益气活血通便方对慢传输型便秘大鼠的治疗作用及机制

目的：探讨益气活血通便方对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及机制。方法：采用盐酸洛哌丁胺灌胃法建立STC大鼠模型,设定正常组、模型组、莫沙必利组、益气活血通便方低、中、高剂量组(3.51、7.02、14.04 g·kg^-1)给药后观察各组大鼠一般体征变化、计算粪便含水率及肠道推进率;采用苏木素-伊红染色观察结肠组织黏膜炎症改变;采用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠结肠P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量;采用免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大鼠结肠组织水通道蛋白(AQP)3、AQP4、AQP8和c-Kit蛋白灰度值,通过16S r RNA高通量测序检测肠道菌群变化。结果：经过益气活血通便方给药治疗10 d后,与模型组比较,益气活血通便方不同剂量组和莫沙必利组大鼠的粪便含水率和肠道推进率均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,益气活血通便方中、高剂量组和莫沙必利组大鼠结肠无明显黏膜炎症改变,杯状细胞排列较规整无断裂、数量较多。益气活血通便方中、高剂量组和莫沙必利组血清中SP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),VIP明显降低(P&...     

黄芪赤风汤对脑梗死大鼠模型的治疗作用及对脑组织ZO-1、Claudin-5、P-gp、MRP1蛋白表达的影响

目的:探究黄芪赤风汤对大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型的治疗作用及机制。方法:将90只SPF级雄性大鼠随机分为假手术组,模型组,黄芪赤风汤高、中、低剂量组(中药低、中、高剂量组)(8.10、4.05、2.025 g·kg^-1),脑心通组(脑心通,0.32 g·kg^-1),建立MCAO大鼠模型,给予黄芪赤风汤药液进行干预,对各组大鼠进行神经功能学评分;大鼠脑组织采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色,计算脑梗死面积;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠脑组织病理变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠脑组织闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白-5(Claudin-5)、P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药蛋白1(MRP1)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分、脑梗死率显著增加(P&l...     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾脏PDGF-B和BMP-7的影响

目的 观察中药复方解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾脏血小板衍化生长因子B(PDGF-B)和骨形成蛋白7(BMP-7)的影响.方法 建立STz诱导的糖尿病SD大鼠模型,将成模大鼠随机分成4组,即模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组、厄贝沙坦+JJFSN组,并设正常对照组.各组大鼠采用相应的干预措施处理12周.常规方法 检测各组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测大鼠肾PDGF-B和BMP-7表达,Western blot检测肾组织PDGF-B的表达.透射电镜观察肾脏超微结构.结果 模型组大鼠肾BMP-7表达显著减少.而两种检测方法 测得的PDGF-B表达均显著升高;JJFSN组、厄贝沙坦组和厄贝沙坦+JJFSN组两种检测方法 测得的肾脏PDGF-B均显著低于模型组(P＜0.05),而肾BMP-7则显著高于模型组(P＜0.05);厄贝沙坦+JJFSN组两项指标的改善情况明显优于其他三组(P＜0.05),但尚未达到正常对照组水平.结论 解聚复肾宁能够减少DM大鼠肾组织中PDGF-B的表达,增加DM大鼠肾组织中BMP-7的表达.     

电针调控褪黑素-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体抑制细胞焦亡减轻脑缺血大鼠脑缺血损伤

目的:探讨电针通过调节褪黑素-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体(NLRP3)轴介导的细胞焦亡减轻脑缺血再灌注大鼠脑缺血损伤的机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组12只及手术组36只，手术组大鼠采用大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血-再灌注损伤模型。大鼠造模成功后进一步分为模型组、电针组和电针+Luz组，每组12只。电针组和电针+Luz组电针“百会”“神庭”,每次20 min,电针+Luz组腹腔注射褪黑素受体拮抗剂luzindole(30 mg/kg),以上干预均1次/d,干预7 d。采用Zea Longa法评估各组大鼠神经功能缺损情况，ELISA法检测各组大鼠12:00及24:00血清褪黑素含量，小动物MRI评估各组大鼠脑梗死体积百分比，TUNEL法检测各组大鼠梗死侧大脑皮质区神经细胞凋亡水平，免疫荧光技术检测各组大鼠大脑皮质小胶质细胞活化情况，Western blot法检测各组大鼠大脑皮质细胞焦亡相关蛋白NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β表达水平。结果:与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分显著升高(P<0.01),24:00...     

电针对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织自噬相关蛋白表达的影响

目的 观察电针对胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)大鼠肝脏组织自噬相关蛋白表达的影响,探讨电针治疗IR的潜在机制。方法 将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组8只。电针干预选取中脘、关元、足三里及丰隆穴,每周干预3次,共8周。检测各组大鼠的餐后血糖(postprandial blood glucose, PBG)、腹腔糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT)血糖、葡萄糖输注率(glucose infusion rate, GIR)。采用高压尾静脉注射GFP-LC3质粒,观察肝细胞GFP-LC3荧光斑,Western Blot法检测大鼠肝脏组织中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3B-Ⅱ, LC3B-Ⅱ)、p62(sequestosome 1, p62)、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-AKT, p-AKT)、胰岛素受体底物-...     

麻元通便止痛汤对慢传输型便秘大鼠肠道推进功能的影响

目的:探究麻元通便止痛汤对慢传输型便秘(STC)大鼠肠道功能、排便量、肠神经递质及水通道蛋白(AQP)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、麻元通便止痛汤低、中、高剂量组(6,12,18 mg·kg-1)及莫沙必利组;模型组、麻元通便止痛汤组及莫沙必利组采用复方地芬诺酯混悬液10 mg·kg-1·d-1灌胃,连续给药14 d,建立STC模型;模型建立后,给药组分别给予相应药物,正常组及模型组给予等体积0.9%Na Cl溶液灌胃,连续给药14 d。检测各组大鼠造模前、造模期及治疗期粪便数量及含水量;计算各组大鼠碳末推进率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠结肠组织一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠结肠组织水通道蛋白1,3,4,8(AQP1,3,4,8)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量降低(P0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组大鼠碳末推进率、排便量及粪便含水量升高,且呈剂量依赖型(P0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠NO,NOS含量升高(P0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠NO,NOS含量降低,且呈剂量依赖型(P0.05);与正常组比较,模型组大鼠结肠AQP1,3,4,8表达升高(P0.05),与模型组比较,麻元通便止痛汤组及莫沙必利组结肠AQP1,3,4,8表达降低,且呈剂量依赖型(P0.05)。结论:麻元通便止痛汤可改善STC大鼠肠道功能、排便数量及粪便含水量,其机制可能与减少结肠NO,NOS含量及AQP1,3,4,8表达有关。     

黄连通过调控肠黏膜上皮细胞AQPs蛋白表达改善溃疡性结肠炎腹泻的机制研究

目的 基于肠黏膜上皮细胞水通道蛋白（AQPs）表达的调控作用,探究黄连改善溃疡性结肠炎（UC）腹泻的药理机制。方法 将SD大鼠随机分为对照、模型、黄连低剂量、黄连中剂量、黄连高剂量组5组,各6只。采用葡聚糖硫酸钠盐（DSS）建立UC大鼠模型,造模结束后第2天,各给药组开始灌胃相应药物,1次/d,连续7 d,计算并评价各组大鼠稀便率、平均稀便级和腹泻指数;采用苏木素伊红（HE）染色法观察各组结肠组织病理变化;应用FITC-Dextran检测结肠黏膜通透性;采用ELISA试剂盒检测各组血清中白细胞介素（IL） 1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平;采用荧光定量PCR法和Western blotting法检测各组结肠黏膜上皮细胞中AQP3和AQP4基因和蛋白表达情况。结果 模型组大鼠稀便率、平均稀便级和腹泻指数增加（P<0.01）,结肠黏膜通透性及炎症损伤加重;肠黏膜上皮细胞中AQP3和AQP4基因和蛋白表达水平均明显下降（P<0.01）。与模型组比较,黄连中、高剂量组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数降低（P<0.01）,且结肠黏膜通透性及炎症损伤改善;肠黏膜上皮细胞中A...     

艾灸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠血清炎性细胞因子、结肠组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和艾灸组,每组8只。采用慢性束缚联合番泻叶灌胃建立IBS-D大鼠模型。艾灸组大鼠予以艾灸"天枢""上巨虚",30 min/次,1次/d,共干预7 d。观察各组大鼠稀便率和直结肠扩张所引起腹部回缩反射(AWR)的最小容量阈值;ELISA法检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理改变;免疫组织化学法检测各组大鼠结肠组织中TLR4和NF-κB(p65)的表达;实时荧光定量PCR法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65) mRNA的相对表达量;Western blot法检测结肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB(p65)蛋白的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠存在低度炎性反应,AWR的最小容量阈值显著下降(P<0.01),稀便率...     

夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠脊髓组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3介导的细胞焦亡的影响

目的：观察夹脊电针对脊髓损伤（SCI）大鼠运动功能、脊髓组织形态、脊髓组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及活化的半胱氨酸蛋白酶-1(cleaved Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)-N表达的影响,探讨夹脊电针治疗SCI的作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、激动剂+电针组,每组分为3、7 d两个亚组,每个时间点6只大鼠。采用改良Allen’s法制备急性SCI大鼠模型。电针组大鼠电针双侧胸（T）9、T11“夹脊”治疗,每次30 min,每日1次,分别治疗3、7 d。激动剂+电针组除电针外造模后腹腔注射单钠尿酸盐200μg/kg。采用BBB评分对各组大鼠运动功能进行评价;HE染色法观察各组大鼠脊髓组织形态结构;免疫组织化学染色法检测各组大鼠脊髓组织焦亡相关因子NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N阳性表达;Westernblot法检测各组大鼠脊髓组织NLRP3、cleavedCaspase-1、GSDMD-N的蛋白表达水平;免疫荧光双标法检测各组大鼠离子钙接头蛋白1(Iba-1)与GSDMD-N在脊髓组织中的表达及定...     

升降润肠方对功能性便秘模型大鼠胃肠动力及结肠黏膜水通道蛋白3、水通道蛋白9的影响

目的 探讨升降润肠方治疗儿童功能性便秘(functional constipation, FC)的可能作用机制。方法 将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、乳果糖组、升降润肠方组,每组12只,除空白组外,其余36只采用盐酸小檗碱灌胃建立SD大鼠FC模型;造模成功后,空白组、模型组均予生理盐水1 mL/次,2次/天,灌胃;乳果糖组予乳果糖口服溶液1 mL/次,第2次予生理盐水1 mL/次,灌胃;升降润肠方组予中药液1 mL/次,2次/天,灌胃;四组均灌胃14天。疗程结束后,各组大鼠雌、雄各随机抓取3只,脱颈处死,通过计算胃排空率、碳墨推进率、记录结肠内存留粪粒数来评价大鼠胃肠动力;其余大鼠麻醉后剖腹取近端结肠组织,采用免疫组化检测水通道蛋白3(aquaporin-3,AQP3)、水通道蛋白9(aquaporin-9,AQP9)在结肠组织分布及表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)进一步检测其mRNA水平,蛋白印迹(western blot, WB)检测其蛋白表达情况。结果 ...     

mTOR激动剂及其抑制剂在电针治疗功能性消化不良中的作用

目的:探讨mTOR激动剂及其抑制剂在电针治疗功能性消化不良中的作用。方法:采用夹尾刺激法构建FD大鼠模型,将24只造模成功的FD大鼠随机分为模型组、电针组、mTOR激动剂+电针组(激动剂组)和mTOR抑制剂+电针组(抑制剂组),以正常大鼠为对照组,每组6只,电针组大鼠采用电针刺激治疗,激动剂组和抑制剂组大鼠分别腹腔注射L-leucine(0.45 g/kg)和rapamycin(1 mg/kg)后再进行电针刺激治疗。观察各组大鼠的日常表现并计算其胃内残留率和小肠推进率;采用qRT-PCR检测各组大鼠胃及小肠中胃促生长素(Ghrelin)和mTOR mRNA的表达;采用Western blot检测各组大鼠胃及小肠中pre-Ghrelin和磷酸化p-P70S6K蛋白的表达。结果:与模型组相比,抑制剂组大鼠的体能状态恢复得最好,胃内残留率最小,小肠推进率最大,其次为电针组和激动剂组。与电针组相比,激动剂组大鼠胃及小肠中Ghrelin mRNA、胃中pre-Ghrelin蛋白的表达显著下降(P0.05),而其胃及小肠中mTOR mRNA和p-P70S6K蛋白的表达量显著升高(P0.05);抑制剂组大鼠胃中pre-Ghrelin蛋白的表达量显著升高(P0.05),而其胃及小肠中mTOR mRNA和p-P70S6K蛋白的表达量显著下降(P0.05)。结论:mTOR激动剂可降低电针治疗FD的效果,而mTOR抑制剂可有效增强电针治疗FD大鼠效果。     

针药结合对心肌梗死大鼠内向整流钾离子通道相关蛋白的影响及作用机制

目的 探讨针药结合对心肌梗死大鼠内向整流钾离子通道(inwardly rectifying K channel, Kir)相关蛋白表达的影响。方法 63只大鼠采用随机数字表法随机抽取8只大鼠作为对照组,其余55只建立模型。对照组给予基础饲料,其余大鼠给予高脂喂饲。3周后对55只造模大鼠采用一次性多点位注射盐酸异丙肾上腺素溶液建立动物模型。将造模成功的40只大鼠按照随机数字表法分为模型组、针刺组、中药组、针药结合组、西药组,每组8只,分别给予相应干预。15 d后观察大鼠心电图变化,采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清血脂水平,HE染色观察各组大鼠心脏组织形态学变化,ELISA法检测大鼠血清中血清超敏C反应蛋白(serum high sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)、非对环二甲基精氨(ADMA)含量,Western Blot法检测大鼠Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠血清hs-CRP、ADMA含量均呈上升趋势(P<0.05),Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3的蛋白表达量均呈下降趋势(P...     

电针对功能性消化不良大鼠胃及小肠Ghrelin和GOAT的影响

目的:观察电针对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃及小肠中胃促生长素(Ghrelin)和Ghrelin酰基转移酶(Ghrelin O Acyltransferase,GOAT)表达的影响。方法:采用夹尾刺激法构建FD大鼠模型,将18只FD大鼠随机分为模型组、药物组和电针组,以正常大鼠为对照组,每组6只,药物组采用西沙必利(0.02 g/m L)进行灌胃治疗,电针组采用电针刺激治疗。观察各组大鼠的日常表现并计算其胃内残留率和小肠推进率;采用qRT-PCR检测各组大鼠胃及小肠组织中Ghrelin和GOAT mRNA的表达;采用Western blot检测各组大鼠胃及小肠组织中Ghrelin和GOAT蛋白的表达。结果:与模型组相比,电针组和药物组FD大鼠的活动量增加,进食量增加,毛发逐渐恢复光泽柔顺,且电针组大鼠的状态改善更为明显;与模型组相比,电针组和药物组FD大鼠的胃内残留率明显减少(P0.01),且电针组大鼠减少得更为明显(P0.01);与模型组相比,电针组和药物组FD大鼠的小肠推进率明显升高(P0.01),但两组之间的差异无统计学意义(P0.05)。与正常组大鼠相比,模型组大鼠胃及小肠中Ghrelin和GOAT mRNA以及蛋白的表达明显下调(P0.01);与模型组大鼠相比,电针组和药物组大鼠胃及小肠中Ghrelin和GOAT mRNA以及蛋白的表达明显上调(P0.01);与药物组相比,电针组大鼠胃及小肠中Ghrelin mRNA以及胃中GOAT蛋白表达量显著上调(P0.01)。结论:电针可有效调控FD大鼠胃及小肠中Ghrelin和GOAT的表达,改善FD大鼠的胃肠消化。     

基于CNP/cGMP信号通路的针刺对脾气虚大鼠胃肠动力作用机制探讨

目的 观察电针足三里、脾俞对脾气虚大鼠一般状态及胃肠动力的影响；基于CNP/cGMP信号通路，探讨电针足三里、脾俞对脾气虚大鼠胃肠动力作用机制。方法 将60只SPF级雄性大鼠随机分为4组，即正常组、模型组、非经非穴组及针刺组，每组15只。除正常组外，其余大鼠采用劳倦过度及饥饱失常的方法造模，21d后针刺组每日电针足三里、脾俞1次，每次20min,持续14d;非经非穴组采用针刺大鼠尾尖方法，每日1次，时长同针刺组。检测大鼠胃排空率及小肠推进率；HE染色观察大鼠胃窦平滑肌组织形态；ELISA法检测大鼠胃窦平滑肌组织环磷酸鸟苷(cGMP)含量，采用Western blot法检测大鼠胃窦平滑肌C型钠尿肽(CNP)、B型钠尿肽受体(NPR-B)蛋白的表达，实时荧光定量PCR法检测大鼠胃窦平滑肌组织MLCK、CNP、NPR-B mRNA表达量。结果 与正常组比较，模型组和非经非穴组大鼠胃排空率和小肠推进率降低(P<0.05);与模型组比较，针刺组大鼠胃排空率和小肠推进率升高(P<0.05)。各组大鼠胃黏膜未见异常，各组大鼠胃窦平滑肌组织细胞形态规则、排列整齐，无炎症细胞浸润；与正常组比...     

针灸足三里穴对胃溃疡大鼠PLCγ-1及胃黏膜细胞活性的影响

目的:探讨针灸足三里穴对胃溃疡大鼠磷脂酶C-γ1 (PLCγ-1)及胃黏膜细胞活性的影响。方法:将30只大鼠分为正常组、胃溃疡组及干预组,每组10只,除正常组外,其余2组建立胃溃疡模型,干预组采用针刺足三里等穴位处理。采用苏木精-伊红染色(HE)法检测各组大鼠胃组织病理;酶联免疫吸附法检测各组大鼠眼眶静脉血炎症因子;TUNEL法检测各组大鼠胃黏膜细胞凋亡率;免疫组化法检测各组大鼠胃组织PLCγ-1表达。结果:正常组大鼠胃组织无坏死,无炎症浸润;胃溃疡组胃组织排列紊乱,溃疡局部呈现扩张,并出现增生结缔组织,血管结构紊乱;与胃溃疡组比较,干预组溃疡部位炎症及坏死部位减轻,肉芽覆盖溃疡。与正常组比较,胃溃疡组大鼠血清白细胞介素-8 (IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及胃黏膜细胞凋亡率升高(P<0.01,P<0.05),胃组织中PLCγ-1蛋白及m RNA表达降低(P<0.05)。与胃溃疡组比较,干预组大鼠血清IL-8、TNF-α水平及胃黏膜细胞凋亡率降低(P<0.01,P<0.05),胃组织中PLCγ-1蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)...     

舒胃汤对功能性消化不良模型大鼠胃排空功能与CNP/pGC信号转导通路的影响

目的观察舒胃汤(柴胡、香附、白术等)对功能性消化不良(FD)模型大鼠胃排空与CNP/pGC(C-型利钠肽/颗粒性鸟苷酸环化酶)信号转导通路的影响,探讨舒胃汤治疗功能性消化不良的作用机制。方法取80只Wistar大鼠,除空白组外,其余动物采用改良复合病因方法 (慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾激怒)复制FD模型,按体质量随机分为舒胃汤组(30.68 g生药/kg)、莫沙必利组(1.37 mg/kg)、模型组。连续灌胃给药2周后,采用Western blot法检测各组大鼠胃窦组织CNP蛋白含有量,RT-PCR法检测各组大鼠胃窦组织CNP mRNA表达水平,酶联免疫法检测各组大鼠胃窦组织pGC含有量,酚红法检测各组大鼠胃排空率。结果与模型组比较,舒胃汤组胃排空速率明显加快(P0.01),CNP、pGC蛋白含有量明显降低,CNP mRNA表达水平明显降低(P均0.05)。结论舒胃汤可明显调节FD模型大鼠胃肠功能,其机制与调控CNP/pGC信号转导通路中CNP和pGC含有量有关。     

益气养阴通络方通过lncRNA UCA1靶向调控miR-485-5p抑制糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡及炎症反应作用机制

目的:探讨益气养阴通络方通过lncRNA UCA1靶向调控miR-485-5p抑制糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡和炎症反应作用机制。方法:选取雄性Wistar大鼠50只,随机分为空白组、模型组和益气养阴通络方低、中、高剂量组,每组各10只;除空白组外,其余组大鼠采用高糖高脂胆固醇饮食造模。检测各组大鼠肾功能指标和炎症因子水平;采用流式细胞术检测各组大鼠细胞凋亡率;WB检测各组大鼠细胞凋亡蛋白表达;PCR检测大鼠UCA1、miR-485-5p mRNA水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测UCA1与miR-485-5p的结合位点。结果:与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组24 h尿蛋白(24 hUTP)、血清肌酐(SCr)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组大鼠细胞凋亡率较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不同剂量组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量较低,且呈剂量依赖性(均P<0.05);与模型组比较,益气养阴通络方不...     

大黄通过调控紧密连接蛋白治疗大鼠脓毒症

目的:探究大黄治疗脓毒症大鼠的分子机制。方法:100只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,大黄高、中、低剂量组(150,100,50 mg·kg~(-1)),除假手术组只暴露盲肠,不进行结扎与穿孔,其余各组采用盲肠结扎法制作大鼠脓毒症模型,记录各组大鼠死亡情况,采用细菌16S rRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测大鼠结肠及肠系膜淋巴结、血液中金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌数量,采用q PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测大鼠结肠紧密连接蛋白紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)和闭锁蛋白(Occludin)水平。结果:与假手术组比较,脓毒症模型组大鼠病死率最高,不同标本的金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌检出率和数量明显升高,ZO-1和Occludin mRNA及蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,大黄高、中剂量组大鼠病死率降低,大鼠不同标本的上述两细菌检出率和数量有所减低,细菌移位情况减少,大鼠结肠的ZO-1和Occludin mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:大黄可调控结肠紧密连接蛋白表达保护肠黏膜屏障,从而抑制脓毒症大鼠细菌移位治疗脓毒症。     

参芪利心汤对心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制研究

目的研究参芪利心汤对阿霉素诱导心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、依那普利(2.1 mg/kg)组以及参芪利心汤低、中、高剂量(9.975、19.950、39.900 g/kg)组,除对照组外,其余大鼠ip阿霉素诱导心力衰竭模型;各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续4周。给药结束后,采用心脏彩色多普勒超声仪测定各组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)以及每搏心输出量(stroke volume,SV);采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用透射电镜观察各组大鼠心肌细胞超微结构;采用ELISA法检测各组大鼠血浆N端B型利钠肽(N-terminal B-type natriuretic peptide,NT-pro BNP)及心肌组织三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;采用流式细胞仪检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠心肌组织B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)m RNA表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和p53蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠LVEF、LVFS和SV显著降低(P0.01),血浆NT-pro BNP含量显著升高(P0.01),心肌组织ATP含量显著降低(P0.01),心肌细胞凋亡率显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平显著降低(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平显著升高(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,参芪利心汤中、高剂量组和依那普利组大鼠LVEF、LVFS和SV均显著升高(P0.01);血浆NT-pro BNP含量显著降低(P0.01),心肌组织ATP含量显著升高(P0.01),心肌细胞凋亡率显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2和PGC-1αmRNA表达水平均显著升高(P0.01),Bax和Caspase-3 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);心肌组织Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P0.01),Bax、Caspase-3和p53蛋白表达水平均显著降低(P0.05、0.01)。结论参芪利心汤能够改善心力衰竭大鼠的心肌结构、能量代谢及心功能,并减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控PGC-1α和线粒体凋亡通路相关蛋白表达有关。     

槐定碱对永久性大脑中动脉栓塞大鼠脑细胞的作用及机制研究

目的探究槐定碱对永久性大脑中动脉栓塞(permanent middle cerebral artery occlusion,p MCAO)大鼠脑细胞的作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组和槐定碱低、中、高剂量(2.5、5.0、10.0mg/kg)组,给予槐定碱5d后,建立p MCAO大鼠模型。考察槐定碱对pMCAO大鼠神经功能评分的影响;考察槐定碱对pMCAO大鼠脑梗死率的影响;采用流式细胞术检测各组大鼠缺血半暗带区细胞凋亡率;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠脑组织病理变化;采用Western blotting法考察各组大鼠脑组织B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated Xprotein,Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达情况。结果与模型组比较,槐定碱组大鼠神经缺陷症状改善,脑梗死率显著降低(P0.05、0.01),缺血半暗带细胞凋亡率明显降低(P0.05、0.01),脑组织损伤有所改善,脑组织Caspase-3和Bax蛋白表达水平显著降低(P0.05、0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P0.05、0.01)。结论槐定碱对pMCAO大鼠脑细胞具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2及下调Bax、Caspase-3蛋白表达水平,进而抑制细胞凋亡有关。