成骨生长肽促进钛表面大鼠成骨细胞的增殖分化

背景：成骨生长肽具有促进多种基质细胞增殖活性,成骨活性,免疫原性低,自身调节极其敏感,提取制作工艺简单等众多优点。 目的：体外观察成骨生长肽对大鼠颅盖骨来源成骨细胞在钛金属表面增殖分化的影响。 方法：将体外培养的新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞以5×10⁷ L^-1细胞浓度接种于6孔板中的纯钛试件表面,分别加入0(空白对照),10^-10,10^-9,10^-8,10^-7 mol/L的成骨生长肽,干预1,3,5,7,9 d后应用MTT法检测纯钛试件表面成骨细胞的增殖活性,应用酶联免疫法检测成骨细胞内碱性磷酸酶活性。 结果与结论：与空白对照组比较,各浓度成骨生长肽组纯钛试件表面成骨细胞增殖活跃(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-9 mol/L(P < 0.05);各浓度成骨生长肽组细胞内碱性磷酸酶活性增强(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-8 mol/L (P < 0.05)。表明成骨生长肽可促进钛片表面成骨细胞的增殖活性,增强细胞内碱性磷酸酶活性。     

新工艺制备纳米钛酸钙涂层及生物相容性评价

目的 :研究新型纳米钛酸钙(CaTiO_3)涂层钛合金材料的生物相容性。方法 :将钛板、羟基磷灰石涂层钛板和纳米CaTiO_3涂层钛板分为钛板组、涂层组、纳米组(各60例)。通过扫描电镜、X射线衍射对3组材料进行分析。将各组材料与成骨细胞(MC3T3-E1)共培养,通过免疫荧光染色、MTT法、碱性磷酸酶(ALP)含量测定评估材料表面细胞的存活、增殖及分化情况;通过电镜检测材料表面成骨细胞的钙化。结果 :涂层组、纳米组比钛板组有更高的活细胞数量、MTT值、ALP含量,有更好的细胞结构形态和钙化,而涂层组、纳米组无差异。结论 :该新型纳米CaTiO_3涂层材料有良好的生物相容性,为其将来临床植入体内提供了一定的实验依据。     

镍钛泡沫合金对成骨细胞生物活性的影响

目的 观察镍钛泡沫合金（PNT）在体外实验对细胞的生物安全性。方法 选择PNT和镍钛致密合金（NiTi）材料（中南大学材料科学工程学院提供）,以及纯钛（Ti）（宁波慈北医疗器械有限公司,中国）;MC3T3-E1来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。用PNT、NiTi、Ti 3种合金的浸提液,培养小鼠前成骨细胞MC3T3-E1。用CCK-8法检测细胞的增殖活性,碱性磷酸酶法测定细胞的分化能力,流式细胞术检测细胞早期凋亡情况。结果 PNT组细胞增殖能力在第1天、第3天、第7天均明显小于NiTi组（P <0.001）和Ti组（P <0.001）。PNT组细胞分化能力在第1天、第3天、第7天均明显小于NiTi组（P <0.001）和Ti组（P <0.001）。PNT组细胞的凋亡细胞百分比在第1天、第3天、第7天均明显高于NiTi组细胞（P=0.001）和Ti组细胞（P <0.001）。结论 PNT对细胞的增殖和分化的影响明显大于NiTi组和Ti组,更明显地抑制了细胞的增殖与分化能力,更容易导致细胞早期凋亡。     

钛颗粒负荷对成骨细胞释放细胞因子的影响

假体周围的溶骨性因子是造成无菌性松动的主要原因之一。前期的研究表明,磨损颗粒抑制成骨细胞分化和矿化能力,为探索不同直径的磨损颗粒对成骨细胞释放细胞因子的影响,我们采用双夹心抗体ELISA、RT-PCR法分析3种直径钛颗粒对兔成骨细胞表达IL-6I、L-10和破骨细胞分化因子(ODF)的影响。结果显示:0.9μm钛颗粒刺激成骨细胞产生大量促骨吸收因子(IL-6、ODF)的同时快速而短暂地释放抑骨吸收因子(IL-10);2.7μm和6.9μm钛颗粒,尤其是后者主要是刺激成骨细胞缓慢而强烈地产生促骨吸收因子。提示:磨屑颗粒作用成骨细胞的生物学反应是双相的,且反应程度因颗粒大小和作用时间的不同而又有所不同。可见如何抑制假体周围溶骨性因子的产生以及人工材料的优化选择是提高人工假体寿命的关键。     

两种斯赤列提取物促进成骨细胞的增殖与分化

背景：在骨稳态中,成骨细胞和破骨细胞通过释放多种调节因子在骨重塑中发挥重要作用,一旦两种细胞功能和活性的动态平衡被打破,则易引起骨质疏松等骨骼疾病。彝族人民常用斯赤列治疗跌打损伤、骨折创伤等,作者所在课题组前期研究发现斯赤列的水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)为其治疗骨折的活性部位,具有促进骨折愈合、改善骨质疏松的作用,但其活性部位对成骨细胞增殖、分化作用的影响尚不清楚。目的：探讨斯赤列改善骨质疏松的活性部位——水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)对成骨细胞增殖与分化的影响。方法：胶原酶消化法提取新生SD大鼠颅骨成骨细胞,CCK-8试剂盒检测SAW-A和SAW-B的细胞毒性;分别给予SAW-A(312.5 mg/L)和SAW-B(156.15 mg/L)干预大鼠第3代成骨细胞,于24,48,72 h用CCK-8试剂盒检测成骨细胞增殖活性;流式细胞仪检测SAW-A、SAW-B干预6 d后对细胞活性的影响,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色检测SAW-A、SAW-B干预后成骨细胞的增殖分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因RUNX2、骨涎蛋白、骨钙蛋白和...     

微重力对成骨细胞分化影响的研究进展

本研究回顾了微重力对成骨细胞分化的影响,综述微重力环境下信号通路和表观遗传对成骨细胞分化的调控作用,并重点介绍了MAPK/ERK、Wnt/β-catenin、BMP/Smad信号通路以及非编码RNA的作用机制。最后,总结当前针对微重力环境下骨量流失的治疗措施,为后期通过促进成骨分化来治疗太空微重力下骨丢失提供理论依据。     

飞秒激光处理促进人牙周成纤维细胞在纯钛材料表面的增殖和分化

背景：目前对种植体表面优化处理促进人工牙种植体骨整合的形成是近年来这一领域的研究热点,而通过飞秒激光这种表面处理钛金属表面改性促进成纤维细胞的增殖和分化的相关性研究报道较少。目的：观察飞秒激光处理对于人牙周膜成纤维细胞在钛金属表面增殖和分化的影响。方法：将人牙周膜成纤维细胞接种在分别经过飞秒激光处理、TiO₂颗粒喷砂和砂纸顺向抛光的纯钛片表面(飞秒激光组,TiO₂颗粒喷砂组和对照组),观察细胞增殖和分化情况。结果与结论：与对照组相比,飞秒激光组和TiO₂颗粒喷砂组钛片表面粗糙度明显增加,表面细胞密度明显增加,RUNX2和OSX mRNA表达水平增加;且飞秒激光组上述指标高于TiO₂颗粒喷砂组。提示飞秒激光处理的纯钛表面更加粗糙,更有利于人牙周膜成纤维细胞的增殖和分化。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

纳米生物材料及其表面对成骨细胞生物学行为影响的研究进展

骨组织工程是再生医学的重要组成部分,支架材料和种子细胞是其关键。近年来,随着纳米技术等相关学科的发展,在骨组织工程领域,研究人员对成骨细胞株的选择和培养、纳米材料的元素组成、表面形态、表面粗糙度及表面改性等方面进行了大量研究,并在纳米材料对成骨细胞生物学行为的影响方面取得了重要的研究成果和进展,本文对近年来在该领域内的研究进展作一综述。     

罗汉果苷V促进LncRNA TUG1表达刺激成骨细胞的增殖与分化

文题释义：长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)：是长度大于200个核苷酸的非编码RNA,在表观遗传调控、细胞周期调控和细胞分化调控等众多生命活动中发挥重要作用,是近年遗传学领域研究的热点对象。罗汉果皂苷V：是一种三萜糖苷,可从罗汉果提取物中分离出来,具有抗氧化、降血糖、抗癌等活性的天然化合物。前期研究中,课题组发现罗汉果皂苷V可刺激成骨细胞增殖、分化。 背景：骨质疏松是骨在进行重塑的过程中,成骨细胞的骨形成和破骨细胞的骨吸收之间的动态平衡紊乱所致。在细胞水平严格控制骨重建,对于维持骨稳态和避免发生骨质疏松有重要意义。前期研究表明1.25×10^-2 g/L的罗汉果苷V可促进成骨细胞增殖、分化,其机制可能涉及LncRNA TUG1。目的：探讨LncRNA TUG1在罗汉果苷V促进成骨细胞增殖与分化中的作用。方法：采用两步酶消化法提取SD乳鼠成骨细胞,随后将细胞分为2组,分别给予0,1.25×10^-2 g/L的罗汉果苷V干预,干预培养2 d后进行LncRNA基因检测;设计并合成LncRNA TUG1沉默病毒,将新提取的成骨细胞分为正常细胞对照组、罗汉果苷V干预组、罗汉果苷V+阴性病毒组、TUG1沉默组、罗汉果苷V+TUG1沉默组。按实验分组对成骨细胞进行干预处理,随后分别在2,4,6 d后通过FDA荧光染色观察成骨细胞增殖活性,干预6 d后通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色及qRT-PCR检测 TUG1在罗汉果苷V促进成骨细胞增殖与分化中的作用。结果与结论：①LncRNA基因检测表明1.25×10-2 g/L的罗汉果皂苷显著促进成骨细胞内LncRNA TUG1表达;②FDA荧光染色显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷V促进成骨细胞增殖;②干预6 d后,碱性磷酸酶染色及茜素红染色实验均显示TUG1沉默可抑制罗汉果苷V促进成骨细胞成骨矿化;③qRT-PCR结果显示成骨分化相关基因RUNX2、BSP、OCN和COL1A1在罗汉果苷V干预组显著高表达,而在罗汉果苷V干预+TUG1沉默组则表达受抑制;④以上结果表明,罗汉果苷V通过促进LncRNA TUG1表达刺激成骨细胞的增殖与分化。 ORCID: 0000-0001-8821-633X(姚顺晗) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

碳化硅对成骨细胞增殖和分化的影响

目的研究碳化硅(SiC)的体外生物相容性,为探索SiC作为骨缺损修复材料的可行性奠定基础。方法实验组为实质SiC,对照组为致密羟基磷灰石(HA)。将取自大鼠胎鼠颅骨的成骨细胞分别接种于2组材料表面。分别采用扫描电子显微镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)法、碱性磷酸酶(ALP)含量测定技术、流式细胞仪检测细胞周期,观察分析两种材料表面上的细胞的增殖和分化能力。结果扫描电子显微镜显示:原代成骨细胞在两种材料表面伸展良好,细胞在材料表面伸出很多伪足,并且在材料表面可见明显的细胞外基质沉积。两组材料上细胞的MTT值从1、3、5、7 d随观察时间逐渐升高,并且各个时间点实质SiC均高于致密HA,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。两组材料上细胞的ALP含量从1、3、5、7 d随观察时间逐渐升高;在1、3 d时,致密HA高于实质SiC,在5、7 d时,致密HA低于实质SiC,但是两组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。1、3、5 d两组材料的细胞增值指数(PI)值逐渐升高,高峰出现在第5天,第7天时下降,两组材料在各个时间点的PI均接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论实质SiC具有与致密HA相似的良好的细胞相容性。     

辛伐他汀对成骨细胞增殖分化及连接蛋白43表达的调控

背景：辛伐他汀对成骨细胞增殖分化的影响以及分子机制尚不完全明了,尤其对连接蛋白43的作用知之甚少。 目的：探讨辛伐他汀对成骨细胞增殖分化及成骨基因和连接蛋白43表达的调控作用。 方法：选取新生SD大鼠,采用颅盖骨消化法培养成骨细胞。采用不同浓度辛伐他汀(0.062 5,0.125,0.25,0.5和1.0 μmol/L)处理成骨细胞,MTT检测辛伐他汀对成骨细胞增殖作用的影响;碱性磷酸酶活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因和间隙连接蛋白43 mRNA和蛋白的表达。 结果与结论：细胞培养第3天,辛伐他汀组各浓度组MTT吸光度值比较差异无显著性意义(P > 0.05);但是培养第4天和第5天,辛伐他汀各浓度组MTT吸光度值低于对照组(P < 0.05)。通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,与对照组比较,成骨细胞碱性磷酸酶活性增加(P < 0.05),且0.25 μmol/L 浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著。采用0.25 μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、碱性磷酸酶、I型胶原和连接蛋白43 mRNA和蛋白表达均增加(P < 0.05)。提示辛伐他汀可能通过上调成骨基因和间隙连接蛋白43 mRNA和蛋白的表达来抑制成骨细胞增殖和促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

微弧氧化技术与钛合金表面成骨细胞增殖及骨向分化能力

文题释义：微弧氧化技术：是金属材料表面处理的一种技术,将金属材料(如,镁、铝、钛等)置于特定电解液中,通过弧光放电过程中瞬时的高温和高压条件产生结合于金属表面的陶瓷膜层,该种方法制备的涂层材料具有高硬度、耐磨的特点。 种植体：是针对于人体自身牙齿缺失而植入上下颌骨内的人工牙根。性能优良的种植体需要同时具备高强度、耐降解、生物相容性好的特性。目前复合材料类如金属表面添加陶瓷涂层材料,具有上述多种材料特性而被临床选择。背景：采用普通电化学法可在钛及其合金表面制备纳米级羟基磷灰石涂层,但该涂层吸收降解缓慢,需要8-12周的时间。而微弧氧化可在复杂表面形成均匀薄膜,有利于细胞黏附和骨组织长入。目的：探索微弧氧化羟基磷灰石涂层钛合金对成骨细胞增殖及骨向分化能力的影响。方法：采用电化学法与微弧氧化法分别制备羟基磷灰石涂层钛合金材料,检测两种材料表面的接触角。将成骨细胞系hFOB1.19接种于两组羟基磷灰石涂层钛合金材料表面,培养48 h时,采用扫描电镜观察细胞在材料上的形态变化;培养1,12,24,48,72 h时,采用MTT法检测细胞增殖;培养1,3,5 d时,比较两组材料表面细胞计数与碱性磷酸活性;培养第5天,采用Western Blotting检测细胞内骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白4表达。结果与结论：①微弧氧化组材料表面的接触角小于电化学组[(66.5±2.2)°,(52.8±2.1)°,P=0.001 5)];②扫描电镜显示,电化学组成骨细胞形态不规则,胞体皱缩不饱满,与材料贴合较差;微弧氧化组细胞充分伸展,形态扁平,与材料贴合紧密;③微弧氧化组12-72 h的细胞增殖快于电化学组(P < 0.05),培养3,5 d的细胞计数多于电化学组(P < 0.05);④微弧氧化组培养1,3,5 d的细胞碱性磷酸酶活性高于电化学组(P < 0.05);⑤微弧氧化组骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白4表达均高于电化学组(P < 0.05);⑥结果表明,微弧氧化羟基磷灰石涂层钛合金材料可促进成骨细胞的增殖及骨向分化能力。ORCID: 0000-0003-2787-4667(王艳玲)中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

海人酸对神经干细胞增殖及分化的影响

背景：神经干细胞对脑组织的修复作用非常有限,约80%新增殖的内源性神经干细胞在6周内死亡,仅0.2%的细胞继续增殖、分化,参与修复。 目的：分析不同剂量海人酸在对神经干细胞增殖及分化的影响。 方法：体外分离并培养新生Wistar大鼠神经干细胞,将神经干细胞分为空白对照组和加入不同浓度梯度的海人酸组,通过免疫组化法和免疫荧光法进行鉴定,MTT比色法测定海人酸对神经干细胞分化的影响,计算分化后神经元和星形胶质细胞比例。 结果与结论：海人酸组贴壁的神经球分化速度较空白对照组快,在同一时间点进行观察,神经细胞的迁移距离较未处理组远。分化5 d后,海人酸组所分化的细胞中,星状细胞较空白对照组多,而神经元样细胞相对较少,培养的细胞具有自我更新和向神经元﹑少突胶质细胞和星形胶质细胞分化的潜能。兴奋性氨基酸海人酸可使部分神经干细胞死亡,但可促进幸存的神经干细胞增殖及分化,并诱导其向星形胶质细胞分化。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

不同质量浓度异烟肼对体外培养乳鼠成骨细胞的毒性作用

文题释义： 异烟肼：对结核杆菌有抑制和杀灭作用,其生物膜穿透性好,由于疗效佳、毒性小、价廉、口服方便,故被列为首选抗结核药。该药品常需和其他抗结核病药联合应用,以增强疗效和克服耐药菌。 成骨细胞：主要由内外骨膜和骨髓基质内的间充质始祖细胞分化而来,能特异性分泌多种生物活性物质,调节并影响骨的形成和重建过程。 背景：异烟肼作为抗结核的一线药物,对细胞内外结核菌都具有极强的杀菌效果,但目前还没有研究报道异烟肼对成骨细胞的毒性作用。 目的：探讨不同质量浓度异烟肼对新生SD大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。 方法：将不同质量浓度(0,10,20,30,40,50,60,100 mg/L)异烟肼分别加入新生SD大鼠第3代成骨细胞中,采用CCK-8法、碱性磷酸酶活性试剂盒和免疫荧光染色法检测异烟肼对成骨细胞增殖、分化的影响。 结果与结论：与对照组比较,异烟肼质量浓度在30 mg/L时,成骨细胞增殖开始受到抑制;随着异烟肼质量浓度增高,碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原表达明显降低。结果表明,异烟肼质量浓度过高对成骨细胞增殖和分化具有抑制作用。 ORCID: 0000-0002-8210-9063(陈强) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

牛膝甾酮干预SD乳鼠成骨细胞的增殖与分化

文题释义：牛膝甾酮：牛膝为苋科植物牛膝的干燥根,主要含有甾酮类、皂苷类及多糖类成分,具有调节糖代谢、抗炎、镇痛、降血糖、免疫调节等作用,牛膝甾酮是其活性成分之一,目前尚无文献报道其对成骨细胞的生物学效应。 成骨细胞：由间充质干细胞分化而来,直接参与骨形成,其增殖、分化缺陷是骨质疏松症发病的重要原因,研究表明改善成骨细胞功能可有效治疗骨质疏松症。 背景：促进成骨细胞的增殖以及分化是治疗骨质疏松症的有效手段之一,但关于牛膝甾酮对成骨细胞增殖、分化的影响却没有报道。 目的：研究牛膝甾酮对SD乳鼠成骨细胞增殖、分化的影响及其潜在的分子机制。 方法：通过酶消化法获得SD乳鼠成骨细胞,体外诱导培养并鉴定;采用CCK8法检测不同质量浓度牛膝甾酮(1,5,10 mg/L)对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶染色及碱性磷酸酶活性试剂盒评价成骨细胞的早期分化能力;采用茜素红染色观察钙结节的形成数量,评估成骨细胞的矿化能力;采用实时荧光定量PCR法检测成骨分化标志物的表达水平;采用MDC染色检测自噬小体数量。 结果与结论：①相对于不加药对照组,牛膝甾酮在一定程度上抑制成骨细胞的增殖(P < 0.05),但却能够显著促进碱性磷酸酶活性及矿化结节的形成(P < 0.05),同时上调成骨分化标志物CollagenⅠ、OPG、OPN、OCN的表达水平,此外牛膝甾酮还能够促进自噬小体的形成;②结果提示,牛膝甾酮能够通过上调成骨分化相关基因及刺激自噬体的形成而促进成骨细胞的分化。 ORCID: 0000-0002-2837-6347(姜涛) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Metastatic breast cancer cells suppress osteoblast adhesion and differentiation

Bone is a primary target for colonization of metastatic breast cancer cells. Once present, the breast cancer cells activate osteoclasts, thereby stimulating bone loss. Bone degradation is accompanied by pain and increased susceptibility to fractures. However, targeted inhibition of osteoclasts does not completely prevent lesion progression, nor does it heal the lesions. This suggests that breast cancer cells may also affect osteoblasts, cells that build bone. The focus of this study was to determine the ability of breast cancer cells to alter osteoblast function. MC3T3-E1 osteoblasts were cultured with conditioned medium from MDA-MB-231 breast cancer cells and subsequently assayed for changes in differentiation. Osteoblast differentiation was monitored by expression of osteocalcin, bone sialoprotein and alkaline phosphatase, and by mineralization. Osteoblasts cultured with MDA-MB-231 conditioned medium did not express these mature bone proteins, nor did they mineralize a matrix. Inhibition of osteoblast differentiation was found to be due to transforming growth factor β present in MDA-MB-231 conditioned medium. Interestingly, breast cancer conditioned medium also altered cell adhesion. When osteoblasts were assayed for adhesion properties using interference reflection microscopy and scanning acoustic microscopy, there was a reduction in focal adhesion plaques and sites of detachment were clearly visible. F-actin was disassembled and punctate in osteoblasts cultured with MDA-MB-231 conditioned medium rather than organized in long stress fibers. Taken together, these observations suggest that metastatic breast cancer cells alter osteoblast adhesion and prevent differentiation. These affects could account for the continued loss of bone after osteoclast inhibition in patients with bone-metastatic breast cancer.     

多孔钽棒表面犬骨髓间充质干细胞的附着与增殖

背景：具有高孔隙率及与骨小梁高度相似弹性模量的多孔钽棒,不仅可为股骨头提供有效机械支撑,还可在坏死区域增强再血管化,降低应力遮挡,为骨长入坏死区提供保证。 目的：为评价多孔钽棒的细胞相容性,观察犬骨髓间充质干细胞在多孔钽棒表面的附着与增殖。 方法：采用密度梯度离心法分离培养犬骨髓间充质干细胞,鉴定后取第3代细胞,以1.5×109 L-1的细胞浓度种植在多孔钽棒表面,联合培养5,10,15 d,分别采用倒置显微镜和扫描电镜观察细胞的附着与增殖情况。 结果与结论：①倒置显微镜：1-5 d 培养期内骨髓间充质干细胞开始增殖,材料近周细胞量少,远周细胞量较多;6-10 d 细胞明显增多并逐渐向材料移行,部分细胞贴附于材料边缘;14 d以后细胞连接成片,填充材料周边及凹陷,材料边缘部分区域还可见细胞层叠成团,出现细胞钙化灶。②扫描电镜：联合培养5 d,钽棒表面无细胞附着;联合培养10 d,细胞形态多样,分散在钽棒表面,细胞间无连接,有多个突起;联合培养15 d,细胞呈多角形,数量增多,连接成片,延展良好,可见多孔钽棒上的细胞分泌大量胶原纤维,细胞被大量细胞外基质包围,细胞形态多为梭形及多角形。结果表明犬骨髓间充质干细胞在钽棒表面有较好的黏附与增殖能力。