改良多聚-L-赖氨酸法防脱片载玻片的制备

目的:探索一种经济实用效果良好的防脱片载玻片的制备方法.方法:将市售普通载玻片进行改良多聚-L-赖氨酸防脱片载玻片的制备处理和传统重铬酸钾洗涤法及防脱片制备处理后,与市售防脱片载玻片成品进行相同的临床病理组织学切片制备.结果:改良防脱制备法效果稳定可靠,明显优于传统防脱片处理法,并可与市售防脱片处理的成品载玻片媲美.结论:改良多聚-L-赖氨酸防脱片载波片的制备法方便可靠,经济实用.     

两种防脱片剂在免疫组化染色中的应用比较

目的探讨多聚赖氨酸及APES在免疫组化染色中防脱片的作用。方法50例经10％中性甲醛液固定的各种人体组织,同一蜡块切片分成两组,对照组50例使用APES（3-氨丙基-乙氧基甲硅烷）涂胶防脱片,观察组50例使用多聚赖氨酸工作液处理,比较两组脱片情况。结果观察组完整贴片率为100％,对照组完整贴片率为92％,观察组完整贴片率优于对照组（P〈0．05）。结论多聚赖氨酸能够促使组织更加粘附于玻片,使实验过程顺利进行。     

多聚赖氨酸修饰的山羊脱钙骨富集骨髓干细胞的性能评价

目的 研究经多聚左旋赖氨酸修饰的山羊脱钙骨基质(demineralized bone matrix decorated with poly-L-lysine,PLL-DBM)的性能,为选择性细胞滞留技术(selective cell retention,SCR)提供一种对骨髓干细胞黏附性能良好的富集基质材料.方法 将取材于山羊股骨近端的松质骨去皮质理化处理制成脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM),用多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)对其进行修饰.扫描电镜分析其显微结构;氨基酸成分分析检测PLL与DBM的复合情况;通过纤维母细胞集落形成单位(CFU-F)计数,检测山羊PLL-DBM对骨髓干细胞的富集效果;在山羊横突间融合模型中,通过X线片及组织学评价其成骨能力.结果 PLL-DBM具有天然网状孔隙结构系统,空隙内修饰有PLL形成的蜘蛛网样结构;PLL与DBM能较好地复合;山羊PLL-DBM对骨髓干细胞富集效果明显优于空白DBM(P<0.01).PLL-DBM的成骨能力与自体髂骨相当.结论 山羊PLL-DBM对骨髓干细胞有较好的富集效果,成骨能力强,是一种理想的富集基质材料.     

用多聚赖氨酸制备血小板光镜及扫描电镜标本的方法

本文报告了用多聚赖氨酸阳离子膜同时制备血小板荧光显微镜和扫描电镜样品。方法简单,血小板不易丢失。     

免疫组化染色中防脱片的技术改进

应用抗原修复技术暴露被封闭的组织抗原决定簇，是免疫组织化学技术中的关键步骤。微波抗原修复技术是一种有效的抗原修复方法，目前该技术已广泛应用于病理切片的免疫组织化学染色操作中。它利用高温效应和微波的直接作用，打开蛋白间的交联键，暴露组织固定时被封闭的抗原决定簇。但是在微波加热处理组织切片的过程中，常发生脱片现象而导致实验失败。为了克服这个缺点，我们经反复实践摸索，使用简单的材料设计了一种可行的方法，较好地防止了脱片现象的发生。     

葡萄糖酸化多聚赖氨酸对A549细胞转基因效率的实验研究

目的:研究葡萄糖酸化多聚赖氨酸介导质粒pCMVβ-Gal对A549细胞的转染效率;观察氯喹对葡萄糖酸化多聚赖氨酸转基因效率的影响.方法:合成葡萄糖酸化多聚赖氨酸,将其独自和在不同浓度的氨喹作用下,分别介导质粒pCMVβ-Gal转染A549细胞,用酶联免疫法定量分析β-半乳糖苷酶的表达水平.结果:葡萄糖酸化多聚赖氨酸单独使用未能有效介导质粒pCMVβ-Gal转染A549细胞,但在氯喹作用下能显著提高其介导的转基因效率.结论:葡萄糖酸化多聚赖氨酸单独作用未能有效介导质粒pCMVβ-Gal对A549细胞的转染,当加入50μM、10(μM氯喹时,其转染效率则明显提高.但当其浓度为200 μM时,其转染效率反而降低.     

多聚赖氨酸对胎鼠颌下腺细胞培养的影响

目的：研究以多聚赖氨酸为生长底物对体外培养胎鼠颌下腺上皮细胞生长的影响。方法：以多聚赖氨酸包被培养板，对胎鼠颌下腺上皮细胞进行分离培养，应用相差显微镜及电镜观察细胞生长特性，免疫组织化学方法对细胞来源进行鉴定。结果：颌下腺细胞在包被有多聚赖氨酸的培养皿表面生长分化良好，呈单层生长；免疫组织化学检测单克隆角蛋白、上皮膜抗体呈阳性表达。结论：多聚赖氨酸在体外培养的过程中，可以促进细胞的黏附与生长。     

N-乙酰基-L-赖氨酸-甲酰胺对主链的理论构象分析

目的考虑到N-乙酰基-L-赖氨酸-甲酰胺的非键及静电相互作用、拓扑能、键角的弯曲和氢键,研究了它的空间结构即分析它的主链理论构象.方法当主链的最大构象可能性确定时,侧链的键角和两面角φ,ψ在每一点变化的情况下,用能量低化的方法得到了构象图,评价了主链和侧链的空间的相互制约性.当主链为低能式而侧链具有最大拓朴势时,φ,ψ,χ1-χ5角的所有组合作为初始近似的情况下,计算了分子的优势构象.结果N-乙酰基-L赖氨酸-甲酰胺的稳定构象与赖氨酸残基在蛋白质中的已知结构的几何构型相符合.     

N-乙酰基-L-赖氨酸-甲酰胺侧链构象的理论分析

目的分析N-乙酰基-L-赖氨酸-甲酰胺的非键和静电相互作用、拓朴能、键角的弯曲和氢键，研究它们的空间结构．方法当主链的最大构象可能性确定时，侧链的键角和两面角φ，ψ在每-点变化的情况下，用能量低化的方法得到了构象图，并评价了主链和侧链的空间的相互制约性．当主链为低能式而侧链具有最大拓朴势时，φ，ψ，x1-x5角的所有组合作为初始近似的情况下，计算了分子的优势构象．结果N-乙酰基-L-赖氨酸-甲酰胺的稳定构象与赖氨酸残基在蛋白质中的已知结构的几何构型相符合．结论赖氨酸残基在蛋白质中构象即为赖氨酸孤立单肽的优势构象．     

多聚赖氨酸复合体治疗口腔幽门螺杆菌感染的疗效观察

目的观察多聚赖氨酸和甘油单月桂酸酯GlycerolMonolaurate（GML,存在人体分泌的乳汁之中）的复合体（LGMI）治疗口腔幽门螺杆菌感染的疗效。方法经“胃幽门螺杆菌唾液测试板”（HPS）检测（1,2,3,4）,唾液幽门螺杆菌抗原两次阳性的口腔幽门螺杆菌感染志愿者150例。随机分为治疗组105例,使用以LGMI配置的漱口液和口腔喷雾剂喷射牙齿与1：3腔黏膜,每日2次,疗程2个月;对照组45例,不用任何治疗。金标比色卡：1—2：阴性。3-5：弱阳性。6—10：阳性。11—15：强阳性。结果受试者105人的HPS阳性程度从3到15,也就是说他们口腔感染螺旋杆菌的程度不一。强阳性41人占39％。阳性54人占51％。弱阳性10人占9．5％。治疗组于治疗结束后2周．经2次HPS检测考核疗效,86例转阴,治愈率为81．91％;对照组45例,观察10周后复查HPS,无1例转阴。结论以LGMI配置的漱口液和口腔喷雾剂,用于口腔幽门螺杆菌感染的治疗有显著疗效。     

SLE细胞形成试验改良基质片法与血块法的比较

检查红斑狼疮细胞的方法有多种,目前国内多采用血块法,本文采用改良基质片法检测34例,阳性率为73％。与血块法阳性率比较差异显著(P<0.05),该法采用末梢血标本,操作简单,阳性率高,值得推广。     

乳糖化修饰海藻酸钠-多聚赖氨酸纳米粒的制备及其肝靶向性研究

目的 探讨乳糖化修饰海藻酸钠-多聚赖氨酸纳米粒(Alg-Lac PLLNP)的制备及其作为肝脏靶向性药物载体的可行性.方法 合成乳糖化多聚赖氨酸(Lac-PLL),并以乳糖化多聚赖氨酸为原料改性修饰海藻酸钠纳米粒.通过半乳糖修饰纳米粒建立配体-受体生物特异性介导来实现肝主动靶向,并分别与非糖化组比较肝靶向效果,对纳米-DNA复合物鼠体内时间、空间分布进行研究.结果 电子显微镜的检测结果 ,Alg-LacPLL纳米粒粒径在250nm左右,近似球形,大小分布均匀;纳米粒未聚集.AlgNP纳米粒PEGFPC-1质粒掺入比为6.15-4.21/6.25=68.给药30 min鼠体生物分布显示,Alg-Lac PLLNP以肝为第一靶向器官.结论 海藻酸钠-多聚赖氨酸纳米粒的制备与栽体海藻酸钠的浓度及最佳凝聚剂氯化钙的浓度密切相关,且多聚赖氨酸和氯化钙加入海藻酸钠溶液的先后顺序对粒径的影响至关重要.该制备工艺简便,药物包封率高.Alg Lac PLL-DNA具有一定肝靶向性.     

SLE细胞形成试验改良基质片法与血块法的比较

查找红斑狼疮细胞的方法有多种，目前国内多采用血块法，本系用改良的基质片法检测34例，性率为23％，与血块法阳性相比差异显（P＜0．05）。该法采集末梢血、方法简单,阳性率高，值得推广。     

多聚左旋赖氨酸促进大鼠肢芽细胞软骨分化的研究

目的:探讨多聚左旋赖氨酸(PL)对大鼠肢芽细胞向软骨细胞分化的促进作用及其可能机制。方法:取大鼠肢芽细胞在含不同剂量PL的培养液中培养4 d,根据培养细胞所形成的软骨集落形成情况、与阿尔新蓝结合量和Ⅱ型胶原的表达情况,判断PL促进肢芽细胞向软骨细胞分化现象;根据不同时间添加PL来推断其发挥最大作用的时间;用免疫组化检测神经钙粘附蛋白的表达。结果:PL促进培养中大鼠肢芽细胞软骨集落的形成的最佳剂量可能为10μg/mL;PL发挥最大作用的时间为培养的第24 h内;免疫组化显示:5μg/mL组中Ⅱ型胶原和神经钙粘附蛋白的表达增强。结论:PL在一定浓度范围内以剂量依赖性方式促进大鼠肢芽细胞向软骨细胞分化且可能是通过增强神经钙粘附蛋白的表达来完成的。     

多聚赖氨酸与 EDTA 交联物对小鼠成纤维细胞的毒性研究

目的：观察多聚赖氨酸与乙二胺四乙酸（EDTA）的交联物（PLE）对体外培养的小鼠成纤维细胞L929的毒性程度。方法：小鼠成纤维细胞 L929分为正常组、对照组、多聚赖氨酸组、PLE 组和 EDTA 组,采用MTT 法比较相同浓度下,EDTA、多聚赖氨酸与 EDTA 交联物对小鼠成纤维细胞 L929相对增殖率的影响。结果：以正常组作为标准（100％）,多聚赖氨酸组、EDTA 组、PLE 组和对照组对小鼠成纤维细胞 L929的相对增殖度（RGR）分别为79．87％、69．35％、81．47％和20．12％,均较正常组下降,差异有统计学意义（P ＜0．05）;在质量浓度达为1000μmoL／L 时,EDTA 对小鼠成纤维细胞 L929的毒性为2级,PLE 和多聚赖氨酸对小鼠成纤维细胞L929的毒性为1级。结论：实验浓度的 PLE 和 EDTA 对小鼠成纤维细胞 L929毒性较低,具有一定的安全性。     

玻璃样变组织及血凝块组织防脱片方法介绍

<正>制作病理切片是病理技术工作者每天的日常工作,在制片过程中,技术员每天都会碰到数个玻璃样变组织及血凝块组织,这些组织在制片过程中都普遍存在完全或部分脱片,造成病理医生无法诊断,延误发报告时间,直接影响病人确诊及进一步治疗,而传统推荐的火棉胶包埋法比较难于掌握,相对     

厚树脂切片的防脱片方法比较

目的对厚树脂切片的3种防脱片方法进行比较,探讨哪种防脱片方法更科学实用。方法取甲基丙烯酸树脂包埋的脑组织,切片机40μm厚连续切片,将切片贴在经L-多聚赖氨酸、明胶硫酸铬钾、APES处理过的载玻片上,经过甲苯胺蓝染色后,对防脱片效果进行比较。结果经明胶硫酸铬钾、L-多聚赖氨酸和APES处理的载玻片脱片率分别为3%、10%和13%,明胶硫酸铬钾组防脱片效果明显优于L-多聚赖氨酸组和APES组(u=2.008、2.010,P<0.01)。结论经明胶硫酸铬钾处理防脱片效果好,且更经济,非常适用于厚树脂切片的实验。     

多聚赖氨酸表面改性后同种异体骨的骨传导能力研究

目的:探讨多聚赖氨酸表面改性兔同种异体骨后骨传导能力的变化。方法:采用冻干法,将多聚赖氨酸覆盖在实验组兔同种异体骨的微孔表面,对其进行表面改性,并将未经表面改性的同种异体骨设为对照组。兔骨髓基质干细胞（BMSCs）种植于2组的微孔表面,进行培养,并向成骨方向诱导。采用扫描电镜观察、MTT法检测BMSCs在同种异体骨微孔表面黏附、增殖情况,检测2组细胞表达的碱性磷酸酶的活性;将2组复合自体BMSCs的同种异体骨回植入兔双侧桡骨缺损处,1、2、3和4个月后分别对标本进行螺旋CT三维重建,观察新骨生成情况。结果:实验组中BMSCs在同种异体骨微孔表面黏附、增殖以及表达碱性磷酸酶的情况明显优于对照组（P<0.01）,实验组兔桡骨缺损处的修复情况优于对照组（P<0.01）。结论:同种异体骨经多聚赖氨酸表面改性后,其在体内和体外的骨传导能力得到了显著的增强。     

腹腔途径时脂质体和糖化多聚赖氨酸对外源基因肝脏靶向导入性能的比较

目的　比较脂质体和糖化多聚赖氨酸经腹腔途径时对目的基因肝脏靶向定位效果的影响。方法　将真核细胞表达质粒分别与脂质体和糖化多聚赖氨酸偶联 ,经腹腔注射导入大鼠体内 ,通过原位杂交和免疫组化的方法观察目的基因在肝脏和其他脏器的分布表达。结果　经脂质体或糖化多聚赖氨酸包埋的质粒DNA导入体内2 4h后均见明显表达 ,1周后逐渐下降 ,3周时仍有表达 ;均以肝脏为主要分布器官 ,但用糖化多聚赖氨酸包埋的质粒在肝脏中的分布表达高于使用脂质体的包埋 ,在其他脏器中的分布表达低于使用脂质体的包埋。结论　腹腔途径时糖化多聚赖氨酸对DNA的肝脏靶向定位效果优于脂质体。