老年性学习记忆减退与大鼠脑发育过程中周期素依赖性蛋白激酶5的表达

背景：周期素依赖性蛋白激酶5是周期素依赖性蛋白激酶家族的成员之一，脑发育过程中周期素依赖性蛋白激酶5mRNA及其蛋白在脑内的表达及分布状况与神经退行性变思维认知学的关系一直被研究者关注。目的：探讨大脑发育过程中的周期素依赖性蛋白激酶5对神经系统的发生和退行性变的影响。设计：单因素方差分析实验。单位：解放军第一军医大学组织学与胚胎学教研室和神经生物学教研室。材料：实验在解放军第三军医大学组织学与胚胎学实验室完成。Wistar大鼠胚胎期（E8-E21）、新生期（P0-P15）、幼年期（P16-2个月）、成年期（〉2个月）及老年期（〉8个月后）5个阶段25只大鼠，每组5只。方法：采用胚胎期至老年期大鼠脑片行原位杂交组织化学和免疫细胞化学染色。主要观察指标：不同脑区内周期素依赖性蛋白激酶5mRNA及其蛋白的阳性细胞分布及表达状况。结果：25只大鼠全部进入结果分析。①周期素依赖性蛋白激酶5mRNA在大鼠E14-P350整个发育过程中均有表达，成年后趋于稳定；周期素依赖性蛋白激酶5mRNA主要定位于神经元，阳性区域主要分布于大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、小脑及部分神经核团。②出生后周期素依赖性蛋白激酶5表达较强，胚胎及老年鼠表达较弱；阳性区域集中在室周区、海马、小脑及部分神经核团内；老年鼠仅在海马、小脑蒲肯野细胞层内表达。结论：脑内周期素依赖性蛋白激酶5的作用贯穿了整个神经发育的各个时期，在新生期、幼年期有较为显著的表达，成年后表达下降，尤以老年期显著。老年大鼠海马内周期素依赖性蛋白激酶5的表达下调可能与老年性学习记忆减退的发生密切相关。     

原代培养海马神经元周期素依赖性蛋白激酶5及其活性在低氧环境中的变化

目的:观察低氧对原代培养海马神经元存活力、周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达及其活性变化的影响。方法:实验于2005-01/12在解放军第二军医大学实验动物中心完成。取孕14～18dSD胎鼠的海马细胞进行原代培养,培养8～10d的细胞用于实验。取培养稳定阶段已分化成熟的大鼠海马神经元至低氧环境,继续培养12,24,36h,微孔酶标仪590nm处暗室内测定神经元存活力,免疫印迹测定周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达及其活性改变,每个时间点重复3次。结果:与常氧组比较,低氧组从继续培养12h起神经元存活力明显下降[(1.01±0.14),(0.77±0.15);(0.98±0.12),(0.68±0.11);(0.95±0.11),(0.61±0.08);P<0.01],周期素依赖性蛋白激酶5蛋白表达水平下降[(1.67±0.19),(0.82±0.08);(1.54±0.13),(0.75±0.06);(1.49±0.13),(0.70±0.11);P<0.01],活性明显增加[(1.76,3.56);(1.84,4.29);(1.95,6.04);P<0.01]。结论:低氧环境可导致神经元损伤,与周期素依赖性蛋白激酶5过度激活有关。     

CBS mRNA在自发性高血压大鼠脑组织中的表达和分布

目的探讨自发性高血压大鼠（SHR）脑组织胱硫醚β合酶（CBS）的表达及分布情况。方法选择SD（Sprague Dawley）大鼠和SHR各8只,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和real time-PCR技术检测其大脑皮层、小脑、延髓、下丘脑、海马组织CBS mRNA的表达。结果 RT-PCR检测,SHR下丘脑、海马、小脑、大脑皮层及延髓组织的CBS mRNA表达水平分别为0.93±0.01、0.09±0.03、0.36±0.06、0.07±0.01及0.39±0.02,显著低于SD大鼠（P〈0.05）。real-time PCR检测,SD大鼠脑组织CBS mRNA的表达水平从高到低依次为大脑皮层、海马、延髓、下丘脑、小脑。SHR脑组织CBS mRNA的表达从高到低依次为下丘脑、延髓、大脑皮层、海马及小脑。SHR脑组织CBS mRNA的表达水平低于SD大鼠（P〈0.05）。结论 SHR脑组织中CBS mRNA的表达下调,可能通过中枢机制参与高血压的发病。     

胚胎及出生后大鼠视网膜细胞促红细胞生成素的表达

背景:促红细胞生成素是低氧诱导因子1 的下游靶基因,受低氧诱导因子1 的调节.目的:观察大鼠视网膜胚胎期及出生后早期发育过程中促红细胞生成素的时空表达与视网膜发育的关系.方法:取胚胎12,16,20d 鼠胚及成年Wistar 大鼠各5 只,处死后摘除眼球,分离视网膜,用免疫组织化学方法、半定量反转录聚合酶联反应检测视网膜促红细胞生成素蛋白及促红细胞生成素 mRNA 的表达.结果与结论:胚胎期大鼠视网膜神经上皮及色素上皮细胞的胞浆及胞核内均有促红细胞生成素阳性表达,表达趋势随胎龄增长而逐渐减弱;成年鼠视网膜促红细胞生成素阳性表达最弱.说明大鼠视网膜胚胎发育过程中促红细胞生成素的表达存在时空上的变化,这种变化可能与大鼠视网膜胚胎期的发育密切相关.     

细胞周期素依赖性激酶-5研究进展

细胞周期素依赖性激酶 5属于小丝氨酸 /苏氨酸周期素依赖性激酶家族成员 ,虽与其他成员序列具有同源性 ,但功能却完全不一样 ,即与细胞周期关系不大 ,却在中枢神经系统的发育和神经元正常功能的维持中发挥重要作用 ,并与一些退行性疾病及药物成瘾有密切联系 ,是神经系统中重要的蛋白激酶之一 ,可能成为防治中枢神经系统疾病的靶分子。现就细胞周期素依赖性激酶 5的一些最新研究进展进行综述     

慢性脑低灌注对大鼠学习记忆及脑海马组织中周期素依赖性激酶5表达的影响

目的:慢性脑低灌注大鼠的学习记忆能力下降,观察此过程中脑海马组织中周期素依赖性激酶5mRNA及其蛋白表达的动态变化。方法:实验于2004-03/12在解放军第二军医大学实验动物中心进行。取雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组18只,假手术组18只,慢性脑低灌注组24只。空白对照不进行干预,慢性脑低灌注组采用双侧颈总动脉结扎建立大鼠慢性脑低灌注模型,假手术组仅行颈前切开,不结扎颈总动脉。分别于术前、术后2,4,8周应用Y迷宫评价错误次数和全天总反应时间,苏木精-伊红染色观察脑海马组织病理变化,脱氧尿嘧啶缺口末端标记染色检测凋亡细胞数目,免疫组化法观察周期素依赖性激酶5蛋白含量的变化,反转录-聚合酶链反应法检测周期素依赖性激酶5mRNA的表达水平。结果:慢性脑低灌注组大鼠死亡3只,57只大鼠进入结果分析。①Y迷宫测试结果:与空白对照组和假手术组相比较,从术后2周开始,慢性脑低灌注组大鼠的迷宫作业错误反应次数增多犤(1.00±0.59),(1.06±0.54),(2.05±0.72)次;F=4.89,P<0.05犦,全天总反应时间延长犤(88.28±17.41),(90.38±15.57),(142.51±21.72)s,F=4.56,P<0.05犦,且随术后时间的延长错误次数和总反应时间增加(P<0.01)。②周期素依赖性激酶5表达:与正常大鼠和假手术组大鼠比较,慢性脑低灌注组大鼠2周时周期素依赖性激酶5阳性表达开始减少(21.68±1.22,21.32±1.38,17.32±1.11,F=3.84,P<0.05),至术后4,8周其表达继续减少(11.59±0.76,8.49±0.42)。结论:慢性脑低灌注可诱导脑海马组织中周期素依赖性激酶5表达下调,同时伴随着大鼠学习、记忆能力下降,提示该酶可能参与了学习记忆过程。     

银杏叶提取物对幼年期大鼠惊厥后海马caspase-3 FasL表达的影响

目的研究幼年大鼠反复惊厥后海马组织caspase-3、FasL表达的变化及银杏叶提取物干预对其的影响。方法108只加日龄健康SD大鼠随机分为三组：正常对照组、惊厥组及银杏叶提取物干预组，通过三氟乙醚反复吸入（每天1次，连续6d），制作幼年大鼠惊厥动物模型。用免疫组化（sP）法检测各组动物反复惊厥结束后1、3、7d海马组织中caspase-3和Fa8L蛋白的表达，RT—PCR方法检测各时相点海马组织中caspase-3mRNA的表达。结果反复惊厥结束后1、3、7d海马组织均有caspase-3、FasL的表达，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。银杏叶提取物干预组海马各时间点ca8pase-3mRNA及caspa8e-3、FasL蛋白的表达均较惊厥组显著下调（P〈0．05）。结论caspase-3、FasL参与了幼年期惊厥性脑损伤。银杏叶提取物对幼年期惊厥性脑损伤的保护机制，可能与抑制海马caspase-3、FasL的异常表达有关。     

神经变性疾病细胞膜损伤机制:分泌型磷脂酶A2-Ⅴ亚型诱导小鼠皮质及海马神经元前列腺素E2受体表达的研究

目的探讨分泌型磷脂酶A2-Ⅴ亚型(sPLA2-Ⅴ)与小鼠皮质及海马前列腺素E2受体表达的关系,从而为癫痫、脑缺血、脑损伤等神经变性疾病的发病机制及干预方向提供理论参考.方法实验于2001-07/2002-07在中国医科大学发育生物教研室完成.选择96只12周C57BL/6小鼠,通过侧脑室内注射sPLA2-Ⅴ及应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印记、免疫组织化学染色等方法,观察其海马及皮质神经元前列腺素E2受体表达情况,并进行生物统计学分析.结果发现4种亚型前列腺素E2受体在小鼠海马及皮质内均有表达,且从mRNA水平证实其表达程度,免疫组化也证实四种亚型前列腺素E2受体在海马齿状回及CA1至CA3有强烈表达.结论sPLA2-Ⅴ可以诱导增加小鼠皮质及海马神经元内四种亚型前列腺素E2受体表达,引起细胞膜受损,诱导神经变性疾病.     

细胞周期素依赖性激酶-5研究进展

细胞周期素依赖性激酶-5属于小丝氨酸／苏氨酸周期素依赖性激酶家族成员，虽与其他成员序列具有同源性，但功能却完全不一样，即与细胞周期关系不大，却在中枢神经系统的发育和神经元正常功能的维持中发挥重要作用，并与一些退行性疾病及药物成瘾有密切联系，是神经系统中重要的蛋白激酶之一，可能成为防治中枢神经系统疾病的靶分子。现就细胞周期素依赖性激酶-5的一些最新研究进展进行综述。     

胚胎及出生后大鼠视网膜细胞促红细胞生成素的表达

背景：促红细胞生成素是低氧诱导因子1的下游靶基因,受低氧诱导因子1的调节。目的：观察大鼠视网膜胚胎期及出生后早期发育过程中促红细胞生成素的时空表达与视网膜发育的关系。方法：取胚胎12,16,20d鼠胚及成年Wistar大鼠各5只,处死后摘除眼球,分离视网膜,用免疫组织化学方法、半定量反转录聚合酶联反应检测视网膜促红细胞生成素蛋白及促红细胞生成素mRNA的表达。结果与结论：胚胎期大鼠视网膜神经上皮及色素上皮细胞的胞浆及胞核内均有促红细胞生成素阳性表达,表达趋势随胎龄增长而逐渐减弱;成年鼠视网膜促红细胞生成素阳性表达最弱。说明大鼠视网膜胚胎发育过程中促红细胞生成素的表达存在时空上的变化,这种变化可能与大鼠视网膜胚胎期的发育密切相关。     

大鼠脑内Fos蛋白在脂多糖免疫激发过程中的传导通路变化

背景越来越多的研究事实表明免疫系统不是一个仅有自主调节的孤立系统,而是与中枢神经系统之间存在双向联系的,但中枢神经系统哪些部位参与免疫调节仍是一个尚未解决的问题.目的研究与神经免疫调节有关的功能神经元在大鼠脑内的分布.设计随机对照的研究.单位解放军第一军医大学珠江医院神经外科,解放军第四军医大学神经科学研究所和解放军第四军医大学唐都医院呼吸科.对象实验在第一军医大学珠江医院神经外科和第四军医大学全军神经科学研究所完成.10只健康清洁级成年SD大鼠由第四军医大学实验动物中心提供.干预以腹腔注射脂多糖(LPS)为免疫激发模型,采用免疫组织化学抗Fos蛋白ABC方法进行染色.主要观察指标Fos蛋白在脑内不同区域内的分布.结果Fos阳性产物多集中分布在大脑额顶皮质、边缘前脑(扣带皮质、梨状皮质、外侧隔核和中央杏仁核等)、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、弓状核、视上核、视交叉上核、下丘脑外侧区、中脑导水管周围灰质腹外侧部、外侧臂旁核和延髓内脏带.小脑内无明显Fos分布密集区.结论LPS诱发的Fos阳性神经元在脑内有相对广泛的分布.     

脑啡肽和多巴胺在实验性脑震荡大鼠脑组织中的表达及意义

背景:脑震荡的机制未明,脑啡肽和多巴胺在其中的表达及意义不清。目的:探讨大鼠脑震荡脑组织中脑啡肽和多巴胺的表达及意义。设计:随机对照实验研究。地点和材料:实验地点:解放军军事医学科学院。健康Wistar雄性二级(清洁级)大鼠80只,军事医学科学院实验动物中心清洁级动物房饲养,水料任意,用于复制脑震荡动物模型。依致脑震荡所用砝码质量的不同随机分为对照组和50,100,200g组。干预:实验大鼠于伤后1,3,7,14及30d活杀,取脑组织,经免疫组化染色等技术,研究脑震荡发生发展中脑啡肽和多巴胺的变化规律。主要观察指标:①临床表现。②病理学改变。③脑啡肽和多巴胺表达的免疫组化染色结果。结果:100g大鼠组出现典型的脑震荡临床表现,其病理改变为脑血管收缩与扩张、脑组织瘀血与水肿、神经元变性、凋亡与坏死。脑啡肽于伤后1d表达增强,阳性部位见于大脑、小脑和海马区的血管内皮细胞浆中;于伤后7d达高峰。14d后表达逐渐减少,30d仍高于正常水平。多巴胺于伤后7d,在大脑、海马区、丘脑及小脑各部分血管内皮细胞、血管壁的表达明显增多,但各时间点无明显变化。结论:脑震荡后以血液循环障碍和实质细胞变性和坏死为主要病理改变。脑啡肽和多巴胺参与了脑震荡发生时脑损伤的病理生理过程,可能对血管损伤、血脑屏障     

α-转化生长因子及其受体在人肝脏组织硬化过程中的表达特征

背景:α-转化生长因子及表皮生长因子受体在不同病变中的表达和意义不尽相同。目的:观察α-转化生长因子及表皮生长因子受体在人类肝硬变组织中的表达。设计:非随机对照实验。材料:实验于2003-03/2004-05在解放军第四军医大学西京医院病理科完成。63份人类肝硬变组织选自解放军第四军医大学西京医院外科手术标本(患者知情同意),5份正常人类肝脏组织取自第四军医大学病理学教研室尸检组织(排除有肝脏疾病)。方法:运用免疫组织化学和原位杂交的方法对63份人类肝硬变组织及5份正常人类肝脏组织进行研究,计算α-转化生长因子及表皮生长因子受体阳性率并进行统计学处理。主要观察指标:免疫组织化学染色方法和原位杂交染色检测肝硬变组织中α-转化生长因子及表皮生长因子受体的表达。结果:免疫组织化学方法检测α-转化生长因子与表皮生长因子受体在63份肝硬变组织中的阳性率分别为84%(53/63)及52%(33/63),阳性产物为棕黄色颗粒,主要弥漫分布于肝细胞浆内,α-转化生长因子与表皮生长因子受体的表达在肝硬变组织中呈显著正相关(r=0.32,P<0.05),5份正常肝组织中α-转化生长因子与表皮生长因子受体表达为阴性;α-转化生长因子与表皮生长因子受体的原位杂交阳性率(86%,54%)略高于其免疫组织化学结果,两种检测方法之间差异无显著性(P>0.05)。结论:在肝脏组织硬变形成过程中可能存在α-转化生长因子/表皮生长因子受体自分泌循环,而α-转化生长因子、表皮生长因子受体高水平表达是促使肝脏组织硬变形成的重要因素之一。     

阿尔茨海默病患者脑皮质神经原脱失和淀粉样脑血管病改变

背景:阿尔茨海默病是老年期或老年前期发病的大脑变性疾病.老年性痴呆患者和患有阿尔茨海默类型的老年性痴呆患者常常在认知力方面、神经病学、电生理、影像学以及神经组化改变等方面混淆在一起,使得对阿尔茨海默病更难作出诊断.目的:测定阿尔茨海默病患者脑皮质神经原脱失和淀粉样脑血管病改变情况.设计:抽样调查.单位:解放军沈阳军区总医院神经内科.材料:在1984/1991解放军沈阳军区总医院神经内科连续尸检的300例脑标本中,筛选出60岁以上18例阿尔茨海默病的标本.另选择18例阿尔茨海默病与脑血管病并存的脑标本作为对照组.方法:详细观察脑皮质神经元脱失和淀粉样脑血管病改变.取自额上回切片在1.45 mm×1.45mm组织(×100)下进行神经元计数,观察阿尔茨海默组和对照组的神经元脱失情况.主要观察指标:①各组标本的神经元计数,对海马、杏仁核、Meynert核、中脑、桥脑、延髓、基底核、丘脑、小脑等区域的神经细胞脱失、胶质增生、脂褐素沉积、淀粉样小体等改变.②观察阿尔茨海默病例组织学缺血改变的容积、大小及数目.结果:①18例阿尔茨海默病标本病理检查可见重度脑萎缩4例,中度8例,轻度6例,镜下于脑叶皮质和海马区见大量老年斑及神经原纤维缠结,8例海马区有颗粒空泡变性.18例脑皮质神经元均明显减少,11例阿尔茨海默病并存有淀粉样脑血管病.②全部阿尔茨海默标本均在额叶皮质见有不同数量的老年斑改变,3例海马区未见老年斑改变,而严重的在海马区也可见到大量老年斑.皮质神经原纤维缠结计数范围3～30个/mm2,多数标本在海马区可见弥漫皮质神经原纤维缠结改变,严重痴呆标本中老年斑和皮质神经原纤维缠结还可见于杏仁核、Meynert核、中脑、桥脑、基底核、丘脑.除特征性的老年斑和皮质神经原纤维缠结改变外,8例在海马区有颗粒空泡变性,其中严重颗粒空泡变性3例;4例Meynert核亦有大量的颗粒空泡变性.对照组18例中,6例在海马或皮质有少量的皮质神经原纤维缠结变性,仅1例在额叶皮质见少量老年斑改变.③阿尔茨海默组神经细胞计数明显少于对照组[(43.9±11.3)个/视野,(62.0±8.03)个/视野,(P＜0.001)].皮质神经元明显减少的病例,痴呆也相对较重.大量神经元脱失的区域,胶质增生更为突出.结论:阿尔茨海默患者病理改变与临床痴呆表现相符,全部在脑海马区或脑皮质存在大量的老年斑和皮质神经原纤维缠结,老年斑以额、颞叶多见,皮质神经原纤维缠结以海马区多见.阿尔茨海默病除老年斑、皮质神经原纤维缠结改变和大量的神经元脱失外,多数伴有淀粉样脑血管病改变.     

高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠迟发型脑损伤影响的组织病理学特点

背景:临床上有3%～30%的急性一氧化碳中毒患者会发生一氧化碳中毒后迟发性脑病,出现以痴呆、精神症状和锥体外系症状为主的神经系统症状。目前,其发病机制还不清楚。目的:探讨一氧化碳中毒迟发性脑损伤的病理损伤机制,及高压氧对迟发性脑损伤的影响。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第四军医大学航空航天医学系航空卫生教研室。材料:实验于2004-03在解放军第四军医大学航空航天医学系航空病理学和分子生物学实验室进行。取清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠80只,单纯随机分为3组,正常对照组10只,模型组35只,高压氧组35只,后2组又分为染毒后6h、1,3,5,7,14,21d7个时间点,每个时间点5只。方法:①模型组:将大鼠放入染毒罐中熏吸入一氧化碳与空气的混合气体60min,一氧化碳的体积分数保持在2500×10-6,制备急性CO中毒动物模型。②高压氧组:同模型组造模,染毒后3h开始行高压氧治疗,压力0.2MPa,氧的体积分数保持在0.90以上熏整个过程共115min,染毒后前3d2次/d,之后1次/d,每周休息1d。③正常对照组不干预。主要观察指标:①采用组织病理学、免疫组织化学等方法检测大鼠染毒后各时间点大鼠脑组织病理改变的特点。②通过细胞超微结构观察和原位末端转移酶标记(TUNEL)等方法进行细胞凋亡的检测,观察急性各组大鼠脑神经元凋亡的发生情况。结果:造模后大鼠死亡率约为10%。①模型组大鼠脑内发生广泛的病理损伤,脑皮质、海马、纹状体和小脑等部位神经元出现变性坏死,其中大脑皮质、海马等部位损伤较重。苏木精-伊红、TUNEL染色和电镜观察表明大鼠海马神经元发生凋亡,凋亡神经元从染毒后第3天开始显著增加,第7天达到高峰穴P<0.01雪,以后逐渐减少。②高压氧组:与模型组相比,脑内神经元变性坏死明显减轻,各时间点大鼠海马区损伤均轻于模型组;凋亡神经元数目减少,尤以中毒后5和7d明显(P<0.01)。高压氧促进模型大鼠海马区Bcl-2蛋白表达熏尤以CO暴露后3,5d明显(P<0.01)。结论:①急性一氧化碳中毒大鼠出现广泛的迟发性神经元损伤,表现为迟发的神经元坏死和凋亡。②高压氧治疗可以有效减少变性坏死神经元熏促进凋亡抑制基因bcl-2表达熏从而抑制神经元坏死和凋亡。     

神经元型一氧化氮合酶基因在脑震荡大鼠脑组织中的表达

背景脑震荡是一种轻型颅脑损伤,因其客观指标较少,常为临床诊断和治疗带来难度.在基础研究方面,脑啡肽和多巴胺在其中的表达及其意义尚不清楚.目的探讨神经元型一氧化氮合酶(neuron nitric oxide synthase,nNOS)在大鼠实验性脑震荡中的表达及意义.设计随机对照实验研究.地点和对象实验地点解放军军事医学科学院放射医学研究所.健康Wistar雄性二级(清洁级)大鼠80只,军事医学科学院实验动物中心清洁级动物房饲养,水料任意,用于复制脑震荡动物模型,依致脑震荡所用砝码质量不同,随机分为对照组,50,100,200 g组.主要观察指标实验动物于伤后1,3,7,14及30 d活杀取脑组织,经免疫组化和原位杂交等技术研究nNOS在脑震荡中的变化规律.结果100 g组见典型脑震荡的临床表现,其病理改变为脑血管扩张,脑组织瘀血、水肿,神经元变性、坏死,尼氏体减少甚至消失.nNOS蛋白和mRNA于伤后3 d表达增强,7 d达高峰,14 d后开始减少,30 d仍呈阳性表达.阳性部位见于大脑皮质、海马、丘脑和小脑神经元胞浆内.结论脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性、坏死为主要病理改变;nNOS基因表达参与脑震荡发生时脑组织损伤的病理过程,可能对神经细胞变性、坏死起重要调节作用.     

养阴通脑颗粒对麻醉犬血压和心率的影响

背景如何选择中药治疗脑血管病,并且具有既提高脑血流量,又不影响血压和心率的作用,成了极有前途的研究方向.目的观察养阴通脑颗粒对麻醉犬平均血压和心率变化的作用.设计以杂种犬为研究对象,完全随机分组设计,随机对照实验.单位解放军第四军医大学西京医院麻醉科及解放军军第四军医大学基础部药理科.材料实验于2003-03/06在解放军第四军医大学生理教研室心血管实验室完成.实验选用健康杂种犬23只,雌雄不拘.将犬随机分为4组养阴通脑颗粒大剂量(n=8),中剂量(n=6)和小剂量组(n=5)及生理盐水组(n=4).方法模仿人类口服中药方式分别给予养阴通脑颗粒大、中、小剂量组麻醉犬养阴通脑颗粒2.0,1.0,0.5 g/kg.所有用药组按犬体质量计算药量,溶于100 mL生理盐水中,通过胃管灌入胃内,生理盐水组用等量生理盐水灌胃.主动脉平均血压由股动脉插管经晶体压力传感器测量,心率从标准Ⅱ导联心电图的R-R间期测算.记录用药前、用药后0.5,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0h的平均血压和心率值.主要观察指标各组犬用药前及用药后不同时间点血压和心率的变化.结果纳入结果分析犬29只.血压变化养阴通脑颗粒大、中剂量组平均血压降低,与用药前比较,最大降幅分别为-5.4%和-6.2%,小剂量组的血压有升有降,以降为主,升压的最大变化率为6.6%(P＞0.05),降压最大变化率为-4.1%(P＞0.05).生理盐水组的平均血压最大变化率为-9.6%(P＞0.05).心率变化大、中剂量组的心率随时间延长呈现减慢趋势,与用药前比较,大、中、小剂量组心率减慢的最大变化率分别为-4.4%,-12.2%和-9.5%,变化率数据差异无明显意义(P＞0.05).生理盐水组的心率随时间延长而逐渐减慢.结论养阴通脑颗粒对麻醉犬平均血压和心率无明显的影响.     

外源性肺表面活性物质与大鼠哮喘发作及表皮生长因子的变化

背景有研究证实,外源性肺表面活性物质参与哮喘大鼠哮喘发作,并与表皮生长因子及其表皮生长因子mRNA的表达相关.目的探讨肺表面活性物质对哮喘大鼠模型哮喘发作、表皮生长因子及表皮生长因子mRNA表达的影响.设计以实验动物为研究对象的观察对比实验.单位一所军医大学医院的呼吸内科.材料实验于2004-04/2004-07在第四军医大学实验动物中心实验二室及病理学教研室免疫组化实验室完成.选择60只体质量为100～120 g的雄性SD大鼠,由第四军医大学实验动物中心提供.随机分为3组,即正常对照组、哮喘对照组和肺表面活性物质治疗组,每组20只.方法建立哮喘大鼠模型,哮喘对照组、肺表面活性物质治疗组腹腔注射免疫原液1 mL及气管炎菌苗1 mL腹腔注射致敏,正常对照组给予等体积生理盐水.致敏2周后,哮喘对照组、肺表面活性物质治疗组给予10 g/L卵蛋白溶液,正常对照组给予理盐水超声雾化吸入20 min激发,肺表面活性物质治疗组每次激发前给予氧气驱动雾化吸入肺表面活性物质100 mg/kg.采用免疫组织化学的方法检测表皮生长因子的表达,用逆转录聚合酶链反应的方法检测表皮生长因子mRNA.主要观察指标各组大鼠哮喘发作情况及其支气管肺组织中表皮生长因子及表皮生长因子mRNA的表达水平比较.结果进入结果分析保持为每组20只.哮喘对照组的哮喘激发率[90%(18/20)]高于肺表面活性物质治疗组[5%(1/20)](x2=28.97,P＜0.01).表皮生长因子表达的图像分析显示哮喘对照组的吸光度(9.652±1.086)高于正常对照组(3.267±0.986)(t=18.552,P＜0.01),肺表面活性物质治疗组吸光度(4.132±1.012)与正常对照组相近(P＞0.05);各组表皮生长因子mRNA扩增产物电泳带显示,正常对照组呈弱表达,哮喘对照组呈强表达,肺表面活性物质治疗组较哮喘对照组明显表达减弱.结论外源性肺表面活性物质能减轻哮喘发作,其机制可能与抑制表皮生长因子的合成及释放有关.     

锌对Caco2细胞锌转运体mRNA表达的影响

背景:小肠锌吸收降低会导致皮炎、脱发、生长发育障碍等。低锌状态下如何保持小肠锌内稳态的作用途径至今尚不清楚,锌转运体的发现及相关研究为其提供了新的研究方向。目的:观察低锌浓度对二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达的影响,分析低锌状态下小肠锌吸收的可能途径。设计:空白对照观察。单位:解放军第二军医大学海医系军队卫生学教研室。材料:实验于2004-10/2005-05在解放军第二军医大学军队卫生学教研室完成,人结肠腺癌细胞系Caco2购自上海中科院细胞所。方法:将Caco2细胞培养至一定浓度。①时间效应:应用反转录聚合酶链反应分别检测10μmol/LTPEN暴露时,0,2,4,6,8和10h时相点Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA的表达情况。②剂量效应:应用反转录聚合酶链反应分别检测0,2.5,5,7.5,10μmol/LTPEN暴露时,各组Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA的表达情况。主要观察指标:锌对Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达影响的时间和剂量效应。结果:①时间效应:与0h比较,2h和4h时二价金属离子转运体1mRNA表达水平没有明显变化,6h,8h和10h,二价金属离子转运体1mRNA均有显著升高(P<0.05)。锌铁调控蛋白4mRNA表达水平随着时间的延长而升高,6h达到峰值,为0h的2.1倍。②剂量效应:二价金属离子转运体1mRNA的表达量在TPEN浓度为2.5和5μmol/L时没有明显改变,7.5和10μmol/L时二价金属离子转运体1mRNA的表达量较对照组有显著升高(P<0.05)。锌铁调控蛋白4mRNA的表达量随着TPEN浓度的升高而升高,10μmol/L时锌铁调控蛋白4mRNA表达量为0μmol/L时的2.7倍。结论:Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达受锌的调控,并且有时间和剂量效应,但是锌铁调控蛋白4mRNA变化较二价金属离子转运体1mRNA变化敏感且迅速。低锌状态下,细胞可能通过上调二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达水平而调节细胞锌内稳态。