碳化二亚胺交联改性脱细胞异种猪肌腱修复跟腱缺损

背景：异体肌腱移植是目前修复肌腱缺损的理想方法,但移植后的排斥反应使其使用受到限制。 目的：观察碳化二亚胺交联改性脱细胞处理的版纳近交系微型猪肌腱移植修复兔跟腱缺损的效果。 方法：横向切除40只日本大白兔双侧跟腱,随机分组：实验组以碳化二亚胺交联改性脱细胞版纳近交系微型猪肌腱移植修复,对照组以自体肌腱移植修复。 结果与结论：①组织学观察：两组新生组织内细胞主要都是单核的成纤维细胞和纤维细胞,术后1-4周主要是呈椭圆形或圆形的成纤维细胞,细胞聚集区的细胞周围有新生胶原形成,这些胶原的走向较紊乱;局灶性条索状成熟胶原呈岛状分布,形成所谓“胶原岛”;术后12周时细胞越来越拉长,成为梭形和长条形的纤维细胞。②实验室检测：两组白细胞、C-反应蛋白水平、羟脯氨酸含量及抗拉强度差异均无显著性意义。说明碳化二亚胺交联改性的脱细胞版纳近交系微型猪肌腱能成功修复兔跟腱缺损,且具有组织相容性好、移植排斥反应轻、生物力学性能强的优点。     

脱细胞羊膜预防生物衍生肌腱修复鸡屈趾肌腱Ⅱ区缺损修复后的粘连

背景：羊膜有预防肌腱修复后粘连的作用,但存在一定的免疫排斥反应。 目的：探讨脱细胞羊膜对生物衍生肌腱修复鸡屈趾深肌腱Ⅱ区缺损修复后肌腱粘连的预防作用。 方法：分别以罗曼鸡右爪的第2,3,4趾将实验分成生物衍生肌腱组,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组以及自体肌腱组,建立屈趾深肌腱Ⅱ区1 cm缺损模型。以生物衍生肌腱桥接第2,3趾缺损,以自体肌腱桥接第4趾的肌腱缺损,在第3趾的生物衍生肌腱和上下吻合口周围包裹完整的脱细胞羊膜。 结果与结论：生物衍生肌腱组与自体肌腱组移植物为外源性愈合,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组羊膜有效地防止了成纤维细胞向修复区域内浸润,形成内源性愈合。肌腱粘连程度生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组优于生物衍生肌腱组和自体肌腱组,生物衍生肌腱组和自体肌腱组相似,移植物周围的炎症反应生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组>生物衍生肌腱组>自体肌腱组。证实脱细胞羊膜能通过机械性阻挡周围肉芽组织向修复区域内生长而防止外源性愈合造成的肌腱粘连。     

骨形态发生蛋白12诱导骨髓间充质干细胞构建组织工程肌腱

背景：以往肌腱损伤的修复方法有端端吻合、自体肌腱移植、同种异体肌腱或人工肌腱移植等,但均有其各自缺点。 目的：探讨以家兔骨髓间充质干细胞为种子细胞,骨形态发生蛋白12诱导,聚羟基乙酸复合材料作为支架材料,预构组织工程化肌腱重建家兔跟腱缺损的可能性。 方法：家兔抽取股骨近端骨髓,分离所得细胞传代至第2代,加入10 μg/L骨形态发生蛋白12诱导分化,并与Ⅰ型胶原溶液按一定比例移植于预张的聚羟基乙酸缝线上预制组织工程化肌腱备用。将家兔制备成跟腱缺损模型,分别采用不同方法修复跟腱缺损：组织工程化肌腱修复,Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸缝线修复,丝线行端端修复。修复12周对各组肌腱行形态学、力学及组织病理学观察。 结果与结论：修复12周家兔肌腱组织病理切片：组织工程化肌腱组可见大量梭形纤维母细胞顺应力学方向排列均匀分布于胶原中,纤维细胞明显增多,胶原致密;Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸缝线组可见部分纤维组织增生伴少许肉芽组织形成,胶原纤维呈松散网丝状,细胞排列紊乱分布不均;丝线组可见纤维组织旁见大量肉芽组织形成。修复12周家兔肌腱生物力学强度：骨形态发生蛋白12+聚羟基乙酸重建肌腱的力学强度明显优于Ⅰ型胶原-聚羟基乙酸组,与丝线缝合组差异无显著性意义;但骨形态发生蛋白12+聚羟基乙酸重建肌腱的力学强度低于正常肌腱。提示以自体骨髓间充质干细胞作为种子细胞,骨形态发生蛋白12诱导,以聚羟基乙酸为支架,可望构建组织工程化肌腱。构建的组织工程肌腱具有一定的生物力学特性,能用于修复跟腱缺损。     

玻璃化冷冻保存组织工程肌腱植入大鼠体内的组织学变化

背景：应用玻璃化冷冻方法保存组织工程肌腱具有可行性和应用前景,有待进一步研究。 目的：探讨应用玻璃化冷冻保存组织工程肌腱体内植入对大鼠跟腱缺损修复的影响。 方法：选用成年SD大鼠64只,于大鼠跟腱中段制备5 mm肌腱缺损模型,随机摸球法均分为2组,分别植入玻璃化冷冻保存组织工程肌腱和新鲜非冷冻保存组织工程肌腱。植入后2,4,6,8周,观察植入肌腱材料及周围组织的大体形态和组织学变化。 结果与结论：两组肌腱材料体内植入后的大体形态和组织学反应无明显差异。植入后2,4周,植入的肌腱材料发生降解,材料中间及周围有大量炎性细胞浸润和纤维结缔组织增生。植入后6,8周,大量新生胶原纤维组织长入并替代降解的植入材料,形态和排列方式趋近于正常肌腱组织,大鼠跟腱缺损基本修复。结果表明玻璃化冷冻保存组织工程肌腱体内植入可修复大鼠跟腱缺损。     

异体肌腱及跟腱移植后移植物的免疫学特点

背景：异体移植的免疫排斥问题是移植能否成功的首要问题。 目的：总结异体肌腱移植治疗跟腱缺损或异体跟腱移植治疗交叉韧带的免疫学特点。 方法：应用计算机检索1990-01/2012-01 PubMed数据库及万方数据库有关异体跟腱移植或跟腱重建的相关文献。英文检索词“allograft,tendon,immunity,transplatation”,中文检索词“异体,跟腱,移植,免疫”。检索文献量总计83篇。 结果与结论：腱组织的异体移植重建免疫排斥问题给手术增加了失败的危险性,但从目前研究来看经深低温冷冻处理的异体肌腱,是人体肌腱缺损修复的理想替代材料。它不以牺牲正常组织结构为代价,不受个体条件的限制。保证了肌腱移植的成功性,为跟腱再断裂缺损修复提供了可靠保证。而且具有操作简单,切口小,损伤小,效果可靠的优点。 关键词：跟腱;异体;肌腱;移植;免疫;综述文献 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.05.036      

带血管蒂肌腱移植修复跟腱缺损的实验研究

目的为带血供肌腱移植修复跟腱缺损提供生物力学和组织学依据.方法选用新西兰大白兔15只,其中12只分两组一侧行带血管蒂趾长屈肌腱转位修复跟腱缺损,对侧为游离肌腱移植对照组,术后12周取材,分别行组织学检查和生物力学测试.结果带血管蒂肌腱组移植跟腱组织学形态近似正常跟腱,肌腱最大拉伸力为正常跟腱的67.7%,而游离肌腱组移植跟腱的腱纤维为瘢痕包裹,最大拉伸力为跟腱的35.3%,两者的差异性非常显著(P＜0.01).结论带血管蒂肌腱移植修复跟腱缺损优于游离肌腱移植.     

新鲜羊膜与脱细胞羊膜修复腱鞘缺损预防肌腱粘连北大核心

背景:羊膜独有的结构可阻止某些物质通过,能保证包裹内组织正常营养供应,而且具有抗粘连、组织相容性好、炎性反应轻、纤维包裹少及可降解等特性。目的:比较新鲜羊膜及脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,预防肌腱粘连和促进肌腱愈合的作用。方法:取60只雄性来亨鸡,制作双足第三足趾制备肌腱及腱鞘损伤模型,随机分为3组修复,新鲜羊膜组采用新鲜人羊膜修复腱鞘缺损,脱细胞羊膜组采用人脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,对照组不做腱鞘修复。修复后进行第三足趾组织学观察及生物力学测试。结果与结论:①组织学观察:修复后2周,3组均存在充血水肿及炎症反应,新鲜羊膜组最轻,对照组最严重,3组水肿及炎症反应随时间延长逐渐减轻。修复12周,各组假鞘较修复后4周明显成熟,新鲜羊膜组及脱细胞羊膜组假鞘表面细胞致密层状排列整齐,表面光滑;对照组假鞘表面细胞排列紊乱,结构松散,可见表面纤维组织突出假鞘表面;②生物力学测试:脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8,12周的肌腱滑动距离均大于对照组(P<0.05),前2组间比较差异无显著性意义;脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8周的肌腱最大拉伸断裂强度高于对照组(P<0.05),且新鲜羊膜组高于脱细胞羊膜组(P<0.05),3组修复后12周的肌腱最大拉伸断裂强度无差异;③结果表明:新鲜羊膜和脱细胞羊膜均可用于重建腱鞘缺损,预防肌腱粘连,新鲜羊膜在促进早期肌腱愈合方面优于脱细胞羊膜。     

同种异体肌腱移植修复跟腱断裂

背景：对于跟腱断裂,临床传统修复方法是应用踝周自体肌腱移位修复,自体肌腱取材有限,供区损伤,以牺牲正常的动力和稳定结构为代价;而同种异体肌腱移植具有来源丰富,取材方便,不破坏宿主正常结构,保持其原有生物结构特性等优点。 目的：评价同种异体肌腱移植修复跟腱断裂的临床效果。 方法：2008年8月至 2011年6月收治30例急性、陈旧性跟腱断裂患者,4例陈旧损伤有2-5 cm不等缺损,应用同种异体肌腱移植修复缺损,移植后短腿石膏固定患肢,4周后拆除石膏行功能锻炼。按Arner-lindholm疗效评定标准评价临床治疗结果。 结果与结论：住院时间平均12.5 d。移植后25例获得随访,随访1-3年,未见再断裂病例。按Arner-lindholm评定标准,25例中优20例,良3例,可2例,优良率为92%。患者踝关节功能恢复正常,3 例跟腱与邻近组织粘连, 影响踝关节背伸, 足部蹬力无明显下降。2例考虑排异反应,经对症处理痊愈。1例出现少许皮缘坏死、切口感染,扩创换药,行邻近转移皮瓣覆盖后痊愈。所有患者出院时切口均愈合。结果显示,同种异体肌腱移植修复跟腱断裂效果满意,是一种值得推荐的治疗选择。但远期疗效需要进一步观察。     

损伤肌腱再生修复过程中胶原纤维的形成与降解

在跟腱缺损的动物模型中植入人发角蛋白(human hair keratin，HHK)人工腱进行修复，观察HHK人工腱诱导自体腱形成过程中胶原纤维的形成与降解。实验发现：在HHK人工腱植入后1周，肌腱的断端有新生腱细胞(成腱细胞)；第3周，人发之间的组织中成腱细胞增多，顺着人发的方向生长，成行排列，且与损伤肌腱的长轴平行，有时可见细胞分裂相，     

BMP12基因和间充质干细胞修复兔跟腱缺损的形态学研究

目的　观察用BMP12基因和间充质干细胞修复兔跟腱缺损的形态学变化。方法　模拟微重力条件下构建两种组织工程化肌腱。 2 4只新西兰白兔分为 4组 :①单纯人发角蛋白 (HHK对照组 )组 ;②骨髓间充质干细胞 (MSCs) /HHK组织工程化肌腱组 ;③骨形态发生蛋白 12 (BMP12 )基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组 ;④pTARGET BMP12质粒 /HHK组。采用光电镜、免疫组织化学和RT PCR方法观察术后不同时期损伤肌腱的修复情况。结果　MSCs/HHK组织工程化肌腱组和基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组的缺损肌腱的再生修复效果均优于单纯HHK组 ,尤以基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组的修复效果最佳 ,且伴随有Ⅰ型胶原mRNA表达的增高。结论　BMP12基因和MSCs通过促进内源性愈合参与了缺损肌腱的再生修复。     

氯仿/甲醇处理同种异体肌腱移植的生物力学变化

目的 :探讨氯仿 /甲醇 (CM)处理的同种异体肌腱移植后的生物力学性质。方法 :2 4只新西兰兔随机选择 1侧跟腱行CM腱移植 ,另一侧行自体移植。按术后 1、2、6、12周行生物力学测试。结果 :自体腱移植组和CM肌腱移植组的拉伸强度和刚度在术后 1、2周 ,6周与术前、术后 12周分别有显著性差异(P <0 .0 1)。自体腱移植组与CM腱移植组术后 12周的拉伸强度和刚度无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :CM腱移植组与自体腱移植组在各个时间点的力学变化相近 ,无统计学变异 ,可以用来替代自体腱。     

肿瘤坏死因子α拮抗剂对应力屏蔽导致的跟腱挛缩形态学影响

背景：跟腱应力屏蔽后肿瘤坏死因子α明显升高,应用肿瘤坏死因子α拮抗剂干预肿瘤坏死因子α的作用是否会干预跟腱挛缩尚不清楚。 目的：通过观察重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)干预应力屏蔽后大鼠跟腱形态学变化,了解肿瘤坏死因子α在肌腱挛缩中的影响及肿瘤坏死因子α拮抗剂对肌腱挛缩的干预作用。 方法：20只健康雄性SD大鼠左后肢行跟腱应力屏蔽后随机数字表法均分为实验组和模型组,两组中随机各抽取5只大鼠以右后肢为正常对照组。建模后即刻实验组大鼠使用0.6 mg/kg重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白、模型组使用1 mL磷酸缓冲盐溶液于大鼠皮下注射,后根据重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白半衰期两组分别再注射3次,干预2周时大体下及透射电镜下观察跟腱形态学改变。 结果与结论：大体观察实验组跟腱明显比模型组细小、光滑,但较正常对照组粗。电镜下模型组胶原纤维束较实验组组疏松、紊乱;实验组横切面和纵切面均与正常对照组差异无显著性意义。说明,在2周时,肿瘤坏死因子α拮抗剂能明显预防应力屏蔽所致的肌腱挛缩。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

Weft-knitted silk-poly(lactide-co-glycolide) mesh scaffold combined with collagen matrix and seeded with mesenchymal stem cells for rabbit Achilles tendon repair

Abstract

Natural silk fibroin fiber scaffolds have excellent mechanical properties, but degrade slowly. In this study, we used poly(lactide-co-glycolide) (PLGA, 10:90) fibers to adjust the overall degradation rate of the scaffolds and filled them with collagen to reserve space for cell growth. Silk fibroin-PLGA (36:64) mesh scaffolds were prepared using weft-knitting, filled with type I collagen, and incubated with rabbit autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs). These scaffold–cells composites were implanted into rabbit Achilles tendon defects. At 16 weeks after implantation, morphological and histological observations showed formation of tendon-like tissues that expressed type I collagen mRNA and a uniformly dense distribution of collagen fibers. The maximum load of the regenerated Achilles tendon was 58.32% of normal Achilles tendon, which was significantly higher than control group without MSCs. These findings suggest that it is feasible to construct tissue engineered tendon using weft-knitted silk fibroin-PLGA fiber mesh/collagen matrix seeded with MSCs for rabbit Achilles tendon defect repair.     

A novel biodegradable PCL film for tendon reconstruction: Achilles tendon defect model in rats

This study aims to investigate applicability of poly(epsilon-caprolactone) (PCL) biodegradable films for repair of gaps in Achilles tendons in a rat model, also comparing surgical repair versus no repair approaches. PCL was synthesized with tailor-made properties, then, PCL films were prepared by solvent casting. Seventy-five outbred Sprague-Dawley rats were randomly allocated into five groups: (i) sham operated (skin incision only); (ii) no repair (complete division of the Achilles tendon and plantaris tendon without repair); (iii) Achilles repair (with a modified Kessler type suture); and (iv) plasty of Achilles tendon defects with the biodegradable PCL films, and (v) animals subjected to 1 cm mid-substance defect with no repair. Functional performance was determined from the measurements of hindpaw prints utilizing the Achilles functional index. The animals were killed 8 weeks after surgery and histological and biomechanical evaluations were made. All groups subjected to Achilles tendon division had a significant functional impairment that gradually improved so that by day 28 there were no functional impairments in any group whereas animals with a defect remained impaired. The magnitude of the biomechanical and morphological changes at postoperative 8 weeks were similar for no repair group (conservative), Achilles repair group and tendonplasty group (biodegradable PCL film group). The initial rate of functional recovery was significantly different for primary suture, Achilles repair group and PCL film group (p>0.01). But, at the 28th day, functional recovery was quite similar to the other groups. In summary, our results suggest that the PCL film can be an alternative biomaterial for tendon replacement.     

伞式经跟骨缝合组合修复跟腱断裂的实验研究

目的 评价伞式经跟骨组合缝合法修复跟腱断裂的生物力学特性。方法 采用伞式经跟骨缝合法，组合应用0-薇乔线(Poliglactin-910)、腱周采用交叉缝合法修复8只家兔单侧跟腱断裂模型，术后固定3天，功能锻炼25天后行离体生物力学实验。结果术后28天组达正常组跟腱生物力学特性的90％。结论 采用伞式经跟骨组合缝合法修复跟腱允许早期康复活动，早期功能锻炼可以迅速提高跟腱的生物力学特性。     

小腿有关肌腱转位修复跟腱的生物力学评价

目的：为临床选用自体肌腱转位修复跟腱提供生物力学依据。方法：选用防腐固定成年和新鲜青年下肢各７例。制备拉伸试件，在ＳＷＤ－１０型材料试验机上，进行单向拉伸破坏实验。结果：跟腱、腓骨长肌腱、腓骨短肌腱、胫骨后肌腱及展肌腱固定组分别为２２９２．６Ｎ、１０２０．５Ｎ、７５２．０Ｎ、９３８．９Ｎ和７２１．３Ｎ，新鲜组分别为１９２７．１Ｎ、８１９．５Ｎ、３４６．７Ｎ、６９９．７Ｎ、３０３．８Ｎ。结论：腓骨长肌腱是跟腱缺损修复术较理想的自体材料。