99mTc标记的新型肺癌多肽分子探针及其生物学分布

目的探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学分布特点。方法采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽(cNGQGEQc),纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相血液放射性清除曲线;分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织百分注射剂量率(%ID/g);经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布变化。结果99mTc标记多肽的标记率>90%,室温下和血清中37℃下放置12 h放化纯度分别为91%和85%;半胱氨酸置换率<7%;血清蛋白结合率<5%。99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速;在小鼠体内清除较快,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低(P<0.05)。结论99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有比较理想的体内分布动力学特性。     

99Tcm标记多肽VEGF125-136及其生物学分布

目的 探讨一种理想的99Tcm标记小分子多肽VEGF125-136的方法,并研究标记物的生物学分布.方法 在合成多肽的过程中直接完成多肽VEGF125-136与双功能螯合剂MAG3的偶联,然后采用正交设计探讨99Tcm的最佳标记条件,并研究标记物稳定性和小鼠体内分布.结果 ①简化了偶联步骤,提高了偶联产率;②最佳标记条件下标记率约78%,经HPLC纯化后放化纯度＞95%,且在室温条件下稳定性好;③ 99mTc-VEGF125-136-MAG3在正常小鼠的血液中清除较快,在肾、肝中摄取较高.结论 以MAG3为螯合剂用99Tcm标记VEGF125-136有良好的标记率.     

99mTc标记葡萄糖99mTc-EC-DG在正常小鼠体内的分布研究

目的研究^99mTc标记葡萄糖99mTc-EC-DG在正常小鼠体内的生物学分布规律,用于临床肿瘤显像作基础研究.方法正常昆明小鼠48只,分8组,每组6只,实验前小鼠禁食8 h以上.尾静脉注射^99mTc-EC-DG 3.7 MBq (100 μCi) 后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h和24 h放血处死,取心、肝、脾、肺、脑、肾、肌肉、骨、小肠、胃和血液等组织或器官,称重并测量其放射性,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g).结果^ 99mTc-EC-DG主要经肾脏代谢,脑不吸收^99mTc-EC-DG,肌肉组织摄取亦较少.各组织、器官的百分剂量率在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降.结论^ 99mTc-EC-DG标记方便,体内外稳定性好,小鼠体内生物学分布表明其可能是一种较好的葡萄糖代谢显像剂.     

^99mTc标记抗人肺癌单克隆抗体3D3

目的 用＾９９ｍＴｃ标记抗人肺癌单克隆抗体３Ｄ３。方法 以ＳｎＣｌ２作为还原剂直接法标记。结果 采用２０μｇＳｎＣｌ２进行标记反应，所得标记抗体标记率高，稳定性好，＾９９ｍＴｃ－胶全含量〈５％。体外免疫荧光分析及放射结合分析提示标记抗体基本保持原抗体的免疫活性，对人肺癌组织有较高的特异性。结论该法度剂简单，快速稳定，还原型抗体可制成药盒形式，有利于临床应用。     

^99mTc—放射性标记药物生物动力学分布的实验研究

应用γ闪烁计数装置探讨Ｎａ＾９９ｍＴｃＯ４（＾９９ｍＴｃ－Ｐ）和＾９９ｍＴｃ－植酸钠（＾９９ｍＴｃ－Ｐｈｙ）在小鼠体内的生物动力学分布，结果显示，以每克组织蓄积的放射性活度计，＾９９ｍＴｃ－Ｐ在注后３０ｍｉｎ以肺脏的含量最多，＾９９ｍｍＴｃ－Ｐｈｙ在肝脏的含量最多，随时间的延续，＾９９ｍＴｃ－Ｐｈｙ在各器官的含量逐渐减少，而在脾脏的蓄积量明显增多，注后６０ｍｉｎ时约为１０ｍｉｎ时的３倍，结果提示，     

^99mTc标记卵巢癌单抗的实验研究

用＾９９ｍＴｃ标记卵巢癌单抗，对标记方法，纯化手段，还原后抗体存时间与标记率关系，标记物免疫活性以及用该标记物对荷瘤裸鼠放免显象进行探讨，提示＾９９ｍＴｃ标记卵巢癌单抗的可行性。     

新型心肌灌注显像剂^99mTc—Q3的标记方法学研究

为获得高质量的心肌灌注显像剂,作者进行了９９ｍＴｃ－Ｎ,Ｎ'－亚乙基－二（乙酰丙 酮亚胺）二「三（３－甲氧基－１－丙基）膦」（＾９９ｍＴｃ－Ｑ３）的制备方法学研究。采用多元正交试验法进行了制备＾９９ｍＴｃ－Ｑ３最佳配方的筛选;用氯化亚锡化学还原法制备＾９９ｍＴｃ－Ｑ３;用柱沉析法进行＾９９ｍＴｃ－Ｑ３的分离和纯化、质量控制及体外稳定性试验;完成了无菌、热原、安全试验及家兔显像验证。制备９９ｍＴｃ－Ｑ     

脂质体介导的99mTc标记c-myc mRNA反义寡聚核苷酸链的生物学特性研究

目的　探索脂质体介导的 99m Tc标记 c- myc m RNA反义寡核苷酸链的生物学特性。方法　合成15 bp的 c- myc m RNA的反义、正义和无义寡核苷酸链 ,用三氯乙酸沉淀测定脂质体包裹的 99m Tc标记的上述寡核苷酸链 (简称为 99m Tc- DNA)和未用脂质体包裹的 99m Tc- DNA的血浆蛋白结合率。用 BAL B/ c小鼠研究不同脂质体包裹的 99m Tc- DNA的生物学分布。用家兔研究脂质体介导的 99m Tc- DNA的药代动力学特性。结果　 99m Tc- DNA的血浆蛋白结合率的范围为 34.81%～ 70 .5 3%。脂质体介导的 99m Tc- DNA的体内分布以网状内皮系统最高 ,胃、血和肠道其次 ,其余组织中放射性分布较少。其药代动力学曲线符合开放二室模型 ,t1 / 2α约为 2～ 5分钟 ,t1 / 2β约为 10 0～15 0分钟 ,血浆清除率小于 2 ml/ min。结论　 99m Tc- DNA的血浆蛋白结合率高 ,脂质体介导的 99m Tc- DNA具有合适的生物半衰期 ,血浆清除快 ,是一种有开发潜力的放射性药物     

99mTc标记抗CEA单抗放射免疫显像的临床研究

目的：采用放射性核素９９ｍＴｃ标记抗癌胚抗原（ＣＥＡ）抗体Ｃ５０进行放射免疫显像（ＲＩ）以探讨其临床应用价值。方法：①对１５２例临床怀疑为各种肿瘤的患者做了ＲＩ检查,包括卵巢肿瘤１１５例,肠道肿瘤２６例和肺肿瘤１１例。②用２巯基乙醇还原法标记９９ｍＴｃＣ５０,其标记率达９０％以上,单抗用量１～１５ｍｇ。③静注地塞米松防过敏,９９ｍＴｃＣ５０静脉注射后４～６ｈ采集平面或断层图像。④以病灶处有放射性浓聚或Ｔ／ＮＴ比值大于１２为阳性判断标准。⑤全部病例均做了病理检查,其中卵巢肿瘤组同时进行了Ｂ超诊断,肠道肿瘤组做了免疫组化实验。结果：９９ｍＴｃＣ５０在恶性病变灶中有较多的滞留,诊断敏感性８８２％,特异性８３２％,准确性为８４９％,转移灶的检出率达８４４％,其诊断效能明显优于Ｂ超。而ＲＩ的质量与血清ＣＥＡ水平无关,与肿瘤的大小、肿瘤细胞ＣＥＡ反应及肿瘤细胞分泌的ＣＥＡ在组织中的分布有关。结论：认为９９ｍＴｃＣ５０ＲＩ对肿瘤的定性诊断和转移灶的检出有价值,是一种安全、简便和实用的影像诊断新方法     

新型核素分子探针18F-NT 靶向 前列腺癌的实验研究

目的 探讨新型核素分子探针18F-NT 在前列腺癌细胞及荷瘤小鼠的靶向性,为后续18F-NT 靶向前 列腺癌的在体显像提供实验依据。方法 制备18F-NT,并完成质量控制检测。选取高表达神经降压素受体1 （NTR1）的人前列腺癌细胞系PC3,分3 组进行细胞结合实验,分别为实验组、阻断组和对照组（游离18F 离 子）。对照组在细胞中加入游离18F 离子,实验组在细胞中加18F-NT,阻断组细胞中加入18F-NT 前30 min 加 入神经降压素（NT）进行阻断。复制荷PC3 前列腺癌裸鼠模型,分为实验组和阻断组,每组3 只。阻断组单次 尾静脉注射NT 0.2 ml（浓度为1 mg/ml）;实验组注射0.2 ml 生理盐水,30 min 后两组裸鼠尾静脉分别注射 37 MBq/ml 的18F-NT 0.2 ml,1 h 后处死裸鼠,分离主要脏器及肿瘤组织,γ 计数器测量各脏器组织的放射性计数。 分析两组肿瘤细胞的放射性计数及肿瘤组织的放射性摄取值（%ID/g）。结果 成功制备18F-NT,其理化性质 及各项质控指标均达标。细胞结合实验显示,PC3 细胞实验组计数值（5 825.00±1 074.52）/min,高于阻断组 （1 941.66±173.58）/min,两者比较,差异有统计学意义（t =7.227,P =0.003）,而对照组计数值仅为（170.33±56.59）/ min;两组荷瘤裸鼠体内生物学分布实验表明,18F-NT 血液清除较快,主要经肾脏代谢。实验组肿瘤摄取值最高, 为（1.02±0.49）%ID/g,阻断组肿瘤摄取值降低,为（0.21±0.03）%ID/g,两者比较,差异有统计学意义（t = 2.815,P =0.049）。结论 18F-NT 标记率和放化纯高,体外稳定性好,前列腺癌细胞系PC3 结合18F-NT 高,PC3 荷瘤裸鼠的肿瘤摄取18F-NT 高,细胞和荷瘤均能被NT 有效阻断,为后续18F-NT 靶向前列腺癌NTR1 在体显 像打下良好的实验基础。     

99Tcm标记Gd-DTPA-DG及其在裸鼠体内的生物分布

目的 探讨锝(99Tcm)标记顺磁性脱氧葡萄糖类MRI对比剂二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖钆盐(Gd-DTPA-DG)的稳定性及在荷瘤裸鼠体内的生物分布,寻找一种核素与磁共振双模式影像探针.方法 对 Gd-DTPA-DG进行99Tcm标记,并对需要的Gd-DTPA-DG、氯化亚锡(SnCl2·2H2O)用量,pH,温度采用正交实验设计,确定最佳标记条件.采用薄层纸层析法(TLC)分析标记率,体外放置6 h,观察标记物的稳定性.将标记的99Tcm -Gd-DTPA-DG注入裸鼠体内,10、30 min及1、2、4、24 h后断头处死裸鼠,测定血液、心脏、脑、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、肌肉、肿瘤中的每克组织百分注射剂量率(%ID/g).结果 取10 mg Gd-DTPA-DG、0.6 mg SnCl2·2H2O,在pH值小于2时加入新淋洗的Na99TcmO4洗脱液(37 MBq),沸水反应30 min所得99Tcm -Gd-DTPA-DG放化纯度最高,可达98.5%,体外放置6 h,放化纯度仍大于96%.尾静脉注射99Tcm -Gd-DTPA-DG 2 h后,裸鼠肿瘤组织的摄取率约为(1.48±0.12)%ID/g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比(T/NT)达2.91.结论 采用放射性核素99Tcm标记顺磁性对比剂Gd-DTPA-DG 简单易行;荷瘤裸鼠模型显示其具有良好的肿瘤靶向性,有望成为一种极具发展潜力的新型单光子发射计算机断层显像(SPECT)-MRI双模式影像探针.     

MicroRNA-155靶向的放射性标记探针对乳腺癌小鼠模型的活体显像

目的：microRNA-155（miR-155）显著高表达于乳腺癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤,本研究旨在构建靶向miR-155的放射性示踪探针对乳腺肿瘤的活体显像。方法：体外化学合成靶向miR-155的反义互补寡核苷酸探针（AMO-155）,并对其进行5′端乙酰基修饰及2′ 甲氧基修饰,进而与双功能螯合剂NHS MAG3偶联后,在氯化亚锡的还原作用下对其标记 99mTc,评价血清稳定性,并对乳腺癌荷瘤裸鼠进行活体显像,对比反义、无义及阻断组的显像差异,并通过实时定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）鉴定肿瘤的miR-155水平。结果：99mTc-AMO-155的制备标记率达97%（n=5）,放射化学纯度大于98%（n=5）,放射比活度约为3.75 GBq/μg。通过对比无义对照组及阻断组,99mTc-AMO-155能够在活体水平特异性地显示miR-155高表达的恶性肿瘤。此外,针对miR-155不同表达水平的肿瘤,99mTc-AMO-155亦可在活体水平反映其表达差异。结论：经化学修饰的99mTc标记的AMO-155探针具有良好的血清稳定性及活体肿瘤靶向识别作用,为肿瘤显像提供了潜在的新型探针。     

IgG三羰基锝[99mTc(CO)3(H20)3+]标记方法及其在动物体内的生物学分布

目的 探索利用fac[99mTC(CO)3(H20)3]+中间体标记IgG的方法,了解99mTc(CO)3(H20)3-IgG在体内外的稳定性,并研究其在小鼠体内的生物分布情况.方法 自行合成fac-(99mTc(CO)3(H20)3]+中间体,并采用聚酰胺薄膜层析法测定其放化产率,利用放化中间体fac-[99mTc(CO)3(H20)3]+直接进行IgG的放射性标记,用纸层析法测定标记率及放化纯度.并分别观察99mTc标记IgG在人血清白蛋白(HSA)及生理盐水(NS)中的稳定性.取9只小白鼠,分别经尾静脉注人99mTc 标记IgG(3.7x104 Bq/100μl),于注药后2,4和12h分别先进行SPECT显像,然后处死小鼠分离各脏器,称重后测定放射性计数,计算各脏器每克组织百分注射剂量(%ID/g),结果fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+中间体的放化产率为82.48%,室温放置4h保持稳定.99mTc(CO)3(H20)3-IgG的标记率为57.04%,放化纯度均大于90%,在HSA中温育24h放化纯度保持稳定,而在NS中温育24h放化纯度则降为20%.体内生物分布显示99mTc(CO)3(H20)3-IgG在体内主要分布于肝、脾、肾,可较长时间存留于血池中.结论 利用放化中间体fac-[99mTc(CO)3(H20)3]+直接进行IgG放射性标记,具有良好的体内、外稳定性,在小鼠组织中分布特点符合IgG体内的放射性分布规律,可满足进一步的单抗及多肽标记的实验要求.     

125I-RC-160的NBS标记法研究及体内生物学分布特征

目的: 研究一种125I直接标记RC-160的简便高效的方法,并观察125I-RC-160在正常小鼠体内的生物学分布特征.方法: 采用N-溴代琥珀酸亚胺(NBS)作为氧化剂,在RC-160定量的反应体系中加入不同量的125I 与NBS,探索标记的最佳反应比例;纯化后产物进行正常小鼠体内生物学分布检测.结果: 反应体系最佳比例为RC-160 ∶125I ∶NBS＝10 μg ∶7.4 MBq ∶30 μg,标记率可达到76.9﹪,经Sep-Pak C18反相色谱柱纯化,放化纯达到95.7﹪;标记产物在血液、心肌、肾脏中清除快,肺脏浓集度最高,肝、脾、胃肠浓集度较高.结论: 本方法步骤简便,标记率高,是一种比较理想的碘标方法,标记肽主要经消化系统代谢.     

11C标记石杉碱甲的制备及其在动物体内的生物学分布

目的:研究11C标记石杉碱甲(HupA)的制备方法及其在大鼠体内的生物学分布.方法:由美国CTI公司RDS 111加速器生产11C-CO2,用碘代甲烷模块将11C-CO2转化成11C-碘代甲烷,再转化为11C-三氟甲基磺酰甲烷后传入到11C-HupA前体的乙醇溶液中,在常温下反应得到产物.SD大鼠静脉给药后不同时间处死,分别取不同器官称量并测定放射性计数.结果:11C-HupA放化合成时间为10-20 min,放化纯度大于98%,比活度47.4GBq/mmol,放化产物相对分子质量为257,稳定性检测2 h内放化纯度>90%,11C-HupA注射液在室温条件下放置5、15、30、60、90和120 min的放化纯度分别为98.2%、97.8%、96.2%、95.7%、93.2%和91.6%.主要质量控制指标达到正电子放射性药物质量要求.11C-HupA进入大鼠体内具有血液清除快的特点,经肝胆系统代谢,肾脏是11C-HupA的主要排泄器官.在大脑皮层、海马、丘脑及脑干分布较多.结论:合成的11C-HupA注射液符合进一步的动物或人体探索性研究要求.     

肝细胞受体显像剂~(99m)Tc-乳糖酸-壳聚糖的制备及在小鼠体内的生物分布分析

[目的]制备99mTc标记的壳聚糖-乳糖酸复合物(99mTc-LA-CS),观察99mTc-LA-CS在正常裸鼠体内的生物分布及去唾液酸糖蛋白受体(ASGP-R)介导的肝细胞靶向作用.[方法]采用氯化亚锡还原法构建99mTc-LA-CS复合物,尾静脉注射给予裸鼠99mTc-LA-CS后分别在10min,60min,2h处死,取血液、肝脏、脾脏、胃、肠、肾脏、肺和肌肉等组织,进行99mTc放射性检测,计算各个脏器每克组织的放射性摄取比率(%ID/g),并进行体内生物分布分析.[结果]99mTc标记率高于93%,生物分布分析结果显示在裸鼠肝脏中有较高的摄取,在60min时,肝脏摄取率高于70%ID/g.[结论]放射性核素99mTc标记的LA-CS在肝细胞中有特异性摄取,提示99mTc-LA-CS可作为ASGP-R介导的肝脏显像剂用于肝细胞成像.     

131I-RP215McAb分子探针的制备、鉴定及荷人肺腺癌裸鼠放射免疫显像

目的 制备靶向肺腺癌细胞表面碳水化合物相关抗原(carbohydrate antigen 215,CA215)的核素分子探针131I-RP215单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像特点.方法 采用氯胺T法对McAb RP215进行131I标记,Sephadex G25M柱纯化标记抗体,并鉴定其理化特性,观察该抗体标记物在荷A549裸鼠模型中的生物分布及放射免疫显像情况.结果 131I-RP215 McAb标记率为(91.03 ±2.36)％,纯化后的放化纯度为(93.15±1.40)％,比活度(3.37±0.42) MBq/μg;具有较好的稳定性及免疫活性.荷瘤裸鼠体内生物分布及SPECT显像结果显示,131 I-RP215 McAb能够在肿瘤组织中选择性浓聚,131I-RP215 McAb作用24h时,肿瘤/肌肉比达最高,且瘤体显影最清晰.结论 成功制备了特性理想的131I-RP215 McAb分子探针,在荷人肺腺癌裸鼠模型中有较好的显像效果.     

孕激素受体靶向聚乳酸-羟基乙酸-超顺磁性氧化铁分子探针的制备及其性能

目的：探讨载孕激素受体（PR）靶向聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）-超顺磁性氧化铁（SPIO）及全氟己烷（PFP）分子探针（PR-s-PFP/PLGA）的构建方法及其对乳腺癌细胞体外靶向结合的可行性。方法：制备s-PFP/PLGA纳米颗粒,检测s-PFP/PLGA纳米颗粒的直径和平均电位。细胞毒性实验不同浓度s-PFP/PLGA条件下检测各组细胞相对增殖率（RGR）。观察不同浓度s-PFP/PLGA纳米颗粒的体外磁共振成像（MRI）、体外光声成像和体外超声成像,高强度聚焦超声（HIFU）检测s-PFP/PLGA纳米颗粒辐照后回声强度值。采用碳二亚胺法制备PR-s-PFP/PLGA探针,体外培养高表达PR的乳腺癌细胞株T-47d,将DiO绿色荧光标记的T-47d细胞分为靶向显像剂组、非靶向组和空白对照组,观察探针与各组细胞的结合情况。结果：透射电镜下s-PFP/PLGA呈球形,SPIO颗粒均匀分布在外壳上,平均粒径为（738.5±181.2） nm,平均电位为（-15.8±5.7） mV,并检测到明显光声信号。体外超声显像中s-PFP/PLGA纳米颗粒呈点状高回声,HIFU辐照后其回声强度值增大。s-PFP/PLGA纳米颗粒在T1加权图像上的信号得到增强。在激光扫描共聚焦显微镜下,靶向显像剂组被T-47d细胞吞噬的s-PFP/PLGA纳米颗粒发出红色荧光。结论：PR-SPIO-PLGA具有优良的理化性质及稳定性,生物安全性好,肿瘤靶向结合能力强。     

乳腺癌特异性磁共振分子探针的制备及体外实验

目的：制备针对乳腺癌细胞表面生长激素抑制素受体(somatostatin receptor, SSTR)的特异性磁共振分子探针,探讨其理化性质及体外成像特征。方法：采用化学偶联法,将超顺磁性氧化铁颗粒（superparamagnetic iron oxide, SPIO）与生长激素抑制素类似物奥曲肽(octreotide, OCT)偶联,制备特异性磁共振分子探针SPIO-OCT。用MTT法分析不同浓度探针对标记细胞生长增殖的影响,普鲁士蓝染色评价其细胞磁性标记情况,并对不同浓度的探针、不同数目的标记细胞行体外磁共振成像。细胞磁性标记对照组采用超顺磁性氧化铁颗粒（Resovist）。结果：细胞被分子探针磁性标记后,胞质内可见蓝染颗粒,且探针标记浓度越高,胞质内蓝染颗粒越多;分子探针细胞阳性标记率达96.15%,高于对照组（80.00%）;MTT结果显示,不同浓度的探针对细胞增殖影响差异无统计学意义（P＞0.05）;探针在Fe²⁺ 浓度为20 mg/L时,T₂WI呈明显低信号、无磁敏感伪影,此浓度标记的细胞数量越多,T2WI信号降低越明显,6×10⁶个磁标记细胞T₂WI上呈显著低信号。结论：磁共振分子探针SPIO-OCT可安全、高效标记SSTR表达阳性的乳腺癌细胞,其理想标记和成像浓度为Fe²⁺ 20 mg/L,体外核磁信号强度可在一定程度上反应磁标记细胞的数量。