HIV/AIDS与肝炎病毒感染者CD4+、CD8+淋巴细胞数的比较

目的：探讨ＨＩＶ携带者或ＡＩＤＳ病人（简称ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）与肝炎病毒感染者的ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋淋巴细胞变化,并进行比较。方法：用免疫磁珠法（ＤＹＮＡ ｂｅａｄｓ）检测ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋Ｔ淋巴细胞数,用双侧ｔ检验进行统计学处理。结果：全部ＨＩＶ／ＡＩＤＳ的ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞降低,且幅度大,８３．４％低于５００细胞／μｌ。在病毒性肝炎中降低的百分比和幅度均明显低于前者,只有２８．８％低于５     

β2-微球蛋白的水平在HIV/AIDS病情评估中的意义

艾滋病(AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种传染病。HIV感染的进展主要表现为病毒感染的CD4^ T细胞迅速破坏和高致病性HIV毒株的出现。病毒感染与宿主的免疫应答、免疫激活之间复杂、动态的相互作用，在本病的发病机制中具有重要意义。由于HIV感染的临床过程是多变的，因此，艾滋病的临床诊断及预测病情的进展，可依据病毒载量、CD4^ T细胞计数及免疫激活标志物(β2-微球蛋白，β2-M)水平的变化综合评估。     

HIV/AIDS患者血浆病毒载量及外周血T淋巴细胞亚群的变化对病情评估的探讨

外周血CD4^ T细胞计数和血浆病毒载量可以相互独立的预测临床进程，我们观察国内HIV／AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群及血浆病毒载量的变化，探讨其临床意义。     

中国HIV/AIDS患者NK细胞及NKT细胞变化的检测

目的　探讨HIV感染后机体NK(naturalkillercells)及NKT细胞的变化情况。方法　取外周血细胞 ,用标记荧光的抗体进行染色 ,流式细胞仪分析HIV AIDS患者NK和NKT细胞的变化。结果　HIV AIDS患者NK、NKT细胞和CD4 + T细胞显著低于正常对照 ;CD8+ T细胞显著高于正常对照。HIV AIDS患者NK百分数显著低于正常对照 ,与CD4 + T细胞数量成正比 ,r=0 .2 89,P <0 .0 1 ;NKT细胞数量与CD4 + T细胞数量成正比 ,r =0 .378,P <0 .0 1 ;与CD8+ T细胞数量成正比 ,r =0 .340 ,P <0 .0 1 ;长期不进展组NKT、NK细胞数量与正常对照组差异无显著性。结论　HIV感染可明显降低HIV AIDS患者NK和NKT细胞数量 ,NK和NKT细胞变化与疾病进展密切相关。     

HIV/AIDS患者CD28在外周血CD4+、CD8+ T细胞上的表达变化

目的　研究国内HIV AIDS患者CD2 8在外周血CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞上表达的变化 ,并探讨这些变化的临床意义。方法　用流式细胞仪检测 5 1例正常对照、14例HIV感染者和 36例AIDS患者的外周血CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面的CD2 8分子的表达 ,用bDNA法检测 11例HIV感染者和 18例AIDS患者的血浆病毒载量。结果　CD4 + CD2 8+ T细胞的绝对计数与百分比、CD8+ CD2 8+T细胞的百分比均显示为正常对照组 >HIV感染组 >AIDS组 ;而CD8+ CD2 8+ T细胞的绝对计数显示HIV感染组和对照组显著大于AIDS组 ,HIV感染组与对照组间差异无显著性。CD4 + 、CD2 8+ CD4 + T淋巴细胞计数与血浆病毒载量显著负相关。结论　HIV AIDS患者外周血CD2 8在CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞上表达随着病情进展而降低 ,反映了细胞免疫功能随着疾病进展损害逐渐加重 ,是判断病情进展的指标。     

HIV/AIDS患者外周血T淋巴细胞功能亚群的变化

研究发现CD28在CD4^＋、CD8^＋ T细胞上的表达可以代表CD4^＋、CD8^＋ T细胞的功能，本实验检测HIV／AIDS患者外周血CD4^＋ CD28^＋、CD8^＋ CD28^＋ T淋巴细胞，以探讨患者T淋巴细胞功能的变化。     

存放温度及时间对于HIV/AIDS患者外周血CD4+、CD8+细胞测定结果的影响

目的　研究HIV AIDS患者外周血CD4 、CD8 淋巴细胞数在不同条件下 (时间、温度和处理过程 )的变化。方法　选取HIV AIDS患者 34例 ,用流式细胞术检测在 4℃条件下放置不同时间(2、2 4、4 8、72h)的外周血CD4 、CD8 细胞数的变化 ,对经过处理的外周血 (处理过的血样 )CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较 ;对室温条件下放置不同时间 (2、2 4、4 8、72h)处理过的血样CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较。结果　在 4℃时 ,全血放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义(P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数放置 72h时则差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;处理过的样品放置 72hCD4 细胞计数差异才有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 2 4h时差异就有显著意义 (P <0 0 5 )。在室温时 ,处理过血样放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 4 8h则差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　抗凝全血在 4℃放置 4 8h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。处理过血样在室温放置 2 4h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。 2 4～4 8h虽然CD4 淋巴细胞没有变化 ,但CD8 淋巴细胞却发生明显的变化 ,两者比例必然发生变化。     

经血感染HIV/AIDS患者pDCs与艾滋病疾病进展关系的研究

目的 了解中国HIV/AIDS患者外周血中类浆细胞样树突状细胞（plasmacytoid dendritic cells，pDC）绝对值的变化，分析其与HIV感染及疾病进展的关系。方法采集56例未经治疗的H1VIMDS患者及34例健康人抗凝静脉血，采用流式细胞仪单平台检测技术，分析计算三色荧光抗体标记的全血中pDC（Lin1^＋／HLA-DR^＋／CD123^＋）绝对值。结果MDS组pDC绝对值为3．31个／μl（0．31～6．46个/μl），显著低于正常对照组、HIV慢性感染组及HIV感染疾病长期不进展（long term non-progressors，LTNP）组（P〈0．01）。HIV慢性感染组pDC绝对值为5．27个/μl（2．25～9．80个/μl），显著低于正常对照组及LTNP组（P〈0．01）。LTNP组pDC绝对值为9．95个／μl（6．16～20．88个／μl），显著高于正常对照组（7．84个/μl，3．45～13．97个／μl，P〈0．01）。56例HIV/AIDS患者pDC绝对值与CD4^＋T淋巴细胞绝对值及百分率呈显著正相关（r=0．422，P〈0．01；r=0．488，P〈0．01），与病毒载量呈显著负相关（r=-0．444，P〈0．05）。结论HIV／AIDS患者pDC数量减少，并且随疾病进展逐渐下降；HIV感染LTNP的血pDC数量显著高于HIV慢悱感染者及MDS患者，甚至高于正常对照。提示外周血pDC在控制HIV感染方面有重要作用，与艾滋病疾病进展明显相关。     

我国HIV/AIDS患者外周血CD4+T淋巴细胞凋亡与疾病进展的相关性分析

HIV特征性地引起CD4^＋T细胞逐步减少和进行性免疫缺陷。尽管目前HIV导致CD4^＋T细胞死亡的具体机制仍不完全清楚，但越来越多证据支持HIV引发的淋巴细胞凋亡是一个重要因素。有研究显示HIV感染使CD4^＋T细胞上多种凋亡相关分子表达异常，但有关CD4^＋T细胞凋亡率与疾病进程的报道较少，更少见到中国HIv／AIDS患者CD4^＋T细胞凋亡在不同疾病进程中变化特点的研究资料。本实验采用流式细胞术研究了我国HIV／AIDS患者CD4^＋T细胞凋亡情况及其在不同疾病阶段中的变化特点。     

高效抗逆转录病毒治疗对中国HIV/AIDS患者淋巴细胞活化及第二受体表达的影响

目的　了解高效抗逆转录病毒治疗后中国HIV/ AIDS患者淋巴细胞活化及CCR5、CXCR4表达的变化,探讨HIV感染者对于抗病毒治疗的免疫应答。方法　10例HIV /AIDS患者给予高效抗逆转录病毒治疗(HAART),用流式细胞仪检测治疗前和治疗第3、6 个月T淋巴细胞活化(HLA DR、CD38表达)及第二受体CCR5、CXCR4表达情况,比较HIV/ AIDS患者治疗前后淋巴细胞活化、第二受体表达的变化。结果　治疗前,10例HIV /AIDS患者CD4+、CD8+ T淋巴细胞活化水平均明显高于健康对照,CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达明显高于健康对照,CXCR4 的表达明显低于健康对照(P<0.05);HAART治疗后,患者淋巴细胞活化水平随治疗时间明显下降(P<0.05),CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达水平显著降低(P< 0. 01), CXCR4 的表达升高;治疗6 个月时, CD38 CD4、HLA DRCD38 CD4、CCR5 CD8、CXCR4 CD8表达水平恢复至健康人水平;HIV AIDS淋巴细胞活化水平及第二受体CCR5的表达降低与HAART治疗后CD4+T淋巴细胞数量的升高具有显著的相关性。结论HAART能够降低中国HIV /AIDS患者淋巴细胞活化水平,使第二受体表达水平趋于正常,促进免疫功能的恢复。     

HIV-1蛋白诱导T细胞产生IFN-γ反应特征及对HIV-1感染者病情进展的影响

目的 探讨HIV-1特异性T细胞反应特征及对HIV-1感染者病情进展的影响.方法 通过合成重叠肽技术及ELISPOT技术,采用队列研究方法对37名HIV-1感染者的病毒特异性T细胞免疫反应进行分析.结果 83.78%(31/37)的HIV-1感染者对1个或多个合成肽反应(反应强度大于50 SFU/106 PBMCs).HIV-1B型病毒不同蛋白均可激发HIV-1感染者的特异性T细胞反应,其中HIV-1 Gag蛋白被识别的频率最高,81%的HIV-1感染者识别HIV-1 Gag而且HIV-1 Gag蛋白诱导的T细胞反应强度最高,相对强度达到28.25%,明显高于其他蛋白,差异具有统计学意义(F=17.969,P<0.001);重叠肽诱导T细胞分泌IFN-γ反应频率、反应强度在HIV-1感染无症状期和艾滋病期无明显区别,但是HIV-1 Gag蛋白诱导的T细胞反应强度在无症状期明显高于艾滋病期.结论 HIV-1B型病毒不同基因编码蛋白激发T细胞分泌IFN-γ反应小同,其中HIV-1 Gag蛋白特异性T细胞在控制病情进展方面发挥了重要作用.     

HIV/AIDS患者CCR5、CXCR4的表达与疾病进展的关系

目的　了解HIV AIDS患者淋巴细胞表面第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,分析其与疾病进展的关系 ,探讨HIV感染的免疫基础。方法　收集 33例HIV AIDS患者及 13例健康对照的抗凝全血 ,用流式细胞仪检测第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,并分析第二受体表达与病毒载量、CD4 + T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化 (HLA DR+ CD38+ )的相关性。结果　艾滋病组CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达高于无症状HIV 1感染组及健康对照 (P <0 .0 0 1) ;艾滋病组CD8+ T淋巴细胞表面CXCR4表达低于健康对照 (P <0 .0 1)。HIV AIDS患者CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达与病毒载量明显正相关 (P <0 .0 1) ;与CD4 + T淋巴细胞绝对值明显负相关 (P <0 .0 1) ,与T淋巴细胞活化(HLA DR+ CD38+ )水平明显正相关 (P <0 .0 0 1)。结论　HIV 1感染者第二受体CCR5的表达与机体对HIV的免疫反应及疾病进展密切相关。     

慢性HIV/AIDS患者T淋巴细胞凋亡与疾病进展关系的研究

目的 探讨慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者T淋巴细胞及各亚群凋亡与疾病进展的相关性.方法 以36例慢性未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者为研究对象,根据CD4细胞计数分为3组:<200个/μl组,200～350个/μl组,>350个/μl组,同时选取16例健康志愿者作对照,分离外周血单核细胞(PBMC)后,采用CD45RO及CD27标记T细胞亚群,Annexin V标记细胞凋亡,用流式细胞仪检测各项指标.其中4例患者及4例健康志愿者的PBMC在体外培养,比较分析体外培养0、3、6、12、24 h不同时间点T细胞凋亡的变化情况.结果 (1)HIV/AIDS患者CD4~+、CD8~+T细胞及各亚群上Annexin V表达百分比均显著高于健康人(P<0.05),但3组患者之间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)HIV/AIDS患者CD4~+、CD8~+T细胞及各业群上Annexin V表达百分比与CD4~+T细胞计数及病毒载显均无显著相关性(P>0.05);(3)随着体外细胞培养时间的延长,HIV/AIDS患者CD4~+T细胞的凋亡及死亡细胞百分比均显著高于健康人(P<0.05),并且HIV/AIDS患者CD4~+T细胞较CD8~+T细胞更易发生凋亡和死亡.结论 HIV/AIDS患者的T细胞凋亡水平显著高于健康人,并且CD4~+T细胞较CD8~+T细胞更易发生凋亡和死亡,但是T细胞凋亡水平与HIV的疾病进展程度并没有相关性.     

IL-7及其受体在T淋巴细胞发育中的作用及对运动免疫的意义

运动训练显著影响机体的免疫功能,T淋巴细胞亚群的平衡是维持免疫系统内部环境稳定的一个中心环节.IL-7/IL-7受体(IL-7R)在促进淋巴细胞,尤其是T淋巴细胞产生、分化和发育成熟的过程中发挥重要作用.从了解IL-7/IL-7 R的生物学特性、信号通路及其在T细胞发育、生存、扩增和记忆性T细胞发育中的重要作用,从细胞免疫产生的源头来分析IL-7/IL-7R运动影响免疫功能的机理,可为改善机体免疫功能提供新的思路.     

用流式细胞仪检测HIV感染者和AIDS患者的T细胞亚群

目的用流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｅｒ,ＦＣＭ）检测周围血中ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞,结合临床情况对ＨＩＶ感染者和ＡＩＤＳ患者的免疫状况进行评价。方法将抗凝全血进行白细胞分类计数,用双色荧光标记的单克隆抗体染色,经溶血和固定后,用ＦＣＭ计数,从而得出ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞数。结果ＨＩＶ感染者和ＡＩＤＳ患者的ＣＤ４＋淋巴细胞数都比正常人低,特别是ＡＩＤＳ患者,他们的ＣＤ４＋淋巴细胞数都低于２００个／ｍｍ３,临床表现也很差。结论ＦＣＭ检测结果与临床评价高度一致,而且ＦＣＭ比一般人工计数法更准确、方便、迅速,同时也证明ＦＣＭ是监测ＨＩＶ感染者和ＡＩＤＳ患者的免疫状况的最佳方法。     

Culturing of HIV-1-specific cytotoxic T lymphocytes with interleukin-7 and interleukin-15

The ability to study HIV-1-specific cytotoxic T cell (CTL) clones in models in vitro or to expand them for immunotherapeutic use is limited by the technical difficulty of propagating these cells. The factors that determine the survival and proliferation of the cells are incompletely understood and could include cytokines provided from feeder cells or serum. We therefore investigated the effects of adding two cytokines reported to have effects on T cell proliferation and function, interleukin (IL)-7 and IL-15. Four HIV-1-specific clones derived from infected persons were cultured under standard conditions with IL-2 compared to IL-7 or IL-15 alone or in combination with IL-2. Proliferation and survival, as reflected by cell numbers after stimulation, were poorly supported by IL-7 or IL-15 alone, and these cytokines appeared to provide no additional benefit when added to IL-2. Similarly, these cytokines alone did not support the functional status of these cells as measured by chromium release assays with peptide-pulsed target cells. Addition of IL-7 or IL-15 to IL-2 did not augment function of the cells. These data suggest that supplementing CTL cultures with these cytokines does not provide improvement of cell growth or function.     

HCV-RNA水平对HIV/HCV合并感染者HIV疾病进展影响研究

目的 探讨人免疫缺陷病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)混合感染者HCV-RNA水平对HIV感染疾病进展的影响.方法 采用横断面研究对391例不同途径HIV感染者进行抗HCV-IgG、HCV-RNA、HIV-RNA、T淋巴细胞计数及其他免疫活化指标检测,比较HCV-RNA水平高组和低组病毒学及免疫学相关指标差别,分析HCV-RNA与HIV-RNA、CD4+T淋巴细胞计数的相关性.结果 (1)有偿供血组(93%)和静脉吸毒组(97.5%)抗HCV-IgG阳性率显著高于性接触组(20.1%);在抗HCV-IgG阳性的HIV感染者中,静脉吸毒组HCV-RNA阳性率(89.9%)显著高于有偿供血组(48.3%)及性接触组(62.5%),P均<0.01.(2) HCV-RNA水平和HIV-RNA水平正相关(r=0.237,P<0.01),与CD4计数负相关(r=-0.201,P<0.05).(3) HCV-RNA高组免疫活化标志物HLA-DR表达高于HCV-RNA低组(P<0.01).结论 高水平的HCV-RNA可能是HIV感染疾病进展的危险因素之一.     

Expression of a functional p75 interleukin-2 receptor on lung lymphocytes from patients with human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection

Lung involvement in patients affected by HIV-1 infection is characterized by an alveolitis sustained by the accumulation of CD8+ T lymphocytes. To investigate whetherin situ T cell growth plays a relevant role in the pooling of CD8+ lymphocytes, we have analyzed the activity of two lymphokines involved in the mechanisms of T cell proliferation, i.e., interleukin-2 (IL-2) and interleukin-4. To this aim, following appropriate triggering and blocking, the expression and the functional role of IL-2 receptors (IL-2R) (both p55 and p75 chains) and IL-4 receptors have been analyzed on T lymphocytes obtained from the bronchoalveolar lavage (BAL) of 16 HIV-1+ patients. Molecular and phenotypic studies we performed demonstrated that CD8+ lymphocytes from the BAL of HIV-1 + patients strongly expressed the p75 chain of IL-2 receptor, while neither p55 mRNA nor its surface membrane product (Tac antigen) was detectable; in addition, there was no expression of IL-4 receptors. IL-2 stimulation was able to induce T cell growth in a dose-dependent manner, whereas IL-4 did not. Finally, using mAbs which specifically block the p55 or p75 IL-2R, we showed that both subunits of IL-2R were involved in the proliferative activity of lung lymphocytes. The results obtained in the present study directly demonstrate that BAL T lymphocytes of HIV-1 + patients express a fully functional IL-2 receptor apparatus, pointing to the role for this lymphokine in maintaining the alveolitis taking place in the lungs of AIDS patients.     

Analysis of the cytolytic activity mediated by natural killer cells from acquired immunodeficiency syndrome patients in response to phytohemagglutinin or anti-CD16 monoclonal antibody

The aim of this study was to assess the cytolytic potential of natural killer (NK) cells from human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1)-infected patients, at different stages of the disease. Twenty HIV-1 seronegative donors as well as sixty HIV-1 seropositive patients were studied. Phytohemagglutinin and/or the anti-CD16 monoclonal antibody Kd1 were used to redirect the peripheral blood lymphocyte lysis of these patients to the ⁵¹Cr-labeled Fcγ receptor-positive P815 murine mastocytoma target cell line. In parallel, NK cytotoxicity to tumor targets was investigated. Seronegative as well as HIV-1 Center for Disease Control (CDC) stage II patients showed maintained cytolytic activity. The cytolytic potential declined with disease progression, starting with CDC IVC2 patients, and was strongly diminished in acquired immunodeficiency syndrome stage patients. This defect was accompanied by decreased cytolytic activity to tumor targets and was not corrected by the in vitro addition of interleukin-2. The number of cells bearing a mature NK phenotype was normal in all the study groups. Our data suggest that the impaired NK cytotoxicity to tumor targets described during the progression of HIV-1 disease may be related to the progressive loss of function of surface receptors involved in NK cell triggering.