miR-34启动子甲基化在胃癌发病过程中的作用研究

目的探讨胃癌组织中miR-34基因启动子甲基化状态对miR-34的表达影响及其与患者预后的相关性。方法采用实时荧光定量PCR法检测50例胃癌组织及癌旁组织中成熟miR-34的表达。采用甲基化特异性PCR法检测miR-34基因启动子的甲基化状态,运用统计学分析miR-34基因启动子甲基化状态与miR-34表达量之间的关系,并随访患者复发和转移情况。结果胃癌组织中成熟miR-34的表达水平比癌旁组织明显降低(P<0.05)。miR-34甲基化水平与淋巴结转移有相关性(P<0.05)。miR-34基因启动子非甲基化组的成熟miR-34表达水平明显高于甲基化阳性单一模式组和甲基化阳性混合模式组(P<0.05)。与非甲基化组和甲基化阳性混合模式组相比,miR-34基因甲基化阳性组的胃癌患者复发和转移率明显升高(P<0.05)。结论在胃癌患者中,miR-34基因启动子甲基化可导致miR-34表达下调。miR-34基因启动子的甲基化状态与胃癌的复发与转移明显相关。     

子宫内膜癌中死亡相关蛋白基酶甲基化、Ki67表达水平与临床病理参数的关系

目的探讨子宫内膜癌组织中死亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化、Ki67表达水平及其与子宫内膜癌临床病理参数的关系,为临床早期诊治子宫内膜癌提供参考依据。方法 2015年2月-2017年2月于天津市宝坻区人民医院行手术切除的79例子宫内膜癌组织标本为研究对象,同期选取52例子宫不典型增生及50例正常子宫内膜组织作为对照,利用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测组织中DAPK甲基化水平,利用免疫组织化学(S-P)方法检测组织中Ki67蛋白表达水平,分析二者表达水平及其与子宫内膜癌临床病理参数之间的关系。结果子宫内膜癌组DAPK甲基化率为58.23%,明显高于子宫不典型增生组(7.69%)及正常子宫内膜组(6.00%),差异有统计学意义(P0.05),子宫不典型增生组与正常子宫内膜组DAPK甲基化率比较,差异无统计学意义(P0.05),子宫内膜癌组Ki67蛋白阳性表达率为48.10%,明显高于子宫不典型增生组(11.54%)及正常子宫内膜组(4.00%),差异有统计学意义(P0.05),子宫不典型增生组与正常子宫内膜组Ki67蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义(P0.05); DAPK甲基化及Ki67蛋白与子宫内膜癌患者年龄、病理类型、肌层浸润无明显相关性,差异无统计学意义(P0.05),与子宫内膜癌临床分期、组织分级、淋巴结转移密切相关,差异有统计学意义(P0.05);子宫内膜癌中DAPK甲基化与Ki67蛋白阳性表达呈明显正相关,差异有统计学意义(rs=0.537,P0.05)。结论子宫内膜癌中DAPK呈明显高甲基化,Ki67蛋白明显高表达,二者与子宫内膜癌临床分期、组织分级、淋巴结转移密切相关,对于早期诊断子宫内膜癌具有一定临床价值。     

微卫星状态与结直肠癌患者的临床病理特征分析

目的 研究分析微卫星状态与结直肠癌患者的临床病理特征。方法 选取本院2018年1月-2022年1月收治的结直肠癌患者52例为研究对象,根据肿瘤微卫星不稳定性将患者分为两组,其中6例患者为高度微卫星不稳定（MSI-H）组,46例患者为低度微卫星不稳定（MSI-L）/微卫星稳定（MSS）组。采用免疫组化染色技术检测微卫星状态,分析微卫星不稳定状态与结直肠癌患者临床病理特征的相关性,同时分析患者预后情况。结果 MSI-H组与MSI-L/MSS组的年龄、血清癌胚抗原（CEA）<4.7ng/mL、肿瘤部位、肿瘤TNM分期、肿瘤T分期、肿瘤N分期、肿瘤分化程度、肿瘤黏液成分、肿瘤最大直径、神经侵犯、癌结节、淋巴结转移比较差异有统计学意义（P<0.05）。MSI-H组1年内复发率明显低于MSI-L/MSS组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 结直肠癌患者微卫星不稳定状态与血清CEA水平、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期、肿瘤分化程度等因素密切相关,可加大研究力度,为临床提供指导依据。     

子宫内膜癌中PR基因表达缺陷及其启动子区CpG岛甲基化的研究

[目的]研究子宫内膜癌中孕激素受体亚型PRA、PRB表达与其启动子区甲基化状态的关系,探讨子宫内膜癌组织、细胞分子变化特征及孕激素受体亚型表达下调的机制。[方法](1)应用免疫组化SP法检测子宫内膜癌组织中PRA、PRB蛋白的表达。(2)应用甲基化特异性PCR检测子宫内膜癌组织及经5-杂氮脱氧胞苷(5′-aza-2′-deoxyóytidine ADC)处理前后子宫内膜癌Hec-1-B细胞系中PRA、PRB的甲基化状态。(3)应用免疫印迹法检测ADC处理Hec-1-B细胞系前后PRA、PRB蛋白的表达。[结果](1)与正常子宫内膜组织比较:PRA蛋白在高、中低分化子宫内膜癌组织中表达差异无统计学意义;PRB蛋白在高分化子宫内膜癌组织中表达无明显降低,差异无统计学意义,在中低分化子宫内膜癌组织中表达明显降低,差异有统计学意义。(2)与正常子宫内膜组织比较,子宫内膜癌组织中,PRA启动子区CpG岛甲基化率较低,差异无统计学意义,PRB启动子区CpG岛甲基化率较高,差异有统计学意义,与组织分化程度有关,与病理类型及有无淋巴结转移和有无肌层浸润无关;子宫内膜癌Hec-1-B细胞系中,加入ADC前PRA出现非甲基化条带,PRB出现甲基化条带,加入ADC后,PRA非甲基化条带不变,PRB甲基化条带消失。(3)子宫内膜癌Hec-1-B细胞系中加入不同浓度ADC后,PRA蛋白表达无明显改变,PRB蛋白表达不同程度增加。[结论]子宫内膜癌组织以及Hec-1-B细胞系中,存在PR基因异常甲基化,与PR表达下调关系密切,编码PR基因启动子的选择性B亚型甲基化,导致了PRB的失活,继而PRB蛋白表达下降或消失,可能参与了子宫内膜癌的形成。ADC可通过去甲基化作用使PRB恢复表达,可能提高子宫内膜癌的临床内分泌治疗效果。     

IL-10基因启动子区CpG岛甲基化与宫颈癌的相关性研究

目的:探讨IL-10基因启动子甲基化与HPV感染导致宫颈癌的相关性。方法:采用PCR和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测宫颈癌49例、癌前病变50例(19例CIN1、10例CIN2、21例CIN3)及正常对照50例宫颈组织中HPV16及IL-10基因启动子甲基化状态,并分析IL-10基因甲基化状态与不同临床病理特征之间的联系。结果:宫颈癌组及癌前病变组IL-10基因甲基化率与对照组比较差异均有统计学意义(P﹤0.05)。宫颈癌组IL-10基因甲基化和HPV16 E7 DNA检测结果有一定的关联性(χ2=20.163,P<0.05,Pearson列联系数r=0.345)。不同年龄、肿瘤组织大小、病理分级、临床分期及有无淋巴结转移和IL-10基因甲基化未见明显关系(P>0.05)。结论:宫颈癌IL-10基因启动子CpG岛甲基化与高危型HPV16感染具有关联性,IL-10基因启动子区低甲基化与宫颈癌发病相关。     

子宫内膜癌组织中miR-106b、DAB2表达与临床病理及预后的相关性

目的:探究子宫内膜癌组织中微小RNA106b(miR-106b)与残疾基因同源物(DAB2)表达水平与临床病理特征及患者预后的关系。方法:收集2010年5月—2015年2月本院手术切除的子宫内膜癌临床资料70例(观察组),同期本院子宫内膜癌切除手术的癌旁组织标本70例(正常组)。qRT-PCR检测子宫内膜组织中miR-106b、DAB2表达,免疫组化法检测子宫内膜组织中DAB2蛋白表达。根据miR-106b表达量分为高表达组与低表达组,观察分析miR-106b、DAB2表达与临床病理特征关系。Pearson法进行相关性分析,采用Kaplan-Meier对患者的生存情况进行分析,采用cox分析进行多因素分析。结果:观察组子宫内膜癌组织中miR-106b表达水平高于正常组,DAB2表达水平低于正常组,免疫组化结果显示观察组中DAB2蛋白阳性表达率低于正常组(均P0.05);临床病理结果显示,miR-106b、DAB2表达均与FIGO分期、P53及Ki67显著相关,相关性分析miR-106b与DAB2表达呈负相关,KaplanMeier分析结果显示miR-106b低表达组与DAB2阳性表达组PFS均高于高表达组、阴性表达组(P0.05);Cox多元回归分析结果显示miR-106b、DAB2表达均是患者预后的危险因素。结论:miR-106b在子宫内膜癌组织中上调表达、DAB2下调表达,二者呈负相关且均与肿瘤组织分化及细胞增殖迁移有关,可作为临床早期诊断治疗子宫内膜癌及有效评估患者预后的指标。     

miR-17-5p和PTEN在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探究子宫内膜癌患者微小RNA 17-5P(miR-17-5p)、内膜中10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达以及临床意义。方法收集2011年8月-2012年4月在该院妇产科进行子宫内膜切除治疗的89例患者为研究对象,16例增殖期子宫内膜标本作为正常组,22例子宫内膜增生标本作为内膜增生组,51例子宫内膜腺癌标本作为内膜癌组。应用RT-PCR法测定子宫内膜组织中miR-17-5p、PTEN表达,应用免疫组化法检测子宫内膜组织中PTEN蛋白表达,分析miR-17-5p、PTEN与临床病理参数的联系,用Kaplan-Meier生存函数对患者预后情况进行分析。结果内膜增生组、内膜癌组子宫内膜组织中miR-17-5p、PTEN基因表达均低于正常组,且内膜癌组基因表达水平低于内膜增生组,差异有统计学意义(P0.05)。正常组、内膜增生组及内膜癌组患者PTEN蛋白阳性表达、平均光密度逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。miR-17-5p表达与病理学分期、淋巴结转移存在一定联系,PTEN表达与病理分级、浸润程度存在一定联系(P0.05)。生存曲线显示,miR-17-5p、PTEN 5年内高表达患者生存率高于低表达患者,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 miR-17-5p和PTEN在子宫内膜癌中表达水平下降,且与子宫内膜癌预后相关。     

微小RNA-124-3p靶向胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨微小RNA-124-3p(miR-124-3p)靶向胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响。方法 选取2015年1月—2021年1月磐石市医院保存的子宫内膜癌组织及癌旁组织20例，分析miR-124-3p在癌组织、癌旁组织中的表达及与患者临床病理特征的关系。用子宫内膜癌MFE-280细胞进行miR-124-3p沉默和过表达转染，分为空白组、miR-124-3p-inhibitor组、miR-124-3p-mimic组，分析调控miR-124-3p表达对子宫内膜癌MFE-280细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。采用双荧光素酶报告实验预测miR-124-3p的靶基因，分析miR-124-3p对子宫内膜癌MFE-280细胞IGF2BP1表达量的影响。结果 子宫内膜癌组织miR-124-3p表达量(1.01±0.09)低于癌旁组织(1.89±0.25),差异有统计学意义(t=14.810,P<0.05)。miR-124-3p与FIGO分期、组织学分级、淋巴结转移、肌层浸润深度有关，miR-124-3p在Ⅳ期、G3分级...     

PTEN和VEGF蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的:研究PTEN、VEGF在子宫内膜样腺癌中的表达及其临床意义,探讨其与子宫内膜样癌发展及生物学行为的相关性。方法:收集92例子宫内膜病理标本,应用免疫组织化学法(SP法)检测PTEN及VEGF的表达情况。结果:PTEN和VEGF在子宫内膜良、恶性病变组织中的阳性表达率相比差异有统计学意义(P<0.05);在子宫内膜癌高中分化组与低分化组中阳性表达率相比差异有统计学意义(P<0.05);在无肌层浸润或浸润深度≤1/2组与浸润深度>1/2组中的阳性表达率相比差异有统计学意义(P<0.05);VEGF在无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中及有转移中的阳性表达率相比差异有统计学意义(P<0.05);PTEN阳性表达率与VEGF阳性表达率呈现出负相关性(γ=-0.633,P<0.05)。结论:PTEN阳性表达与子宫内膜癌的组织学分级及肿瘤侵袭性呈负相关,VEGF阳性表达与子宫内膜癌的组织学分级、肿瘤侵袭性及淋巴结转移呈正相关;二者在子宫内膜癌发生和发展中呈拮抗作用,表达呈负相关。监测PTEN和VEGF的表达,可以作为判断肿瘤恶性程度的指标。     

GRB7在子宫内膜癌中的表达和临床意义及与HER2的关系

目的探讨生长因子受体结合蛋白7(GRB7)在子宫内膜癌中的表达和临床意义及与表皮生长因子受体2(HER2)的关系。方法采用免疫组化法检测52例子宫内膜癌组织(子宫内膜癌组)、38例不典型增生子宫内膜组织(不典型增生组)和30例正常子宫内膜癌组织(正常对照组)中GRB7和HER2的表达,并分析两者阳性率与子宫内膜癌临床病理特征的相关性。结果3组GRB7和HER2蛋白阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组相比,不典型增生组和子宫内膜癌组GRB7和HER2蛋白阳性率均明显升高(均P<0.05),且子宫内膜癌组GRB7和HER2蛋白阳性率高于不典型增生组(均P<0.05)。不同临床分期、组织学分级、病理类型及HER2蛋白表达的患者GRB7阳性率差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同临床分期、组织学分级、淋巴结转移情况及肌层浸润深度的患者HER2阳性率差异均有统计学意义(均P<0.05)。子宫内膜癌组织中GRB7和HER2的表达呈正相关(r=0.375,P<0.05)。结论GRB7和HER2在子宫内膜癌组织中高表达,与子宫内膜癌的恶性程度密切相关。     

经阴道彩超联合血清HE4、miR-21诊断早期子宫内膜癌价值

目的:探讨经阴道彩色多普勒超声(TVCDS)联合血清人附睾分泌蛋白4(HE4)及miR-21检测诊断早期子宫内膜癌价值。方法:回顾性收集本院2017年3月-2019年1月择期手术后病理学确诊为早期子宫内膜癌91例患者(恶性病变组),同期择期手术后病理学确诊为子宫内膜良性病变86例患者(良性病变组),所有患者入院后均行TVCDS检查,并于术前完成血清HE4及miR-21表达检测,观察TVCDS影像学表现,并根据病理结果评价TVCDS、HE4、miR-21检测对早期子宫内膜癌的诊断价值。结果:TVCDS提示早期子宫内膜癌病变特点为子宫形态增大、浆膜与内层膜间的低回声晕中断、病灶侵犯子宫内膜肌层以及新生血流信号丰富,新生血管增加。两组患者病灶血流信号有差异(P<0.05),病灶血流信号恶性病变组多呈现树叉状或网状,良性病变组多呈现点状或短棒状。恶性病变组子宫内膜厚度、血清HE4和miR-21水平均高于良性病变组,而搏动指数和阻力指数均低于良性病变组(P<0.05)。彩色多普勒超声单独检测诊断的特异性80.4%,敏感性83.5%;HE4临界值为71.35 pmol/L,诊断特异性78.3%,敏感性85.9%;miR-21临界值为1.32,诊断特异性85.7%,敏感性88.4%;3项联合检测诊断的特异性(95.1%)、敏感性(94.5%)和约登指数(0.899)均高于单独检测(F=15.382,P<0.05)。结论:早期子宫内膜癌患者血清HE4和miR-21均升高,TVCDS联合HE4、miR-21检测可提高早期子宫内膜癌的诊断效能。     

子宫内膜异位症患者血清及子宫内膜组织miR-21水平与不孕不育的相关性分析

目的 探讨子宫内膜异位症患者血清及子宫内膜组织中miR-21表达水平与不孕不育的相关性.方法 选取2019年1月至2020年11月于中南大学湘雅医学院附属海口医院就诊并行腹腔镜手术治疗的120例子宫内膜异位症患者为研究对象(患者均合并不孕症),根据妊娠结局将其分为妊娠成功组69例与不孕不育组51例.采用实时荧光定量PC...     

实时荧光定量PCR检测膀胱癌TWIST1基因启动子的甲基化状态

目的建立针对TWIST1基因启动子甲基化状态的荧光定量检测方法,进而评估其在膀胱癌临床研究的应用前景。方法应用实时荧光定量PCR方法检测南通地区50例确诊膀胱癌患者和25例非膀胱癌的健康对照者的尿液标本中TWIST1基因启动子的甲基化和非甲基化含量,对其甲基化率进行对比。结果正常人的TWIST1启动子的甲基化率为8.1%～17.3%,平均值为12.3%,膀胱癌患者的甲基化率为25.2%～48.3%,平均值为38.2%,膀胱癌患者的TWIST1基因启动子甲基化率有明显的增高(P<0.05)。结论 TWIST1基因启动子区在膀胱癌中异常甲基化,能够作为有效检测膀胱癌的基因。     

结肠癌患者CDH13基因启动子甲基化状态

目的 分析结肠癌患者CDH13基因启动子甲基化情况.方法 留取32例结肠癌患者的手术标本(观察组)及12例非结肠癌患者正常结肠组织(对照组),应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法分析CDH13基因启动子甲基化情况.结果 观察组CDH13基因启动子甲基化总发生率为59.4％(19/32),显著高于对照组的8.3％(1/12)(P=0.002).结论 结肠癌中存在着较高比例的CDH13基因启动子甲基化,提示CDH13在结肠癌的发生中起着重要作用.     

外周血中miR-138、miR-338在痉挛型脑性瘫痪患儿中表达水平及临床价值

目的 检测微小RNA-138(miR-138)、微小RNA-338(miR-338)在痉挛型脑性瘫痪患儿中表达水平,并探究两者的临床价值.方法 选取2018年3月-2020年4月于本院门诊就诊及住院治疗的64例痉挛型脑性瘫痪患儿为研究对象(痉挛型脑性瘫痪组);同期选取62例健康体检儿童作为健康对照组.采用实时荧光定量P...     

MLH1 promoter methylation, diet, and lifestyle factors in mismatch repair deficient colorectal cancer patients from EPIC-Norfolk

There is conflicting evidence for the role diet and lifestyle play in the development of mismatch repair (MMR)-deficient colorectal cancers (CRC). In this study, associations between MMR deficiency, clinicopathological characteristics, and dietary and lifestyle factors in sporadic CRC were investigated. Tumor samples from 185 individuals in the EPIC-Norfolk study were analyzed for MLH1 gene promoter methylation and microsatellite instability (MSI). Dietary and lifestyle data were collected prospectively using 7-day food diaries (7dd) and questionnaires. MMR-deficient tumor cases (MLH1 promoter methylation positive, MSI-H) were more likely to be female, older at diagnosis, early Dukes' stage (A/B), and proximal in location (MSI-H P = 0.03, 0.03, 0.02, and 0.001, respectively). Tumors with positive MLH1 promoter methylation (>20%) were associated with poor differentiation (P = 0.03). Low physical activity was associated with cases without MSI (P = 0.05). MMR deficiency was not significantly associated with cigarette smoking or alcohol, folate, fruit, vegetable, or meat consumption. We conclude that MMR-deficient tumors represent a distinct subset of sporadic CRC that are proximal in location, early Dukes' stage, and poorly differentiated, in cases that are female and older at diagnosis. There is no overall role for diet and lifestyle in MMR status in CRC, consistent with age-related susceptibility to MLH1 promoter methylation.     

实时荧光定量PCR检测膀胱癌TWIST1基因启动子的甲基化状态

目的建立针对TWIST1基因启动子甲基化状态的荧光定量检测方法,进而评估其在膀胱癌临床研究的应用前景。方法应用实时荧光定量PCR方法检测南通地区50例确诊膀胱癌患者和25例非膀胱癌的健康对照者的尿液标本中TWIST1基因启动子的甲基化和非甲基化含量,对其甲基化率进行对比。结果正常人的TWIST1启动子的甲基化率为8.1%～17.3%,平均值为12.3%,膀胱癌患者的甲基化率为25.2%～48.3%,平均值为38.2%,膀胱癌患者的TWIST1基因启动子甲基化率有明显的增高（P〈0.05）。结论 TWIST1基因启动子区在膀胱癌中异常甲基化,能够作为有效检测膀胱癌的基因。     

结肠癌患者血清miR-192和miR-23a水平的变化及其临床意义

目的探讨结肠癌患者血清miR-192及miR-23a水平变化及其临床意义。方法选取我院2016年3月至2019年2月期间收治的64例结肠癌患者作为结肠癌组,选取同期42例肿瘤性息肉患者作为良性息肉组及同期30例健康体检者作为对照组。三组均测定血清miR-192及miR-23a水平,结肠癌组术后再次测定血清miR-192及miR-23a水平。对比三组血清miR-192及miR-23a水平;对比结肠癌组手术前后miR-192及miR-23a水平变化情况,并分析结肠癌组miR-192与miR-23a的相关性。结果miR-192水平:结肠癌组<良性息肉组<对照组;miR-23a水平:结肠癌组>良性息肉组>对照组(P均<0.05)。与术前相比,结肠癌组术后的miR-192水平较高,miR-23a水平较低(P均<0.05)。相关性分析显示,结肠癌组血清miR-192与miR-23a水平呈负相关(r=-0.997,P=0.000)。结论血清miR-192及miR-23a水平变化在结肠癌的发生及发展中发挥重要作用,两项指标有望作为结肠癌诊断的重要肿瘤标记物。     

ER-β基因多态性与子宫内膜癌组织ER表达的相关性

目的:研究ER-β基因多态性与子宫内膜癌组织ER阳性表达的相关性。方法:选择60例子宫内膜癌患者和60例健康对照者,检测两组ER-β基因RsaI和AluI酶切多态性,检测子宫内膜癌组ER阳性表达率。结果:ER-β基因RsaI多态性在EC组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05),R等位基因患EC的风险是r等位基因的1.796倍(OR=1.796,95%CI:1.070～3.017);EC组RR基因型癌组织ER阳性表达明显少于Rr、rr基因型(P<0.05)。AluI多态性在EC组和对照组间无统计学差异(P>0.05)。结论:ER-β基因RsaI酶切多态性与子宫内膜癌的发病有相关性,R等位基因可能是EC的遗传易感基因,RR基因型与癌组织ER阳性低表达具有关联性。