外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值

目的 探讨外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞对老年脓毒症患者预后的预测价值。方法 采用回顾性队列研究,选取2015年2月—2016年8月西安交通大学第二附属医院重症医学科住院的年龄≥60岁的脓毒症患者75例,依据ICU结局分为存活组(n=54)及死亡组(n=21)。收集患者一般资料,诊断脓毒症当天进行急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分及序贯器官衰竭(SOFA)评分,检测外周血液标本TNF-a、IL-10及CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞。结果 死亡组平均年龄大于存活组(P<0.05)。死亡组较存活组有更高的APACHEⅡ评分、SOFA评分及休克比例,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞、TNF-a、IL-10较存活组更高(P<0.05)。存活组的耐药菌感染比例低于死亡组,但差异无统计学意义(P>0.05)。无论单因素还是对一系列协变量进行调整的多因素Logistic回归分析均显示,较高的外周血CD8+CD28-CD57+T淋巴细胞比例与高的ICU死亡率相关(OR, 1.21;95%CI...     

鼻咽癌Survivin基因表达与预后关系的研究

目的探讨鼻咽癌组织中凋亡抑制基因Survivin蛋白和mRNA表达与鼻咽癌患者预后之间的关系。方法应用免疫组织化学和原位杂交技术检测44例鼻咽癌患者活检组织标本Survivin蛋白和mRNA表达量,以30例同期鼻咽慢性炎症患者作为对照。结果鼻咽癌患者两者阳性率分别为79.5%、75.0%,明显高于对照组（P〈0.01）,且Survivin蛋白与mRNA水平具有很好的一致性;两者任何一项高表达的鼻咽癌患者平均生存时间均低于低表达者（P〈0.01）。结论 Survivin基因的过度表达在鼻咽癌的发生、发展中起重要作用,而且对其预后有重要的临床价值。     

CD4+CD25+调节性T细胞在胃癌患者的表达及其临床意义

目的研究胃癌患者肿瘤组织、淋巴结及外周血中CD4 、CD25 调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)的表达情况与胃癌临床病理的关系并分析其意义.方法胃癌患者肿瘤组织、淋巴结、外周血及对照组中Treg表达情况分别以冰冻切片荧光抗体染色、流式细胞仪进行检测,结合胃癌患者临床病理情况分析.结果健康成人对照外周血Treg表达率为(4.1±5.7)%,胃癌患者外周血Treg表达显著增高(16.8±7.9)%.胃癌组织Treg表达为(6.5±7.2)%,胃癌周围淋巴结Treg比例为(8.4±7.2)%,均较对照组显著增高.胃癌外周血和淋巴结Treg表达与淋巴结转移率和TNM分期有着负相关性,淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,Treg表达率越高.结论Treg在胃癌患者的瘤组织、淋巴结及外周血中表达较对照组显著增高,并与临床病理存在显著相关性.     

血红蛋白浓度与鼻咽癌放射治疗效果分析

目的:探讨鼻咽癌(NPC)患者的血红蛋白浓度(HBC)对放射治疗疗效的影响。方法:回顾性分析2001年1月1日～2004年12月31日接受根治性放疗的NPC患者336例临床资料,根据放疗前HBC分为贫血组(男性<120g/L,女性<110g/L)和正常组(男性≥120g/L,女性≥110g/L),根据放疗前、后HBC变化情况分为HBC下降组(放疗结束时HBC<放疗前)和HBC未下降组(放疗结束时HBC≥放疗前)。采用电子直线加速器8MVX线进行常规分割外照射,比较各组间局控率和5年生存率。结果:贫血组和正常组的局控率差异无统计学意义(P>0.05),贫血组和正常组的5年生存率分别为35.12%和55.36%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。正常组中放疗后HBC下降组的5年生存率较未下降组低,但差异无统计学意义(P>0.05),贫血组中放疗后HBC下降组的5年生存率较未下降组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:放疗前HBC可影响鼻咽癌患者放射治疗的局控率和5年生存率。     

CD4+ T cell-mediated presentation of non-infectious HIV-1 virion antigens to HIV-specific CD8+ T cells

Background The mechanism of chronic immune activation and impairment of HIV-specific immune responses during chronic infection is not fully understood. However, it is known that high immune activation leads to more rapid progression to AIDS. We hypothesize that CD4^＋ T cell-mediated viral antigen presentation contributes to this pathologic immune activation in HIV-infected individuals. Methods HIV-specific T cells, responding to noninfectious HIV-1 virions as antigen, were measured by flow cytometric assays. These experimental conditions reflect the in vivo condition where noninfectious HIV-1 represents more than 99% of the antigens. Results CD4^＋ T cells purified from HIV-infected individuals were capable of cross presenting exogenous noninfectious HIV-1 virions to HIV-1-specific CD8^＋ T cells. Cross presentation required the entry of HIV-1 to CD4^＋ T cells and antigen translocation from endoplasmic reticulum to the Golgi complex. Blocking CD4^＋ mediated activation of HIV-specific CD8^＋ T cells and redirecting the viral antigens to antigen presenting cells improved HIV-specific T cell responses. Contusions One possible cause of chronic immune activation and impairment of HIV-1 specific T cell responses is represented by HIV-1 harboring CD4^＋ T cells cross presenting HIV-1 antigen to activate CD8^＋ T cells. This new mechanism provides the first evidence that cross presentation of noninfectious HIV-1 virions play a role in the immunopathogenesis of HIV-1 infection.     

恶性肿瘤患者营养状况与血清瘦素、CD4^＋T／CD8^＋T细胞关系的研究

目的：探讨恶性肿瘤患者营养状况与血清瘦素、CD4^ T／CD8^ T细胞比值的关系。方法：选择恶性肿瘤患者79例及BMI为18．5～25．0的42例健康者，检测血清瘦素浓度和CD4^ T／CD8^ T细胞比值。结果：(1)不同营养状态的恶性肿瘤患者的血清瘦素含量之间均有显著性差异，而CD4^ T／CD8^ T细胞比值之间均无显著性差异。(2)女性肿瘤患者的血清瘦素含量明显高于男性患者。(3)BMI为18．5～25．0的恶性肿瘤患者与健康人血清瘦素含量之间无显著性差异，而肿瘤组CD4^ T／CD8^ T细胞比值明显低于健康人。(4)以瘦素为因变量，BMI、性别、年龄、CD4^ T／CD8^ T细胞比值为自变量进行多元线性回归分析，结果显示，血清瘦素含量与BMI、性别显著相关。结论：恶性肿瘤合并营养不良者，血清瘦素水平明显低于营养正常和肥胖的肿瘤患者。血清瘦素含量女性高于男性。BMI正常的肿瘤患者血清瘦素含量与正常人无差异，说明此时瘦素还发挥正常调节作用。在影响恶性肿瘤患者血清瘦素含量的因素中，BMI、性别是最主要的因素。不同营养状况的肿瘤患者之间的血清瘦素水平有明显差异，而与其相对应CD4^ T／CD8^ T细胞比值无统计学差异，提示瘦素影响免疫反应可能有更复杂的途径和机制，值得进一步探讨。     

白癜风患者外周血黑素细胞抗原特异性T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞水平及意义

目的 探讨白癜风患者外周血黑素抗原特异性CD8+T细胞、调节性T细胞及自然杀伤T细胞的变化及意义。方法 采用流式细胞术对初诊123例白癜风患者（观察组）和30例正常人（对照组）外周血中黑素细胞抗原特异性T细胞（CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL）、调节性T细胞（CD4+CD125+CD127-Tregs）及自然杀伤T细胞（CD3+TCRα24+β11+NKT）进行定量分析并进行比较。结果观察组CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL水平显著高于对照组（P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平均低于对照组（均P＜0.05）。不同分期白癜风患者外周血各种T细胞表达水平比较中,CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL在各期中均高于对照组（均P＜0.05）;CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平仅在进展期中均低于对照组（均P＜0.05）,稳定期则无统计学差异。3种细胞水平与患者的白斑面积明显相关（r=0.929、-0.982、-0.957,均P＜0.01）。结论CD8+Melan-A+/Tyrosinase+CTL、CD4+CD125+CD127-Tregs、CD3+TCRα24+β11+NKT水平的异常导致白癜风患者体内免疫调节功能失衡,与白癜风的发生、发展有密切关系。     

哮喘患者外周血Th1、Th2、CD4＋CD（25）＋T细胞的变化及其意义

目的探讨哮喘患者外周血Th1、Th2、CD4＋CD25＋T细胞的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术检测52例急性哮喘患者（急性组）、56例慢性哮喘患者（慢性组）和60名健康对照人群（对照组）外周血中Th1、Th2和CD4＋CD25＋T细胞的水平,并计算Th1与Th2的比值。结果急性哮喘患者外周血中Th1、CD4＋CD25＋T细胞水平和Th1/Th2比值明显低于慢性哮喘患者和健康对照人群（P〈0.05）;急性哮喘患者外周血中Th2水平明显高于慢性哮喘患者和健康对照人群（P〈0.05）。结论 Th细胞和CD4＋CD25＋T细胞在哮喘的疾病活动中起到重要的作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因。     

CD4+CD25+ T细胞、IL-10在类风湿关节炎中的表达及意义

目的:探讨CD4 CD25 T细胞、白细胞介素-10(IL-10)在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达及临床意义。方法:采用流式细胞仪检测30例RA患者(RA组)和20例正常对照者(正常对照组)外周血CD4 CD25 T细胞水平,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组血清中IL-10水平。结果:RA组与正常对照组CD4 CD25 T细胞水平分别为(12.5±8.4)和(7.9±3.2)%,2组差异无统计学意义(t=2.132,P>0.05);IL-10水平分别为(12.4±10.5)和(22.7±20.6)pg/ml,2组差异无统计学意义(t=2.920,P>0.05)。结论:RA患者存在细胞免疫功能紊乱和CD4 CD25 T细胞功能缺陷。     

鼻咽癌患者治疗前外周血Th1细胞因子浓度与远期生存的关系

目的评价治疗前血清Th1细胞因子（IL-2、TNF-α和IFN-γ）浓度在鼻咽癌放化疗中对患者远期生存的影响。方法使用流式细胞小球微阵列术检测80例鼻咽癌患者治疗前血清Th1细胞因子水平,使用Kaplan- Meier法绘制生存曲线,使用COX回归法分析细胞因子水平与患者总生存（OS）之间的关系。结果非角化性鼻咽癌上IFN-γ水平较角化性癌升高（P=0.012）;Th1细胞因子水平与患者放化疗治疗效果差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗前TNF-α高浓度组患者预后明显不如低浓度组（P=0.015）,治疗前IL-2高浓度组患者预后明显好于低浓度组（P=0.048）。结论鼻咽癌患者治疗前TNF-α及IL-2水平是预后的独立预测因素。     

耐多药结核患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的变化

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+T细胞在耐多药结核(multidrug-resistant TB,MDR-TB)发病机制中的作用。方法:随机选择MDR-TB患者31例,药物敏感性结核(drug-susceptible TB,S-TB)33例,健康对照(healthy control,HC)30例,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞。结果:S-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(2.43±0.69)%,显著高于健康人的(1.61±0.46)%,两组之间差异具有显著统计学意义;MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(3.14±0.59)%,显著高于S-TB患者的细胞比例,两组之间差异具有显著统计学意义。结论:MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显增加,揭示其在MDR-TB发病中发挥了重要作用。     

cyclin D1和p16蛋白在鼻咽低分化鳞癌表达与预后的关系

目的探讨中细胞周期素D1(cyclin D1)和p16蛋白的表达与鼻咽低分化鳞癌预后的关系.方法应用免疫组化SP法检测cyclin D1和p16在66例鼻咽低分化鳞癌和20例鼻咽部炎症黏膜组织中的表达.分析这两种蛋白与鼻咽癌颈淋巴结转移、临床分期、复发和预后的关系.结果 p16的缺失表达在有淋巴结转移组高于无转移组(P＜0.0 5),而cyclin D1的过表达与淋巴结转移无关(P＞0.05).cyclin D1的过表达在有复发组高于无复发组(P＜0.05),而p16的缺失表达与复发无关(P＞0.05) .p16的缺失表达和cyclin D1的过表达均与临床分期无关(P＞0.05).p16的缺失表达和c yclin D1的过表达小于5年生存组均明显高于大于5年生存组(P＜0.05).结论 p16的缺失表达可能与淋巴结的转移和预后有关;cyclin D1的过表达可能与复发和预后有关.p16和cyclin D1均有可能独立作为鼻咽低分化鳞癌的预后评估指标.     

结核抗原特异性CD4+中央型记忆T细胞的检测及分布特性研究

目的 比较活动期肺结核患者和纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验阳性健康人记忆T细胞的产生和分布特性.方法 取乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝静脉血,Ficoll进行密度梯度离心获取PBMCs.采用卡介苗刺激后,通过CD4、CD154、CCR7、CD45RA 4种抗体共染色,用流式细胞仪检测结核抗原特异性CD4+记忆T细胞.结果 以CIM+CD154+双阳性区设门,研究结核抗原特异性CD4+记忆T细胞,结果显示,肺结核患者CD4+CD154+CD45RA-CCR7+中央型T淋巴细胞亚群分布频率显著降低(P<0.05),CD4+CD154+CD45RA+CCR7+初始T细胞亚群的比例明显增高(P<0.05).结论 肺结核患者CD4+中央型记忆T淋巴细胞亚群的产生存在异常,可能与免疫功能低下和结核病发病密切相关.     

Weel蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的关系

目的 探讨Wee1蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床预后的关系.方法 收集2005年1月至2010年12月期间在张家口市第一人民医院和中国人民解放军251医院耳鼻喉科住院患者70例,手术病理活检均明确诊断为鼻咽癌,应用免疫组织化学(EnVisionTM)法检测其Wee1蛋白表达,并与30例正常组织的表达进行比较,同时分析Weel蛋白的表达与鼻咽癌临床病理因素的关系及其5年生存率.结果 Wee1蛋白在鼻咽癌组织、正常组织中的阳性表达率分别为52.86%(37/70)、10.00%(3/30),两组的阳性表达率比较差异有显著统计学意义(P>0.01);Wee1蛋白的阳性表达与肿瘤直径、淋巴结转移、浸润邻近组织及EBV感染有关(P>0.05),与性别、年龄、组织学类型及肿瘤部位无关(P>0.05);Wee1蛋白阳性表达的鼻咽癌患者5年生存率为35.14%(13/37),明显低于Wee1蛋白阴性表达的81.82%(27/33),两组比较差异有显著统计学意义(P>0.01).结论 Wee1蛋白的异常表达不仅参与了鼻咽癌的发生,而且有利于癌细胞的浸润转移,对预测患者的生存预后也有参考价值.     

溃疡性结肠炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达及意义

目的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因及发病机制迄今尚未完全明确的累及肠道的慢性非特异性炎症,近年来,研究发现免疫异常与其发病密切相关。通过分析UC患者外周血和肠黏膜中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其特异性标志物Foxp3的表达特点,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在UC发病机制中的作用。方法 20例UC活动期患者,15例健康体检者作为正常对照组,分别抽取外周静脉血和经电子肠镜活检肠黏膜组织,以流式细胞术检测外周血单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和肠固有层单个核细胞(lamina propria mononu-clear cell,LPMC)中CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞比例,应用免疫组化方法检测肠黏膜中Foxp3的表达,并检测血清中IL-10的水平。结果 UC患者外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例明显低于正常对照组(P<0.05),肠黏膜CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例和Foxp3+T细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05),两组PBMC和LPMC中CD4+T细胞比例无明显差异(P>0.05),两组血清IL-10水平无显著差异(P>0.05)。结论 CD4+CD25+Treg在UC的发病机制中起重要作用,外周血Treg数量减少可能是疾病发生的重要因素。     

肺癌细胞株A549培养上清诱导CD4+CD25+调节性T细胞频率增高

目的研究肺癌细胞株A549培养上清是否能够诱导外周血CD4 CD25 调节性T细胞(简称:Treg细胞)频率增高。方法选择20例健康人并分离其外周血PBMC,设上清组和对照组,上清组用A549培养上清和用PHA(植物血球凝集素) A549培养上清分别诱导,对照组设空白和单用PHA诱导,用流式细胞仪技术检测两组PBMC不同诱导条件Treg细胞的频率变化。结果用A549培养上清诱导后,上清组Treg细胞的频率与对照组空白孔相比,差异有统计学意义(P<0.05);用PHA A549培养上清诱导后,上清组Treg细胞的频率与对照组PHA孔相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌细胞株A549培养上清能够诱导CD4 CD25 调节性T细胞频率增高。     

外周血CD4+ T淋巴细胞绝对数及CD4+/CD8+比值在套细胞淋巴瘤中的预后价值

目的：探索外周血T淋巴细胞亚群计数在套细胞淋巴瘤（mantle cell lymphoma,MCL）患者中的分布、与临床特征的相关性及预后价值。方法：回顾性分析2006—2017年92例初诊MCL患者的临床资料。使用简化的MCL国际预后指数（sMIPI）进行预后评分,采用流式细胞术分析T淋巴细胞亚群计数,包括CD4+ T淋巴细胞绝对数（ACD4C）和CD8+ T淋巴细胞绝对数（ACD8C）。Mann?Whitney U及Kruskal?Wallis检验分析T淋巴细胞亚群计数与其他临床指标的相关性。采用 Kaplan?Meier 法进行生存分析,Cox比例风险模型进行预后因素分析。结果：中位随访51个月（12~150个月）,92例患者的中位总生存期（OS）是44个月。1年、3年、5年OS率分别为72%、45%、37%。ACD4C >0.5×109个/L的患者较ACD4C ≤0.5×109个/L的患者的无进展生存期（PFS）和OS更长（P=0.009和P=0.004）。CD4+/CD8+比值>1.2的患者较≤1.2的患者有更长的PFS和OS（P=0.025和 P=0.009）。单变量Cox回归分析显示：体力状态（ECOG评分）≥2分（P=0.021）、B症状（发热、盗汗或体重下降）（P=0.001）、升高的血清乳酸脱氢酶（LDH）（P=0.027）、高sMIPI评分（P=0.004）、低ACD4C（P=0.013）、低CD4+/CD8+比值（P=0.030）与较短的PFS相关。而较短的OS与B症状（P < 0.001）、高sMIPI评分（P=0.004）、升高的LDH（P=0.040）、低ACD4C（P=0.006）和低CD4+/CD8+比值（P=0.012）相关。多因素Cox回归分析显示：B症状（P=0.006）、低ACD4C（P=0.001）是影响PFS的独立预后因素;B症状（P=0.003）、高sMIPI评分（P=0.047）、低ACD4C（P=0.001）、低CD4+/CD8+比值（P=0.031）是影响OS独立的预后因素。结论：低ACD4C、低CD4+/CD8+比值与MCL患者不良的预后相关,ACD4C水平、CD4+/CD8+比值可作为判断MCL患者预后方便且有效的指标。     

支气管哮喘小鼠外周血CD8+CD28-T细胞群和CD8+CD56+T细胞群作用机制研究

目的研究哮喘小鼠外周血CD8+CD28-T细胞与CD8+CD56+T细胞间的关系及两种细胞群在哮喘中的作用。方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组和哮喘组,每组各15只。测定小鼠的气道反应性,对支气管肺泡灌洗液行细胞学分类,观察肺组织的病理变化,流式检测小鼠外周血CD8+CD28-T细胞及CD8+CD56+T细胞的比例,分析哮喘中两种细胞之间的相关性。结果成功建立小鼠哮喘模型。①哮喘组小鼠BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞(%)较对照组明显增高;②哮喘组小鼠外周血CD8+CD28-T细胞及CD8+CD56+T细胞比例均较对照组升高;③CD8+CD28-T细胞与CD8+CD56+T细胞数量上呈正相关(r=0.737,P=0.002)。结论哮喘时外周血CD8+CD56+细胞和CD8+CD28-细胞数目异常,两种细胞正相关,可能在哮喘发病中起重要作用。     

口腔扁平苔藓组织中CD3+、CD8+T细胞浸润与不典型增生的关系

目的：探讨口腔扁平苔藓（OLP）中CD3+T细胞和CD8+T细胞浸润与OLP伴上皮不典型增生的相关性,为OLP的临床诊断和免疫治疗提供新的方向。方法：采用免疫组化半定量法检测CD3+、CD8+T细胞在79例OLP患者组织中的表达,取10例口腔正常黏膜组织作为对照,分析口腔扁平苔藓组织中CD3+、CD8+T细胞浸润与不典型增生的关系。结果：CD3+、CD8+T细胞在正常口腔黏膜组织中呈阴性表达,在79例OLP中均呈阳性表达。CD3+、CD8+T细胞浸润与患者性别、年龄、发生部位无明显统计学意义,但是与OLP伴上皮不典型增生密切相关,具有统计学意义（P<0.001,P=0.002）,CD3+T细胞浸润和CD8+T细胞浸润之间具有显著相关性（r=0.498,P<0.001）。结论：口腔扁平苔藓患者组织中CD3+、CD8+T细胞浸润与上皮不典型增生密切相关,影响OLP的发生发展。