经肝动脉途径兔自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化

BACKGROUND:How to make more transplanted bone marrow stem cells stay and differentiate in the liver is an important issue, which is also crucial for treatment of liver cirrhosis via the hepatic artery. OBJECTIVE:To investigate the therapeutic effect of autologous bone marrow stem cell transplantation via the hepatic artery on liver cirrhosis. METHODS:Thirty New Zealand white rabbits were equivalently randomized into normal control, stem cell transplantation and model groups. Animal models of liver cirrhosis were made in the latter two groups. Then, model rabbits in the stem cell transplantation group were subjected to autologous bone marrow stem cell transplantation via the hepatic artery. Liver function of rabbits was detected in 1, 2, 4, 8, 10 weeks after cell transplantation, and pathological detection of the liver was performed in the 10th week. RESULTS AND CONCLUSION:At 10 weeks after cell transplantation, the liver function of the rabbits was improved significantly compared with the model group, including reduced activities of serum alanine aminotransferase, total bilirubin and aspartate aminotransferase, shortened activated partial thromboplastin time, and increased albumin level (P < 0.05). Pathological examination of the liver showed that the liver cells in the stem cell transplantation group were intact with no obvious edema and still had the structure of the pseudolobule, and compared with the model group, the degree of liver fibrosis was significantly reduced in the stem cell transplantation group. Our experimental results show that the transplantation of autologous bone marrow stem cells via the hepatic artery has a certain therapeutic effect on liver cirrhosis by increasing the body albumin content in a short time and improving the liver function.     

自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的围手术期护理

肝细胞再生在肝细胞损伤修复中起着重要作用,骨髓源性干细胞（bone marrow stem cells,BMSC）在诱因刺激下可定向分化为肝细胞和胆管细胞,参与肝结构和功能的修复和重构[1],是肝细胞再生的重要肝外来源。2008年以来,我科采用患者自体BMSC作为供体,体外分离、纯化后经肝动脉移植入患者肝内,通过自体BMSC在肝脏中分化为具有完整功能的肝细胞,使患者的肝功能得到恢复。这项新技术不仅临床效果良好,而且风险小、痛苦少、费用低、没有伦理问题,具有很大的临床应用前景睢]。但目前针对此手术的相关护理流程和标准国内尚没有定论,现将我科自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的护理工作报告如下。     

失代偿期乙肝肝硬化患者的骨髓间充质干细胞的免疫调节作用

目的 观察失代偿期乙型肝炎肝硬化患者的骨髓间充质干细胞（BMSCs）对自体外周血淋巴细胞增殖及调节性T细胞（Tregs）亚群的影响.方法 从8例失代偿性肝硬化患者骨髓中分离培养MSCs,采用流式细胞仪分析鉴定MSCs的纯度,分离患者外周血淋巴细胞行羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFDA SE）荧光染色,在植物血凝素（PHA）刺激下,培养基为自体血清,自体外周血淋巴细胞与BMSCs共培养,流式细胞术检测各组淋巴细胞增殖情况及CD4＋ CD25＋ CD127-Tregs频数.结果 流式细胞术显示：接触培养组及非接触培养组的细胞增殖较阳性对照组明显减低（P均＜0.01）,但亦显著高于阴性对照组（P均＜0.01）,其CD4＋ CD25＋ CD127-Tregs频率显著高于阳性及阴性对照组（P均＜0.01）;接触培养组与非接触培养组比较,淋巴细胞增殖及CD4＋ CD25＋ CD127-Tregs频数差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论 肝硬化患者BMSCs可抑制自体外周血淋巴细胞增殖、上调CD4＋ CD25＋ CD127-Tregs表达.     

自体骨髓单个核细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化

背景：大量研究发现,骨髓间充质干细胞是肝干细胞的主要肝外来源,骨髓间充质干细胞在特定环境下可分化为肝组织和肝细胞从而参加肝脏的修复与重建。 目的：观察自体骨髓单个核细胞移植治疗失代偿期肝硬化的效果及安全性。 方法：选择肝硬化失代偿期患者20例,在无菌条件下由髂后上棘抽取骨髓200 mL,在体外分离纯化骨髓单个核细胞并制成10 mL细胞悬液,经肝动脉将细胞悬液移植入肝脏,分别在移植后第2、4、8、12周复查肝脏功能,观察实验室指标,临床症状及不良反应。 结果与结论：移植后2周内所有血清学指标均无显著改变,移植后4周白蛋白由(27.05±5.23) g/L升到(30.02±5.02) g/L,纤维蛋白原由(1.55±0.53) g/L升到(2.55±0.53) g/L,凝血酶原时间由(24.05±5.23) s降到 (17.05±5.13) s,胆碱酯酶和甲胎蛋白也有不同程度上升,氨基转移酶、总胆红素水平在移植前后无显著性变化。单个核细胞移植后食欲改善、体力好转10例,腹胀减轻6例,腹水减少7例,下肢浮肿减轻4例。全部患者在移植中未发生严重并发症,移植近期无不良反应出现。     

骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的研究进展

肝硬化是临床中常见的慢性进行性肝病,目前治疗晚期肝硬化最有效的方法是肝脏移植,但肝源缺乏、费用昂贵、移植排斥反应及长期应用免疫抑制剂引起并发症等成为限制其广泛应用的主要原因.干细胞移植有利于受损肝组织修复,能够代偿部分肝功能,已成为治疗肝病的一种新方法.就骨髓间充质干细胞移植治疗肝硬化的基础、临床研究进展、存在的问题以及发展前景作一综述,旨在为其进一步研究提供理论依据.     

干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的Meta分析

目的 系统评价干细胞移植对失代偿期肝硬化的治疗作用.方法 计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库、中国生物医学文献数据库、CALLS学位论文库和Pubmed、Embase、Cochrane Library和Google学术数据库,收集应用干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的随机对照临床试验（RCT）,辅以手工检索,评价文献质量,合并肝功能结果进行Meta分析.结果 纳入研究的29篇文献均为RCT,共1 161例患者.Meta分析结果显示,术前移植组和对照组患者各指标差异无统计学意义;移植组术后第4、8、12周患者丙氨酸氨基转移酶（ALT）[MD4周=-17.17,95％CI（-24.90,-9.43）,P＜0.001]、[MD蜩=-14.80,95％CI（-22.32,-7.28）,P＜0.001]、[MD12周=-15.5,95％ CI（-28.47,-2.52）,P＜0.001]、血浆总胆红素（T-Bil）[MD4周=-5.92,95％CI（-9.72,-2.13）,P＜0.001]、[MD8周 =-12.02,95％CI（-18.78,-5.25）,P＜0.001]、[MD12周=-11.23,95％CI（-19.61,-2.84）,P＜0.001]水平均明显低于对照组;而血清白蛋白（ALB）[MD4周=2.87,95％CI（1.83,3.92）,P＜0.001]、[MD8周=5.11,95％ CI（3.90,6.31）,P＜0.001]、[MD12周=4.66,95％ CI（2.10,7.22）,P＜0.001]、凝血酶原活动度（PTA）[MD4周=3.76,95％CI（-0.98,8.49）,P＜0.001]、[MD8周=7.92,95％CI（4.25,11.58）,P＜0.001]、[MD12周=10.51,95％CI（-2.15,23.17）,P＜0.001]均明显较对照组升高.结论 干细胞移植能改善失代偿期肝硬化,干细胞治疗的发展需要更多的注册临床研究.     

自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化的护理

肝硬化是临床常见病、多发病,该病进入失代偿期后逐渐发展,最终可导致肝功能衰竭。自体骨髓干细胞移植是治疗肝功能衰竭的一个新的研究方向,该方法简便、有效、侵入性小且并发症少,具有重要临床意义[1]。我科于2009年9月至2011年1月共收治严重肝硬化失代偿期患者8例,经自体骨髓干细胞移植,效果良好,现报告如下。     

自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化的疗效观察

治疗终末期肝病,原位肝移植是最理想的手段,然而供体短缺、手术损伤大、术后的免疫排斥反应以及费用高昂等问题限制了肝移植技术的发展和临床应用。自体骨髓干细胞移植操作简便、有效、侵入性小且并发症少,具有重要的临床意义。我科2009年9月至2011年1月共收治严重肝硬化失代偿期患者8例,经自体骨髓干细胞移植,治疗效果良好     

人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化的近期效果*

背景：脐带间充质干细胞可分化为肝细胞样细胞。 目的：观察人脐带间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的近期临床效果。 方法：选择肝硬化失代偿期患者30例,对照组18例给予内科常规治疗,移植组12例在内科综合治疗基础上经肝动脉移植人脐带间充质干细胞悬液治疗。 结果与结论：移植后,移植组白蛋白有上升趋势,从第2周开始明显高于对照组(P < 0.05),并持续至第12周;谷丙转氨酶和凝血酶原时间有下降趋势,从第8周开始明显低于对照组(P < 0.05),并持续至第12周;总胆红素水平有下降趋势,从第4周开始明显低于对照组(P < 0.05),并持续至第12周。两组临床症状、体征改善情况差异无显著性意义(P > 0.05)。说明经股动脉移植人脐带间充质干细胞是治疗失代偿期肝硬化近期有效。关键词：肝硬化;脐带;间充质干细胞;失代偿期;肝动脉;移植 缩略语注释：UC-MSCs：human umbilical cord mesenchymal stem cells,人脐带间充质干细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.14.024     

脂肪间充质干细胞经肝动脉移植治疗晚期肝病

BACKGROUND: Stem cell transplantation is a promising treatment for advanced liver diseases, and adipose-derived mesenchymal stem cells are a hot topic following bone marrow mesenchymal stem cells. OBJECTIVE: To explore the therapeutic effect of adipose-derived mesenchymal stem cells transplantation via the hepatic artery on advanced liver diseases in rats. METHODS: Forty-five rats were randomized into three groups, 15 rats in each group: control group, model group and transplantation group. Rat models of liver cirrhosis were made in the latter two groups through subcutaneous injection of carbon tetrachloride. Then, 1 mL of CFSE-labeled adipose-derived mesenchymal stem cells was infused via the hepatic artery in the transplantation group, and the same volume of normal saline was infused in the model group. Control group had no treatment. Pathological changes, liver function and degree of hepatic fibrosis were observed in the three groups at 4 weeks after treatment. RESULTS AND CONCLUSION: After transplantation, green fluorescence-labeled adipose-derived mesenchymal stem cells were seen in the liver of rats. Hematoxylin-eosin staining and Masson staining showed unclear hepatic lobule structure in the model group with the formation of false lobules, cell cloudy swelling and loose, some degeneration and necrosis, and inflammatory cell infiltration; in the control group, there was nothing abnormal in the liver tissues of rats in the control group; in the transplantation group, the pathological changes of the rat liver were better than those in the model group, but worse than those in the control group. Compared with the model group, the level of serum albumin was higher in the control and transplantation group (P < 0.05), and the levels of bilirubin, aminotransferase and type IV collagen were lower in the control and transplantation group (P < 0.05). Thus, it can be seen that adipose-derived mesenchymal stem cell transplantation can improve liver function and reduce liver fibrosis in cirrhotic rats.      

Autologous bone marrow cells in the treatment of cirrhosis of the liver

The data characterizing tolerance and efficiency of autologous bone marrow cells in the treatment of patients with cirrhosis of the liver are presented. Injection of autologous bone marrow cells was not associated with the development of adverse reactions. Cell therapy of patients with compensated cirrhosis arrested asthenic syndrome, reduced cytolysis, increased the level of serum albumin and platelet count. Ultrasonic examination revealed reduction of portal hypertension (the area of the spleen and the portal vein lumen decreased). In patients with decompensated cirrhosis, a positive response presenting as reduction of the disease severity (by 1.9 points) was observed in 48.6% cases. Positive shifts in these patients were associated with a decrease of ALT and AST levels, reduction of laboratory signs of cirrhosis, increase in platelet count, and reduction of the asthenic syndrome. Hence, therapy with autologous bone marrow cells is safe and, according to preliminary results, can be regarded as a new approach to the treatment of patients with cirrhosis of the liver. __________ Translated from Kletochnye Tehnologii v Biologii i Medicine, No. 4, pp. 231–237, October, 2007     

同基因与异基因胚胎肝干细胞移植治疗小鼠肝硬化

背景：胚胎肝干细胞移植免疫相关研究较少,同基因与异基因胚胎肝干细胞移植对小鼠肝硬化的治疗作用,目前尚不清楚。 目的：观察同种同基因与同种异基因胚胎肝干细胞移植对小鼠肝硬化的治疗作用,以及治疗过程中免疫排斥反应发生情况。 方法：采用Ⅳ型胶原酶消化法分离纯化BALB/c与C57BL/6胚胎肝干细胞。104只健康BALB/c小鼠随机分为4 组：正常对照组不予任何处理;肝硬化组、同种同基因移植组、同种异基因移植组腹腔注射四氯化碳石蜡油溶液复制肝硬化模型,16周后分别经其尾静脉注射生理盐水,等量同种同基因胚胎肝干细胞和同种异基因胚胎肝干细胞。在移植4周后比较各组受体小鼠存活情况、肝功能恢复情况、肝纤维化程度、免疫细胞(CD4⁺T、CD8⁺T、NK、NKT)数目及比值、肝脏病理学变化。 结果与结论：同种同基因移植组和同种异基因移植组生存率均为100%,与肝硬化组小鼠存活率67%相比差异有显著性意义(P < 0.05);各组肝功能和肝纤维化指标差异无显著性意义(P > 0.05)。各组免疫学指标比较差异无显著性意义(P > 0.05)。肝脏组织病理学显示肝组织修复：同种异基因移植组>同种同基因移植组>肝硬化组。因此,经尾静脉移植胚胎肝干细胞能提高肝硬化小鼠的生存率、减轻肝细胞坏死程度;同种同基因与同种异基因胚胎肝干细胞移植未发现免疫排斥,对小鼠肝硬化有一定的治疗作用。     

人脐带源间充质干细胞静脉移植治疗大鼠肝纤维化

背景：近来国内外研究证明,来自其他组织的干细胞能够归巢到肝脏,并可能参与肝组织的再生,这为发展干细胞治疗肝脏疾病提供了新的希望。 目的：探究人脐带源间充质干细胞的分离、培养方法,观察脐带间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化模型的修复作用,为脐带间充质干细胞的临床应用提供可靠的理论依据。 方法：自然贴壁法分离、纯化人脐带间充质干细胞并进行体外培养和扩增,用皮下多点注射CCl₄制备肝纤维化大鼠模型。将22只模型大鼠随机分为模型损伤组(n=11)和细胞移植组(n=11)。细胞移植组在模型制备成功后的第1,2,3周经尾静脉给予1×10⁶脐带间充质干细胞治疗,4周后将大鼠处死,收集各组大鼠血液检测肝功能;摘取肝脏行苏木精-伊红染色,观察病理变化;免疫组化法观察库普弗细胞的数量及分布;免疫组化法观察治疗组脐带间充质干细胞的定位情况。 结果与结论：脐带间充质干细胞经尾静脉移植入肝硬化大鼠后,大鼠的肝功能均明显改善,与对照组比较,差异有显著性意义(P < 0.05);肝组织苏木精-伊红染色提示,肝纤维化程度明显改善;免疫组化法观察库普弗细胞的数量提示,库普弗细胞数量明显减少;免疫组化方法利用抗BrdU抗体在治疗组大鼠肝脏观察到BrdU标记的脐带间充质干细胞。说明脐带间充质干细胞移植可以改善大鼠外周血液的血生化特性和肝的组织学结构。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

自体骨髓干细胞移植治疗心力衰竭的研究进展

细胞移植已为病损心脏细胞重建及衰竭心脏功能恢复提供了一种全新的治疗方法。骨髓干细胞具有自我更新、定向分化成为包括心肌细胞等多种组织细胞的潜能,其增殖分化能力能持续终生,已成为细胞移植治疗心力衰竭的主要细胞源。本文就自体骨髓干细胞治疗心力衰竭可行性、与其他移植细胞相比较的优势、临床应用现状及目前问题与展望作一综述。     

人脐血间充质干细胞移植改善肝硬化大鼠的肝功能

背景：人脐血间充质干细胞移植治疗肝硬化的可行性及机制有待深入探讨。 目的：观察经门静脉移植人脐血间充质干细胞对肝硬化大鼠肝功能及组织病理学改变的影响。 方法：采用四氯化碳法制备肝硬化大鼠模型,造模成功后,细胞移植组经门静脉注射1 mL BrdU标记的人脐血间充质干细胞(5×106个),模型组注射等体积的PBS;以经门静脉移植1 mL人脐血间充质干细胞的正常大鼠作为对照。细胞移植后4周,取大鼠尾静脉血及肝脏组织进行检测。 结果与结论：细胞移植后4周,与模型组比较,细胞移植组大鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素明显降低,而白蛋白明显升高(P < 0.01);肝细胞炎性坏死、脂肪变及肝纤维化程度明显改善(P < 0.05或P < 0.01)。免疫组化及免疫荧光染色显示细胞移植组和对照组大鼠肝组织中均有人脐血间充质干细胞的定植,但细胞移植组BrdU阳性细胞数目明显多于对照组。RT-PCR检测结果显示,细胞移植组大鼠肝组织表达人源性细胞角蛋白18和白蛋白mRNA,而模型组未见。可见人脐血间充质干细胞移植可在一定程度上改善肝硬化大鼠的肝功能及病理损伤,其机制可能与移植细胞在肝硬化大鼠肝内归巢定植并向肝样细胞分化有关。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗杜氏型肌营养不良血清酶学变化对照研究

目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗杜氏型肌营养不良(DMD)治疗前后血清酶学变化及临床效果.方法 选择2007年6月至2009年6月解放军第四六三医院515例DMD患者,其中男性502例,女性13例;年龄1～20岁,平均年龄133岁.阳性家族史121例.经解放军第四六三医院伦理委员会同意,并征求患者本人及家...     

应用成人骨髓间充质干细胞建立人-猴肝脏嵌合体

背景：建立人骨髓间充质干细胞与猴的嵌合体肝脏对研究干细胞体内增殖与分化具有重要意义。 目的：应用成人骨髓间充质干细胞建立人-猴肝脏嵌合体动物模型。 方法：分离成人骨髓间充质干细胞,纯化并培养至6代,使细胞量大于5×108。转染绿色荧光蛋白基因标记后在B超引导下移植到妊娠10周的胎猴肝脏中,幼猴出生后1个月和3个月,穿刺取肝脏组织活检,切片后荧光显微镜观察带绿色荧光的人源细胞数量及分布,免疫组织化学染色法检测人白蛋白的表达。 结果与结论：荧光显微镜观察发现,幼猴出生后1个月及3个月均发现有人源骨髓间充质干细胞在肝脏内存活,并发生迁移,分布趋向于集中。免疫组织化学检测发现,幼猴出生后1个月及3个月肝脏内有表达人白蛋白的细胞存在,分布与带有绿色荧光的细胞较为一致。提示应用成人骨髓间充质干细胞在猴胚胎早期能够建立人-猴肝脏嵌合体,人源性骨髓间充质干细胞可在猴肝中分化成具有合成白蛋白功能的细胞。     

脐血单个核细胞移植治疗失代偿期肝硬化

背景：原位肝移植是目前治疗终末期肝病的最有效手段,但是供肝来源匮乏、免疫排斥、无法有效控制反复感染等问题限制了其应用。干细胞移植技术的应用为该病种的治疗提供了新的思路和研究方法,许多研究证实可以通过各种不同的方法在体外成功诱导脐血来源的间充质干细胞向肝细胞转化。 目的：探讨人脐血单个核细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效及可行性。 方法：异体人脐血单个核细胞移植治疗23例肝硬化失代偿期患者,检测移植后2,4,8,24周的血清丙氨酸氨基转移酶、白蛋白、胆碱酯酶、总胆红素和凝血酶原时间,并观察患者临床症状体征改善情况以及不良反应。 结果与结论：人脐血单个核细胞移植后2周,肝功能各项指标较治疗前无明显改善(P > 0.05);移植后4周,谷丙转氨酶有显著改善(P < 0.05)、其余指标无明显改善;移植后12周肝功能各项指标均有改善(P < 0.05),且肝脏硬度有所改善(P < 0.05);移植后24周各项指标有显著性改善(P < 0.01)。移植后4周时患者临床症状有明显改善,20例乏力好转(87%)、21例食欲改善(91%)、19例腹水减轻(83%);所有患者移植期间及治疗后随访24周无严重不良反应。结果显示异体人脐血单个核细胞移植治疗肝硬化失代偿期患者临床疗效肯定,安全性好,可作为中晚期肝硬化患者的临床治疗手段。