红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤

目的观察红景天苷对缺氧损伤成年大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)组织分离培养神经干细胞凋亡比例和Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响。方法原代培养成年大鼠SVZ神经干细胞,不同浓度红景天苷预处理24 h后,干细胞厌氧工作站缺氧损伤48 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力;显微镜下观察各组细胞形态;TUNEL染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2和caspase-3蛋白的表达变化。结果红景天苷预处理可显著改善缺氧损伤后的细胞生长状态和活力,降低缺氧引起的细胞凋亡率的升高(P<0.05);拮抗缺氧损伤导致的细胞Bcl-2/Bax蛋白比例的下降,降低活化的caspase-3蛋白的表达(P<0.05)。结论红景天苷通过抑制神经干细胞的凋亡,保护缺氧对神经干细胞的损伤,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspases-3的表达有关。     

红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响

目的 观察红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响,并探讨其造血调控作用机制。方法 用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法和流式细胞术（FCM）分别检测红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞以及骨髓细胞周期的影响,同时用免疫组织化学方法检测各组骨髓细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果 低剂量和高剂量红景天苷能明显升高外周血白细胞（WBC）和骨髓有核细胞（BMC）数,低剂量红景天苷能明显升高外周血血小板（PLT）数,促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化,而高剂量红景天苷具有明显促进S期细胞向G2／M期细胞转化的能力,从而导致高、低剂量组G2／M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。另外,高、低剂量红景天苷都能促进骨髓细胞中Bcl-2的表达。其中低剂量红景天苷的促进作用更为明显。同时,高、低剂量红景天苷也都能明显降低骨髓细胞中Bax的表达。结论 红景天苷可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞解除G0／G1期阻滞,加速骨髓G0／G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2／M期细胞的转化以及升高骨髓细胞Bcl-2的表达、降低Bax的表达来抑制骨髓细胞凋亡,促进骨髓造血功能的恢复。     

红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响

目的观察红景天多糖对骨髓抑制小鼠表达凋亡相关蛋白的影响，并探讨其造血调控作用部分机制。方法用免疫组化SABC法分别检测骨髓抑制小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白Caspases-3及Fas／FasL的表达。结暴经过射线照射及化疗药物造模后，小鼠骨髓细胞表达Fas／FasL、caspase-3明显增加，用药后各组小鼠骨髓细胞Fas／FasL、caspase-3蛋白表达有不同程度的减少，以高剂量组减少明显（P〈0．01）。结论红景天多糖可通过影响骨髓抑制小鼠骨髓细胞死亡受体Fas介导的Fas／FasL-caspase-3凋亡信号通路，减少骨髓细胞凋亡，促进骨髓造血功能的恢复。     

红景天苷对神经干细胞的影响

近年来,随着脑血管疾病的发病率、致死率的逐年提高,中药的有效成分对神经干细胞的作用机制引起越来越多的专家和学者们的关注,本文主要阐述了红景天苷对神经干细胞的影响,力求通过研究和解决这些问题为临床应用提供有力依据。     

红景天苷通过HIF-1途径对缺氧诱导心肌细胞凋亡的抑制作用

目的:研究红景天苷(Sal)抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡作用并探讨其可能的分子机制.方法: 将原代培养的心肌细胞分为6组:正常对照组、缺氧组、缺氧 不同剂量Sal预处理组(10,50,100 mg/L)和缺氧 10-7mol/L胰岛素组.比色法测定细胞存活率、细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)活力;Hoechst 33258染色观察细胞形态学改变;细胞流式检测术、DNA-ladder测定细胞凋亡;免疫荧光染色、蛋白印迹检测HIF-1α表达.结果:与缺氧组比较,不同浓度Sal预处理组可增加细胞存活率(P<0.05);显峙嘌锨逡篖DH,CK活力(P<0.01);减少Hoechst染色阳性细胞(P<0.01);流式细胞仪、DNA-ladder检测凋亡细胞比率降低.缺氧可激活HIF-1α的表达并诱导其转位,100 g/L Sal可明显增加HIF-1α蛋白的表达(P<0.01).结论:Sal可抑制缺氧诱导的心肌细胞的凋亡,该抑制作用具有剂量依赖性,其分子机制可能与激活HIF-1α的表达,诱导其转位有关.     

红景天苷对人心肌细胞缺氧损伤的保护作用及可能机制

目的  观察人心肌细胞（HCM）在不同浓度红景天苷的刺激下其乳酸脱氢酶（LDH）、脱酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）和超氧化物歧化酶（SOD）的释放量,以及心肌细胞活性的变化。分析红景天苷对人心肌细胞的作用,并探讨其可能的分子机制。方法  体外模拟缺氧环境对人心肌细胞造成损伤,测定不同浓度红景天苷作用下人心肌细胞LDH、CK、AST以及SOD释放量,并采用活细胞计数法试剂盒（cck-8）检测不同处理组细胞活性,赫克斯特-碘化丙啶（Hoechst-PI）双染观察细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测低氧诱导因子（HIF-1α）表达。结果  与缺氧对照组比较,1×10-4、10-5及10-6 mol/L红景天苷处理组LDH、CK和AST释放量均降低,呈剂量依赖性（P <0.01）。与缺氧对照组比较,红景天苷处理组（1×10-4、10-5及10-6 mol/L）细胞上清SOD含量增加,呈剂量依赖性（P <0.01）。与缺氧对照组比较,红景天苷处理组（1×10-4、10-5及10-6 mol/L）人心肌细胞随着红景天苷的剂量增大,细胞活性逐渐升高。与缺氧对照组比较,红景天苷处理组（1×10-4、10-5及10-6 mol/L）人心肌细胞随着红景天苷的剂量增大,死亡以及凋亡细胞呈现明显减少趋势。缺氧可激活HIF-1α的表达。结论  红景天苷能抑制人心肌细胞LDH、CK和AST的释放,增加SOD的含量,同时可提高人心肌细胞的活性并减少其凋亡,对其有保护作用,其分子机制可能与诱导HIF-1α的表达有关。

     

血塞通胶囊通过抑制炎症因子表达对心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的 通过建立心肌损伤大鼠模型,并应用血塞通胶囊处理损伤的心肌细胞,探讨血塞通胶囊对心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法 将25只SD雄性大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型组和血塞通胶囊低、中、高剂量组,每组5只,取每组大鼠心肌细胞进行培养,各组心肌细胞凋亡率采用流式细胞仪检测,各组炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平和氧化应激指标[乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平采用ELISA测定,应用Western blotting法检测核因子κB(NF-κB)表达量。结果 H/R组心肌细胞凋亡率[(22.85±1.78)%]高于对照组[(3.45±0.42)%]及血塞通胶囊低、中、高剂量组[(10.25±2.02)%、(8.96±1.23)%、(5.88±1.45)%],均P<0.05;H/R组血清IL-6、TNF-α、LDH、MDA及NF-κB表达量较对照组及血塞通胶囊低、中、高剂量组显著提升(P<0.05),而H/R组SOD活力较对照组及血塞通胶囊低、中、高剂量组显...     

红景天苷对缺氧心肌细胞保护作用的蛋白组学分析

[目的]观察缺氧大鼠心肌细胞和经红景天苷(salidroside,SAL)干预的大鼠心肌细胞蛋白表达差异,探讨SAL对缺氧心肌的保护作用机制.[方法]以H9c2大鼠心肌细胞为靶细胞,使用不同浓度的氯化钴(CoCl2)和SAL处理H9c2细胞,筛选适宜的CoCl2刺激浓度和最佳的SAL保护浓度.采用稳定同位素标记细胞结合...     

氯化锂对缺氧后神经干细胞磷酸化Caspase-9蛋白表达的影响

目的探讨氯化锂对缺氧后神经干细胞磷酸化Caspase-9(P-Caspase-9)蛋白表达的影响。方法分离培养新生Sprague-Dawley乳鼠神经干细胞(NSCs),建立缺氧NSCs模型。将NSCs分为正常对照组、单纯缺氧组、生理盐水干预组和1、3、5 mmol·L~(-1)氯化锂干预组。正常对照组乳鼠NSCs加无血清培养基,单纯缺氧组乳鼠NSCs仅缺氧1 h,生理盐水干预组乳鼠NSCs缺氧1 h后加生理盐水,3组氯化锂干预组乳鼠NSCs缺氧1 h后分别加入氯化锂至1、3、5 mmol·L~(-1)。免疫组织化学法检测各组乳鼠NSCs中P-Caspase-9阳性细胞表达。结果成功建立了NSCs缺氧模型。正常对照组、单纯缺氧组、生理盐水干预组及1、3、5 mmol·L~(-1)氯化锂干预组P-Caspase-9阳性细胞数分别为126.400±0.548、21.000±0.707、21.200±0.837、64.600±0.548、116.800±1.483、17.200±1.643。单纯缺氧组和生理盐水干预组乳鼠NSCs中P-Caspase-9阳性细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05);其余各组NSCs中P-Caspase-9阳性细胞数两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氯化锂可能通过磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/Caspase-9信号通路调控缺氧NSCs增殖。