红细胞抗体的评价

ELISA由Engvall和Perlmann在1972年首创,最近应用于检测红细胞抗体,称为酶联抗球蛋白试验(ELAT)。用LISS作红细胞致敏,以及用碱性磷酸酶联结的抗球蛋白(AP-AHG)血清的酶联抗球蛋白试验,已经在222份各种特异性红细胞抗体的测试中,与惯用的低离子强度抗球蛋白试验做了比较。红细胞悬液用0.15mol/l氯化钠溶液洗4次,用LISS重悬,配成10%的红细胞悬液,致敏。该悬液0.1ml与血清0.1ml在75mm×12mm的玻管中37℃温育15分钟,然后细胞用含0.2%牛血清白蛋白(BSA)的咪唑缓冲氯化钠液(BS-BSA),pH为7.0,洗4次,     

上期输血医学病案讨论参考答案

上期输血医学病案讨论参考答案病案１３参考答案２．１冯××的红细胞直接抗球蛋白试验是阳性，但红细胞放散液与试剂谱细胞反应是阴性，提示致敏在患者红细胞上的抗体，没有能通过所用的方法放散出来，或者是该抗体与Ｏ型的试剂谱细胞上的抗原无关，如抗－Ａ和抗－Ｂ，就...     

EDTA抑制抗-A_1

本文报道了1例抗-A_1被商品试剂细胞中的乙二胺四乙酸(EDTA)抑制的现象。被检者为1例发生严重输血反应的病人。用商品试剂细胞(含EDTA)作抗体筛选。用抗-A_1植物血凝素、A_2试剂红细胞和配组细胞作试剂来检测病人。作者发现:病人为A型,Rh阳性,直接抗球蛋白试验阴性,抗体筛选阴     

873例血型血清学检测药物诱导免疫溶血性贫血的结果分析

目的探讨药物诱导免疫溶血性贫血(DIIHA)的机制及血型血清学检测的方法。方法通过直接抗人球蛋白试验检测红细胞致敏情况,通过间接抗人球蛋白试验分别以药物包被法及免疫复合物法检测血浆中及红细胞放散液中药物抗体。结果 873例患者中,直抗阳性患者156例,其中血浆与红细胞放散液以药物包被法检测出头孢菌素抗体3例,免疫复合物法检出头孢菌素抗体4例。结论通过患者红细胞直接抗人球蛋白试验、血浆中及红细胞放散液中药物抗体检测,能够大大提高对DIIHA的诊断能力。     

流式细胞检测术分析胎肝CD_(34)~+细胞成分

目的　了解胎肝中CD3 4 + CD3 8+ 和CD3 4 + CD3 8-细胞数量组成。方法　从胎肝中分离细胞 ,制成细胞悬液 ;经淋巴细胞分离液密度梯度离心 ,收集单个核细胞 ;洗涤两次 ,制备细胞母液 ;取约 1× 10 6细胞经CD3 4 CD3 8荧光抗体标记 ,流式细胞仪检测CD3 4 + CD3 8+ 和CD3 4 + CD3 8-细胞含量 ;用红细胞裂解液裂解残留在MNCs中的红细胞 ,统计肝细胞中MNCs的相对总数 ,最终统计出胎肝中CD3 4 + 和CD3 4 + CD3 8-细胞的相对数量。结果　 2 2～ 30W胎龄胎肝MNC中CD3 4 + 细胞平均为 12 .0 2 %± 4 .0 0 % ,CD3 4 + CD3 8-细胞平均为 6 .17%± 5 .0 8% ,CD3 4 + CD3 8-细胞在CD3 4 + 细胞中约占 5 1.0 0 %± 32 .5 6 % ;该期胎肝组织中CD3 4 + 细胞和CD3 4 + CD3 8-细胞相对总数和胎龄有一定的相关性 ,30W时明显高于 2 2W。结论　 2 2～ 30W胎龄胎肝中的CD3 4 + 细胞和CD3 4 + CD3 8-细胞相对百分率都高于胎儿脐血、新生儿脐血、成人骨髓和外周血的百分率 ;CD3 4 + CD3 8-细胞在CD3 4 + 细胞中的比例也远高于上述四种组织中的比例     

缺少细胞骨架红细胞微囊的免疫介导的凝集反应

红细胞凝集反应是复杂的生化现象,他被视为大多数常规试验的终点,这对于保存血液尤为重要。免疫介导凝集反应包括两个阶段:不可见的致敏阶段,即抗体与红细胞表面抗原决定簇的结合;和可见的凝集反应,即由包被的抗体和致敏的红细胞的随机碰撞而导致红细胞间的相互缠结。IgG抗体需加入抗人球蛋白试剂产生凝集现象。 红细胞膜是由磷脂双分子层和镶嵌蛋白形成的流动镶嵌体组成,其下面的蛋白质网状结构即为细胞骨架。细胞骨架的功能包括维持膜的完整性、维持红细胞的形状和变形性、限制带3蛋白的侧向运动。由于红细胞膜与细胞骨架结合的复杂性,故而难以将这两种结构相互分离。为了简化红细胞膜成分,一些生成缺     

聚凝胺试验用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的探讨

目的：探索MPT用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的可能性。方法：设计了用MPT测定致敏红细胞的方法，即先吸取3％～5％的待检红细胞悬液2滴和健康献血员AB型血浆(血清)1滴混合，AB型血浆作为一种抗红细胞“粘壁”现象的惰性介质；设计了用MPT测定血清中有无不完全抗体的方法，即先吸取待检血清2滴加入3%～5%的Rh(D)阳性混合健康献血员O型红细胞悬液1滴，O型红细胞作为检测不完全抗体是否存在的栽体；接下去按一般的MPT步骤操作。通过模拟试验和临床应用来论证MPT的这一新用途。结果多量蛋白质的存在不影响MPT结果，蛋白质过少会导致MPT中红细胞“粘壁”现象，通过加入适量血浆(血清)能消除；MPT能检测最高稀释度为1：256的抗D(IgG)和1：64的免疫性抗A血清制备的模拟致敏红细胞和不完全抗体。MPT检测凝胶法抗球蛋白试验阳性15例，MPT结果比试管法敏感，和凝胶法一致；检测试管法阴性20例临床标本，MPT结果与试管法符合。结论：MPT可用于致敏红细胞和相应不完全抗体的初筛，比试管法抗球蛋白试验敏感、快捷。     

红细胞致敏对毛细管离心法分离新旧红细胞的影响

目的：探讨毛细管离心法分离新旧红细胞与红细胞致敏的关系。方法对新鲜 A 型 RHD 阳性红细胞或陈旧 B 型 RHD 阳性红细胞用 IgG 型抗-D 致敏后,与原本未致敏的红细胞混合,用毛细管离心法分离,比较新鲜红细胞致敏与陈旧红细胞致敏对分离效果的影响。结果不论是否致敏,均可达到分离新旧细胞的效果。但是,新鲜未致敏的 A 型红细胞＋陈旧致敏的 B 型红细胞分离效果更好,而新鲜致敏的 A 型红细胞＋陈旧未致敏的 B 型红细胞分离效果略差。结论采用毛细管离心法可以分离新旧红细胞,红细胞致敏对其分离效果有一定影响但不改变整体趋势,红细胞致敏可能增加红细胞的密度。     

急性白血病患者淋巴细胞亚群及电泳观察

目的 探讨急性白血病患者T淋巴细胞亚群与淋巴细胞电泳间的关系。方法 T淋巴细胞亚群采用单克隆抗体致敏的红细胞花环直接法。淋巴细胞电泳采用单个核淋巴细胞电泳法。结果 急性白血病患者其快峰淋巴细胞数量增加，电泳率增加，其T3、T4淋巴细胞较正常减低，T4/T8比值较正常减低。结论 急性白血病患者细胞免疫功能减低。     

CD_3AK细胞治疗中晚期癌肿107例疗效分析

目的 :分析CD3 AK细胞在 10 7例中晚期癌症病人治疗中情况 ;方法 :取正常献血员外周血离心提取淋巴细胞成份液加入CD3 单抗及小剂量IL 2与 5 %CO2 孵育增殖至 2× 10 84× 10 8静脉输注于病人 ;结果 :肿瘤缩小 ,临床症状改善 ,总有效率为 5 4.2 % ;CD3 AK细胞能使病人NK细胞活