胰腺癌细胞株化疗敏感性与胸苷酸合成酶蛋白表达的关系

目的 探讨胸苷酸合成酶(TS)在胰腺癌细胞中的表达及其蛋白表达水平与胰腺癌细胞化疗敏感性的关系.方法 利用CCK-8试剂盒检测7株胰腺癌细胞(AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、SU86.86、T3M4、PANC-1与COLO357)对5-氟脲嘧啶(5-Fu)的化疗敏感性,应用Western blot检测其TS蛋白表达.结果 细胞株AsPC-1、BxPC-3、Capan-1、SU86.86、T3M4中TS蛋白表达水平低(低TS表达组),而PANC-1与COLO357中TS蛋白表达水平较高(高TS表达组),低TS表达组的细胞在低中高3个不同药物浓度下对5-Fu抑制率分别为0.683±0.131、0.769±0.114与0.836±0.094.同浓度下高TS表达组的细胞对5-Fu抑制率分别为0.370±0.157、0.548±0.018与0.638±0.020.TS蛋白表达低的细胞对5-Fu化疗敏感性明显高于TS表达高的细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在胰腺癌细胞株中,TS蛋白表达水平与其对5-Fu的化疗敏感性密切相关.     

激素难治性前列腺癌的化疗进展

雄激素非依赖性状态的出现是前列腺癌死亡的最后原因，本文复习文献中有关激素难治性前列腺癌（HRPC)化疗的报道，迄今为止，没有一个化疗方案被证实可以延长HRPC患者的寿命，仪米托蒽醌加用肾上腺皮质激素对骨痛症状的缓解有较为确实的作用。     

胃癌胸苷酸合成酶表达与耐药的关系及耐药逆转的研究进展

胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)是DNA生物合成反应中的关键酶,所以其编码基因成为许多化学药物治疗癌症的靶基因,比如胃癌化疗中常用的5-氟尿嘧啶(5-fluoropyrimi-dines,5-Fu)。随着对肿瘤耐药的深入研究,逐渐发现了TS与耐药之间的关系。现综述胃癌TS表达水平与耐药之间的关系、原理、TS测定方法及耐药逆转的研究进展等。     

电脉冲化疗对人前列腺癌细胞系PC-3M的体外作用

目的 探讨电脉冲化疗对人前列腺癌细胞系PC－3M的体外作用。方法 选用平阳霉素作为抗癌药物与电脉冲相结合,测定电脉冲化疗对PC－3M细胞系的细胞毒作用。HE染色法观察实验后形态学改变。结果 单用平阳霉素,低浓度无效,高浓度有效,最大无细胞毒作用浓度为0.1ug/ml;单用电脉冲,最大无细胞毒作用场强为125V/mm;平阳霉素与电脉冲相结合的电脉冲化疗最大无细胞毒作用浓度仅为单用平阳霉素的1／100;0.1ug/ml的平阳霉素与125V／mm的场强相结合,细胞生存分数为52.6%,组织形态学改变明显。结论 平阳霉素可显著被电脉冲增效,适用于电脉冲化疗阳霉素介导的电脉冲化疗对前列腺癌细胞生长有较强的抑制作用。     

洛拉曲克对人大肠癌LoVo细胞胸苷酸合酶水平及细胞增殖的影响

目的：研究洛拉曲克体外对人大肠癌LoVo细胞胸苷酸合酶（TS）水平动态变化以及对细胞增殖的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度的洛拉曲克对LoVo细胞抑制率的影响,RT-PCR和Wes tern blot法检测TS基因和蛋白的表达变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果：洛拉曲克对LoVo细胞有明显的抑制作用,其IC50值约为6.31μmol/L;并可促进细胞凋亡,凋亡率随作用时间的延长而增加。RT-PCR结果显示,在mRNA水平,相同剂量洛拉曲克处理细胞后,随着时间的延长,TS/GAPDH比值与对照组相比,有持续升高的趋势,但是只有48 h和60 h相对于未处理组差异有统计学意义。相同剂量的洛拉曲克处理细胞后,随着时间的延长,其TS蛋白的表达水平亦有持续升高的趋势。结论：洛拉曲克可以明显促进大肠癌细胞的凋亡并可产生TS诱导现象,术后以此可以更好地指导临床用药。     

乳腺癌患者胸苷酸合成酶基因多态性及其与临床病理的关系

目的 研究胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)基因多态性在汉族女性乳腺癌患者中的分布特点及其与临床病理之间的关系.方法收集经病理学确诊的83例初诊乳腺癌患者外周静脉血,术前均未给予任何针对乳腺癌的治疗,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测墓因型.基因多态性与临床病理的关系采用卡方分析进行检验.结果 83例乳腺癌患者的基因分布情况为:(1)3R/3R、2R/3R及2R/2R 3种基因型的频率分别为68.7%、27.7%、3.6%;(2)按G→C单核苷酸多态性细分,2R/2R,2R/3C,2R/3G,3G/3G,3C/3C及3G/3C 6种基因型的频率分别为3.6%、19.3%、8.4%、19.3%、37.3%及12.1%;(3)+/+6 bp、+/-6 bp及-/-6 bp3种基因型的频率分别为8.4%、50.6%及41.0%;(4)3种基因多态性均与乳腺癌的组织学分级相关(P＜0.05);另外TS 5′-UTR多态性与淋巴结转移(P=0.019)、Ki67(P=0.022)相关,TS 3′-UTR多态性与发病年龄相关(P=0.002),G→C单核苷酸多态性与淋巴结转移相关(P=0.021).结论 汉族女性乳腺癌患者中3R/3R、-/-6 bp基因型频率较高;TS基因多态性与乳腺癌临床病理因素密切相关.     

RNA干扰和洛拉曲克对结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达及细胞增殖的影响

目的探讨下调胸苷酸合成酶（Ts）基因以及化疗药洛拉曲克对人结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达水平以及对细胞生长、凋亡的影响。方法构建针对人Ts基因的小分子干扰RNA（siRNA）和阴性对照,转染至LOVO细胞,利用RT—PCR和Westernblot技术观察沉默TS基因后其基因和蛋白表达水平的变化,MTF法检测细胞增殖情况;另联合洛拉曲克作用于LOVO细胞,观察两者对LOVO细胞的TS蛋白表达和细胞生长的影响。结果转染TSsiRNA后,LOVO细胞TSmRNA及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组,细胞增殖速度亦低于对照组（均P〈0．05）。TSsiRNA联合洛拉曲克组细胞IC50值为（1．46±0．25）μm01／L,而阴性对照组和单用洛拉曲克组的IC50值分别为（6．81±0．31）μmol／L和（6．47±0．43）μmol／L。TSsiRNA联合洛拉曲克作用于细胞36h后。细胞凋亡指数为（62．12±0．89）％,高于单用TSsiRNA和洛拉曲克[（21．56±0．67）％和（40．51±0．83）％．均P〈0．05]。结论TSsiRNA可以下调人LOVO细胞中TS基因和蛋白的表达,使细胞生长速度减慢,凋亡增加,并可以增强洛拉曲克的药物敏感性。     

siRNA沉默HIF-1α基因对前列腺癌PC-3细胞多西紫杉醇化疗敏感性的影响

目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对前列腺癌PC-3细胞多西紫杉醇(docetaxel,DTX)化疗敏感性的影响。方法:实验分为PC-3组,PC-3+NCsiRNA组,PC-3+HIF-lαsiRNA组。用脂质体Lipofectamine2000将经过筛选证实有效的HIF-1αsiRNA序列和阴性NC siRNA序列转染PC-3细胞。待细胞转染或不转染后继续培养,根据实验要求时间点加入DTX。采用CCK-8法检测转染后96 h内各组细胞的生长增殖情况,流式细胞仪检测加DTX后48 h各组细胞的周期分布、凋亡率及多药耐药基因P糖蛋白(MDR/P-gp)的表达。结果:PC-3+HIF-1αsiRNA组肿瘤抑制率高于PC-3+NC siRNA组,尤以转染后48 h表现的较为明显;转染后48 h,PC-3+HIF-1αsiRNA组细胞存活率均明显低于PC-3组和PC-3+NCsiRNA组(P均0.01)。细胞周期分布变化,PC-3+HIF-1αsiRNA组较两对照组比较,G0/G1期细胞百分数较低,而G2/M期细胞百分数稍高(P均0.01)。细胞凋亡结果,PC-3+HIF-1αsiRNA组细胞凋亡率明显高于两对照组(P均0.01)。各组细胞MDR/P-gp表达无明显差异(P均0.05)。结论:沉默HIF-1α基因能增强DTX对前列腺癌PC-3细胞的生长抑制,通过调整细胞周期重新分布、诱导细胞凋亡,增加前列腺癌PC-3细胞对化疗的敏感性,而这一作用与MDR/P-gp无明显相关。     

人前列腺癌细胞对化疗药物敏感性的对比

目的 :研究人雄激素非依赖性前列腺癌细胞对化疗药物的敏感性。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)法测定人雄激素非依赖性高转移前列腺癌细胞 (PC- 3M)对 6种化疗药物的敏感性。结果 :PC- 3M对 6种化疗药物的敏感性依次为喜树碱 >依托泊甙 >卡铂、阿霉素、氮芥 >5 -氟尿嘧啶 (P均 <0 .0 5 )。结论 :PC- 3M对喜树碱、依托泊甙较敏感。可作为临床用药参考。     

晚期激素非依赖性前列腺癌临床化疗效果分析

目的探讨吉西他滨加顺铂(DDP)治疗晚期激素非依赖性前列腺癌的临床效果及毒副反应。方法26例晚期激素非依赖性前列腺癌患者,年龄53～76岁,中位年龄63岁。均经去势手术或(和)抗雄激素药物治疗,患者血PSA呈逐渐上升趋势。全身骨扫描证实均有多发性骨转移灶,其中20例出现不同程度的骨转移灶疼痛,疼痛按VRS分级,0级6例、Ⅰ级8例、Ⅱ级7例、Ⅲ级5例。肝脏、双侧。肾上腺和颅内转移各1例。吉西他滨1000 mg/m~2加生理盐水100 ml静脉滴注,第1、8天各1次;顺铂100 mg/m~2加生理盐水500 ml静脉滴注,第1天用,或者顺铂30 mg加生理盐水250 ml静脉滴注,第1～5天使用;每28 d为1个疗程。结果治疗后患者血PSA值降至正常水平(<4 ng/ml)1 8例,PSA值下降>50%5例,3例PSA值变化不明显,总有效率88%。20例骨转移灶疼痛者化疗后6例仍有疼痛,VRS分级Ⅰ级4例、Ⅱ级2例。1例多发性颅内转移灶其中最大转移瘤直径由化疗前的3.0 cm缩小至0.5 cm,化疗后面瘫症状消失。1例肝脏转移瘤由10.2 cm缩小至3.3 cm。1例双侧肾上腺转移瘤化疗后肿瘤体积缩小>2/3。随访6～52个月,平均30个月,15例患者死亡,中位生存期21.1个月。疼痛缓解期平均15.7个月。PSA值降低的稳定期平均14.5个月。常见毒副反应为恶心、呕吐、白细胞减少、血红蛋白降低及血小板减少等,但均在可耐受范围。结论吉西他滨联合顺铂全身化疗治疗晚期激素非依赖性前列腺癌的临床疗效显著,毒副反应较轻,可作为晚期激素非依赖性前列腺癌的一种辅助治疗方法。     

对激素抗拒的前列腺癌的联合化疗

目的　探讨阿霉素、丝裂霉素、５氟尿嘧啶联合化疗对激素抗拒的前列腺癌的疗效。　方法　１９９５ 年４ 月至１９９８ 年７ 月治疗１５ 例对激素抗拒的前列腺癌病人。随访５ ～２４ 个月,平均１０个月。　结果　ＣＲ１ 例,ＰＲ２ 例,ＳＤ９ 例。ＣＲ 和ＰＲ 持续６ ～１８ 个月,平均１１ 个月,ＣＲ、ＰＲ 及ＳＤ持续５ ～２４ 个月,平均９ 个月。脱发、恶心呕吐、骨髓抑制是主要副反应。　结论　阿霉素、丝裂霉素、５氟尿嘧啶联合化疗方案可以延缓部分对激素抗拒的前列腺癌的进展。     

前列腺癌放射免疫显像的实验研究

采用二巯基乙醇直接还原法将Ｔｃ９９ｍ放射性核素标记抗人前列腺癌单克隆抗体ＹＤＰＣ，标记物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱，获得纯化的标记抗体ＹＤＰＣ９９ｍＴｃ，薄层层析检测其放射化学纯度为９７％。ＹＤＰＣ９９ｍＴｃ经尾静脉注射入荷人前列腺癌裸鼠体内，２４小时后行γ照相，可以得到前列腺癌的特异显像，而同一裸鼠体内的人直肠癌移植瘤没有显像。结论：ＹＤＰＣ９９ｍＴｃ放射免疫显像具有前列腺癌特异性。     

HSP 70反义寡核苷酸逆转LNCaP和PC-3m细胞耐药性的研究

目的：探讨热休克蛋白（HSP70）反义寡核苷酸逆转入前列腺LNCaP及PC－3m耐药性的作用。方法用MTT法和成集落试验测定了10μmol/L,HSP70反义寡核苷酸作用后不同浓度阿霉素、丝裂霉素C对LNCaP和PC－3m生长抑制率的影响。结果10μmol/LHSP70反义寡核苷酸可以显著增加4－12μg/ml阿霉素和10－100μg/ml丝裂霉素－C对PC－3m的生长抑制率以及0．01－0．08μg/ml阿霉素和1－6μg/ml丝裂霉素C对LNCaP的生长抑制率,差别有显著性意义（P＜0．05）。抑制率均超过505。结论HPS70与前列腺癌细胞的耐药性有关;HSP70反意义（P＜0．05）。报制率均超过505。结论HSP70与前列腺部细胞的耐药性有关;HSP70反义寡核苷酸可以特异性地逆转二种不同生物学特性的前列腺癌细胞的耐药性。为临床前列腺癌化疗提供了新方法。     

前列腺癌患者的红细胞免疫功能及T淋巴细胞亚群变化观察

目的探讨前列腺癌患者红细胞免疫功能状态及与Ｔ淋巴细胞亚群改变的关系。方法测定１２例前列腺癌患者的红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（Ｃ３ｂＲＲ）、免疫复合花环率（ＩＣＲ）及四项肿瘤红细胞花环率（ＤＴＥＲ、ＥＴＥＲ、ＡＴＥＲ、ＮＴＥＲ）,用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测Ｔ细胞亚群,与年龄相近的１５例良性前列腺增生症（ＢＰＨ）患者作比较,并测定了２０名健康献血员的红细胞免疫指标作对照。结果前列腺癌组Ｃ３ｂＲＲ降低,ＣＤ３、ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８均低于ＢＰＨ组。ＢＰＨ组Ｃ３ｂＲＲ和ＤＴＥＲ低于对照组。前列腺癌组Ｃ３ｂＲＲ与ＣＤ４／ＣＤ８比值呈正相关。结论前列腺癌患者红细胞免疫功能低下,Ｔ淋巴细胞免疫活性下降,两者关系密切。前列腺癌易发生血行扩散可能与红细胞免疫功能低下有关。ＢＰＨ患者红细胞免疫粘附能力降低为老年性改变。     

端粒酶与前列腺癌及其生物学行为的关系

目的 探讨端粒酶（ＴＥ）与前列腺癌（ＰＣａ）及其生物学行为的关系。方法 应用端粒重复片段扩增法（ＴＲＡＰ）法,检测３９例ＰＣａ组织,１５例前列腺增生（ＢＰＨ）组织及１０例正常前列腺（ＮＰ）组织中的ＴＥ活性,并比较ＴＥ活性水平与ＰＣａ病理分化程度,临床分期及转移情况的关系。     

肾上腺源性雄激素与前列腺癌

目的 探讨肾上腺源性雄激素与前列癌（ＰＣａ）的关系。方法 １９９８年３月～１９９９年７月,采用雄激素全方法治疗１８例Ｂ２期以上ＰＣａ,并与２３例单纯睾丸切除治疗的晚期ＰＣａ比较,雄激素全阻断法采用睾丸切除加缓退瘤或酮康唑。结果 雄 纱全阻断治疗组可迅速使患者血清睾酮、ＰＳＡ降低和前列腺体积缩小,与单纯睾丸切除组比较,血ＰＳＡ降低和前列腺体积缩小５０％的时间差别有显著性意义（Ｐ〈０．０１）。雄激素全     

雄激素治疗对人前列腺癌（PC－3m）裸鼠可移植瘤中AC和GC活性变化的实验研究

本研究利用不同浓度的丙酸睾丸素（ＴＰ）治疗雄激素非依赖性前列腺癌细胞株（ＰＣ－３ｍ）裸鼠可移植瘤，并观察了其生长及瘤组织中的腺苷酸环化酶（ＡＣ）和鸟苷酸环化酶（ＧＣ）的活性变化。结果发现可移植瘤生长呈双相效应，并伴有相应的ＡＣ活性水平的变化。其中ＴＰⅡ组的瘤重明显高于对照组，ＡＣ和ＧＣ活性无变化；ＴＰ　Ⅲ组的瘤重明显低于对照组，ＡＣ活性明显升高，为１３．８４７±１１．３３５ｐｍｏｌ·Ｍｉｎ（－１）·ｍｇ蛋白（－１）。本研究结果为临床利用高水平雄激素治疗晚期复发的前列腺癌提供了实验依据，同时对高水平雄激素抑制前列腺癌生长及其与ＡＣ和ＧＣ的关系进行了讨论。     

前列腺干细胞抗原在人前列腺癌组织中的表达及意义

目的　探讨前列腺干细胞抗原 (PSCA)在国人前列腺癌 (PCa)组织中表达的临床意义。　方法　采用免疫组织化学 (IHC)和核酸原位杂交 (ISH)方法检测 4 0例PCa、2 0例良性前列腺增生(BPH)和 2 0例前列腺上皮内瘤 (PIN)组织标本PSCA蛋白和mRNA表达 ,半定量法计算PSCA阳性表达细胞百分数和阳性表达强度 ,比较各组织间表达水平的差异及其与PCa分级、临床分期之间的关系。　结果　PCa、BPH、PIN组织PSCA中度阳性到强阳性表达分别为 85 % (34/ 4 0 )、2 0 % (4/ 2 0 )和35 % (7/ 2 0 ) ;PCa组织PSCA表达水平与BPH和PIN比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,BPH与PIN比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;PCa组织PSCA表达水平随Gleason评分及临床分期增加而升高。　结论　人PCa组织有PSCA蛋白质和mRNA的过表达 ,且与PCa病理分级、临床分期呈正相关 ,可能对PCa的诊断及判断预后有潜在价值。