小鼠十二指肠嗜银细胞发育分化的组织学观察

用Ｇｒｉｍｅｌｉｕｓ嗜银法研究了小鼠胚胎１４天至成年十二指肠嗜银细胞的发育分化过程。提示肠嗜银细胞可能有外分泌功能。     

免疫细胞ACTH受体测定方法建立及大鼠胸腺ACTH受体的发现

本文介绍了免疫细胞ACTH受体(ACTHR)测定法并首次报道了大鼠胸腺细胞具有高亲和力和低亲和力两类ACTHR。方法学研究表明,胸腺细胞数量以1～2×10~6个/管、反应时间20分钟较佳;竞争结合实验结果表明,非标记ACTH的IC_(50)值为800nM;当加入的~(125)I-ACTH为2.5 nM时,胸腺细胞ACTHR已基本饱和,根据饱和曲线进行Scatchard作图分析表明,大鼠胸腺细胞具有两类亲和力不同的ACTHR。应激可致胸腺细胞ACTHR急骤减少。     

环磷酰胺诱发大鼠胸腺细胞凋亡的研究

目的：研究环磷酰胺的免疫抑制作用机制。方法：以大鼠胸腺为对象,采用细胞凋亡的原位特异性染色及ＤＮＡ凝胶电泳的方法,观察没剂量、不财时间环磷酰胺处理后胸腺细胞的凋亡现象。结果：剂量为２０和７０ｍｋ／ｋｇ的环磷酰胺可引起广泛的胸腺细胞凋亡。该作用最早发生在环磷酰胺处理后的８Ｈ,１２～２４最明显,４８Ｈ消失。结论：环磷酰胺的免疫作用可能是通过诱导免疫细胞凋亡而产生的。     

不同嗜性HIV复制与树突状细胞成熟状态关系的研究

目的 探讨不同嗜性HIV-1在人树突状细胞（dendriticcell，DC）内复制与DC成熟状态的关系。方法 采用MACS磁珠分选法纯化出CD14^＋细胞，加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4体外培养7d，得到未成熟DC；再加入肿瘤坏死因子-α继续培养3d，得到成熟DC。感染不同嗜性HIV-1病毒株后，检测培养上清p24含量，观察HIV-1复制能力。结果 受T嗜性HIV-1攻击后，未成熟DC及成熟DC培养上清p24抗原含量随培养时间延长无明显增加。受M嗜性HIV-1攻击后，未成熟DC培养上清p24抗原含量随培养时间延长明显增加，成熟DC培养上清p24抗原含量不随培养时间延长明显增加。结论 T嗜性HIV-1不能在未成熟DC和成熟DC内复制，M嗜性HIV-1能在未成熟DC内复制但不能在成熟DC内复制，提示HIV-1能否在DC内复制与HIV-1嗜性和DC成熟状态有关。     

人胎胸腺细胞的荧光染色观察

运用7690—Xu荧光染色法观察不同胎龄胎儿胸腺细胞的荧光映象,发现:不同胎龄人胎胸腺细胞悬液呈现相似形态和相似分布特征的8种异质性荧光图像的细胞.E花环实验和密度梯度离心分离结合7690—Xu荧光染色观察显示:墨黑核细胞和部分深蓝核细胞为分化早期细胞,淡桔黄核黄质细胞为分化晚期细胞,灰蓝核细胞和灰黄核细胞为处于分化中期的细胞.     

胎儿胸腺发育过程中T细胞抗原受体的表达

目的:检测不同胎龄胎儿胸腺组织内T细胞抗原受体(TCR)的表达及发育规律.方法:18～40周胎儿胸腺组织,采用免疫组织化学SP法检测TCRαβ和TCRγδ的表达. 结果:胚胎21周,胸腺组织开始出现TCRαβ和TCRγδ阳性细胞.TCRαβ阳性细胞主要分布被膜下及小叶间隔中,围绕血管成群分布.TCRγδ阳性细胞的分布与TCRαβ阳性细胞相似, 但细胞数量较TCRαβ阳性细胞少.38周以后胎儿胸腺内TCR阳性细胞主要分布在皮髓质交界处,被膜下及小叶间隔中的TCR阳性细胞较早期少.结论:TCR阳性细胞在胚胎早期开始出现,其分布部位提示局部微环境有利于这些细胞的分化发育.     

大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的鉴定

根据小鼠胸腺冰冻切片免疫组织化学染色，将已获得的３０种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体分为８组：１．髓质胸腺基质细胞（ＴＳＣ）阳性，皮质ＴＳＣ阴性；２．髓质部分ＴＳＣ阳性，皮质ＴＳＣ阴性；３．皮、髓交界部分ＴＳＣ阳性；４．皮、髓质部分ＴＳＣ阳性；５．髓质ＴＳＣ阳性，皮质部分ＴＳＣ阳性；６．皮、髓质大部分ＴＳＣ阳性；７．被膜和血管内皮细胞呈阳性；８．髓质ＴＳＣ和皮质胸腺细胞为阳性。用这８组单抗对本室     

性激素对大鼠胸腺中肥大细胞数量及分布的影响

用长时间甲苯胺蓝等组织化学方法，研究了性激系对大鼠胸腺中肥大细胞数量及分布的影响。结果表明：接受雌二醇或睾酮处理的大鼠胸腺中肥大细胞数量显著减少（Ｐ〈０．０１）；阉割则能使胸腺中肥大细胞显著增加（Ｐ〈０．０１）。提示减少胸腺中肥大细胞数可能是性激素影响机体免疫功能的途径之一。文内还讨论了性激素对胸腺的影响的机制等问题。     

胸腺及其投射神经元一氧化氮的分布

本实验用 NADPH-d组织化学方法及 n NOS免疫细胞化学方法 ,对大鼠胸腺内一氧化氮 (NO)阳性细胞的分布进行了研究。采用 CB-HRP逆行追踪结合 n NOS免疫细胞化学双重反应技术 ,观察了大鼠胸腺投射神经元 n NOS的分布。结果显示 :(1)在脑干的疑核、面后核内有 CB-HRP与 n NOS双重阳性细胞 ;(2 )在胸腺内有多种 NADPH-d和 n NOS阳性细胞 ,按其形态可分为 :髓质上皮样细胞、胸腺树突样细胞、神经元样细胞、胸腺细胞样细胞及胸腺小体 ;(3 )在胸腺的被膜下、小梁内、皮髓质交界处、小血管的周围有丰富的 n NOS阳性纤维。提示 ,胸腺内 NO的来源不同 ,其在调节胸腺的各种活动中可能发挥的作用也不同     

实验性糖尿病大鼠胸腺的形态学研究

用四氧嘧啶诱导复制的大鼠实验性糖尿病动物模型，在光，电镜下，观察了糖尿病大鼠胸腺的形态学变化。结果表明：糖尿病大鼠胸皮质明显就薄，皮质淋巴细胞大量减少，细胞分裂盯计数显著降低。细胞退化。明上皮细胞呈明显的退行性变，其胞质内张力细丝束和溶酶体样致密颗粒明显增多，出现空泡化，自噬体及较多的含颗粒状物质的囊泡。     

人胸腺上皮细胞类型及分布的超微结构研究

对１０例成人胸腺微环境作超微结构观察。结果显示，根据胸腺上皮细胞超微结构形态和分布特征，可将其分为四种类型。Ｉ型为包膜下－血管旁上皮细胞，分布于胸腺包膜下及皮髓交界区血管周围。Ⅱ型上皮主要要布于外皮质和整个胸腺实质，部分胞浆含分泌颗粒。Ⅲ型上皮分布于髓质，胞浆有形态多样的囊泡。Ⅳ型仅存在于髓质，数量极少。提示胸腺上皮细胞是异质性的，并且在胸腺内形成不同的局部微环境。     

胶体金法研究胎儿胸腺上皮网状细胞的细胞学观察

为了探讨胎儿胸腺上皮网状细胞发育过程的结构特点,用胶体金免疫组化法及电镜观察60例胎龄12～42周胸腺。结果表明:不同类型的上皮网状细胞中间丝有多寡之别并含有不同类型角蛋白;中间丝多者细胞器相对减少。角蛋白阳性反应细胞体积随胎龄增长而增大,但阳性细胞出现率与胎龄关系不大。角蛋白阴性反应细胞电镜下可见丰富的内质网、线粒体及核糖体,提示该细胞主要有分泌胸腺激素功能。     

嗅鞘细胞联合神经干细胞脑内移植改善Parkinson病大鼠行为的观察

为了观察嗅鞘细胞(OECs)联合神经干细胞(NSCs)脑内移植对Parkinson病(PD)的治疗作用,首先将6-OHDA注射至左侧黑质致密部和腹侧被盖区制备PD大鼠。将成功制备的PD大鼠随机分为5组,即0.9%生理盐水对照组、单纯移植NSCs或OECs组、OECs+NSCs共移植组和PD模型对照组。将培养并传至第3代的NSCs、OECs和OECs+NSCs分别移植到PD大鼠的纹状体内,于移植后7、14、30、60d检测PD大鼠旋转行为变化后处死,取脑做冰冻切片,行BrdU、酪氨酸羟化酶(TH)、p75免疫荧光和TH免疫组织化学检测。移植后21d以内,各组大鼠的旋转行为无明显变化;30d和60d时,单纯移植NSCs或OECs组和OECs+NSCs共移植组与生理盐水和模型对照组相比,旋转行为有较明显的改善(P<0.05),其中OECs+NSCs共移植组的旋转行为改善更为显著。在移植后30d和60d,单纯移植NSCs或OECs组在移植区可见少数TH阳性神经元,而OECs+NSCs共移植组的TH阳性神经元明显多于单纯移植NSCs或OECs组(P<0.05)。上述结果表明:OECs能促进胚鼠中脑来源的NSCs向TH阳性神经元分化;单纯移植NSCs或OECs和OECs+NSCs共移植,均能不同程度地改善PD大鼠的旋转行为,但联合移植优于单纯移植。     

人胎儿胸腺精氨酸-加压素、血管活性肠肽和5-羟色胺免疫反应细胞

目的：通过观察神经肽及生物胺在胸腺中的分布，探讨胸腺神经内分泌的性质和神经肽及生物胺在胸腺中的生物学意义。方法：应用胎儿胸腺冰冻切片，采用ＰＡＰ免疫组织化学法，行ＡＶＰ、ＶＩＰ和５－ＨＴ免疫组织化学染色。结果：在胸腺的实质和小叶间隔中均可见到ＡＶＰ、ＶＩＰ和５－ＨＴ免疫反应细胞。ＡＶＰ免疫反应细胞主要分布于被膜下皮质内，ＶＩＰ和５－ＨＴ免疫反应细胞主要分布于被膜下皮质区和皮髓质交界区。５－ＨＴ免疫反应细胞的数量为最多。结论：胎儿胸腺中存在着弥散神经内分泌细胞。它们可以产生ＡＶＰ、ＶＩＰ和５－ＨＴ，通过内分泌和旁分泌等方式，调节胸腺的生理功能。     

P物质,血管活性肠肽和神经肽Y在大鼠舌肥大细胞内的定位研究

采用甲苯胺蓝染色和免疫组织化学ＡＢＣ方法，对大鼠舌组织中肥大细胞的分布，形态特点以及细胞内的Ｐ物质、血管活性肠肽和神经肽Ｙ的定位进行了研究。结果表明，大鼠舌组织内肥大细胞主要分布于固有层和肌层，多呈圆形，椭圆形或长梭形。经与甲苯胺蓝染色的相邻切片比较，几乎所有肥大细胞分别呈Ｐ物质、血管活性肠肽和神经肽Ｙ免疫反应阳性。提示：舌组织肥大细胞内Ｐ物质，血管活性肠肽和神经肽Ｙ等生物活性肽可能与其局部血液供     

大鼠脑组织细胞培养的形态学观察

为观察原代培养 SD大鼠大脑组织 ,包括神经干细胞在内的各种细胞的形态 ,取新生大鼠 ,无菌操作下取出整个大脑 ,制备成单细胞悬液 ,接种培养 ,免疫细胞化学鉴定各类细胞的同时用光镜和扫描电镜对不同阶段和种类的细胞进行形态学观察。结果显示 :在体外培养出神经元、胶质细胞和神经干细胞 ;神经细胞在体外的发育时程跟体内基本一致 ,神经干细胞在体外 2 0 d左右分化成熟 ,获取了神经细胞和干细胞体外培养的光镜和扫描电镜形态。结果提示 ,成体神经细胞体外分离、培养的条件关键点在于尽可能贴近自然 ,由此可保证细胞培养的质量 ,获得可靠的神经干细胞、神经元和胶质细胞。为各类神经细胞提供了形态学资料。