补肾益精方药对老年大鼠染色体端粒DNA重复序列长度的影响

目的:观察补肾益精方药对老年大鼠细胞染色体端粒DNA重复序列长度的影响,探讨其延缓衰老的机理.方法:以经方左归饮及自拟方益肾宝为补肾益精方药给予老年大鼠.以本实验室建立的PCR法测定老年大鼠肝、肾、睾丸及白细胞染色体端粒DNA重复序列的相对长度.用紫外分光光度计测端粒DNA扩增产物,以光密度值表示端粒DNA重复序列相对长度.结果:左归饮和益肾宝两组大鼠除睾丸组织外,肝、肾和白细胞端粒DNA扩增产物光密度值均大于老年对照组,统计学处理具有显著性差异.结论:左归饮和益肾宝补肾益精方药可使体细胞染色体端粒DNA重复序列减缓缩短,这可能就是补肾益精方药延缓机体衰老的作用机制之一.     

补肾益精方药对老龄大鼠不同脏器DNA聚合酶的影响

中医“肾精”与现代分子生物学中DNA功能极其相似,因此,补肾益精方药应对DNA合成、复制、损伤修复有一定的影响。本课题选用古典经方左归饮及自拟方益肾宝作为补肾益精方药,观察其对老龄大鼠不同脏器。DNA聚合酶活性的影响,探讨其延缓衰老的机理。1材料与方法1·1材料1·1·1主要试剂氚标记的脱氧胞嘧啶核苷三磷酸(〔3H-〕dCTP),放射比活为592GBq/mmol,9·25MBq,购自英国Amersha m Pharmacia Biotech公司。dGTP,dATP,dTTP购自华美公司。鱼精DNA,国产。DTT,国产。1·1·2主要试剂的配制酶提取缓冲液:取1mol/LTris母液2·5ml,…     

补肾益精方药对外周淋巴细胞DNA损伤修复能力的影响

实验用UV和MMC作损伤因子,通过细胞短期培养和同位素液体闪烁计数测定等方法,观察具有补肾益精功能、在临床有明显延衰疗效的“固真胶囊”对人体与大鼠外周淋巴细胞DNA的非程序合成(UDS)水平和复制后合成(PRDS)水平,人体外周淋巴细胞姐妹染色体交换(SCE)率和细胞增殖周期(CGC)状况的影响,以探讨补肾益精方药对机体外周淋巴细胞DNA受损后修复能力的影响。实验结果显示:由UV诱发的对照老人UDS水平低于青年人,老年大鼠的UDS和PRDS水平也低于青年大鼠;由UV诱发的服药老人UDS水平和饲药老年大鼠的PRDS水平均高于老年对照组;对由MMC损伤引起的修复水平,各用药老年组与对照老年组均无显著差异;服药老人的自发SCE值和由MMC诱发的SCE值都低于对照老年组,而CGC的M_3值和增殖速率PRI都比对照老年组提高。提示:补肾益精方药确明显提高了老年机体外周淋巴细胞DNA损伤后的修复能力,这可能就是其延衰作用的一个现代科学机理。     

补肾益精药物对老年小鼠DNA双链结构及损伤修复能力影响

目的观察了补肾益精药物益肾宝及左归饮对老年小鼠ＤＮＡ损伤、抗损伤及ＤＮＡ熔解温度（Ｔｍ）、热增色效应等方面的影响，以探讨补肾益精中药对ＤＮＡ结构及某些功能的作用。方法紫外线损伤小鼠脾淋巴细胞，用荧光法检测其ＤＮＡ损伤及抗损伤的情况；提取小鼠肝脏ＤＮＡ，用分光光度法检测其不同温度下的紫外吸收值。结果（１）老年小鼠脾淋巴细胞ＤＮＡ双链剩余率较青年小鼠显著降低，紫外线照射后，其损伤修复能力较青年小鼠显著降低，服用补肾益精药物后明显提高。（２）老年小鼠肝ＤＡＮ的Ｔｍ及热增色效应较青年小鼠升高，服用补肾益精药物后其Ｔｍ及热增色效应降低。讨论补肾益精药物可以减少老年小鼠ＤＮＡ损伤程度，提高其损伤修复能力，改善其ＤＮＡ结构的增龄性变化     

Albaconol对DNA拓扑异构酶活性的抑制及对DNA的直接作用

目的：研究地花茵(Albatrellus confluens)提取物Albaconol对DNA拓扑异构酶(TOPO)活性的抑制及对DNA的直接作用。方法：DNA超螺旋解旋法检测Albaconol对TOPO介导pBR322 DNA解旋反应的影响;琼脂糖凝胶电泳法测定Albaconol对pBR322 DNA的直接断裂作用。结果：Albaconol能明显促进TOPOⅡ介导的DNA解旋或断裂,并抑制DNA再连接反应,在16μg／ml时完全抑制TOPOⅡ活性,但对TOPOⅠ介导的DNA解旋反应几无影响;同时在较高浓度时(≥400μg／ml)还能直接引起pBR322 DNA双链断裂。结论：Albaconol能选择性地抑制TOPOⅡ的活性,TOPOⅡ是其抗肿瘤作用的细胞内靶点之一。     

琉球松茎皮中三萜类化合物及其对DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制作用

琉球松 Pinus luchuensis Mayer 分布于日本东南部的琉球群岛,作者曾从其茎皮中分得4个25,26,27-三-去甲-羊毛甾烷型三萜,现又从该植物茎皮的氯仿提取物中分离并鉴定了9种羊毛甾烷型和锯齿石松烷型三萜,其中2个为新化合物。该植物干燥茎皮在60℃用氯仿渗滤提     

鱼鳔补肾益精丸的药理作用实验研究

鱼鳔补肾益精丸可使大剂量皮质激素诱发的肾阳虚模型小鼠自主活动次数增加，游泳时间延长，体重、体温降低减少；使去势大鼠精囊、前列腺、包皮腺明显增重；缩短去势大鼠电刺激阴茎勃起的潜伏期；提高雄性大鼠的交配能力；并可改善神经性性功能障碍小鼠的性活动，表明本品具有明显的补肾壮阳作用。     

补肾益精法对硬皮病成纤维细胞SMAD3/FLI1平衡的影响

目的:初步研究补肾益精法中药复方对硬皮病成纤维细胞SMAD3/FLI1"平衡"的影响。方法:体外培养建立硬皮病组和正常对照组皮肤成纤维细胞系;使用补肾益精法中药复方含药血清与对照血清处理两组细胞;采用实时定量RT-PCR技术测定I型前胶原COLⅠ-α2与TGF-β途径中SMAD3、FLI1等因子的基因转录水平。结果:补肾益精法可不同程度地减少硬皮病成纤维细胞COLⅠ-α2、SMAD3表达,上调FLI1基因表达,使SMAD3/FLI1比值趋向健康对照组水平。结论:补肾益精法对硬皮病成纤维细胞表型的影响可能与TGF-β途径中SMAD3/FLI1"平衡"有关。     

补肾益精方药对老年大鼠不同组织DNA TOPOⅡ活性的影响

目的:研究补肾益精方药对老龄大鼠肝、肾、睾丸、脾DNA TOPOⅡ活性的影响,初步探讨补肾益精方药抗衰老的机理.方法:用雄性老年大鼠为肾虚模型,观察左归饮、益肾宝对TOPOⅡ活性的影响.结果:老年大鼠TOPOⅡ的活性明显低于青年大鼠,经灌喂左归饮、益肾宝后,老年大鼠TOPOⅡ的活性显著提高.结论:补肾益精方药能提高老年大鼠TOPOⅡ的活性,起到延缓衰老的作用.     

补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化的影响

目的:研究补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化表型的影响。方法:使用博来霉素诱导建立硬皮病小鼠模型,分别采用补肾益精法中药复方(中药复方组)、生理盐水(模型组)处理硬皮病模型小鼠,共3周,并设正常对照组。HE染色观察皮肤病理改变;使用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定各组小鼠I型胶原α2(COLⅠα2)基因表达情况。结果:成功建立硬皮病小鼠模型,皮肤病理HE染色显示,中药复方组小鼠皮肤纤维化有不同程度改善。模型组小鼠COLⅠα2基因表达较正常对照组高(P<0.01);经补肾益精法处理后,中药复方组小鼠COLⅠα2基因表达减少,与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补肾益精法中药复方可改善硬皮病模型小鼠皮肤纤维化程度。     

端粒与中医补肾益精的关系

粒是染色体末端独特的DNA－－蛋白质结构,在保护染色体的完整性和维持细胞的复制能力方面起着重要的作用。端粒的长度随着年龄和细胞分裂次数的增加而逐渐变短,因而导致染色体不稳定,因此端粒长度的变化与细胞衰老密切相关。中医理论认为,补肾益精可以延缓衰老,很有可能正是通过补肾益精使端粒获得了稳定,从而控制了细胞的衰老。     

补肾益髓法治疗β-地中海贫血症临床研究

目的：观察补肾益髓法代表方益髓生血灵治疗β-地中海贫血症的临床疗效。方法：用益髓生血灵在广西高发区治疗β-地中海贫血症78例，观察治疗前后患者的临床症状、血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞(Ret)、抗碱血红蛋白(HbF)水平．并进行停药后的疗效随访调查。结果：益髓生血灵治疗β-地中海贫血症疗效显著，可明显提高患者Hb、HbF水平，优于西药马利兰。结论：中药益髓生血灵治疗β-地中海贫血症疗效显著。     

右归丸补肾填精的药理作用

目的:以下丘脑-垂体-性腺轴为基础,探究右归丸对肾阳虚大鼠的药理作用,探讨其补肾填精的作用机制。方法:SD大鼠60只,采用氢化可的松建立肾阳虚模型大鼠,随机分为6组,分别为正常组、模型组、甲基睾酮(0.5 g·kg-1)组、右归丸低、中、高剂量组(0.5,1.0,2.5 g·kg-1),每组10只。造模后连续ig给药30 d,分别于给药第15,30天进行强迫负重游泳实验;第30天,眼球取血,放射免疫分析法检测大鼠血清睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)的含量;采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑、垂体和靶腺(睾丸)钙调蛋白(Ca M)mRNA的表达。结果:与正常组比,模型组大鼠的负重游泳时间减少(P0.05),明显升高血清中E2的激素水平及降低T的激素水平(P0.05),明显升高下丘脑、垂体、睾丸中Ca M mRNA的表达(P0.05);与模型组比,甲基睾酮组、右归丸低、中、高剂量组可明显提高肾阳虚模型大鼠的负重游泳时长(P0.05),给药20 d后其体能趋于正常;给药20 d后甲基睾酮组、右归丸低、中、高剂量组可明显降低血清中E2的激素水平及升高T的激素水平(P0.05),明显降低下丘脑、垂体、睾丸中Ca M mRNA的表达(P0.05)。结论:右归丸可通过调节机体下丘脑-垂体-性腺轴中钙调蛋白基因表达,改善阳虚大鼠激素水平,逆转肾阳虚状态,具有补肾填精的作用。     

Experimental Study on Effect of Aplastic Anemia the Model Rat's Regulation Factors Treated with Tonifying Kidney and Replenishing Essence Method

目的 观察补肾填精法对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA,简称再障)模型大鼠调控因子的影响.方法 将清洁级Wistar大鼠36只随机分为对照组、模型组、治疗组(补肾填精中药)3组各12只;对照组正常饲喂,模型组和治疗组用5-氟尿嘧啶(5-FU)与马利兰合用诱导建立大鼠AA模型,之后治疗组每天给予补肾填精中药10 g/kg-1·d灌胃,连续4周,4周后观察各组大鼠外周血WBC、RBC、Hb、PLT及调控因子的变化.结果 ①模型组与治疗组外周血以上各值水平显著低于对照组,治疗后治疗组外周血以上各值水平提高,差异有统计学意义;②模型组与治疗组调控因子白介素-2( Interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)含量显著高于对照组,治疗后治疗组IL-2、TNF-α含量下降,差异有统计学意义.结论 补肾填精法能明显改善再障模型大鼠的骨髓造血功能,并可有效改善细胞因子分泌异常,促进骨髓造血功能的恢复.     

补肾益气通利方治疗围绝经期水肿临床观察

目的 运用自拟补肾益气通利方治疗围绝经期水肿并观察其治疗效果及安全性.方法 收治符合入组标准的围绝经期水肿患者共100例,随机分为2组,治疗组50例,对照组50例.治疗组运用自拟补肾益气通利方口服中药治疗,对照组运用济生肾气丸中成药治疗,治疗后观察2组治疗效果及用药安全性.结果 2组治疗方法对于围绝经期水肿均有效,且治...     

补肾填精中药治疗老年性痴呆

目前,补肾填精中药用治老年性痴呆的研究主要为临床与基础实验研究。临床研究表明,应用补肾药物治疗老年痴呆可取得良好效果,基础研究主要从神经干细胞、神经内分泌网等不同作用途径来说明其治疗老年痴呆的作用机理。肾虚髓亏是老年性痴呆的本质特征,补肾填髓是治疗的基本方法。     

补肾、健脾、活血类中药复方对老龄小鼠免疫功能作用的对比研究

本研究以老龄小鼠为实验对象，对补肾的右归饮，健脾的四君子汤，活血的桃红四物汤对免疫功能的影响作对比研究。结果表明：老年对照组Ｔ，Ｂ淋巴细胞转化，ＯＫＴ３细胞均明显低于成年对照组。     

补肾、健脾、活血类中药复方对老龄小鼠免疫功能作用的对比研究

本研究以老龄（１８月龄）小鼠为实验对象，对补肾的右归饮、健脾的四君子汤、活血的桃红四物汤对免疫功能的影响作对比研究。结果表明：老年对照组Ｔ、Ｂ淋巴细胞转化（淋转）、ＯＫＴ＿３细胞均明显低于成年（３月龄小鼠）对照组。经喂中药４周后，活血化瘀组、健脾益气组Ｔ、Ｂ淋转明显高于老年对照组；补肾益精组Ｔ、Ｂ淋转没有明显变化，ＯＫＴ３细胞明显低于老年对照组。这一结果提示：补肾益精方对衰老或肾虚状态下的免疫机能似乎与活血化瘀方、健脾益气方有不同的作用。     

补肾益精汤治疗月经过少30例

目的:观察补肾益精汤治疗月经过少的疗效。方法:30例月经过少属肾精不足的患者用补肾益精汤治疗,1个月经周期为一疗程,治疗3个疗程。结果:治愈24例,显效4例,有效1例,无效1例,总有效率96.66%。结论:补肾益精汤治疗月经过少有较好效果。