松质骨基质材料应用于牙周组织工程的可行性*☆

背景：松质骨基质材料具有骨诱导性和骨传导性双重特性,已被成功应用于骨再生及骨组织工程研究。 目的：分析松质骨基质材料的细胞相容性与毒性,探讨其应用于牙周组织工程的可行性。 方法：采用改良组织块法体外培养人牙周膜细胞,将其接种于松质骨基质三维支架上复合培养,采用细胞计数方法和扫描电镜观察人牙周膜细胞在松质骨基质支架上的附着、生长情况,并通过MTT测试法和碱性磷酸酶活性检测法观察松质骨基质浸提液对人牙周膜细胞增殖及功能表达的影响。 结果与结论：扫描电镜可见松质骨基质具有良好的多孔网状结构,人牙周膜细胞在松质骨基质上贴附紧密,生长旺盛,伸展充分,而人牙周膜细胞在不同浓度材料浸提液中的生长、增殖及碱性磷酸酶活性与阴性对照组相比差异无显著性意义。表明松质骨基质具有良好的三维空间结构和细胞相容性,且无细胞毒性,有望应用于牙周组织再生及牙周组织工程研究。     

珊瑚转化羟基磷灰石应用于牙周组织工程的细胞相容性和细胞毒性**☆

背景：经处理后的珊瑚转化羟基磷灰石具有良好的生物相容性和可降解性,其三维相通的孔隙结构不仅可为种子细胞的黏附、增殖提供足够的内部空间和表面积,而且有利于营养成分的渗透和血管化形成。 目的：对珊瑚转化羟基磷灰石进行细胞相容性和细胞毒性的研究,以初步探讨其应用于牙周组织工程的可行性。 方法：将体外培养的人牙周膜细胞接种到珊瑚转化羟基磷灰石支架上体外三维复合培养,通过细胞计数方法和扫描电镜观察人牙周膜细胞在珊瑚转化羟基磷灰石支架上的附着、生长情况,并设立阴性对照组和阳性对照组,采用MTT测试法和碱性磷酸酶活性检测法评估稀释浓度分别为100%,50%,10%,1%的珊瑚转化羟基磷灰石浸提液对人牙周膜细胞增殖及功能表达的影响。 结果与结论：珊瑚转化羟基磷灰石具有良好的多孔网状结构,人牙周膜细胞在珊瑚转化羟基磷灰石支架上生长旺盛,伸展充分,而不同浓度的材料浸提液对人牙周膜细胞的生长、增殖及碱性磷酸酶活性的影响差异均无显著性意义。提示珊瑚转化羟基磷灰石具有良好的三维空间结构和细胞相容性,且无细胞毒性,有望用作牙周组织工程的支架材料。关键词：珊瑚转化羟基磷灰石;细胞相容性;细胞毒性;支架材料;组织工程 缩略语注释：CHA：coral hydroxyapatite,珊瑚转化羟基磷灰石;HPDLCs：human periodontal ligament cells,人牙周膜细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.16.025      

丝蛋白应用于牙周组织工程的可行性

背景：丝蛋白是有利于表皮细胞、成纤维细胞、成骨细胞、血管内皮细胞、胶质细胞黏附和生长的一种新型生物材料。 目的：评估丝蛋白作为支架材料应用于牙周组织工程的可行性。 方法：采用组织块法培养人牙周膜细胞,将第5代细胞悬液以2×10⁷ L^-1的浓度接种到丝蛋白支架材料上复合培养,并以1%,10%,50%,100%的丝蛋白支架浸提液培养,观察人牙周膜细胞在丝蛋白上及在丝蛋白浸提液中生长状况,用MTT法测定浸提液培养人牙周膜细胞的活力。 结果与结论：扫描电镜可见人牙周膜细胞在丝蛋白支架上伸展充分,生长旺盛,不同浓度丝蛋白支架浸提液培养对人牙周膜细胞的增殖与碱性磷酸酶活性均无影响。说明丝蛋白材料具有良好的生物相容性、独特的力学性能,可作为人牙周膜细胞黏附生长的理想支架材料较好地应用于牙周组织工程中。     

大鼠成骨细胞与壳聚糖/羟基磷灰石复合支架降解产物的生物相容性

背景：人们对壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架在体内的降解过程并非十分清楚,而且有关其降解产物对成骨细胞的影响研究也较少。 目的：分析大鼠成骨细胞与壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物的生物相容性。 方法：将培养的第2代大鼠成骨细胞分别在壳聚糖/羟基磷灰石复合支架降解产物浸提液和含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液中培养,培养第2,4,6,8,10天分别对两组细胞做MTT细胞计数,采用联合会推荐法测定细胞碱性磷酸酶活性,采用BCA蛋白定量法测定总蛋白。 结果与结论：在壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架降解产物浸提液中培养的大鼠成骨细胞增殖速度、细胞碱性磷酸酶活性、细胞总蛋白合成及碱性磷酸酶与总蛋白的比值明显高于在体积分数为10%胎牛血清DMEM培养液中培养的细胞(P < 0.05)。表明壳聚糖/羟基磷灰石复合多孔生物支架的降解产物不仅可促进大鼠成骨细胞的黏附、生长和增殖,还可增强其骨化功能,具有较好的生物相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

壳聚糖/磷酸三钙复合组织工程支架材料的制备及其性能*

背景：通过适当的工艺混合、加工来制备复合支架材料,可以弥补单一材料的不足,最大限度地满足组织工程的需要。 目的：制备壳聚糖/磷酸三钙复合支架,探讨其作为牙髓组织工程支架材料的可行性。 方法：壳聚糖粉末溶于微量冰醋酸溶液中,搅拌均匀,静置脱泡,预冷冻,交联,再次冷冻制成海绵状多孔壳聚糖/磷酸三钙支架。 结果与结论：冻干法制备的壳聚糖/磷酸三钙多孔支架平均孔隙率达85.78%,最高孔隙率达90%以上,孔径在100~300 μm,复合后的支架材料具有良好的韧性,当轴向压缩变形量超过5 mm时,材料仍然没有发生破坏。材料浸提液与牙髓细胞复合培养后,细胞毒性均为0级,由此可见壳聚糖/磷酸三钙复合材料具有良好的生物相容性、细胞亲和性和一定的力学性能,满足生物材料基本要求。     

双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞的生物相容性

背景：静电纺织制备的纳米纤维支架形态结构与天然细胞外基质相似,为细胞的生长、增殖提供了良好的微环境,可增强细胞的黏附、迁移、增殖及分化功能。 目的：观察双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞的生物相容性。 方法：采用静电纺织技术制备双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架。MTT法评估不同浓度(100%、75%、50%、25%)双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架浸提液对人牙周膜细胞的毒性;将双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架与人牙周膜细胞共培养,以MTT法检测细胞的早期黏附能力,扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。 结果与结论：不同浓度双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架浸提液对人牙周膜细胞无毒性。共培养2,6,24 h,人牙周膜细胞在双层左旋聚乳酸静电纺织纳米纤维支架上的黏附能力较差。复合培养7 d,人牙周膜细胞在支架疏松面黏附良好,并保持原有的形态,伸展良好,伸出突起相互连接;在支架致密面呈复层生长,胞体呈梭形、多角形,连接成片。表明双层左旋聚乳酸静电纺织纳米支架与人牙周膜细胞具有良好的生物相容性。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

聚L-乳酸合成新型烧伤材料的生物相容性

背景：最近有研究表明,高分子聚合物聚L-乳酸具有很好的生物相容性,可直接参与人体代谢且无任何不良反应,是一种可用作生物支架的高分子材料。目的：验证高分子聚合物聚L-乳酸的生物相容性。方法：检测胶原复合物及聚L-乳酸的吸湿性能。分别以正常HDMEM培养基、HDMEM培养基+二甲基亚砜、HDMEM培养基+胶原复合物浸提液、HDMEM培养基+聚L-乳酸浸提液培养C3H10T1/2细胞,72 h后观察细胞形态变化。MTT法检测聚L-乳酸浸提液、二甲基亚砜、胶原复合物浸提液对C3H10T1/2细胞的毒性。在兔血中分别加入生理盐水、蒸馏水、聚L-乳酸浸提液及胶原复合物浸提液,检测溶血度。通过兔耳缘静脉分别注射生理盐水、聚L-乳酸浸提液、二甲基亚砜及胶原复合物浸提液,观察过敏反应、热源反应。将胶原复合物及聚L-乳酸分别植入兔背部皮下,4周后检测血清中炎性因子白细胞介素10和白细胞介素23的水平。结果与结论：胶原复合材料单位质量和单位面积的吸湿率均明显低于聚L-乳酸材料(P < 0.05)。在聚L-乳酸浸提液中培养的C3H10T1/2细胞生长状态良好,细胞相对增殖率高,材料毒性为1级;聚L-乳酸材料溶血率较低,无过敏反应及热源反应,植入体内后的炎症反应低于胶原复合材料(P < 0.05)。证实聚L-乳酸新型皮肤烧伤支架材料具有良好的吸收伤口液体性能及生物相容性。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

不同配比壳聚糖/聚磷酸钙复合支架应用于半月板的生物相容性研究

目的评价对比不同配比壳聚糖/聚磷酸钙复合支架的体外生物相容性,观察半月板纤维软骨细胞在不同配比支架材料上的生长情况,选出最佳配比CS/CPP生物材料用于半月板的治疗。方法利用ADA将CS与CPP混合液交联,制备不同配比的CS/CPP复合支架材料。采用扫描电镜检测半月板细胞在支架材料上的生长情况。采用MTT法检测不同配比CS/CPP支架材料浸提液的毒性,通过细胞接种的方法评价支架材料的生物相容性。结果扫描电镜下,CS/CPP复合支架材料均呈三维多孔结构;细胞在支架材料上粘性良好,分布均匀,生长良好,其中配比为3∶7CS/CPP复合支架材料上细胞粘性最好,黏附细胞数量最多。不同配比CS/CPP复合支架材料不同浓度浸提液的毒性均不高于1级,全部合格,配比为3∶7CS/CPP复合支架材料浸提液细胞相对增殖高、毒性小,细胞相容性最好,与其它配比相比,差异有统计学意义(0.05)。结论不同配比壳聚糖/聚磷酸钙均具有良好的细胞相容性,其中配比为3∶7CS/CPP复合支架材料生物相容性最好,有望成为组织工程半月板的支架载体。     

新型壳聚糖基仿生支架材料生物相容性的评价

目的: 评价新型壳聚糖基仿生支架材料的生物相容性.方法: 采用仿生学方法,将壳聚糖、明胶、果胶按一定比例制成新型壳聚糖基仿生支架材料.体外培养骨髓间充质干细胞(MSCs)并与支架材料复合培养,通过倒置相差显微镜、H-E染色、扫描电镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的生物相容性.结果: 新型壳聚糖基仿生支架材料呈半透明薄膜状.MSCs接种在支架材料上,倒置相差显微镜观察到细胞在材料上贴附、生长良好、增殖旺盛;H-E染色显示细胞胞质丰富,核卵圆形,可见1～2个清晰的核仁;扫描电镜可见细胞伸出多个伪足样突起,互相连接,并分泌大量细胞外基质;MTT法检测细胞活性显示仿生材料组吸光度值与对照组比较差异无统计学意义.结论: 新型壳聚糖基仿生支架材料蕴涵丰富的生物信息,细胞毒性小,生物相容性好,是一种很好的组织工程支架材料.     

聚乳酸/壳聚糖多孔支架材料的生物学性能评价

通过过敏试验、热原试验和细胞培养与毒性试验，对聚乳酸(PLA)／壳聚糖多孔支架材料进行了生物学评价。结果显示，聚乳酸／壳聚糖复合三维多孔材料均呈阴性，符合ISO 10993-1标准，细胞能在材料表面更好的贴附和生长。所以，本材料具有良好的生物相容性，可以用作细胞支架材料植入体内。     

左旋聚乳酸羟基磷灰石生物材料与牙周膜细胞的生物相容性

BACKGROUND: Hydroxyapatite/poly-L-lactic acid composite can well improve the brittleness and mechanical properties of the hydroxyapatite. OBJECTIVE: To study the biocompatibility of hydroxyapatite/poly-L-lactic acid composite biomaterials with periodontal ligament cells. METHODS: Passage 4 human periodontal ligament cells at a density of 5×109/L were cultured with hydroxyapatite/poly-L-lactic acid composite as experimental group, and human periodontal ligament cells cultured alone as control group. Cell proliferation was detected within 7 days of culture; alkaline phosphatase activity was detected at 24, 48 and 72 hours of culture; and type I collagen expression was detected at 72 hours of culture. RESULTS AND CONCLUSION: There was no significant difference in the absorbance value of cells between the two groups at 1-7 days of culture. The alkaline phosphatase activity of cells at 48 and 72 hours was significantly higher than that at 24 hours (P < 0.05) in the two groups, but there was no difference between the two groups. The expression of type I collagen had no difference between the two groups. These findings indicate that the hydroxyapatite/poly-L-lactic acid composite biomaterial has good cell compatibility.      

左旋聚乳酸羟基磷灰石材料上人牙周膜细胞的生长

BACKGROUND: In constructing tissue-engineered periodontium in vitto, the effective combination of seed cells with scaffold materials is the key to promote the quality of tissue-engineered periodontium, in which human periodontal ligament cells are commonly used. OBJECTIVE: To explore the growth of human periodontal ligament cells on the poly-L-lactic acid hydroxyapatite. METHODS: Human periodontal ligament cells were isolated and cultured in vitro, and passage 3 cells were chosen to be randomly divided into two groups: cells cultured alone as control group, and cultured with poly-L-lactic acid hydroxyapatite as experimental group. After 1, 2 and 3 days, alkaline phosphatase activity and expression of type III collagen in the two groups were detected, and the cell growth curve was depicted using MTT method. RESULTS AND CONCLUSION: By immunohistochemical staining, cultured cells were positive for vimentin and alkaline phosphatase staining and negative for anti-keratin staining, indicating that the cells were identified as human periodontal ligament cells. By MTT method, there was no significant difference in the absorbance value of two groups at different time points (P > 0.05). And after 1, 2 and 3-day co-culture, the alkaline phosphatase activity levels showed no significant difference between two groups (P > 0.05). Besides, no significant difference in the absorbance value of type III collagen was found in the two groups (P > 0.05). To conclude, the human periodontal ligament cells can grow and proliferate well on the poly-L-lactic acid hydroxyapatite scaffold with no cytotoxicity.     

Evaluation of biomimetic scaffold of gelatin-hydroxyapatite crosslink as a novel scaffold for tissue engineering: biocompatibility evaluation with human PDL fibroblasts, human mesenchymal stromal cells, and primary bone cells

Biomimetic gelatin (gel)-hydroxyapatite (HA) composites have been prepared for studying hard tissue engineering scaffolds. However, the biocompatibility test of this form of material using these three cell types, which are periodontal ligament (PDL) fibroblast cells, human mesenchymal stromal cells (HMSc) and primary cells from human hip bone (HBc) has never been evaluated. The objective of this article is to prepare and evaluate the biocompatibility of gel-HA crosslinked scaffold for tissue engineering. Two different scaffolds were prepared: preparation (1), 2.5% gel/2.5% HA; preparation (2), 2.5% gel/5% HA. Three cell types including PDL, HMSc, and HBc were used. Assessment of biocompatibility and osteoblastic cellular responses was evaluated using a three-dimensional cell culture method and scanning electron microscopy (SEM). From SEM, it was observed that scaffold (1) exhibits stable porous formation with well-blended and dispersed HA powder. All three cell types were able to proliferate in both scaffolds. The HMSc and HBc got attached to the scaffolds to a significantly higher degree and subsequently proliferated more than PDL. The alkaline phosphatase (ALP) activities of HMSc and HBc were stronger when cultured in scaffold (S1) than (S2). It was seen that the two scaffold preparations show good biocompatibility with all three cell types tested. The better cellular responses with scaffold (S1) than (S2) might be due to the different structural and morphological characteristics, that is, scaffold (S1) retained more small-sized apatite crystals and a better developed pore configuration than scaffold (S2). Based on these findings, the biomimetically synthesized composite scaffolds have the potential to be used in hard tissue regeneration and tissue engineering fields.     

胶原蛋白支架对载杜仲叶提取物处理的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的作用

文题释义：杜仲：是中国特有的杜仲科植物,其活性成分具有促进某些间充质干细胞的增殖,调节骨代谢和促进骨生成,同时抑制骨吸收,并加速骨痂改建的药理作用。临床上,杜仲主要用于预防和治疗骨质疏松症、骨关节炎和骨折等疾病。 人牙周膜干细胞：一种来自牙周韧带的多能间充质干细胞,具有良好的自我更新和多向分化潜能。通过不同的体外诱导条件刺激,它可以分化成骨样细胞、软骨样细胞、牙周韧带细胞、脂肪样细胞和神经元样细胞,并且就细胞来源而言,它是用于牙周组织再生的优选种子细胞。 背景：胶原蛋白支架是一种良好的组织工程材料,但目前其对于载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞的生物相容性、增殖及成骨活性的影响尚未有报道。 目的：通过对载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架的体外共培养,研究人牙周膜干细胞在支架材料上的形态特征、黏附情况、增殖及成骨分化功能。 方法：将载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架体外共培养作为实验组,以人牙周膜干细胞与胶原蛋白支架的共培养作为阳性对照组,无支架的人牙周膜干细胞常规培养作为空白对照组。 结果与结论：①扫描电镜下可见,实验组支架上有大量人牙周膜干细胞附着,且细胞突触与支架紧密相连,生长状态良好,细胞间相互接触、紧密相连;②共培养4,8和12 h后,实验组和阳性对照组人牙周膜干细胞的黏附率均呈上升趋势,实验组黏附率高于阳性对照组(P < 0.05);③MTT结果显示,复合培养3,5和7 d后,实验组的细胞吸光度值高于阳性对照组(P < 0.05);④成骨诱导7,14 d后,实验组碱性磷酸酶活性高于阳性对照组(P < 0.05);⑤RT-PCR检测结果显示,成骨刺激作用21 d后,实验组和阳性对照组中成骨相关基因Runx2、OPN和OCN的表达显著高于空白对照组(P < 0.01),实验组上述基因的表达均高于阳性对照组(P < 0.05);⑥上述数据说明,胶原蛋白支架对于载杜仲叶提取物的人牙周膜干细胞具有较好的生物相容性,复合培养后可保持细胞形态、促进其增殖及成骨分化功能。 ORCID: 0000-0002-6784-9979(刘焱) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙周膜细胞的作用

背景：碱性成纤维细胞生长因子是具有多功能的细胞生长因子,对来源于中胚层及神经外胚层的细胞有明显的促进增殖作用。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙周膜细胞的作用。 方法：将第5代人牙周膜细胞,以1×108 L-1的浓度分别接种到96孔板,随机分成4组,分别加入含0,1,10,100 μg/L的碱性成纤维细胞生长因子、体积分数为15%胎牛血清的α-MEM培养基进行培养。在第1,3,5,7天测定细胞的增殖情况,在第1,7天检测碱性磷酸酶活性。 结果与结论：4组之间人牙周膜细胞增殖情况的差异有显著性意义(F=6.586,P=0.024),随着碱性成纤维细胞生长因子质量浓度的增大,吸光度值均增大,其中100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子组的吸光度值均大于其他组(P < 0.05);碱性成纤维细胞生长因子各组的碱性磷酸酶活性均低于对照组(P=0.000),浓度越大,活性越低(P < 0.05)。结果显示碱性成纤维细胞生长因子在1-100 μg/L范围内质量浓度越高,促进人牙周膜细胞增殖和抑制碱性磷酸酶活性的作用越强。     

胶原-纳米羟基磷灰石复合支架的细胞相容性

背景：观察成骨细胞在生物材料上的形态、增殖和分化等项目,可评估生物支架材料的生物相容性。 目的：观察复合支架材料纳米羟基磷灰石/胶原对成骨细胞增殖、分化的影响。 方法：取新生24 h内Wistar大鼠的颅盖骨,采用改良胶原酶消化法进行成骨细胞原代培养,取第3代细胞与纳米羟基磷灰石/胶原支架或普通羟基磷灰石材料体外复合培养。培养3,6,9 d后,观察材料周边的细胞形态及支架材料对细胞分化、增殖的影响。 结果与结论：纳米羟基磷灰石/胶原材料较普通的羟基磷灰石材料更有利于成骨细胞的黏附、生长、分化、增殖,证实其生物相容性更好,有望成为一种新型的骨组织工程支架材料。     

牙周膜干细胞成骨分化中细胞因子的作用

背景：牙周膜干细胞是牙周组织中的成体干细胞,具有高度增殖、自我更新能力和多分化潜能。促进牙周膜干细胞向成骨细胞分化有助于牙周疾病的治疗。 目的：观察胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2对牙周膜干细胞向成骨细胞分化的影响。 方法：采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞,经体外鉴定、扩增后,通过倒置显微镜、苏木精-伊红染色、流式细胞仪对牙周膜干细胞进行生物学检测。分别在成骨细胞诱导培养液中加入成骨诱导液(对照组)及胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2持续诱导7,14 d后,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测,以及茜素红染色,并用实时定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因的表达情况。 结果与结论：胰岛素样生长因子1刺激组的碱性磷酸酶活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx2、Alp、col-1的mRNA呈高表达;成纤维细胞生长因子2刺激组的碱性磷酸酶活性以及钙化结节也高于对照组,Runx2、Alp、col-1的mRNA表达量也高于对照组。提示胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2在不同程度上促进体外培养的牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化。     

柿鞣质水提取液对牙周膜细胞增殖的影响

背景：柿果实中含有丰富的鞣质类物质,鞣质具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、保护黏膜及收敛等多重种功效,其在口腔领域的实用性和安全性已得到多方面的认证。 目的：观察不同浓度的柿鞣质水提取液对牙周膜细胞增殖的影响。 方法：将青少年因正畸需要拔除的前磨牙放置于无菌的含有DMEM培养基中,体外培养牙周膜细胞。对全柿果实进行超声提取,牙周膜细胞与不同质量浓度(0.013 3,0.025 9,0.038 9,0.088,0.147,0.440,0 g/L)的柿鞣质水条件培养液分别培养24,48,72 h后,采用MTT法、考马斯亮蓝法和碱性磷酸酶法分别观察不同质量浓度柿鞣质水提取液在不同时间点对牙周膜细胞数量、细胞总蛋白合成以及细胞活性的影响。 结果与结论：在24,48,72 h 3个时间点,各质量浓度柿鞣质水提取液(0.013 3,0.025 9,0.038 9,0.08 8,0.147及0.440 g/L)均能促进人牙周膜细胞数量增长,促进蛋白质的合成,并使得细胞活性增强,且效应呈浓度依赖性和时间依赖性。结果提示柿鞣质水提取液具有促进人牙周膜细胞增殖的作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程      

Three-dimensional nanohydroxyapatite/chitosan scaffolds as potential tissue engineered periodontal tissue

The development of suitable three-dimensional scaffold for the maintenance of cellular viability and differentiation is critical for applications in periodontal tissue engineering. In this work, different ratios of porous nanohydroxyapatite/chitosan (HA/chitosan) scaffolds are prepared through a freeze-drying process. These scaffolds are evaluated in vitro by the analysis of microscopic structure, porosity, and cytocompatibility. The expression of type I collagen and alkaline phosphatase (ALP) activity are detected with real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). Human periodontal ligament cells (HPLCs) transfected with enhanced green fluorescence protein (EGFP) are seeded onto the scaffolds, and then these scaffolds are implanted subcutaneously into athymic mice. The results indicated that the porosity and pore diameter of the HA/chitosan scaffolds are lower than those of pure chitosan scaffold. The HA/chitosan scaffold containing 1% HA exhibited better cytocompatibility than the pure chitosan scaffold. The expression of type I collagen and ALP are up-regulated in 1% HA/chitosan scaffold. After implanted in vivo, EGFP-transfected HPLCs not only proliferate but also recruit surrounding tissue to grow in the scaffold. The degradation of the scaffold significantly decreased in the presence of HA. This study demonstrated the potential of HA/ chitosan scaffold as a good substrate candidate in periodontal tissue engineering.