金莲花中荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑损伤的保护作用

目的 研究金莲花中黄酮碳苷单体荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑损伤的保护作用。方法 小鼠ip给予D-半乳糖8周制备亚急性衰老模型,造模成功后将小鼠分成模型组,维生素E（20 mg/kg）阳性对照组,荭草苷和牡荆苷高、中、低剂量（40、20、10 mg/kg）组,各组每日上午ig给予相应药物1次。连续给药8周后小鼠断头取脑,测脑质量,制备脑组织匀浆上清液,检测脑组织中抗氧化酶系、丙二醛（MDA）、脂褐素,并观察脑组织形态学变化。结果 荭草苷和牡荆苷可改善衰老小鼠一般状态,延缓脑组织萎缩,提高脑组织中抗氧化酶的活性和降低MDA、脂褐素的量,改善海马区神经细胞结构的功能。荭草苷中、低剂量的抗氧化活性强于同剂量的牡荆苷,差异显著（P＜0.05、0.01）;而荭草苷和牡荆苷高剂量的抗氧化活性与维生素E的相当。结论 荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与提高脑组织内抗氧化酶系活性,降低MDA、脂褐素的量,改善海马区神经细胞结构功能相关。     

金莲花中药效成分荭草苷和牡荆苷的色谱鉴定

目的建立金莲花中药效成分荭草苷和牡荆苷的色谱鉴定方法。方法采用 TLC 和 HPLC 法分别进行定性和定量分析。结果①TLC 鉴定方法的最佳条件:聚酰胺薄膜,用氯仿-丙酮-冰醋酸-无水乙醇(4:1:3:2)展开,喷1%三氯化铝乙醇试液显色后在紫外(365 nm)灯下检视。在此条件下,荭草苷的 Rf 值为0.46,牡荆苷的 Rf 值为0.62,2个斑点形状及分离效果均很好。②HPLC 定量分析的最佳条件:色谱柱为 C_(18)ODS_2,流动相为0.35%磷酸溶液-乙腈(82:18),检测波长为345 nm。在此条件下,牡荆苷色谱峰的分离度>1.5,保留时间<10 min,而且各项方法学试验均得到良好结果。结论建立的此项鉴定方法可行。     

金银花水煎剂对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用

[目的]探讨金银花水煎剂对D-半乳糖致衰模型小鼠的抗氧化作用。[方法]（1）取一月龄ICR小鼠50只,随机分为对照组、衰老组、金银花高、中、低剂量组。D-半乳糖构建衰老模型过程中,金银花高（10g·kg^-1）、中（5g·kg^-1）、低（2.5g·kg^-1）剂量组每天按剂量分别灌胃。对照组和衰老组灌等量的生理盐水。连续6W后采集小鼠血清样品和各组织匀浆样品进行生化指标SOD、MDA、GSH-Px检测。[结果]42d后,衰老组小鼠出现不同程度的行动缓慢,皮毛光泽暗淡;体重低于正常组;血清、肝、肾、大脑组织中的SOD值、GSH-Px水平低于正常组;血清、肝、肾组织中的MDA含量均高于正常组（P〈0.05或P〈0.01）;以上数据说明造模基本成功。与衰老组比较,金银花给药组各项指标明显改善,金银花给药组体重增加高于衰老组（P〈0.01）;血清、肝、肾SOD值及GSH-Px水平均高于衰老组（P〈0.05或P〈0.01）,MDA含量低于衰老组（P〈0.05或P〈0.01）。[结论]金银花对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗氧化作用,且中剂量组（5g·kg^-1）效果显著。     

金莲花中荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑组织动态抗氧化作用研究

目的：研究金莲花中荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖(D-galactose,D-gal）致衰老小鼠脑组织抗氧化酶活性的动态影响,寻找荭草苷和牡荆苷对脑组织抗氧化酶系活性作用的时效关系。方法：采用D-gal腹腔注射（intraperitoneal injection, ip）致亚急性衰老小鼠为模型,8周造模成功后,分成正常组,模型组,荭草苷和牡荆苷各三个剂量组（40,20,10 mg·kg^-1）,维生素E对照组。各治疗组从第9周开始每日上午分别口服灌胃(intragastric perfusion, ig)给药,每日一次。给药第2,4,6,8周时,分别断头处死小鼠,用预冷的生理盐水制成10％的脑组织匀浆,8000 r离心得上清液,检测超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶以及脑脂褐素含量。结果：与模型组相比,给药2、4周后,各治疗组抗氧化酶系虽有提高但无统计学意义,给药6、8周后,各治疗组在提高抗氧化酶系活性以及降低脑脂褐素含量上差异有显著性。荭草苷和牡荆苷相比,给药2、4周后,各剂量组在提高抗氧化酶活性及降低脑脂褐素含量上无统计学意义,给药6周后,荭草苷40 mg·kg^-1,20 mg·kg^-1,10 mg·kg^-1三个剂量组在提高抗氧化酶活性及降低脑脂褐素含量上优于同等剂量的牡荆苷,给药8周后,荭草苷20 mg·kg^-1和10 mg·kg^-1剂量组在提高抗氧化酶系的活性及降低脑脂褐素含量上高于同等剂量的牡荆苷,而40 mg·kg^-1剂量组差异无显著性。与维生素E相比,给药8周后,荭草苷和牡荆苷20 mg·kg^-1,10 mg·kg^-1两个剂量组在提高脑组织抗氧化酶系活性及降低脑脂褐素含量上低于维生素E,40 mg·kg^-1剂量组差异无显著性。结论：D-gal致衰老小鼠脑组织抗氧化酶活性的作用,随给药时间和给药剂量的增加,其提高抗氧酶活性的作用增强。高剂量的荭草苷和牡荆苷抗氧作用与维生素E相当。荭草苷和牡荆苷具有提高     

异莲心碱对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究

目的：探讨异莲心碱对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化的作用。方法：选取昆明种成年小鼠50只,随机将其分为空白组、模型组、异莲心碱低剂量组（10 mg/kg）、高剂量组（20 mg/kg）及维生素C（Vitamin C）对照组,测定小鼠体重和肝脏指数,以小鼠血清和肝脏组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性及MDA含量为指标,考察异莲心碱在体内的抗氧化性能。结果：与空白组比较,模型组小鼠体重和肝脏指数明显下降,为32.87 g和3.87 mg/g;血清和肝脏组织SOD和GSH-Px活性明显降低,其值分别为247 U/ml、408 U/ml和358、319 U/mgpro;MDA含量为20.62 nmol/ml和13.01 nmol/mgpro,明显增加（P〈0.01）;与模型组比较,异莲心碱20 mg/kg可明显拮抗小鼠体重和肝脏指数的降低、增强血清和肝脏组织SOD和GSH-Px活性、减少MDA含量（P〈0.01）,其值分别为36.29 g,4.53 mg/g,305、459 U/ml,438、355 U/mgpro和16.47 nmol/ml。异莲心碱低剂量组小鼠肝脏组织GSH-Px活性为333 U/mgpro,与模型组比较差异无统计学意义。结论：异莲心碱能显著提高D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化能力。     

阿魏酸钠对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化活性的研究

目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对D -半乳糖诱导衰老模型小鼠抗氧化能力的影响。方法 :D -半乳糖 (15 0mg·kg-1)诱导衰老模型小鼠为实验对象 ,造模同时及造模第 5周始同时ipSF (2 5、 5 0mg·kg-1) ,以体重、免疫器官重量 ,血清、脑SOD ,血清、肝脏MDA ,全血GSH -Px活力和脑MAO含量为指标 ,全面考察SF抗衰老作用。结果 :造模同时注射SF高低剂量组均能显著对抗D -半乳糖所致小鼠血清、肝脏MDA、脑MAO的增加 ,提高血清、脑SOD的活力 ,对抗小鼠体重、胸腺指数下降 ;SF高剂量组显著抑制脾指数降低 ,提高GSH -Px活力。造模第 5周开始同时给药高剂量组显著抑制血清MDA的增加。结论 :SF具有良好的抗氧化能力 ,预防性给药能在一定程度上延缓D -半乳糖引起的小鼠体内的拟衰老变化 ,而治疗性给药抗衰老作用不明显。     

安吉白茶茶多酚对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用研究

目的:探讨安吉白茶茶多酚对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用。方法:72只雄性ICR小鼠随机分为正常组、D-半乳糖模型组、安吉白茶茶多酚低、中、高剂量组,Vc组。除正常组外,余组采用腹腔注射D-半乳糖建立衰老小鼠模型。在造模的同时,给药组分别灌胃相应浓度药物;正常组和模型组每天灌胃等量的生理盐水。连续给药35天后称体重,摘眼球取血,分离血清并测定脏器指数;测定血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:模型组较正常组小鼠体重增量及部分脏器指数显著降低(P0.01),脑组织和血清中MDA含量显著升高,SOD活性显著降低(P0.01);与模型组比较,安吉白茶茶多酚各剂量组小鼠肾脏和脾脏的脏器指数显著性增加(P0.01);各剂量组血清和高剂量组脑组织SOD活性显著增高(P0.01);各剂量组脑组织和中、高剂量组血清中MDA含量显著降低(P0.01),提示安吉白茶茶多酚有良好的抗氧化作用。结论:安吉白茶茶多酚中、高剂量组能够提高D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力,其机理可能与抑制体内脂质过氧化物的生成,增强抗氧化酶的活性有关。     

HPLC法测定金莲清热颗粒中牡荆苷和荭草苷的含量

目的 建立HPLC方法同时测定金莲清热颗粒中牡荆苷和荭草苷的含量.方法 采用phenomenex-C1800G-4435-E0色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸(14∶86)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长340 nm.结果 金莲清热颗粒中牡荆苷线性范围为7.26 ～5...     

回春汤对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化系统的影响

目的探讨回春汤对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化系统的影响。方法将小鼠随机分为空白组、衰老模型组、维生素E组、回春汤大、小刺量组5组，采用灌胃给药6周后测定指标。选用：血浆丙二醛（MDA）含量、红细胞超氧化物歧化酶（S0D）活力、肝组织谷胱甘肽过氧化物酶（Gsh-Px）活力为指标，观察回春汤对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化系统的影响。结果回春汤2个剂量组均能提高D-半乳糖所致衰老小鼠的红细胞SOD活力、肝组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活力，降低血清MDA含量。结论回春汤具有良好的抗氧化作用，有助于延缓衰老过程。     

D-半乳糖致衰老小鼠肝肾睾丸组织氧化和抗氧化能力的变化

目的 D-半乳糖致衰老小鼠肝、肾、睾丸组织氧化和抗氧化能力的变化。方法 用D-半乳糖制备衰老小鼠模型，6周后，用722分光光度计检测衰老小鼠肾、肝、睾丸组织超氧化物歧化酶(superoxidc dismutase；SOD)活性、丙二醛(malondialdehydel;MDA)含量。结果 D-半乳糖致衰老小鼠肝、肾、睾丸组织中SOD活性下降,MDA含量升高。结论 D-半乳糖致衰老小鼠肝、肾、睾九组织中抗氧化能力下降，氧化水平增加。     

Pharmacokinetics and Tissue Distribution of Orientin from Trollius chinensis in Rabbits

Objective To study the pharmacokinetics (PK) and tissue distribution of orientin in rabbits. Methods The high-performance liquid chromatography method was developed and validated for the determination of orientin in rabbit plasma and tissues. The PK characteristics of orientin in rabbits were compared by three kinds of administration, iv, im, and ip injection, using 3P97 pharmacokinetic software to examine the PK parameters. Results The elimination half-life (t1/2β) of three kinds of administration was higher than the distribution half-life (t1/2α). The PK of orientin eliminating in rabbit fitted the two compartment model. Orientin was mainly eliminated in rabbit. The distribution of orientin in tissue after iv injection was investigated, and the order of orientin AUC in each group was kidney > liver > lung > spleen > heart > brain. Conclusion Orientin is distributed extensively in tissues such as kidney, liver, and lung. It is difficult for orientin to cross the blood brain barrier.     

牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤保护作用及其机制研究

目的：本研究旨在探讨牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及其作用机制。方法：采用Longa 改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型。实验随机分为假手术组,模型组,模型+ 依达拉奉阳性对照组（3.24 μmol·kg-1）,模型+ 牡荆苷（1.62、3.24、6.48 μmol·kg-1）不同剂量组,大鼠缺血2 h 再灌注1 h 后腹腔注射给药,连续给药时间为1 d 和3 d。2,3,5- 氯化三苯基四氮唑（triphenyltetrazolium chloride,TTC）测大鼠脑梗死体积,干湿重法测脑组织含水量,相应试剂盒法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、活性氧（reactive oxygen species,ROS）和丙二醛（methane dicarboxylic aldehyde,MDA）含量,免疫组化检测水孔通道蛋白4（aquaporin 4,AQP-4）阳性细胞表达,RTqPCR检测Toll 样受体4 （Toll-like receptor 4,TLR4）和核因子κB（nuclear factor κB,NF-κB）mRNA 表达水平,ELISA 测定肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）含量,HE 染色观察大鼠神经细胞的形态。结果：与假手术组相比,模型组大鼠再灌注后缺血侧脑组织出现明显的梗死灶,含水量明显增多,SOD 活性明显降低,ROS 和MDA 含量明显升高;与模型组相比,给药组大鼠脑组织含水量降低,抗氧化酶活性升高,抗炎作用显著,显著改善脑缺血再灌注大鼠细胞病理形态,在一定剂量范围内,呈剂量依赖性;与依达拉奉对照组相比,牡荆苷中、低剂量组作用较弱（P<0.01,P<0.05）;牡荆苷高剂量组与依达拉奉作用相当,差异无显著性。结论：牡荆苷对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用可能是通过抗氧化应激和抗炎作用实现。     

一种新型致小鼠拟衰老模型的初步建立

目的研究长期高剂量葡萄糖对小鼠衰老情况的影响。方法将健康小鼠按体重分段法随机分为:对照组(注射生理盐水)、D-半乳糖组、D-半乳糖+葡萄糖组、葡萄糖组,每日颈背部皮下注射相应药物建立衰老模型,连续14周观察及检测相关衰老指标。结果 D-半乳糖组、D-半乳糖+葡萄糖组、葡萄糖组小鼠行为较迟缓、反应较迟钝、较嗜睡(P<0.05);葡萄糖组小鼠红细胞脆性最大、物体识别分辨能力最低、皮肤羟脯氨酸含量最低、脑组织MDA含量最高(P<0.05)。结论高剂量葡萄糖长期反复注射对昆明小鼠有致拟衰老的作用,且此作用似乎优于传统的D-半乳糖模型。本实验为建立一种新型致小鼠衰老模型提供了初步的实验基础。     

金莲花总黄酮及其单体成分的抗氧化活性研究

目的研究金莲花精制总黄酮及其中主要成分的抗氧化活性。方法采用清除DPPH自由基和ABTS自由基能力实验,测定精制总黄酮及其中主要成分的抗氧化活性,并与维生素C对比分析。结果通过比较半数清除浓度（μg/ml）,DPPH自由基清除能力大小依次为维生素C（24.01±0.02）、荭草苷（30.56±0.31）、牡荆苷（35.08±0.15）、荭草素-2-O-β-半乳糖苷（36.39±0.10）、精制总黄酮（44.25±0.39）;ABTS自由基清除能力大小依次为荭草苷（41.94±0.23）、维生素C（48.34±0.11）、荭草素-2-O-β-半乳糖苷（52.25±0.47）、精制总黄酮（59.90±0.26）、牡荆苷（64.94±0.56）。上述成分自由基清除能力两两比较,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论金莲花精制总黄酮及其主要成分均具有优良的抗氧化能力。     

NADPH oxidase-dependent oxidative stress and mitochondrial damage in hippocampus of D-galactose-induced aging rats

Mitochondrial DNA(mtDNA) common deletion(CD) plays a significant role in aging and age-related diseases.In this study,we used D-galactose(D-gal) to generate an animal model of aging and the involvement and causative mechanisms of mitochondrial damage in such a model were investigated.Twenty 5-week-old male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups:D-gal group(n=10) and control group(n=10).The quantity of the mtDNA CD in the hippocampus was determined using a TaqMan real-time PCR assay.Transmission electron microscopy was used to observe the mitochondrial ultrastructure in the hippocampus.Western blot was used to detect the protein levels of NADPH oxidase(NOX) and uncoupling protein 2(UCP2).We found that the level of mtDNA CD was significantly higher in the hippocampus of D-gal-induced aging rats than in control rats.In comparison with the control group,the mitochondrial ultrastructure in the hippocampus of D-gal-treated rats was damaged,and the protein levels of NOX and UCP2 were significantly increased in the hippocampus of D-gal-induced aging rats.This study demonstrated that the levels of mtDNA CD and NOX protein expression were significantly increased in the hippocampus of D-gal-induced aging rats.These findings indicate that NOX-dependent reactive oxygen species generation may contribute to D-gal-induced mitochondrial damage.     

肉苁蓉总苷对D-半乳糖脑老化模型小鼠的保护作用

目的 探讨肉苁蓉总苷(GCs)对D 半乳糖(D gal)脑老化模型小鼠的保护作用机制。方法实验分 30d和 50d,每期NIH小鼠各为 120只,随机分为 6组:正常对照组 (NC)、模型组 (D gal)、VitaminE组、GCs组:分小、中、大剂量组[ (mg.kg-1.d-1 )31. 25、62. 5、125],每组 20只。除NC组外,在各组小鼠皮下注射D gal(50mg.kg-1.d-1 );NC组皮下注射NS, D gal组和NC组给予等容积饮水灌胃,VitaminE组和GCs组灌胃给药,每日 1次,均连续皮下注射和灌胃 30d和 50d。分别测定 5min错误次数、潜伏期、脑组织SOD的活性、MDA、LF含量,并观察 50d后海马CA1区组织结构形态的变化。结果 (1)5min内的错误次数: 30d和 50d的D gal组分别为(8. 25±4. 03)次和(9. 63±6. 18)次,均显著高于其它各组(P均 <0. 01)。(2)潜伏期: 30d和 50d的D gal组分别为 (25. 21±13. 86)s和(31. 75±17. 77)s,低于NC组、GCs中剂量组和大剂量组(P<0. 05,P<0. 01)。(3)SOD活性: 30d和 50dD gal组脑组织的SOD活性较其它各组低(P<0. 05,P<0. 01)。(4)MDA含量: 30d和 50dD gal组脑组织的MDA含量均较其它各组高 (P<0. 05,P<0. 01)。(5)LF含量: 30d和 50dD gal组脑组织的LF含量均较NC组高, 30d的脑组织GCs小剂量组、VitaminE组及 50dGCs各组及VitaminE组均较D gal     

祛痹消痛胶囊中牡荆苷的含量测定

目的建立祛痹消痛胶囊中牡荆苷含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱条件：250mm×4．6mm不锈钢柱，填充剂为十八烷基键合相硅胶（5μm），流动相为乙腈-1％乙酸溶液（15：85）；检测波长为340nm；流速为1．0ml／min；柱温为28℃。结果牡荆苷浓度在8～80μg／ml范围内，与峰面积呈良好的线性关系。回归方程为y=49656x＋15576，相关系数r=0．9998，回收率为98．42％，RSD为1．15％。结论本法简便准确，专属性强，重现性好，可作为该制剂质量控制方法。     

绿茶多酚对东莨菪碱及D-乳糖所致小鼠学习记忆障碍的影响

目的：研究绿茶多酚（green tea polyphenols ,GTPs）对记忆障碍模型小鼠学习记忆功能的影响。方法以东莨菪碱和D-半乳糖复制记忆障碍小鼠模型,以跳台和水迷宫为学习记忆指标,观察不同剂量的GTPs对小鼠学习记忆的影响。结果在东莨菪碱和D-半乳糖记忆障碍小鼠模型中,与模型组比较,GTPs能减少小鼠在跳台实验中的错误次数（P＜0．05）,延长跳台潜伏期（P＜0．01）,GTPs可缩短小鼠在水迷宫实验中的潜伏期（P＜0．05）,减少错误次数（P＜0．05）。结论 GTPs对东莨菪碱及D-半乳糖造成的两种学习记忆获得障碍小鼠的学习记忆能力均有明显的改善作用。     

千佛菌对衰老模型小鼠免疫失衡的调节作用

目的研究千佛菌对衰老模型小鼠免疫失衡的调节作用。方法 40只健康昆明小鼠随机分为对照组、模型组及千佛菌大、小剂量组,每组10只。模型组,千佛菌大、小剂量组小鼠按25 mL·kg-1体质量腹腔注射D-半乳糖,每日1次,连续注射6周,制备模型;对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。造模第21天起,千佛菌大、小剂量组每只小鼠分别以1 000和500 g·L-1的千佛菌0.4 mL·d-1灌胃,对照组及模型组小鼠给予等量生理盐水灌胃,连续3周后,检测比较各组小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)水平和IFN-γ/IL-10。结果与对照组比较,模型组小鼠血清IL-10水平升高,IFN-γ水平、IFN-γ/IL-10降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,千佛菌大、小剂量组小鼠血清IL-10水平降低,IFN-γ水平、IFN-γ/IL-10升高,差异有统计学意义(P<0.01)。千佛菌大剂量组血清IFN-γ水平、IFN-γ/IL-10高于小剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脑组织SOD水平明显降低,MDA水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,千佛菌大、小剂量组小鼠脑组织MDA水平明显下降,SOD水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论千佛菌对衰老机体具有一定的免疫调节作用。