高压氧治疗溃疡性结肠炎患者的疗效及对Th17/Treg细胞免疫调节的影响

目的 探讨高压氧治疗溃疡性结肠炎（UC）患者的疗效及其对外周血Thl7细胞（CD4＋ IL-17＋T细胞）与Treg细胞（CD4＋ CD25＋T细胞）数量的影响.方法 选择74例UC患者,随机分为柳氮磺胺吡啶组（对照组）38例和高压氧联合柳氮磺胺吡啶组（高压氧组）40例.治疗4周后,比较2组总有效率,同时采用流式细胞仪检测治疗前后CD4＋ IL-17＋T细胞与CD4＋CD25＋T细胞的表达百分比.结果 2组患者在治疗前外周血Thl7细胞所占比例、Treg细胞所占比例、Th17/Treg细胞的比值差异均无统计学意义（t=1.747,0 149,0 091,P＞0.05）.治疗后,2组患者外周血Thl7细胞所占比例均明显下降（t=14.679,17.486,P＜0.01）,Treg细胞所占比例均明显升高（t=9.85,13.042,P＜0.01）,而Th17/Treg细胞的比值则下降（t=12.5,9.09,P＜0.01）.高压氧组Thl7细胞所占比例下降程度、Treg细胞所占比例升高程度以及Th17/Treg细胞的比值下降程度较对照组更为明显（t=9.076,8.638,2.227,P＜0.05）.结论 Th17/Treg失衡可能参与UC的发生发展,而HBO联合柳氮磺胺吡啶正是通过调节Th17/Treg的失衡关系,改善免疫抑制功能,抑制炎症因子的释放来达到抗炎-促炎平衡的治疗作用,这可能是其治疗UC的免疫调节重要机制之一.     

高效抗反转录病毒疗法治疗24周艾滋病感染者外周血中PD-1/PD-L1的变化特点

目的探讨高效抗反转录病毒疗法(highly active antiretroviral treatment,HAART)治疗24周AIDS患者外周血程序性死亡因子(programmed death-1,PD-1)和配体(Programmed cell death 1 ligand l,PD-L1)表达水平的特点变化。方法选取HAART治疗的45例艾滋病感染者(AIDS),按CD+4T细胞计数分成1~100 cells/μl、101~200cells/μl和201~350 cells/μl三组,于抗病毒前和抗病毒24周时采集静脉血,同时选取21名健康体检者作对照。运用流式细胞仪检测外周血中CD+4T细胞表面PD-1和PD-L1的表达水平,实时荧光定量PCR仪检测血浆病毒载量,数据处理采用t检验,相关性分析采用Pearson相关。结果 AIDS感染者治疗前PD-1/PD-L1的表达频率为(1.16±0.26)%和(0.63±0.140)%,均显著高于健康对照组(t分别为6.31和4.27,P=0.000)。抗病毒治疗24周时PD-1/PD-L1在CD+4T细胞中的表达频率分别为(0.76±0.14)%和(0.52±0.06)%,与治疗前相比PD-1表达水平显著下降(t=3.77,P=0.000),PD-L1的表达频率也有所下降,但差异无统计学意义(t=1.78,P=0.056)。CD+4T细胞基数为201~350 cells/μl患者组其PD-1表达频率在治疗24周后平均下调率明显高于另二组(38.54%vs.25.66%和23.77%),而PD-L1的表达也高于1~100 cells/μl和101~200 cells/μl二组(18.97%vs 15.87%和12.31%)。治疗前与治疗后AIDS感染者CD+4T细胞数与PD-1表达百分率呈显著负相关(r=-0.434,-0.317,P=0.009和0.031),与病毒载量呈显著正相关(r分别为0.499和0.319,P为0.0049和0.032)。PD-L1表达频率在治疗前与治疗后与CD+4T细胞数呈显著负相关(r=-0.454和-0.314,P=0.002和0.012),与病毒载量在治疗前后呈显著正相关(r=0.513和0.428,P=0.000和0.004)。结论 AIDS感染者外周血PD-1/PD-L1的表达水平增加,且与疾病进展密切相关。     

外周血单个核细胞中Th17、CD4＋CD25＋Treg细胞水平诊断重度子痫前期的价值

【目的】探讨外周血单个核细胞中辅助性 T 细胞17（Th17）、CD4＋ CD25＋ Treg 细胞水平在诊断重度子痫前期（sPE）中的应用价值。【方法】选取在本院行剖宫产分娩的68例子痫前期患者,其中轻度子痫前期（mPE）患者40例,sPE 患者28例,同时选取正常晚期妊娠30例作为对照组,检测比较各组外周血 Th17、CD4＋ CD25＋ Treg 细胞水平,血浆 IL‐17、IL‐21和转化生长因子‐β（TGF‐β）水平。【结果】sPE 患者外周血Th17细胞水平明显高于 mPE 组和对照组（ P ＜0．05）,而 CD4＋ CD25＋ Treg 细胞明显低于 mPE 组和对照组（ P ＜0．05）;sPE 患者外周血 IL‐17和 IL‐21明显高于 mPE 组和对照组（ P ＜0．05）,而 TGF‐β明显低于mPE 组和对照组（ P ＜0．05）;sPE 患者 IL‐17、IL‐21与 Th17细胞水平呈正相关（ P ＜0．05）,TGF‐β与 CD4＋CD25＋ Treg 细胞呈正相关（ P ＜0．05）;mPE 患者 IL‐17、IL‐21和 TGF‐β与 Th17和 CD4＋ CD25＋ Treg 细胞水平未见明显相关性（ P ＞0．05）。【结论】子痫前期患者 Th17细胞表达上调,CD4＋ CD25＋ Treg 细胞表达下调,其中 sPE 患者 Th17和 CD4＋ CD25＋ Treg 细胞水平与 IL‐17、IL‐21和 TGF‐β有相关性,其可能在 sPE 发病机制中起重要作用。     

哮喘- 慢阻肺重叠综合征患者外周血Th17 和Treg 细胞水平表达与肺功能的关系研究

目的　分析哮喘- 慢阻肺重叠综合征（ACOS）患者辅助性T 细胞17（Th17）和调节性T 细胞（Treg）表达水平,及其与肺功能的相关性。方法　采用流式细胞术检测60 例ACOS 患者（ACOS 组）、60 例哮喘患者（哮喘组）和60 例慢性阻塞性肺疾病患者（COPD 组）外周血Th17 和Treg 细胞的表达,比较分析其与肺功能指标的关系。结果　与哮喘组比较,COPD 组、ACOS 组外周血CD4+ 细胞中Th17 细胞表达及Th17/Treg 比例明显升高,而Treg细胞表达明显下降,差异均有统计学意义 (F=15.36~36.61,均P<0.05);与COPD 组比较,ACOS 组外周血CD4+ 细胞中Th17 细胞表达及Th17/Treg 比例明显升高,而Treg 细胞表达明显下降,差异有统计学意义 (F=36.61,21.18,15.26, P<0.05)。ACOS 组患者FVC%pred,FEV1%pred 和FEV1/FVC 明显低于哮喘组,差异均有统计学意义(F=7.36,11.36,9.68, P<0.05),但FVC%pred 与COPD 组患者比较,差异无统计意义(t=0.52, P>0.05)。ACOS 患者外周血Th17 和h17/Treg 表达与FVC%pred,FEV1%pred 和FEV1/FVC 呈显著负相关（r=-0.502~-0.407, 均P<0.05）。Treg与FVC%pred,FEV1%pred 和EV1/FVC 呈显著正相关（r=0.019~0.033, 均P<0.05）。结论　ACOS 患者外周血Th17 和Treg 细胞表达异常,存在Th17/Treg 比例失衡,且与肺功能下降密切相关。     

子痫前期患者外周血中Th17、Treg细胞变化及意义

目的研究CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg）以及Th17细胞在子痫前期（PE）患者外周血比例的变化,并探讨其在子痫前期免疫耐受失衡中的作用。方法选取子痫前期患者20例,同期正常晚期妊娠20例。分别采集子痫前期患者、正常晚期妊娠妇女外周血,采用细胞内染色的流式细胞术检测CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg以及CD4＋IL-17A＋的表达。结果子痫前期患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋细胞的比例明显低于正常晚期妊娠者（P〈0．05）;而CD4＋IL-17A＋／CD4＋细胞的比例明显偏高（P〈0．05）。结论子痫前期患者上调Th17的表达,Treg细胞表达下降,可能产生Th17／Treg平衡偏移,这一结果造成母胎免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生。     

CD4＋CD25＋调节性T细胞和Th17细胞在特发性血小板减少性紫癜中的表达和意义

目的验证并探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞及Th17细胞与特发性血小板减少性紫癜发病的关系及可能机制。方法入选自2009年12月至2010年11月在山东省医学科学院附属济宁市第一人民医院血液内科门诊就诊或住院治疗的41例ITP患者（其中初治19例,复发22例,符合难治标准17例）及同期41例健康查体者为研究对象。所有标本均抽取清晨空腹外周血,以肝素钠抗凝。应用流式细胞术（FCM）测定ITP患者和健康对照外周血的CD4＋CD25＋调节性细胞及Th17细胞百分率;应用酶联免疫吸附试验（ELISA技术）测定ITP患者和健康对照血浆的IL-17水平。结果 ITP病例组外周血CD4＋CD25＋调节T细胞的百分率明显低于对照组（P〈0.05）,而Th17细胞的比例显著高于正常对照组（P〈0.05）,血浆IL-17水平在两组间差异无统计学意义（P〉0.05）;病例组中初治患者与复发患者外周血CD4＋CD25＋调节T细胞的百分率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;难治组患者外周血CD4＋CD25＋调节T细胞的百分率低于非难治组（P〈0.05）;初治患者治疗后外周血CD4＋CD25＋调节T细胞百分率显著升高,但仍低于正常对照组（P〈0.05）。ITP病例组的CD4＋CD25＋Treg/Th17较健康对照组明显下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞显著减少,Th17细胞明显增加,出现Treg/Th17细胞失衡,这可能是影响特发性血小板减少性紫癜发生发展的一个重要因素。ITP患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞减少程度在初治与复发ITP患者中差异无统计学意义;难治性ITP可能与CD4＋CD25＋调节性T细胞数量减少和Treg/Th17失衡尚未纠正有关。初治ITP患者经临床常规治疗后外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例回升。     

胸腺瘤合并重症肌无力患者外周血Th17／Treg变化及其与IL-6相关性

目的：研究单纯胸腺瘤和胸腺瘤合并重症肌无力（MG）患者外周血CD4＋T细胞中Th17细胞、Treg细胞变化及其与IL-6的相关性。方法：采用流式细胞术检测胸腺瘤合并MG（MG组）、单纯胸腺瘤（NMG组）和健康对照组患者外周血CD4＋T细胞中Th17细胞、Treg细胞比例,ELISA法检测IL-6。结果：MG组及NMG组Th17细胞比例高于对照组（P＜0．01）;MG组与对照组、NMG组比较,Treg细胞比例降低、IL-6水平增高（P＜0．01）。 MG组IL-6水平与Th17细胞比例呈正相关性（r＝0．792,P＜0．001）,与Treg细胞比例呈负相关性（r＝－0．559,P＝0．005）。结论：单纯胸腺瘤及胸腺瘤合并MG患者Th17细胞增多,胸腺瘤合并MG患者Treg细胞减少,IL-6在维持两者间平衡起着重要作用,Th17／Treg失衡可能导致免疫调节功能紊乱。     

外周血淋巴细胞监测人类免疫缺陷病毒和获得性免疫缺陷综合症疗效评价

目的研究人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者和获得性免疫缺陷综合症（AIDS）患者CD4^＋T淋巴细胞数变化（ΔCD4^＋T）和外周血淋巴细胞总数变化（ΔTLC）的相关性。探讨用ΔTLC预测ΔCD4^＋T在监测HIV/AIDS患者疾病进展以及高效抗逆转录病毒治疗（HAART）疗效的价值。方法回顾性分析20052008年确诊的91例HIV/AIDS患者的临床资料。结果ΔTLC与ΔCD4^＋T呈直线正相关（r=0.809,P〈0.01）,好于TLC与CD4^＋T的相关性（r=0.712,P〈0.01）。分别用ΔTLC170、330、630、910个/μL细胞预测ΔCD4^＋T50、100、200、300个/μL细胞时具有较好的预测价值,各项评价指标符合率基本达到90%以上,显著高于相同时间下用TLC预测CD4^＋T计数的价值。结论应用ΔTLC预测ΔCD4^＋T,可比TLC更加直观、准确的反映HIV感染者疾病进展和评价AIDS患者HAART的疗效。     

多发性骨髓瘤患者骨髓中Treg/Th17细胞失衡研究

本研究通过检测多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓微环境中调节性T细胞（Treg）和Th17细胞的比例,探讨Treg/Th17细胞失衡与多发性骨髓瘤发生发展的关系.应用流式细胞术检测37例MM患者和12例正常对照者骨髓中Treg和Th17细胞的表达量,对其中19例MM患者同时检测了外周血中Treg和Th17细胞的表达量.结果表明：MM组骨髓中Treg细胞比例高于正常对照组（P＜0.05）,自ISS分期的Ⅰ＋Ⅱ期至Ⅲ期逐渐增高（P＜0.05）;进一步研究发现,MM患者骨髓中Treg细胞水平高于外周血,差异有统计学意义（P＜0.05）.MM组骨髓中Th17细胞比例与正常对照组无差别（P＞0.05）,临床分期间无差别（P＞0.05）.MM患者骨髓中TH17细胞比例与外周血无差别（P＞0.05）.MM组Treg/Th17的比值高于正常对照组（P＜0.05）,自ISS分期的Ⅰ＋Ⅱ期至Ⅲ期逐渐增高（P＜0.05）.结论MM患者骨髓微环境中存在Treg/Th17比例失衡,这种失衡可能促进了MM的病程进展.     

儿童肺炎支原体感染者血Th17/Treg的变化分析与临床意义

目的 探讨外周血辅助性T细胞17型(helper T cell type 17,Th17)和 CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)在肺炎支原体感染儿童体内的变化及临床意义.方法 肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染组32例,分为普通肺炎组18例、肺炎合并肺外症状组14例;健康对照组26名.常规分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测各组外周血Th17细胞、Treg的表达频率;ELISA方法 检测血清细胞因子IL-6、IL-17水平.结果 1.MP感染组外周血Th17细胞频率高于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Th17细胞频率水平高于普通肺炎组(P＜0.01);MP感染组外周血Treg细胞表达频率低于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Treg细胞频率低于普通肺炎组(P＜0.01).2.MP感染组血清IL-6、IL-17水平高于正常对照组(P＜0.01);肺外症状组血清IL-6、IL-17水平高于普通肺炎组(P＜0.01).结论 在儿童MP感染者体内存在Treg与Th17细胞频率明显改变,并伴有炎症性细胞因子水平升高,提示Treg与Th17细胞的频率异常在儿童MP感染的发病机制中起着重要的作用.     

慢性心力衰竭患者外周血Th17/Treg失衡的研究及意义

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血中Th17细胞、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)的变化及意义。方法 53例CHF患者按照NYHA心功能分级分为CHF1组(NYHA心功能Ⅰ~Ⅱ级,n=24)和CHF2组(NYHA心功能Ⅲ~Ⅳ级,n=29)。20例健康体检者作为对照组。采用流式细胞分析法检测外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例。结果 CHF1组和CHF2组患者外周血中Th17/CD4+T细胞的比例明显高于对照组(1.89±1.24 vs 0.51±0.35,3.35±1.78 vs 0.51±0.35;P<0.05;P<0.01),CHF2组亦明显高于CHF1组(3.35±1.78 vs 1.89±1.24,P<0.01);CHF1组和CHF2组患者外周血中Treg/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(5.69±0.74 vs 7.89±1.66,3.31±0.98 vs 7.89±1.66;P<0.01;P<0.01),CHF2组亦明显低于CHF1组(3.31±0.98 vs 5.69±0.74,P<0.01);CHF1组和CHF2组患者Th17/Treg的比值明显高于对照组(0.35±0.17 vs 0.11±0.09,1.06±0.49 vs 0.11±0.09;P<0.05;P<0.01),CHF2组亦明显高于CHF1组(1.06±0.49 vs 0.35±0.17,P<0.01)。结论 CHF患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与心功能有一定关系,Th17/Treg失衡可能参与了CHF的发生发展。     

香烟烟雾提取物致Th17/Treg的失衡在慢性阻塞性肺疾病发生发展中的作用与意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例及香烟烟雾提取物(CSE)对其的影响,探讨CSE对Th17细胞、Treg细胞的影响及Th17/Treg的平衡关系在COPD发生发展中的作用。方法随机收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者20例(A组),COPD稳定期患者20例(B组),吸烟肺功能正常者20例(C组),不吸烟肺功能正常者20例(D组)。抽取空腹静脉血制备单个核细胞悬液(PBMC),将每个试验对象的PBMC分为空白对照组和CSE干预组,采用流式细胞术检测所有试验对象对照组和干预组CD4+Th17细胞及CD4+Treg细胞各占CD4+T细胞的比例;ELISA法检测各组血浆中IL-17的浓度。结果 Th17/CD4+T细胞百分比对照组A组(5.33±0.66)高于B组(2.99±0.50)、C组(2.09±0.68)、D组(1.19±0.48)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);Treg/CD4+T细胞百分比对照组C组(5.88±0.52)高于D组(3.35±0.30)、B组(2.25±0.30)、A组(1.58±0.39)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);CD4+Th17细胞百分比对照组与CSE干预组差值A、B组高于C、D组(P<0.001),A组与B组之间差异无统计学意义(P=0.866),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.793);CD4+Treg细胞百分比对照组与CSE干预组差值C、D组高于B组、A组(P<0.001),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.756);外周血IL-17水平A组(145.22±5.50)高于B组(94.99±3.19)、C组(59.77±5.09)、D组(50.84±5.85)(P<0.001);COPD组血浆中IL-17的水平与外周血Th17细胞比例呈正相关(rA=0.524,rB=0.462);与FEV1/FVC值呈负相关(rA=-0.456,rB=-0.567);与FEV1/预计值%呈负相关(rA=-0.503,rB=-0.445)。结论 Th17与Treg比例的失衡可能是COPD的其中一个重要的发病机制;外周血IL-17水平与FEV1/FVC值、FEV1/预计值%呈负相关。     

HBV感染者外周血Th17细胞和Treg细胞的检测及意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血中辅助性T细胞17(Th17)细胞和调节性T细胞(Treg)的比例变化及其与HBV感染后肝脏损伤的关系。方法采用流式细胞术检测34例乙型肝炎病毒携带者(ASC)、50例慢性乙型肝炎(CHB)患者、32例肝细胞癌(HCC)伴活动性肝炎(简称HCC)患者及30名健康对照者(正常对照组)外周全血Th17细胞和Treg细胞,同时采用西门子1650全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果与正常对照组的Th17细胞比例(1.13%±0.37%)比较,ASC组略有升高(1.30%±0.28%),但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(2.06%±1.15%)和HCC组(5.89%±3.31%)均明显升高(P0.01),且HCC组高于CHB组(P0.05)。Th17细胞比例与ALT、AST呈正相关[相关系数(r)分别为0.682、0.637,P均0.01]。与正常对照组CD4+CD25+CD127lowTreg细胞(7.18%±2.28%)比较,ASC组(7.72%±2.05%)略有升高,但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(9.01%±2.92%)和HCC组(10.86%±1.77%)均明显升高(P0.01),且HCC组高于CHB组(P0.05)。Treg细胞与ALT、AST均呈正相关[r值分别为0.452(P0.01)、0.307(P0.05)]。外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例呈正相关(r=0.327,P0.01)。正常对照组Th17/Treg最低,为0.17±0.16,ASC组略有上升(0.18±0.13),但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(0.23±0.19)和HCC组(0.52±0.54)明显升高(P0.05、P0.01)。结论 HBV感染后随着疾病的发生、发展,外周血Th17细胞和Treg细胞的比例增加。由于Th17细胞和Treg细胞构成的平衡被打破,趋向Th17细胞所介导的炎症反应,引起肝细胞损伤。     

青蒿素对支气管哮喘外周血Treg/Th17的调控机制

目的探讨青蒿素对支气管哮喘患者外周血Treg/Th17表达的调控机制。方法将随访的145例哮喘患者按照ACT评分分成完全控制组、部分控制组、未控制组,再从每组中按性别、年龄、BMI匹配随机分别抽取20例、21例、7例作为研究对象,入选同期于医院就诊的哮喘急性发作期患者18例和医院体检的健康成人19例作为对照组。流式细胞术检测各组CD4+T淋巴细胞Treg和Th17的表达,将CD4+T淋巴细胞用一定浓度的青蒿素干预共培养24 h检测对比。结果未控制组及急性发作期哮喘患者外周血CD4+T淋巴细胞Th17比例明显高于正常对照组、完全控制组及部分控制组哮喘患者(P<0.05),Treg比例明显低于正常对照组、完全控制组及部分控制组(P<0.05);完全控制组及部分控制组哮喘患者外周血CD4+T淋巴细胞Treg比例稍低于正常对照组(P<0.05),而Th17比例较正常组差异无统计学意义(P>0.05);与青蒿素共浴培养24 h后,未控制组哮喘患者CD4+T淋巴细胞中Th17较干预前明显减低(P<0.05),Treg较干预前明显升高(P<0.05);急性发作组哮喘患者Th17较干预前明显减低(P<0.05),Treg较干预前明显升高(P<0.05);部分控制组哮喘患者Th17较干预前差异无统计学意义(P>0.05),Treg较干预前差异无统计学意义(P>0.05);完全控制组哮喘患者Th17较干预前稍减低(P<0.05),Treg较干预前差异无统计学意义(P>0.05)。结论青蒿素在体外对支气管哮喘,尤其是难治性哮喘的外周血CD4+T淋巴细胞中Treg/Th17有一定的调控作用,并在一定程度上可改善难治性哮喘患者CD4+T淋巴细胞中Treg/Th17免疫失衡。     

干扰素治疗慢性乙肝患者外周血调节性T细胞动态变化和临床意义

目的探讨干扰素抗病毒治疗过程中慢性乙肝患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）的变化及其临床意义。方法采集干扰素抗病毒治疗的CHB患者46例外周血,在治疗前及治疗后12、24、36、48周,停药后24周时,分别以流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋Treg比例,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV-DNA载量,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果在46例CHB患者中,完全应答的13例患者CD4＋CD25＋Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时分别为（4.16±0.64）%、（3.98±0.75）%、（3.70±0.55）%、（3.44±0.48）%、（3.07±0.48）%,呈逐步下降趋势,明显低于治疗前（5.73±0.62）%（P〈0.01）。部分应答的18例患者CD4＋CD25＋Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时分别为（4.98±0.62）%（、4.50±0.54）%、（4.10±0.64）%、（4.02±0.64）%（、3.82±0.47）%,呈逐步下降趋势,明显低于治疗前（5.84±0.68）%（P〈0.01）。无应答的15例患者CD4＋CD25＋Treg频率较治疗前无明显变化。完全应答、部分应答组患者Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时与无应答组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗24、48周,停药后24周时,HBeAg阴转率分别为10.8%、26.1%、28.3%,发生HBeAg血清学转换者在治疗12周时CD4＋CD25＋Treg比例明显下降。结论本实验初步认为,干扰素抗病毒治疗过程中及治疗后,有应答的CHB患者的外周血CD4＋CD25＋Treg频率下降。治疗早期CD4＋CD25＋Treg比例下降的患者HBeAg血清学转换率可能更高。     

儿童过敏性紫癜急性期Th17细胞功能和CD4~＋CD25~＋调节性T细胞水平变化

目的观察过敏性紫癜（HSP）病儿急性期Th17细胞功能和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）水平变化,探讨其在HSP免疫发病机制中的作用。方法选择54例HSP急性期病儿为研究对象,根据尿检有无异常分为肾炎组（HSPN组）和非肾炎组（NHSPN组）,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血浆白细胞介素17（IL-17）水平,采用流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋Treg、CD4＋细胞、CD8＋细胞、CD3＋细胞、NK细胞（CD3-CD56＋）、B淋巴细胞（CD19＋）和CD3＋HLADR＋细胞水平。以30名健康儿童作为对照。结果HSP病儿血浆IL-17水平较对照组明显增高（t=14.66,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿外周血CD4＋CD25＋Treg比例明显低于对照组（t=7.28,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿CD4＋CD25＋Treg水平与CD4＋细胞呈正相关（r=0.554,P〈0.01）,与CD19＋细胞呈负相关（r=-0.305,P〈0.05）,而与CD8＋细胞、CD3＋细胞、CD3-CD56＋细胞以及CD3＋HLADR＋细胞则无相关性（r=-0.109～0.287,P〉0.05）。HSP病儿血浆IL-17水平与CD4＋CD25＋Treg水平呈负相关（r=-0.295,P〈0.05）。结论 HSP病儿急性期Th17细胞功能增强,免疫抑制效应不足;HSP病儿存在Th17/Treg平衡紊乱,Th17/Treg失衡参与了HSP的发病过程。     

Toll 样受体 1 对间充质干细胞免疫调节 Th17细胞的作用简

背景：课题组前期研究表明间充质干细胞具有免疫调节Th17细胞的作用,但内在的调节机制尚待阐明,为此,针对Tol 样受体1在其中的作用进行探讨,为今后潜在的细胞治疗策略提供可能的实验依据。目的：探讨Tol 样受体1对间充质干细胞免疫调节Th17细胞的作用。方法：贴壁法分离人胚胎骨髓来源间充质干细胞,免疫磁珠法分离正常人CD4＋T细胞。CD4＋T细胞单独培养或与间充质干细胞共培养4 d。实时定量聚合酶链反应测定白细胞介素17、Tol 样受体1相关基因的表达水平;流式细胞仪检测Th17细胞的数量。 结果与结论：CD4＋ T细胞及间充质干细胞均表达Tol 样受体1。相对于CD4＋单独培养组,间充质干细胞共培养组（间充质干细胞＋CD4）白细胞介素17明显升高（3.59±0.11,1.14±0.08,P＜0.01）;进一步发现Tol 样受体1 mRNA表达水平亦相应升高（6.07±1.79,1.53±0.63,P ＜0.01）。流式细胞仪检测发现,共培养组（间充质干细胞＋CD4）Th17细胞数量明显高于CD4＋T细胞组[（4.53±1.27）%,（2.39±0.80）%,P＜0.01）。研究结果表明Tol 样受体1可能参与间充质干细胞免疫调节人Th17细胞的作用。