Taq DNA聚合酶5′~3′外切活性对荧光定量PCR的影响

目的为探讨Taq DNA聚合酶(后简称Taq酶)中5′~3′外切酶活性在Taqman探针法荧光定量PCR中的作用及影响,指导热启动Taq酶性能改造,本文研究了不同热启动Taq聚合酶的5′~3′DNA外切酶活性差异,以及该活性的高低对Taqman探针法荧光定量PCR的影响。方法使用荧光探针为底物,分别测定不同热启动Taq酶的聚合酶活性及外切酶活性,对比在相同聚合酶活性下外切酶活性的差异,以及在荧光定量PCR扩增反应中的差异。结果在聚合酶活性相等的条件下,不同的热启动Taq聚合酶具有不同的5′~3′DNA外切酶活性,经化学修饰的Taq酶的5′~3′DNA外切酶活性分别下降2.7倍和4.55倍,经抗体修饰的Taq酶5′~3′DNA外切酶活性没有变化。在乙型肝炎病毒(HBV)DNA荧光定量PCR检测体系中,加入同等聚合酶活性单位的不同修饰方法制备热启动Taq酶,外切酶活性高的酶比活性低的酶ct值更低。结论在Taqman探针法荧光定量PCR反应中,Taq酶对探针的外切降解过程是反应的限速步骤,提高Taq酶5′~3′DNA外切酶活性有利于提高反应效率。     

血清对氧磷酶活性测定方法研究

根据对氧磷酶能水解对氧磷成为对硝基酚原理，用ＥＤＴＡ终止酶促反应。分光光度法测定对硝基酚的生成量，反映对氧磷酶的活性水平。结果显示酶活性在０－１６００单位范围内与吸光度值呈线性，方法的变异系数在１．４９％－４．２７％间。说明 检测方法用血量少，酶反应时间短，用ＥＤＴＡ抑制酶活性后，能在普通分光光度计上进行测定，可以普遍使用。     

科技期刊基础统计存在的问题及改进建议

科技期刊基础统计资料是科技期刊研究的基础。科技期刊基础统计存在不完整、不准确、项目不全、某些数据有虚构成分、有差错、使用不方便等问题。建议编制单位与期刊编辑部联手,扎实地做好这项基础性工作。     

上海市正常人群血清对氧磷酶活性及多态分布特征

目的 研究上海市正常人群血清对氧磷酶活怀及多态分布特点。方法 检测了１９８例上海居民的对氧磷酶生、直刺激对氧磷酶活性和芳香酯酶活性,根据不同型的对氧磷酸本对盐刺激的反应程度不同及盐刺激对氧磷酶芳香酯酶的活性比值不同,将３型区别开来。结果 正常人群的对氧磷酶活性范围在９７．６￣４７２．１单位之间,不同年龄和性别２之间差异无显性。测得低活性型２７人,中等活性型７１人,高活性型１００人。低活性型基因频     

全血胆硷酯酶活性的硫代乙酰胆碱-联硫代双硝基苯甲酸比色测定法研究

用硫代乙酰胆硷-联硫代双硝基苯甲酸比色法(ASCh-DTNB法)对全血胆硷酯酶活性测定方法作了研究,酶活性在0～80单位范围内与测定读数呈直线关系(r=0.999)。本方法的变异系数在0.5～3.9%之间。加入不同酶量的测定值分别为各该理论值的88.4%、94.7%和100.8%,最低检测限为2单位。     

宫内节育器(IUD)对人体宫腔液中类尿激酶免疫活性和纤溶酶元激活因子的影响

已经证实人宫腔液中存在着两种能使纤溶酶原转变为纤溶酶的激活因子,一种为类尿激酶激活因子,另一种为类组织激活因子。使用和未使用IUD者宫腔液中纤溶酶活性均随月经周期的不同时相呈相似的周期性变化,但前者纤溶酶活性略低。作者选择身体健康、月经正常的妇女88名,其中有使用IUD(1/2～3年之间)和未使用IUD者。分别在月经增殖期、中期、黄体期和月经前期     

三氧化二砷对卵巢癌细胞端粒酶活性及hTERT蛋白表达的影响

目的观察三氧化二砷(As2O3)对卵巢癌细胞株A2780端粒酶活性的影响。方法应用端粒酶多聚酶联反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法检测As2O3作用后卵巢癌细胞系A2780细胞端粒酶活性的变化并使用流式细胞仪检测hTERT蛋白表达。结果0.25μmol/LAs2O3(24~72h)可抑制卵巢癌细胞系A2780的端粒酶活性及hTERT蛋白表达,抑制作用呈时间依赖性效应。结论AsO可以通过降低hTERT蛋白表达进而抑制卵巢癌细胞的端粒酶活性。     

血清芳香酯酶活性测定方法研究

目的 建立血清芳香酯酶活性的测定方法。方法 采用EDTA终止酶促反应，分光光度法测定苯酚的生成量，反映芳香酯酶的活性水平。测定了该法的线性范围，变异系数，重现性。结果 芳香酯酶活性在0-80单位范围内与吸光度值呈线性（r=0.999)，方法的变异系数在1.08%-1.77%间。加入不同酶量（25%、50%、75%的血清），实测值与理论值误差百分比分别为14.04%，11.34%和4.13%。同一样本重复测定，变异系数在2.1-8.3%间。结论 该检测方法用血量少，酶反应时间短，采用EDTA终止反应，可以在普通分光光度计上进行测定。实验证明方法稳定、重现性好，具有推广使用前景。     

林业科技论文中“年”及“a”的用法探讨

针对林业科技期刊中存在的“年”及“a”的使用比较混乱的情况,提出了在用序词表示时间和在专业术语中以及在时间计量意义不强时应使用中文名称“年”,在具有明显时间计量意义时应使用单位符号“a”。     

科技期刊应规范发展协办单位

发展协办单位已成为科技期刊发展的新趋势。在适应新的出版生态环境背景下,科技期刊发展协办单位是一条双赢的合作之路,一种对经营模式的有益探索。总结目前科技期刊发展协办单位的4种合作模式：要素互补模式、集群效应模式、载体辐射模式和特色互动模式,指出在发展协办单位过程中出现的乱象,最后从4个方面提出应规范发展协办单位。     

三氧化二砷对卵巢癌细胞端粒酶活性及hTERT蛋白表达的影响

目的观察三氧化二砷(As2O3 )对卵巢癌细胞株A2780端粒酶活性的影响.方法应用端粒酶多聚酶联反应-酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法检测As2O3作用后卵巢癌细胞系A2780细胞端粒酶活性的变化并使用流式细胞仪检测hTERT蛋白表达.结果 0.25μmol/ L As2O3 (24～72 h) 可抑制卵巢癌细胞系A2780的端粒酶活性及hTERT蛋白表达,抑制作用呈时间依赖性效应.结论 As2O3可以通过降低hTERT蛋白表达进而抑制卵巢癌细胞的端粒酶活性.     

医学论文作者署名和工作单位规范化标注建议

【目的】探讨医学科技期刊作者署名和单位标注的共识性规范。力争让科技期刊编辑有所遵循,为编辑实践提供方便。【方法】分析科技期刊作者署名和单位标注中存在的问题,并针对各种情况详细举例。【结果】对日渐突出的论文作者署名和单位标注中的随意和不规范问题,提出规范和细化的标注建议。【结论】医学科技期刊作者署名和工作单位规范化标注,对尊重作者的署名权,确保提供资料来源的单位的责任、权利和义务,以及联系和沟通作者及其单位畅通无阻至关重要。     

新生猪缺氧缺血性脑病脑中Ca~(2+)、CaM、PDE的变化

通过新生猪缺或缺血性脑损伤模型,检测了脑皮质组织钙、钙调素含量以及磷酸二脂酶活性的变化,探讨在缺氧缺血性脑损伤过程中以上三指标的改变.方法 采用改进的Thompson CaM激活PDE间接测定法检测CaM,反应液中除去工具酶PDE及CaM标准液检测PDE,利用火焰原子吸收分光光度法检测Ca~(2+).结果 脑损伤后单位体积湿重脑组织含钙量变化不明显,钙调素含量及磷酸二脂酶活性分别在损伤后即刻及12小时明显升高.结论 缺氧缺血性脑损伤早期就有钙调素含量的升高,继而引起其靶酶活性升高,造成神经系统的损害.     

硝酸铈对大鼠组织中ATP酶活性的影响

研究了硝酸铈对大鼠内脏、大脑、肌肉中ＡＴＰ酶活性的影响。结果显示,连续腹腔注射低浓度硝酸铈后,大鼠肝脏、肾脏、心脏等组织中Ｃａ２＋ －ＡＴＰ酶,Ｋ＋ 、Ｎａ＋ －ＡＴＰ酶,Ｍｇ２＋ －ＡＴＰ酶活性明显增强;而当注射高浓度硝酸铈时,酶活性均未发生明显变化。估计这是机体受到外界毒物影响后的一种保护机制     

铅接触评价法—红细胞嘧啶5—核甙酸酶的活性研究

目的:红细胞嘧啶5′—核甙酸酶(P_5N)活性与铅接触量的剂量—反应关系已引人注目。作者等使用最近研究的红细胞P_5N活性的简易测定法对P_5N酶活性的正常值分布和血液标本保存时酶活性稳定性进行了研究,就铅作业者的P_5N酶活性与血中铅的相关关系也进行了研究,明确了红细胞P_5N对铅暴露的评价是有用的。 方法:正常人的血来自佐贺县自活体的成人病检     

酪氨酸酶活性测定影响因素的探讨

酪氨酸酶催化酪氨酸转变成黑色素的过程中,酶和底物必须在适当的浓度范围内,才能充分发挥酶的催化作用;酶促反应在1小时内速度最快,随着时间延长,酶活性缓慢增高,4小时后酶促反应基本处于平衡状态。实验还发现,酶和底物的量不变,减少水的加入量以提高浓度,并不能提高酶的活性;同时,在37℃水浴比在40℃更能提高酶的活性;而pH在5至8范围内对酶活性影响不大。     

医学期刊论文的基本格式——第六讲 数字、标点、统计学符号和其它

一.数字:在科技期刊中,数字(特别是阿拉伯数字)使用的频率很高,故如何正确使用和表达非常重要。1987年1月1日,国家语言文字工作委员会等7个单位公布了《关于出版物上数字用法的试行规定》;前几年新发布的一些国家标准(如GB1.1-     

ATP酶、乳酸脱氢酶活性作为冷藏鱼肉变质的指标

据测定,在鱼体内ATP酶和乳酸脱氢酶都具有较高的活性,但死后肌肉ATP酶活性与ATP降解相关,ATP的降解导致尸僵的发生,乳酸脱氢酶是糖酵解过程中的关键酶,而且普遍存在于各种动物细胞中。这表明在鱼组织中可能出现的许多酶作为鱼肉的质量控制指标是有潜在应用价值的。据报道,曾有人通过测定鱼肉组织中的酶活性来鉴别新鲜鱼和冷冻     

大豆脂肪氧化酶活性的测定

大豆脂肪氧化酶严重影响大豆制品的质量，必须使其失活，为了监测酶的失活情况，我们建立了大豆脂肪氧化酶活性的测定方法。测定时取大豆脂肪氧化酶粗提液０．２ｍｌ、底物２．８ｍｌ，混合后立即在紫外光２３４ｎｍ处测定，测定的光密度值代入公式中，计算出酶的活性单位。实验证明：大豆脂肪氧化酶粗提液在８℃下贮存可稳定１２小时；在ｐＨ９、温度２０～４０℃时测定能得到较好的结果。在总体为３ｍｌ的反应中，提取物所含蛋白质在０．０７～１６ｍｇ范围内，测定结果符合比耳定律。本方法操作简便，重现性好，变异系数为６．９９％。在本文中我们着重对影响酶活性的诸因素和特性做了详细观察，并选定了酶活性测定的最适条件，这些内容国内均未见报导。     

GnRH-a对子宫肌瘤自身芳香酶产生的抑制作用

目的:探讨GnRH-a(促性腺激素释放激素激动剂)对于子宫肌瘤本身芳香酶产生抑制作用。方法:运用细胞培养及RT-RCR等分子生物学技术探讨GnRH-a药物的投予对于子宫肌瘤组织芳香酶产生的抑制作用。结果:①在手术前服用GnRH-a患者子宫平滑肌组织及肌瘤组织中芳香酶发现量均明显低于未服药组。②手术前用药组与非用药组体外细胞培养实验表明:DEX+IL-1β明显刺激了两组子宫肌瘤细胞芳香酶的产生,但它们之间的差异却并不显著。说明体外培养肌瘤细胞仍具有芳香酶活性但是术前是否使用GnRH-a药物对之后的体外培养不具后续作用。③在肌瘤细胞培养实验中加入GnRH-a,随着用药时间的延长肌瘤细胞芳香酶活性呈现减低趋势,具有显著性差异。结论:该实验证明促性腺激素释放激素激动剂明显在短期内减小肌瘤体积主要是作用于肌瘤细胞,使其自身芳香酶的产生得到抑制。