慢性再生障碍性贫血患者间充质干细胞对T细胞的抑制作用

目的比较来源于正常志愿者和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)免疫抑制作用的区别。方法培养5例正常志愿者和10例CAA患者的骨髓MSCs,比较两组MSCs的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过PHA刺激的T细胞增殖试验、混合淋巴细胞培养和T细胞周期检测比较两组MSCs对T细胞的抑制作用。结果两组MSCs形态、表型基本相同。CAA来源的MSCs对PHA和同种异体抗原诱导的T细胞的抑制作用均低于正常志愿者来源的MSCs,加入正常志愿者的MSCs后有更多的T细胞阻滞在G0/G1期,但CAA来源的MSCs作用较弱。两组MSCs表达的肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子(TGF-β2)无明显区别,但CAA患者的MSCs表达的TGF-β1、3较正常志愿者MSCs表达的明显减少。结论虽然CAA的MSCs在形态、增殖和细胞表型上基本正常,但其对T细胞的抑制作用减弱,在经过免疫抑制剂治疗后仍然存在,其异常是否与CAA的发病机制有关需要进一步研究。     

骨髓间充质干细胞抑制再生障碍性贫血患者外周血T细胞增殖的实验研究

背景：既往研究发现骨髓间充质干细胞具有免疫抑制作用,而再生障碍性贫血患者存在T淋巴细胞异常活化及增殖。 目的：体外分析骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞增殖的抑制作用。 方法：分离再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞,行羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA SE)荧光染色,与体外培养扩增的骨髓间充质干细胞按3︰1比例直接接触法及Transwell法共培养,加入植物血凝素(PHA)刺激T淋巴细胞增殖,并设阴性及阳性对照。流式细胞术检测各组T细胞增殖情况,评价骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞增殖的影响。 结果与结论：CFDA SE染色分析显示,直接接触组T细胞增殖较阳性对照组明显减低(P < 0.01);Transwell组T细胞增殖亦较阳性对照组减低(P < 0.05);直接接触组T细胞增殖较Transwell组明显减低(P < 0.01)。骨髓间充质干细胞可能通过直接接触及分泌某些细胞因子方式抑制再生障碍性贫血患者异常增殖的T细胞,以直接接触方式发挥主要作用。     

重型再生障碍性贫血患者骨髓T细胞克隆的初步研究

目的建立源于重型再生障碍性贫血(重型再障)患者骨髓的T淋巴细胞克隆,以便研究该病的发病机理.方法用免疫分选法分别从1名初诊重型再障患者及对照的骨髓中富集CD34+和CD3+细胞.将CD3+细胞作反应细胞、照射过CD34+细胞作刺激细胞,进行14d单向自身混合淋巴细胞培养.对活细胞作有限稀释和单个细胞分孔接种,与含IL-2和PHA-P的饲养细胞体系共培养.观察挑选细胞生长孔,计算接种率,用泊松(Poisson)分布初步判断单个细胞分离过程成功与否.而后将阳性孔细胞作转孔培养,定期用饲养抚育刺激、常规用IL-2支持增殖以扩大各克隆的数量.用SABC-P免疫细胞化学染色法,初步鉴定各克隆CD4/CD8抗原表型.结果自身混合淋巴细胞培养后的活细胞数,病例为4×103,对照为65.单细胞分离接种培养后,对照组的细胞生长孔数为0;而病例组的培养板上,共有11孔发生细胞增殖,相应的实际接种率是2.1%,未超出Poisson理论接种率值范围(＜26%),判明平均每个增生孔的细胞克隆前体数不大于1.这11个克隆中,9个呈CD4单阳性表型,阳性为98%;2个为CD8单阳性表型,阳性率为98%.结论从1例重型再障患者骨髓中分离出了11株T淋巴细胞克隆.进一步鉴定分析这些克隆的表型和特异性,以及探讨其Th1(Tc1)/(Th2)(Tc2)效应类型等功能表现,对研究重型再障的免疫学机理具有积极的意义.     

人脐带间充质干细胞对再生障碍性贫血患者Treg细胞的影响

目的:研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对再生障碍性贫血患者Treg细胞的影响,探讨其对再生障碍性贫血(AA)可能的治疗作用。方法:取传代培养第7代的hUC-MSC,密度梯度离心法分离AA-PBMC,分为3组:空白组(hUC-MSC),对照组(AA-PBMC),实验组(分别以1∶10、1∶1及10∶1的比例将hUC-MSC与AA-PBMC共培养7天),RT-PCR法测定Foxp3mRNA的相对表达量(Foxp3/β-actin),3色流式细胞仪测定Treg细胞(CD4+CD25+Foxp3+)占外周血CD4+T细胞的比例。结果:hUC-MSC不表达Foxp3mRNA,无Treg细胞存在。实验组Foxp3mRNA相对表达量、Treg细胞占外周血CD4+T细胞比例高于对照组(P<0.05),hUC-MSC与AA-PBMC比例为10∶1时,差异更显著(P<0.01)。结论:人脐带间充质干细胞体外可增加再生障碍性贫血患者Treg细胞占CD4+T细胞比例,为临床治疗提供新的理论依据;其来源广泛,目前已产业化,具有广阔的临床应用前景。     

间充质干细胞对再生障碍性贫血患者造血支持及T淋巴细胞分泌功能的影响

BACKGROUND: Recently, the role of mesenchymal stem cells in aplastic anemia has been widely explored. However, its underlying mechanism remains unclearly.OBJECTIVE:To study the effect of umbilical cord blood and bone marrow mesenchymal stem cells on hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes in patients with aplastic anemia.METHODS:Cord blood and bone marrow samples from 48 cases of aplastic anemia and 48 healthy lying-in women to isolate mesenchymal stem cells using flow cytometry. Mesenchymal stem cells from the cord blood and bone marrow were respectively co-cultured with cord blood mononuclear cells to count burst forming units-erythroid and colony forming units-granulocyte/macrophage. Mesenchymal stem cells were co-cultured with T lymphocytes from aplastic anemia patients undergoing phytohemagglutinin stimulation, and ELISA was used to detect interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ levels secreted from T lymphocytes.RESULTS AND CONCLUSION: The number of burst forming units-erythroid and colony forming units-granulocyte/macrophage significantly increased in normal bone marrow or umbilical cord blood mesenchymal stem cells co-cultured with cord blood mononuclear cells (P < 0.05), but reduced remarkably in umbilical cord blood mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients co-cultured with cord blood mononuclear cells (P < 0.05). Levels of interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ from T lymphocytes were inhibited significantly after co-culture with normal bone marrow mesenchymal stem cells compared with phytohemagglutinin-induced T lymphocytes (P < 0.05). There was a similar inhibitory effect after co-culture with normal umbilical cord blood mesenchymal stem cells. There was a significantly reduction in the capacity of inhibiting interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ levels from T lymphocytes after co-culture with bone marrow mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients (P < 0.05). Aplastic anemia patients show some functional defects in their bone marrow mesenchymal stem cells that have a weaker inhibitory role than normal bone marrow or umbilical cord blood mesenchymal stem cells in the hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes. These findings indicate that mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients can influence the pathological progress through weakening hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人骨髓间充质干细胞及条件培养液对异体T淋巴细胞分泌功能的影响

背景：骨髓间充质干细胞具有支持造血、多向分化及免疫调节作用,后者在异基因造血干细胞移植尤其是HLA半相合造血干细胞移植后移植物抗宿主病中具有潜在的应用价值,但其免疫调节作用的机制不清。 目的：体外观察人骨髓间充质干细胞及其条件培养液对异体外周血T淋巴细胞及其分泌功能的影响。 方法：从人骨髓中分离培养骨髓间充质干细胞,反复贴壁进行纯化;用尼龙棉柱法纯化异体外周血T淋巴细胞。观察骨髓间充质干细胞及其条件培养液体对植物血凝素刺激下T淋巴细胞增殖的影响,以ELISA方法检测γ-干扰素、白细胞介素4水平变化。 结果与结论：骨髓间充质干细胞及其条件培养液体对植物血凝素诱导的T淋巴细胞增殖均有抑制作用,并呈剂量和浓度依赖性。ELISA结果表明,骨髓间充质干细胞及其条件培养液抑制T淋巴细胞γ-干扰素的分泌;骨髓间充质干细胞可促进白细胞介素4的分泌,但其条件培养液对白细胞介素4的分泌无影响。提示骨髓间充质干细胞及其条件培养液对异体外周血T淋巴细胞的增殖有抑制作用,其作用可能与其影响T淋巴细胞分泌γ-干扰素和白细胞介素4有关。     

人脂肪间充质干细胞对再生障碍性贫血T淋巴细胞的免疫调节作用

目的研究人脂肪间充质干细胞(haMSCs)对再生障碍性贫血(AA)T淋巴细胞(TLCs)的作用,初步探讨其治疗AA的机制。方法从人脂肪中提取并培养haMSCs;从AA患者外周血中分离T淋巴细胞(AA-TLCs);将两者共培养后,MTT法检测细胞增殖;real-time RCR和Western blot测定T-bet和GATA-3的表达,ELISA法检测上清IL-2、IL-4、IL-10和INF-γ的水平。结果 HaMSC呈时间依赖性的抑制AA-TLCs的增殖,AA-TLCs与haMSCs共培养3、5和7 d后的抑制率分别为34.94%±10.11%、53.44%±6.16%和68.13%±15.24%(P0.05);haMSC能够下调AA-TLCs转录因子T-bet的表达,同时上调GATA-3的表达(P0.05);haMSCs能够升高Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平,降低Th1类细胞因子INF-γ、IL-2的水平。[MSCs+AA-TLCs组:IL-4(88.6±15.2)ng/L、INF-γ(8.7±2.7)ng/L;AA-TLCs组:IL-4(1.4±0.6)ng/L、INF-γ(41.5±3.7)ng/L(P0.05)]。结论 HaMSCs在体外对AA患者TLCs具有免疫调节作用,其机制可能是通过调节转录因子T-bet和GATA-3的表达从而抑制Th细胞向Th1细胞方向分化。     

骨髓间充质干细胞干预再生障碍性贫血患者树突状细胞的成熟分化CSCD

背景:骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞增殖的影响国内仅见少量报道,而骨髓间充质干细胞是否通过调节树突状细胞来影响再生障碍性贫血患者T细胞的增殖,国内未见报道,其机制值得深入研究。目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者树突状细胞的免疫调节作用。方法:将培养第5天的再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞来源的树突状细胞与第3代健康人骨髓间充质干细胞混合培养,加入脂多糖、肿瘤坏死因子促树突状细胞成熟,应用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞与未成熟、成熟树突状细胞共培养前后树突状细胞表面标志表达。结果与结论:未成熟的树突状细胞在脂多糖的刺激诱导下与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达无变化(P>0.05);成熟树突状细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达降低(P<0.05)。结果说明骨髓间充质干细胞可抑制再生障碍性贫血患者单核细胞来源的树突状细胞的发育和成熟,进而发挥调节再生障碍性贫血患者的免疫作用。     

肿瘤坏死因子-β对重型再生障碍性贫血患者效应T细胞损伤骨髓造血的影响

目的:研究肿瘤坏死因子-β(TNF-β)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者效应T细胞(CD8+HLA-DR+T细胞)损伤骨髓造血的影响,探讨TNF-β在SAA免疫发病中的作用。方法:以免疫磁珠阳性分选15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+T细胞作为效应细胞,以阴性分选去除15名正常人骨髓单个核细胞中CD3+T细胞后作为靶细胞,两者混合培养,于体系中分别加入不同浓度TNF-β(终浓度分别为0、15、25、50 ng/ml)为实验组,并设空白对照组,孵育72小时后,通过流式细胞术以Annexin V检测靶细胞凋亡状况,采用ELISA法测定培养上清液IL-10、IFN-γ水平。结果:空白对照组及3个实验组细胞凋亡比例分别为(49.85±20.33)%、(51.65±20.34)%、(55.94±20.19)%、(57.72±19.45)%,TNF-β终浓度为50 ng/ml组及25 ng/ml组均明显高于空白组和15 ng/ml组细胞凋亡比例(P<0.05),但空白组与15 ng/ml组,25 ng/ml组与50 ng/ml组细胞凋亡比例无显著差异(P>0.05)。空白对照组及各实验组培养上清IL-10浓度分别为(217.99±29.47)ng/ml、(216.47±29.00)ng/ml、(212.15±13.19)ng/ml、(218.01±28.61)ng/ml,各组差异无统计学意义(P>0.05)。TNF-β终浓度50 ng/ml组培养上清IFN-γ水平[(593.50±48.18)ng/ml]明显高于空白对照组[(544.85±69.77)ng/ml],15 ng/ml组[(567.38±74.51)ng/ml]、25 ng/ml组[(544.05±79.69)ng/ml](P<0.05)。结论:TNF-β能增强SAA患者效应T细胞诱导骨髓造血细胞凋亡,并呈浓度依赖性;高水平的TNF-β可能还促进SAA患者CD8+HLA-DR+T细胞分泌IFN-γ,两者具有协同细胞毒作用。     

间充质干细胞可能通过调控免疫细胞促进再生障碍性贫血小鼠骨髓的造血功能

目的:探讨间充质干细胞(MSCs)影响再生障碍性贫血小鼠造血功能的可能免疫机制。方法:30只小鼠分3组,分别为单纯照射组、再障模型组、MSCs治疗组,建立再生障碍性贫血小鼠模型。单纯照射组仅经5Gy[60Co]γ射线照射,再障模型组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,MSCs治疗组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,3d后输注人骨髓MSCs1×106cell/只。观察各组小鼠外周血象、骨髓及外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+、NK细胞变化及与造血的关系。结果:经5Gy[60Co]γ射线照射后,单纯照射组、MSCs治疗组外周血象第7d开始下降,21d血象恢复正常。再障模型组外周血象第7d开始持续性下降,至21d血象仍未恢复。照射后7d,各组小鼠间外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+无明显差异,但MSCs治疗组NK细胞低于单纯照射组和再障模型组(P0.05)。照射后14d3组CD4+细胞比例均明显下降,CD8+细胞则表现不同,再障模型组与MSCs治疗组CD8+细胞比例明显高于单纯照射组,至照射后21d,MSCs治疗组CD8+、NK细胞与单纯照射组相近、而模型组则明显高于单纯照射组和MSCs治疗组;MSCs治疗组小鼠股骨病理切片中脂肪细胞比例明显低于再障模型组,与单纯照射组结果一致。结论:MSCs输注可能通过调控免疫细胞影响再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能。     

G-CSF动员的骨髓及外周血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

采用G CSF动员的骨髓以及外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血 (SAA)。共有 10例重型再生障碍性贫血患者接受了G CSF动员的骨髓以及外周血造血干细胞移植 ,回顾性分析植入情况、植入速度及急慢性移植物抗宿主病 (GVHD)发生率等。所有患者移植后均获得造血重建。中性粒细胞计数 (ANC) >0 5× 10 9L- 1 的中位时间为 13 2d(8～ 18) ,血小板 >2 0× 10 9L- 1 的中位时间为 2 2 2d(10～ 10 8)。 8例获得异体植入的患者中 3例发生Ⅰ Ⅱ度皮肤急性GVHD ,发生 5例慢性GVHD。至随访截止 ,中位随访 775d(2 10～ 14 2 9) ,所有 10例患者均无病存活(DFS)。因此我们认为G CSF动员的骨髓及外周血干细胞移植是治疗SAA的有效方法 ,可获得快速、持久植入 ,而不增加急性和慢性GVHD的发生率。     

再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞转化生长因子β1及Smad3表达下调的发病学意义

 目的 研究骨髓间充质干细胞（MSC）中转化生长因子 β1（TGF-β1）与 Smad3 的表达下调与再生障碍性贫血（再障）发生的可能关系。 方法 取 20 例重型再障患者骨髓 MSC，分离制备出 Flk1+CD34–MSC 后进行以下试验：①体外定向诱导 MSC向脂肪细胞分化，倒置显微镜观察成脂分化情况，油红 O染色法鉴定脂肪细胞，用实时荧光定量 PCR 检测分化过程中脂蛋白酯酶（LPL）基因的表达；②用蛋白质印迹法检测MSC 中 TGF-β1 及 Smad3 的表达，用 ELISA 检测 MSC分泌 TGF-β1 的能力；③观察不同剂量（0、5、10、15、20 ng/ml）TGF-β1 对再障患者骨髓 MSC 成脂分化和增殖的影响。以 7 名健康成人的骨髓 MSC 相应检测为对照。 结果 再障患者骨髓 MSC 经 4 d 培养后即分化为脂肪细胞，而健康成人骨髓 MSC 中仅见少量细胞出现脂肪滴。再障患者 MSC 培养 4 和 8 d 时 LPL 基因表达水平分别为 0.091 ± 0.028、0.142 ± 0.033，均高于健康成人骨髓 MSC（分别为 0.021 ± 0.011 及 0.049 ± 0.010，均 P < 0.01）；而 TGF-β1 及 Smad3 表达水平明显低于健康成人骨髓 MSC，TGF-β1 分泌水平（3.4 μg/L ± 0.9 μg/L）也明显低于健康成人骨髓 MSC（11.6 μg/L ± 1.2 μg/L，P < 0.01）。在向脂肪细胞分化过程中，仅加入 5 ng/ml 的 TGF-β1 即可明显抑制再障患者骨髓 MSC 向脂肪细胞定向诱导分化，同时促进其增殖。 结论 再障患者骨髓 MSC 中 TGF-β1 及 Smad3 表达水平的显著下调可能参与了再障的部分发病环节。     

Expression of membrane-bound IL-15 by bone marrow fibroblast-like stromal cells in aplastic anemia

In order to explore the relationship between IL-15 and aplastic anemia (AA), bone marrow (BM) fibroblast-like stromal cells (BMFSCs) were obtained from BM samples of 23 AA patients by density centrifugation and primary culturing in vitro. Indirect immunofluorescence labeling as well as flow cytometry and confocal laser scanning microscopy analysis were used to determine the expression of membrane-bound IL-15 (mIL-15) on the surface of BMFSCs derived from AA patients (AA-BMFSCs). The effects of IFN-gamma and cyclosporin A (CsA) on the expression of mIL-15 were also investigated. [(3)H]thymidine incorporation test as well as specific antibody inhibition and Transwell separation experiment was adopted to functionally evaluate the expression of mIL-15 on the surface of AA-BMFSCs. mIL-15 was found to be over-expressed on the surface of AA-BMFSCs. IFN-gamma further significantly up-regulated its expression, which, however, was inhibited by CsA. Interestingly, a tight correlation was found between the expression of mIL-15 and IL-15Ralpha on the surface of AA-BMFSCs. AA-BMFSCs had the capability to stimulate the proliferation of T lymphocytes, which was partly or completely inhibited by using neutralizing anti-IL-15Ralpha antibody, neutralizing anti-IL-15 antibody, blocking anti-IL-2/15Rgamma(c) mAb or Transwell chambers with a 0.3-mum pore size membrane to block the direct cell-to-cell contact between AA-BMFSCs and T cells. Apparently, BMFSCs as the most important component of BM hematopoietic microenvironment usually over-express mIL-15 in AA patients. Therefore, AA-BMFSCs may indirectly participate in the T cell-mediated destruction of hematopoietic progenitors in AA by recruiting T cells to BM and stimulating them in situ.     

Abnormal immunomodulatory ability on memory T cells in humans with severe aplastic anemia

Severe aplastic anemia (SAA) is a bone marrow failure disease induced by hyperfunctional autoimmunic Th1 lymphocytes. Memory T cells (TM) are a component of the adaptive immune system. They ensure the host of more aggressive and faster immune response to efficiently eliminate the specific antigens after re-exposure and thus play a key role in T-cell functions. In this study we investigate the quantities and functions of memory T cells in SAA patients before and after immunosuppressive therapy (IST) to further clarify the mechanism of SAA apoptosis of bone marrow hematopoietic cells. Results showed that the percentage of CD4+ effector T cells in peripheral blood and bone marrow lymphocytes was decreased in SAA patients. The ratio of CD4+ memory T lymphocytes to CD8+ memory T subsets (CD4+/CD8+TM) in SAA patients was also lower. The percentage of CD8+ effector T cells in peripheral blood and CD8+ central memory T cells in the bone marrow lymphocytes was significantly higher in newly diagnosed patients. Furthermore, the median expressions of perforin and granzyme B on memory T cells were higher in SAA patients compared to those in normal controls. After IST, the quantities and functions of memory T cells return to normal level. Therefore, we concluded that the abnormal immunomodulatory ability on memory T cells may contribute to the imbalance of Th1/Th2 subsets and thus lead to over-function of T lymphocytes and hematopoiesis failure in SAA.     

骨髓间充质干细胞对肾病综合征大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

背景：CD4⁺CD25⁺调节性T细胞功能降低、数量下降已被公认为是肾病综合征患儿免疫失调的重要表现。骨髓间充质干细胞具有免疫调节功能,可上调CD4⁺CD25⁺调节性T细胞,抑制淋巴细胞增殖,并已在许多免疫性疾病方面成功应用。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植对原发性肾病综合征大鼠外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的影响。 方法：自SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,经体外传代培养及鉴定后制备细胞悬液。30只SD大鼠随机均分为3组,生理盐水组和干细胞移植组尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,干细胞移植组注射阿霉素当日尾静脉射干细胞1×10⁷;正常组不做处理。 结果与结论：①与正常组比较,生理盐水组大鼠均出现肾病综合征表现,以腹水、大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症为特征;干细胞移植组较生理盐水移植组则有明显改善(P < 0.05)。②造模第28天,干细胞移植组和生理盐水组大鼠造模后外周血CD4⁺CD25⁺Treg/ CD4⁺ Treg均明显高于正常组(P < 0.05);干细胞移植组与生理盐水组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。③造模第28天,干细胞移植组大鼠外周血单个核细胞FoxP3mRNA的表达显著高于生理盐水组和正常组(P < 0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植对阿霉素肾病综合征模型有一定的治疗作用,其机制可能与上调FoxP3在组织局部的表达而诱导CD4⁺CD25⁺Treg产生有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

大鼠骨髓间充质干细胞对T细胞免疫活性的影响

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stemcells,MSCs)对脾脏T细胞的免疫调节作用。方法:从大鼠骨髓中分离培养间充质干细胞,通过瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态,并用流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测其细胞表面特征分子表达情况。MTT法测定经刀豆蛋白A(ConA)刺激后,不同数量MSCs对T细胞增殖能力的影响;ELISA法检测MSCs对T细胞分泌IFN-γ和IL-4水平的影响。FCM检测MSCs对脾脏T细胞凋亡水平的影响。MTT法测定MSCs对细胞毒性T细胞(Cytotoxic Tcells,CTL)杀伤活性的影响。结果:经不同数量MSCs作用后,脾脏T细胞增殖水平明显低于阳性对照组(P<0.01),而且MSCs比例越高,其抑制作用越强(P<0.01)。经MSCs作用后,T细胞分泌IFN-γ的水平明显降低,而分泌IL-4的水平明显升高,且这种作用随MSCs比例的增加而增强(P<0.01)。MSCs能够抑制在体外培养过程中T细胞的自发凋亡。与MSCs共培养后,T细胞对L1210细胞的杀伤活性和单独培养组相比明显下降(P<0.05)。结论:MSCs能够抑制T细胞增殖反应和CTL活性,该作用可能与MSCs改变T细胞分泌细胞因子水平有关,但与诱导T细胞凋亡无关。