糖尿病大鼠颌下腺肥大细胞数量及转化生长因子β1的表达

背景：研究表明,持续高血糖可导致大鼠颌下腺的细胞出现退行性改变,表现为细胞因子表达增加,糖原代谢改变,分泌功能减弱。关于肥大细胞及转化生长因子β1与糖尿病颌下腺组织病变的关系研究较少。 目的：观察糖尿病状态下颌下腺组织中肥大细胞数量与形态变化和转化生长因子β1的表达。 方法：雄性SD大鼠32只,随机分为实验组和对照组,实验组注射四氧嘧啶成模后的4,8,12周测量体质量和血糖,并与对照组大鼠一同取下颌下腺组织做苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色观察并计数肥大细胞,SP 免疫组织化学染色方法检测转化生长因子β1棕黄色阳性细胞数量。 结果与结论：①肥大细胞在正常鼠及糖尿病鼠颌下腺组织中均有表达,实验组与对照组比较肥大细胞数随病程延长而增多,实验组不同时期明显多于对照组(P < 0.01)。②转化生长因子β1阳性细胞数在正常大鼠及糖尿病大鼠颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及纹状管细胞中均有表达,阳性颗粒位于胞浆内,糖尿病时,随病程延长而增多,实验组不同时期明显多于对照组(P < 0.01)。结果可见糖尿病大鼠颌下腺中肥大细胞与转化生长因子β1表达增强与糖尿病病程呈正相关。     

退行性变椎间盘组织转化生长因子β1基因的表达

背景：据报道,转化生长因子β1能促进椎间盘细胞的增殖与分化,并参与其损伤修复过程。但转化生长因子β1是否参与椎间盘退变的过程？ 目的：分析在人体退行性变椎间盘组织中转化生长因子β1的表达情况,并探讨其与人体椎间盘退行性变的关系。 方法：收集正常椎间盘组织30例,退行性变人体椎间盘组织530例,采用苏木精-伊红染色、免疫印迹和RT-PCR方法进行研究,对退行性变的椎间盘组织进行病理学分型,分别检测转化生长因子β1在不同类型退变的椎间盘中表达的情况并与正常椎间盘组织进行对比分析。 结果与结论：苏木精-伊红染色病理学诊断：将退行性变的椎间盘组织根据病理学改变程度分为4型。免疫印迹法和RT-PCR法均显示：在正常和退变椎间盘组织中,转化生长因子β1均有表达,但在病变组织中随病变加重转化生长因子β1表达量随之增加,退变组织与正常组织比较差异有非常显著性意义 (P < 0.01)。说明转化生长因子β1高表达与人体椎间盘退行性变呈正相关。     

小鼠下颌下腺内ncNOS的表达

目的对小鼠下颌下腺内ncNOS进行定性和定位研究。方法取8只昆明种小鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色。结果小鼠下颌下腺纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阳性。结论小鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能。     

瘦素及其受体在大鼠下颌下腺的定位研究

目的研究大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体的表达及意义。方法取SD大鼠下颌下腺，分别进行HE染色和瘦素与瘦素受体的免疫组织化学染色。结果大鼠下颌下腺颗粒曲管和纹状管上皮细胞呈瘦素及其受体免疫反应阳性，其中颗粒曲管为强阳性反应，而纹状管为中等阳性反应，腺泡细胞为阴性。结论大鼠下颌下腺导管上皮细胞有瘦素及瘦素受体表达，提示下颌下腺也可能参与机体能量代谢与平衡的调节。     

大鼠皮肤创伤修复过程中转化生长因子β1和β3的表达

背景：转化生长因子β在组织创伤修复中发挥核心和关键作用。 目的：观察转化生长因子β1和转化生长因子β3在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中表达量及表达部位的变化。 方法：制备大鼠皮肤全层切伤模型,长度1.5-2.0 cm,深及筋膜层。于伤后0 h,12 h,1 d,2 d,3 d,4 d,5 d,6 d,7 d处死大鼠,取损伤部位皮肤,采用免疫组织化学染色检测各时间点转化生长因子β1和转化生长因子β3的表达,并进行定量分析。 结果与结论：免疫组织化学染色显示,在创伤愈合的早期阶段(伤后1-5 d),转化生长因子β1和转化生长因子β3免疫阳性颗粒主要出现在上皮细胞、上皮基底层细胞胞浆、巨噬细胞等免疫细胞胞浆及肉芽组织中;随着创伤修复时间的持续,免疫阳性颗粒主要出现在真皮层的成纤维细胞及细胞外基质中。其中转化生长因子β1的表达在创伤后1-5 d最强,而转化生长因子β3在创伤后六七天时开始明显表达。可见在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中,转化生长因子β1的表达先于转化生长因子β3,提示转化生长因子β1与胶原形成及创伤修复关系密切,而转化生长因子β3在愈合后期表达量有升高趋势,其可能与创伤后期的组织改建密切相关。     

丹参酮ⅡA抑制心肌细胞的纤维化

背景：转化生长因子β-Smads信号通路是心肌纤维化的关键通路;丹参酮ⅡA具有抑制心肌纤维化作用。 目的：验证丹参酮ⅡA对转化生长因子β1致心肌纤维化的作用并探讨其机制。 方法：取出生24 h内的SD大鼠心脏,利用酶消化法结合差速贴壁体外培养心肌成纤维细胞。取上述第3代心肌成纤维细胞,用5 μg/L转化生长因子β1培养15,30,60,120 min或6,12,24 h后收集细胞,用不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L)丹参酮ⅡA预处理2 h后再加入5 μg/L转化生长因子β1培养120 min或24 h后收集细胞,并设空白对照组。免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定,反转录聚合酶链反应检测结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达,Western Blot检测Smad7及磷酸化Smad3蛋白表达。免疫组织化学染色及免疫荧光法检测磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白表达。 结果与结论：转化生长因子β1在一定范围内以时间依赖方式诱导结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原、磷酸化Smad3及Smad7的表达,刺激终末结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原mRNA的表达量明显上升(均P < 0.01);磷酸化Smad3及Smad7蛋白表达量在刺激后1 h达到峰值,表达量显著增加(均P < 0.01)。高浓度丹参酮ⅡA预处理可显著下调磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原表达(均P < 0.01)。两种浓度的丹参酮ⅡA预处理均可上调Smad7蛋白表达(P < 0.05,P < 0.01)。提示丹参酮ⅡA对心肌纤维化有抑制作用,可能与其上调Smad7蛋白表达,抑制转化生长因子β1诱导的Smad3磷酸化,部分阻断转化生长因子β1-Smads信号通路有关。     

下颌下腺主导管结扎可激活损伤组织中的干/祖细胞

背景：成体干细胞的伦理学问题较少,而且某些操作技术比较成熟,利用成体干细胞进行组织工程化涎腺的构建具有十分诱人的吸引力和极其重要的应用前景。 目的：建立下颌下腺主导管结扎的涎腺组织损伤大鼠模型,探讨涎腺组织损伤模型中成体干/祖细胞存在的可能性及可能位置。 方法：SD大鼠统一行右侧下颌下腺主导管结扎,1周后处死大鼠取出两侧腺体,通过苏木精-伊红染色、PAS糖原染色及细胞角蛋白19、Bcl-2、Ki-67等指标的免疫组织化学测定,对正常涎腺组织与建立的损伤模型组织进行比较。 结果与结论：同一只大鼠,结扎侧与对照侧体积、质量有明显的差异。对照侧下颌下腺组织呈卵圆形,色泽红润,表面光滑,有完整包膜,质地柔软;结扎后腺体萎缩,组织形态欠规整,色泽暗红,包膜充血,质地变韧,周围组织血管代偿性扩张。主导管结扎的组织损伤模型可导致PAS阳性腺细胞的消失和细胞角蛋白19阳性的小导管上皮细胞增殖,并有在未结扎的腺体中很少见到的小丛层粘连蛋白阳性细胞出现在导管周围,而抑制细胞凋亡的Bcl-2和提示增殖活跃度的Ki-67的表达均有所增强。可见下颌下腺组织中可能存在着定位于涎腺周围导管区的下颌下腺干/祖细胞;下颌下腺主导管结扎导致的组织损伤模型是一种能有效激活下颌下腺组织中干/祖细胞的方法。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

电针干预膝骨关节炎过程中转化生长因子β的调控作用

背景:电针治疗膝骨关节炎具有良好的中枢和外周镇痛作用。研究显示转化生长因子β在膝骨关节炎发生中具有重要作用。 目的：从转化生长因子β调控角度,认识电针治疗膝骨关节炎的可能作用机制。 方法：健康3月龄雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组和药物组。通过结扎大鼠股静脉并强迫运动的方法,建立膝骨关节炎动物模型。造模1个月后,电针组刺激内膝眼(EX-LE4)和犊鼻(ST 35)穴位,深0.1寸,脉冲2 Hz刺激20 min,1次/d,药物组为关节腔内注射药物透明质酸钠,0.1 mL/次,1次/周。治疗2周后,采集各组动物膝关节滑膜组织,观察转化生长因子β1、转化生长因子β1受体Ⅰ、转化生长因子β受体Ⅱ的表达。 结果与结论：膝关节骨关节炎动物膝关节滑膜中转化生长因子β1水平增加(P < 0.05),经电针或透明质酸钠治疗后,膝关节滑膜中转化生长因子β1水平降低(P < 0.05),且转化生长因子β1受体Ⅰ,Ⅱ含量出现显著降低(P < 0.05)。提示电针治疗膝骨关节炎是通过下调转化生长因子β1的含量来改善骨关节炎症状的,受体含量的减少有助于膝骨关节炎的恢复。     

人体正常涎腺组织中成纤维细胞生长因子受体3的表达

目的　探讨成纤维细胞生长因子受体 3 (FGFR3 )在人体正常涎腺组织中的表达情况。方法　正常成人涎腺标本2 4例 ,其中腮腺、颌下腺和舌下腺标本各 4例 ,唇腺、腭腺、磨牙后腺及舌腺各 3例 ,分别用超敏S P免疫组化法检测不同腺体组织中FGFR3的分布。结果　在腮腺的浆液性腺泡的分泌颗粒及其他混合性腺的浆液性腺泡的分泌颗粒中均可见少量的FGFR3的表达 ,在大唾液腺及小唾液腺的小叶内导管和小叶间导管中均可见中等强度的FGFR3的表达 ,其中以颌下腺中表达较强 ,而在舌下腺中表达较弱 ,在间质结缔组织中均无FGFR3的表达。结论　人体正常涎腺的导管系统中及浆液性腺泡中有FGFR3的表达     

转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞诱导其向软骨表型的分化

背景：内源性诱导软骨分为就是通过一定的载体将目的基因整合入干细胞内,使其自行分泌诱导因子诱导自身进行分化。 目的：观察将转化生长因子β3通过腺相关病毒载体转染诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨表型转化的能力。 方法：取体外培养的第3代骨髓间充质干细胞进行重组腺相关病毒转染,将转染后3,6,9,12 d细胞裂解提取蛋白进行酶联免疫检测目的蛋白转化生长因子β3的体外表达。RT-PCR,免疫印迹western blot分别从基因和蛋白水平上检测1,2周Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺蓝染色检测1,2周蛋白多糖的表达。 结果与结论：重组腺相关病毒转染后,骨髓间充质干细胞可以较稳定的表达目的蛋白转化生长因子β3,并且转染成功的骨髓间充质干细胞较阴性对照组能够更好的向软骨表型转化。证实转化生长因子β3可以腺相关病毒为载体转染骨髓间充质干细胞并诱导其向软骨表型分化。     

酸性成纤维细胞生长因子促进大鼠肠缺血-再灌注损伤的修复

背景：细胞外调节蛋白激酶和酸性成纤维细胞生长因子受体2在肠缺血-再灌注损伤修复中的作用尚无研究报道。 目的：观察大鼠肠缺血-再灌注损伤后外源性酸性成纤维细胞生长因子对细胞外调节蛋白激酶和酸性成纤维细胞生长因子受体2表达的影响,探讨细胞外调节蛋白激酶和酸性成纤维细胞生长因子受体2与酸性成纤维细胞生长因子促进创伤修复的关系。 方法：以大鼠肠系膜上动脉夹闭45 min造成肠缺血-再灌注损伤模型,于再灌注即刻应用酸性成纤维细胞生长因子行干预。分别于再灌注2,6,12,24 h取大鼠小肠组织标本,利用免疫组化和RT-PCR检测酸性成纤维细胞生长因子受体的表达及免疫组化检测细胞外调节蛋白激酶表达的规律。 结果与结论：在正常大鼠,酸性成纤维细胞生长因子受体2主要分布在小肠绒毛上皮细胞的肠腔侧、侧壁和小肠隐窝朝向隐窝腔的一侧细胞膜上。缺血-再灌注初期,酸性成纤维细胞生长因子受体2及细胞外调节蛋白激酶的表达未发生明显变化,但随着再灌注时间的延长表达水平逐渐提高,并于再灌注后6-12 h达高峰。经酸性成纤维细胞生长因子治疗后,大鼠小肠组织小肠黏膜损伤程度减轻,酸性成纤维细胞生长因子受体2及细胞外调节蛋白激酶的表达量高于未治疗大鼠。结果表明缺血-再灌注损伤后,酸性成纤维细胞生长因子干预可上调酸性成纤维细胞生长因子受体2及细胞外调节蛋白激酶的表达,提示外源性酸性成纤维细胞生长因子通过促进内源性酸性成纤维细胞生长因子受体2和细胞外调节蛋白激酶的生成可能是其参与内脏损伤修复的机制之一。     

生后小鼠颌下腺神经生长因子基因表达的发育变化

为了探讨在发育过程中小鼠颌下腺神经生长因子基因表达的变化，应用原位杂交组织化学技术和图像分析方法对新生至２月龄ＩＣＲ雄性小鼠颌下ＮＧＦｍＥＮＡ基因表达的变化，应用原位杂交研究。结果显示：新生小儿颌下腺未见ＮＧＦｍＲＮＡ杂交信号，８－１０ｄ龄小鼠颌下腺ＮＧＦ原位杂交信号呈阴性至弱阳性。     

Role of Stress-Related Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF) in the Rat Submandibular Gland

The nerve growth factor (NGF) family comprises NGF, brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and neurotrophins (NTs)-3, -4/5, -6 and -7, all of which are collectively referred to as neurotrophins. However, the expression of neurotrophins other than NGF in the salivary gland has not been described in detail. Through interaction with the TrkB receptor, BDNF plays an important role in long-term potentiation. We found that BDNF expression increased within submandibular gland tissue in response to stress, suggesting that the salivary glands are sensitive to stress. In addition, stress caused increases in plasma BDNF derived from the submandibular gland and in TrkB receptor mRNA in the adrenal medulla. Plasma BDNF might activate TrkB receptors in the adrenal medulla during acute stress. The salivary glands are likely to influence not only oral health, but also systemic organs. This review addressed the relationship between hormone-like effects and stress-related BDNF expression in the rat submandibular gland.     

IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF OVEREXPRESSION OF FIBROBLAST GROWTH FACTOR-1 (FGF-1), FGF-2, AND FGF RECEPTOR-1 IN HUMAN MALIGNANT SALIVARY GLAND TUMOURS

Fibroblast growth factor-1 (FGF-1) and FGF-2 are broad spectrum mitogens. The expression of FGF-1, FGF-2, and their receptor, FGF receptor-1 (FGFR-1), was examined in malignant salivary gland tumours and normal salivary glands, using immunohistochemical methods. In seven cases of adenoid cystic carcinoma (ACC), both duct-like cells and modified myoepithelial cells were apparently immunopositive for FGF-1, FGF-2, and FGFR-1. In five cases of mucoepidermoid carcinoma (MC), all three types of tumour cells including epidermoid cells, mucous cells, and intermediate cells expressed immunoreactive FGF-1, FGF-2, and FGFR-1. In these malignant salivary gland tumours, increased expression of FGFR-1 correlated with the intensity of both FGF-1 and FGF-2 immunoreactivity. In contrast to malignant salivary gland tumours, eight cases of normal salivary gland showed negative immunostaining for FGF-1, FGF-2, and FGFR-1 while four cases were weakly immunoreactive for FGF and its receptor. These results demonstrate that malignant salivary gland tumours overexpress FGF-1, FGF-2, and FGFR-1 compared with normal salivary glands and suggest that these growth factors may play an important role in facilitating neoplastic progression in human salivary glands.     

Suppression of immune responsiveness by a submandibular salivary gland factor.

Both tissue extracts prepared from submandibular salivary glands of male mice and epidermal growth factor isolated from these glands depressed the delayed type hypersensitivity response to 2,4-dinitro-1-fluorobenzene in mice. Extirpation of the submandibular salivary glands from male mice did not alter the delayed type hypersensitivity response. The role of salivary gland factors, particularly epidermal growth factor, in influencing the immune response has been discussed.     

Expression of podoplanin and classical cadherins in salivary gland epithelial cells of klotho-deficient mice

We have recently shown that salivary gland myoepithelial cells express podoplanin. Podoplanin indirectly binds the actin filament network which links classical cadherins. The study here is aimed to investigate the expression of podoplanin and cadherins on salivary gland myoepithelial cells and the changes in the aging cells using klotho-deficient (kl/kl) mice. The submandibular glands of kl/kl mouse lack granular ducts which express klotho in wild type mice, suggesting that klotho may be a gene responsible for granular duct development. Although aging resulted in growth suppression of myoepithelial cells because of the sparse distribution of the cells in kl/kl mouse salivary glands, the expression of podoplanin and E-cadherin was shown in aging myoepithelial cells. It is thought that podoplanin participates in the actin-E-cadherin networks which are maintained in aging myoepithelial cells. It was also shown that granular ducts were filled with P-cadherin, and that the P-cadherin amount was larger in the wild type mouse submandibular glands than in the sublingual and parotid glands of wild type mouse, and in the submandibular glands of kl/kl mouse. These findings suggest that the granular duct is an organ secreting soluble P-cadherin into the saliva.     

运动神经诱向因子1及其受体在大鼠下颌下腺的表达

实验用运动神经诱向因子１的单克隆抗体及抗独特型单克隆抗体的免疫组织化学染色研究了运动神经诱向因子１及其受体在大鼠下颌下腺的表达。邻片免疫组织化学法显示：成年雄性大鼠下颌下腺的浆液性腺泡及各级导管上皮细胞增多呈运动神经诱向因子１及其受体的免疫的应阳性，副交感神经节细胞也呈运动神经诱向因子１及其受体免疫反应阳性，提示下颌下腺的以上结构均能自分泌运动神经诱向因子１。生后１日龄大鼠、仅见个别腺导管显示为极