知母多糖降血糖活性研究

治疗糖尿病中药“玉液汤”中，知母是主药。本文研究了百合科植物知母多糖的降血糖活性。知母根茎经热水提取、乙醇沉淀、稀碱脱蛋白，得到的多糖给小鼠准胃，结果表明知母多糖可使小鼠的血糖及肝糖元含量明显降低，而血脂含量几乎没有变化。若为腹腔给药，该多糖也有降血糖活性。注胃四氧吃陡高血糖小鼠，其血糖含量也有明显下降。     

五灵脂乙酸乙酯提取物抗炎作用研究

五灵脂乙酸乙酯提取物（ＷＬＺ）腹腔注射４００ｍｇ／ｋｇ对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀及对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀有显著抑制作用；灌胃６００ｍｇ／ｋｇ能明显抑制由醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管渗出；腹腔注射８００ｍｇ／ｋｇ对小鼠棉球肉芽组织增生有明显抑制作用．ＷＬＺ能显著降低炎症组织的前列腺素Ｅ（ＰＧＥ）含量，但对小鼠血清皮质酮水平无显著性影响，表明ＷＬＺ的抗炎作用与其抑制ＰＧＥ合成或释放有关．     

松补力口服液总多酚及总多糖的测定

目的：建立松补力口服液总多酚和总多糖测定方法,比较10批松补力口服液中总多酚和总多糖的含量。方法采用可见分光光度法测定松补力口服液中总多酚和总多糖的含量,总多酚检测波长为760 nm,总多糖检测波长为610 nm。结果以没食子酸为松补力口服液中总多酚的对照品,在浓度0．913～9．130μg/mL （r＝0．9991）范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98．2％,RSD为1．64％。以葡萄糖分别作为总多糖的对照品,在浓度0．015～0．105 mg/mL （r＝0．9994）范围内呈良好的线性关系,平均回收率为96．62％,RSD为1．0％。10批松补力口服液总多酚的含量为0．617 mg/mL,总多糖的平均含量为1．216 mg/mL。结论该方法简便、快速、重现性好,可作为松补力口服液总多酚和总多糖的检测方法。本研究结果为松补力口服液质量评价提供了参考依据。     

不同方法提取的知母总皂苷元气相-质谱分析

知母为百合科植物知母Anemarrhena asphode-loides Bge.的干燥根茎,知母总皂苷元由知母药材经水解提取的总皂苷元精制而成,具有清热泻火,生津润燥,止渴除烦作用[1,2],知母总皂苷元能明显降低衰老小鼠脑β受体-cAMP系统的反应性,重现知母的下调作用[3],并且能提高衰老小鼠脑内受体密度[4],知母总皂苷元是深圳太太药业股份有限公司开发研究的中药二类新药,主治现代医学中早、中期老年性痴呆症及脑功能减退(学习、记忆减退,或某些性格改变)等见有以上症侯者.知母总皂苷元传统的提取法为:先用酸水解,再用汽油提取精制.     

知母总皂苷对高脂血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性的影响

目的探讨知母总皂苷的调脂作用机制。方法将SD大白鼠随机分成4组,正常对照组、模型组、辛伐他汀组和知母总皂苷组,每组20只。以免疫组织化学法对其肝脏低密度脂蛋白受体活性(LDLR)水平进行测定。结果知母总皂苷组大白鼠肝脏切片棕色颗粒的灰度值大于模型组,差异有统计学意义(P<0.001),而与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论知母总皂苷具有明显的增强高脂血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体活性的作用,从而加快血中低密度脂蛋白的清除,起到调控血脂水平的作用。     

大孔树脂吸附知母总皂苷热力学研究

目的:考察SP825、XAD-16、LX-18、XDA-5四种大孔吸附树脂在15℃、25℃和35℃吸附知母提取液中总皂苷的热力学现象。方法:在3种不同温度和一定浓度范围内,通过树脂对知母提取液的静态吸附实验,以紫外分光光度法测定皂苷的含量并绘制吸附平衡线。吸附平衡数据用Langmuir方程和Freundich方程进行拟合,得到SP825、XAD-16、LX-18和XDA-5等大孔吸附树脂对知母总皂苷的吸附焓△H、自由能△G、吸附熵△S。结果:Langmuir方程可以描述4种树脂对知母总皂苷的吸附(R2大于0.98),平衡吸附量qm和KL随着温度的升高而减小,吸附吸附焓△H为负值,自由能△G为正值,吸附熵△S为负。结论:4种树脂吸附总皂苷过程为放热过程,低温有利于吸附,吸附为单分子层吸附,范德华力克服放热过程推动吸附主动进行。XDA-5饱和吸附量最大,吸附效果最好。     

红原草炭腐植酸钠抗炎作用初步探讨

红原草炭腐植酸钠腹腔注射约1/5 LD_(50)剂量,对大鼠蛋清性足肿有显著抗炎作用,未见对血浆前列腺素含量的影响,但能明显降低大鼠肾上腺维生素C含量及增加大鼠、兔血浆皮质酮含量。初步表明,腐植酸钠的抗炎作用可能与刺激肾上腺皮质释放皮质激素有关。     

百合知母汤水煎液总黄酮和总皂苷的含量测定

目的;建立百合知母汤水煎液中总黄酮和总皂苷含量测定方法。方法:;采用紫外分光光度法对知母总黄酮和总皂苷进行测定。结果:;芒果苷线性关系为y=0.070 2x0.118 9,加样回收率为98.55%,RSD=1.65%(n=5);菝葜皂苷元线性关系为y=0.023 6x+0.017,加样回收率为97.11%,RSD=2.82%(n=5)。结论:;该方法简便、快速、准确,适合百合知母汤中总黄酮和总皂苷含量的测定,可以作为该方的质量控制方法。      

Inhibitory effects of saponins from Anemarrhena asphodeloides Bunge on the growth of vascular smooth muscle cells

Objective To investigate the effects of saponins from Anemarrhena asphodeloides Bunge （SAaB） （Botanical Name： Anemarrhena Asphodeloidis Rhizoma） on the growth of vascular smooth muscle cells （VSMCs）. Methods Cell proliferation was measured by a newly developed cell proliferation reagent, WST-1. Cell apoptosis was assayed by flow cytometry through detecting annexin V. Nitric oxide production was evaluated using confocal laser scanning microscopy with diaminofluorescein diacetate （DAF-2, DA）. Cell aldose reductase （AR） activity, as well as the effect of Epalrestat and interleukin-1β were also explored. Results WST assay showed that cell proliferation induced by serum was significantly inhibited by SAaB （P〈0.01）. Flow cytometry analysis revealed that SAaB could enhance apoptotic rate of VSMCs （P〈0.01）. Nitric oxide production was significantly enhanced after administration of SAaB and interleukin-Iβ Moreover, AR activity of VSMCs was also remarkably inhibited by both SAaB and Epalrestat （P〈 0.01）. Conclusion SAaB can inhibit proliferation and enhance apoptosis of VSMCs. It may protect vascular cells by inhibiting VSMC proliferation and augmenting apoptotic rate of VSMCs via NO-dependent pathway.     

知母微粉的溶出及活性研究

目的观察知母微粉体外成分溶出以及体内活性,对微细化工艺在中药中的应用进行评价。方法采用HPLC法定量芒果苷,比较知母微粉和知母粉中芒果苷溶出速度及不同时间点溶出百分率;采用小鼠悬尾和强迫游泳试验,测定最大耐受量,观察知母微粉与知母提取物体内活性和安全性。结果体外溶出时,知母微粉中芒果苷的溶出速度较知母粉明显加快,在不同时间点芒果苷的溶出百分率亦有所提高;以相同治疗剂量给药时,知母微粉与知母提取物表现出相当的作用,知母微粉最大给药剂量为20 g/kg。结论知母制成微粉后能在一定程度上改善体外成分的溶出和体内活性。     

知母须根化学成分研究

目的 对知母（Anemarrhena asphodeloide Bunge.）的干燥须根进行化学成分研究。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等手段进行分离纯化,运用波谱学方法鉴定化合物的结构。结果 从知母须根中分离得到15个化合物,分别鉴定为胡萝卜苷(1)、菝葜皂苷元(2)、芒果苷(3)、7-hydroxy-3-(4-methoxybenzyl)-chroman(4)、3′-hydroxy-4′-methoxy-4-dehydroxynyasol(5)、5, 7-dihydroxy-3-(4-methoxybenzyl)-chroman-4-one(6)、2,4′-dihydroxy-4-methoxy benzophenone(7)、1,3-Bis(4-hydroxyphenyl)pent-4-en-1-one(8)、(+)-syringaresinol(9)、ent-16, 17-dihydroxy-kauran-19-oic acid (10)、(+)-pinoresinol (11)、对羟基苯甲酸(12)、新芒果苷(13)、丁香酸 (14)、4′,6-dihydroxy-4-methoxy- benzophenone-2-O-(2″), 3-C-(1″)-1-desoxy-α-L-fructofuranoside (15)。结论 化合物5～11、14、15为首次从知母须根中分离得到。     

双参平肺方中药味配伍对知母芒果苷提取率的影响与成分作用探讨

目的 探究双参平肺方中不同配伍对知母芒果苷提取率的影响,并以成分配伍研究影响复方提取率的作用机理。方法 根据处方中药含有成分的类别进行处方拆方、配伍,分为知母单煎组、处方合煎组、知母-皂苷类中药复方组、知母-酚酸类中药复方组、知母-碱基类中药复方组。以知母中芒果苷提取率为指标,分析配伍对芒果苷提取率的影响;根据拆方结果,对显著影响芒果苷提取率的桑白皮,以其所含的生物碱成分1-脱氧野尻霉素（1-Deoxynojirimycin,DNJ）、氨基酸等代表性成分进行不同配伍,考察桑白皮中成分对知母中芒果苷的影响,探讨芒果苷提取率的影响机理。结果 知母单煎、处方合煎、知母-皂苷类中药复方、知母-酚酸类中药复方、知母-碱基类中药复方配伍的提取率分别为97.33%、47.03%、94.08%、57.53%、34.31%;进一步拆分表明,处方中桑白皮与知母配伍时对芒果苷的提取率影响最为明显,其中桑白皮生物碱部位、DNJ、甘氨酸、β-丙氨酸溶液分别与知母合煎,芒果苷的提取率分别为16.64%、28.13%、40.75%、48.56%。结论 双参平肺方煎煮提取时主要是桑白皮、地骨皮影响了芒果苷的提取率,推测桑白皮中生物碱及氨基酸与芒果苷形成缔合物,团聚分子量增大,影响了芒果苷煎出时的成分溶出。      

不同产地知母须根中3个𠮿酮类成分含量测定

目的 测定不同产地知母须根中新芒果苷、芒果苷和异芒果苷的含量。方法 采用高效液相二极管陈列检测法,Shim-pack色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);乙腈-0.4%冰醋酸水溶液梯度洗脱,流速1. 0 mL/min;柱温25 ℃;检测波长为258 nm。结果 所收集的知母须根样品中新芒果苷的含量为1.2％～1.9％,芒果苷的含量为1.0％～1.6％,异芒果苷的含量为0.4％～0.6％。结论 知母须根中（口山）酮成分含量较高,在知母须根的综合开发利用中可考虑此类成分。     

RP—HPLC—ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量

目的 阐明ELSD对于检测菝葜皂苷元等不含发色团的化合物是一种优越的检测器,为知母药材及含知母制剂提供了一种可靠的质检手段。方法 采用RP-HPLC-ELSD法测定知母药材及含知母制剂中菝葜皂苷元的含量。结果 分离完全的色谱峰,有良好的线性关系,r=0.9990,对药材及制剂测定的回收率分别为100.5%、91.38%。结论 该方法先进、可靠、简便,可广泛用于知母药材及含知母制剂的质量监控。     

HPLC-CAD同时测定知母根茎与须根中5种呋甾皂苷的含量

目的 建立高效液相色谱-电雾式检测器(HPLC-CAD)同时测定知母根茎与须根中5种呋甾皂苷含量的方法.方法 采用TechMate C18-ST-Ⅱ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(22:78,V/V);流速1.0 ml/min;柱温30℃;CAD检测器参数:采集频率10 Hz;雾化温度55℃;filter:5 s.结果 知母中5种主要呋甾皂苷:知母皂苷N、知母皂苷L、知母皂苷BⅡ、25R-知母皂苷BⅡ和25S-officinalisnin-Ⅰ分别在一定范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9992~0.9998,检测限分别为0.28、0.92、0.92、0.92和0.92 ng,定量限分别为0.92、2.77、2.77、2.77和2.76 ng,精密度、重复性、48 h稳定性的RSD均<3.0%,平均加样回收率分别为98.17%、101.37%、98.53%、97.63%和98.17%.结论 本研究建立的HPLC-CAD法重复性好,结果准确可靠,可作为中药知母多成分含量测定的方法.     

知母皂苷B对体外培养的大鼠皮层神经元树突发育的影响

目的探讨知母皂苷B（Saponins from Anemarrhena asphodeloides Bge,SAaB）对体外培养大鼠乳鼠大脑皮层神经元树突发育的促进作用。方法选用出生0～24h的Sprague—Dawley（SD）大鼠乳鼠,取皮层神经元进行体外细胞培养,培养4d的神经元用于实验。应用倒置相差显微镜测量培养神经元树突分支总长度（TDBL）、一级树突数目（PDN）、最大分支级数（MBO）和神经元胞体面积。Western印迹法观察神经元突触素蛋白表达的改变。结果形态学观察结果显示SAaB（10、30、100μmol／L）可明显促进树突发育,表现为树突分支总长度增加、一级树突数目增多、最大分支级数增大及胞体面积增大。并呈明显浓度依赖。Western印迹结果显示SAaB（10、30、100μmol／L）也可明显增加突触素蛋白表达水平,并呈明显浓度依赖。结论SAaB对体外培养皮层神经元树突的发育有促进作用。     

大鼠口服知母皂苷后入血成分研究

目的 分析大鼠口服知母总皂后吸收入血的情况,为进一步研究知母总皂苷的药理作用提供化学物质依据。方法给大鼠灌胃知母皂苷2．5g／kg,于不同时间采集血清样品,用电喷雾质谱（ESI—MS）检测知母皂苷吸收入血成分。结果通过比较给药前后的TOF总离子流图,对给药后血浆中特征峰的保留时间及相关化合物离子峰进行了比较分析,在血浆中发现了两个原型皂苷。结论大鼠口服知母总皂苷后,知母皂苷B-Ⅱ和知母皂苷B-Ⅲ被吸收入血。