β淀粉样蛋白通过升高ROS水平上调晚期糖基化终末产物受体的表达

目的探讨β淀粉样蛋白(Aβ)调控海马晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达及其机制。方法通过脑立体定向仪及微量注射器于大鼠海马内注射Aβ1~40,注射3周后,利用Western blot检测海马组织RAGE、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶(gp9lphox及p47phox亚基)、核因子-κb(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白(IκB)的表达变化,利用流式细胞仪检测大鼠海马组织活性氧(ROS)的变化。结果海马注射Aβ1~403周后,海马组织的RAGE的表达显著升高(P<0.01),同时检测到注射Aβ1~40引起海马组织内ROS水平明显增高(P<0.01),gp9lphox、p47phox的表达及p47phox的磷酸化水平均显著升高(P<0.01),IκBα的表达显著降低(P<0.01),IκBα的磷酸化水平显著增加(P<0.01),NF-κB的表达及NF-κB的磷酸化水平均显著升高(P<0.01)。结论 Aβ可引起海马组织RAGE的表达升高,NADPH氧化酶/ROS/NF-κB信号通路可能在Aβ诱导海马神经元RAGE的表达过程中发挥重要作用。     

反式激活蛋白-NEMO结合域抑制核因子-κB活化在胆红素诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用

目的明确核因子-κB（NF-κB）活化在胆红素诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用,及反式激活蛋白-NEMO 结合域
（TAT-NBD）对胆红素神经毒性的干预作用。方法原代培养海马神经元分为对照组、胆红素组、TAT-NBD早期干预组、持续干
预组及晚期干预组。免疫细胞化学法检测NF-κB p65蛋白表达,改良MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法及TUNEL法检测细胞
相对存活率及凋亡率,ELISA法检测原代培养基上清IL-1β水平。结果胆红素组海马神经元NF-κB p65 蛋白平均光密度值
（MOD）明显高于对照组（P<0.01）,6、24 h达高峰。TAT-NBD早期干预组细胞相对存活率为（80.784±9.767）%低于对照组（P<
0.01）、高于胆红素组（P<0.01）,细胞凋亡率为（14.100±2.252）%（Annexin V-FITC/PI双染法）、（12.883±1.629）%（TUNEL法）高
于对照组（P<0.01）、低于胆红素组（P<0.01）,IL-1β水平为15.348±0.812 pg/ml低于胆红素组（P<0.05）。TAT-NBD持续干预及晚
期干预组细胞存活率、凋亡率、IL-1β水平与胆红素组无显著性差异（P>0.05）。结论NF-κB双向调控胆红素诱导的海马神经元
凋亡。TAT-NBD抑制NF-κB早期高峰有神经保护作用,有可能用于胆红素脑损伤的预防。
     

槲皮素对糖尿病大鼠肾脏NADPH氧化酶p47phox亚基表达的影响

目的探讨槲皮素干预对糖尿病大鼠肾脏NADPH氧化酶p47phox亚基表达的影响及意义。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法构建糖尿病模型,32只大鼠分为正常对照组、糖尿病未治疗组、槲皮素小剂量干预组及槲皮素大剂量干预组,12周后称体质量、肾重,计算肾重指数,Western blot检测各组肾脏p47phox、NF-κb、FN和ColIV的表达,应用流式细胞仪检测组织中活性氧簇(ROS)的表达。结果糖尿病未治疗组肾重指数增高(P<0.01);p47phox、NF-κb、FN、ColIV及ROS表达显著上调(P均<0.01)。槲皮素干预能降低肾重指数(P<0.01);减少糖尿病大鼠肾脏p47phox、NF-κb、FN、ColIV及ROS的表达(P均<0.01),以上效应具有剂量依赖性。结论槲皮素干预可以减轻糖尿病大鼠肾病病变,p47phox表达下调导致氧化应激减弱可能是其作用机制之一。     

维生素E经LOX-1/NADPH氧化酶/ROS通路抑制oxLDL诱导的HUVEC细胞损伤

【目的】 复制氧化性低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein,oxLDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)损伤模型,建立慢病毒介导的LOX-1-shRNA转染HUVEC细胞模型,从LOX-1/NADPH氧化酶/ROS信号通路研究维生素E(Vit E)对oxLDL诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用。 【方法】 以200 μg/mL oxLDL与HUVEC细胞共孵育24 h,用于复制细胞损伤模型;实验设计分为:正常对照组、oxLDL模型组、药物组(200 μmol/L Vit E);以MTT检测细胞存活率,DCFH-DA检测细胞内ROS及蛋白质印迹法检测LOX-1、NADPH氧化酶亚基(gp91phox、p47phox、p67phox)蛋白经时改变(3、6、12、24 h);real-time PCR检测24 h后LOX-1、NADPH氧化酶亚基(p22phox、gp91phox、rac1)mRNA的表达,采用慢病毒介导的基因沉默技术抑制LOX-1表达48 h后,用oxLDL诱导24 h,检测LOX-1蛋白、NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白和ROS的含量。采用SPSS 17.0进行统计学分析。 【结果】 与正常组比较,oxLDL处理后细胞生存率仅为50.31%,LOX-1蛋白伴随细胞氧化损伤在3、6、12、24 h表达量显著增加,且在3 h和24 h时呈现两个表达高峰(P<0.05),NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白表达水平在各时间点均显著升高(P均<0.01),24 h达高峰,ROS检测结果表明其动态经时改变在3 h和24 h达峰值( P<0.05)。Real-time PCR结果显示,LOX-1 mRNA及NADPH氧化酶亚基(gp91phox、p22phox、rac1) mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。慢病毒介导LOX-1基因沉默后,最佳转染效率为73.23%。oxLDL诱导24 h后,LOX-1及NADPH氧化酶亚基(p47phox、p67phox、gp91phox)蛋白表达下调,ROS生成量相应降低。VitE组下调LOX-1和NADPH氧化酶的mRNA及蛋白质表达并降低ROS生成。 【结论】 oxLDL经LOX-1/NADPH氧化酶/ROS通路诱导HUVEC细胞损伤。200 μmol/L的VitE可通过抑制LOX-1/NADPH氧化酶/ROS信号通路的活化而发挥对oxLDL诱导的HUVEC细胞损伤的保护作用。     

蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用

目的研究蛋白激酶D1（PKD1）在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲
霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和
HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子（1×105 CFU/ml）于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的
过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理
细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc 荧光素酶报告基因及内参照报告质
粒海肾荧光素酶（pRL-SV40）共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理
24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激
的A549细胞和HEK293 细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表
达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激
活活性。结论PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。
     

硝基酪氨酸对糖尿病肾病大鼠肾脏NF-κB、MCP-1 及TGF-β1表达的影响

目的观察硝基酪氨酸（NT）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏核因子-κB（NF-κB）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和转化生长
因子-β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其在DN发生发展中的作用机制。方法用链脲佐菌素腹腔注射法建立DN大鼠模型,造模
成功的大鼠随机分3组：DN模型组、DN+NT组和DN+NT+Ebselen组（NT抑制剂）,另设正常对照组。各组分别干预8周后,观
察24 h尿蛋白定量变化,采用免疫组织化学染色检测肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检
测肾组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 mRNA表达,光镜观察肾脏病理改变。结果与DN模型组比较,DN+NT组大鼠24 h尿蛋
白定量、肾脏组织中NF-κB、MCP-1和TGF-β1的蛋白及mRNA水平均显著增加,肾脏病理改变加重;NT抑制剂Ebselen可明显
减轻这些变化。结论硝基酪氨酸可上调DN大鼠肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 蛋白及其mRNA的表达,加重炎性反应,
促进DN的进展。
     

胰岛素抵抗大鼠血管AGEs水平及其损伤机制和吡格列酮的保护作用

目的  探讨胰岛素抵抗大鼠血管AGEs水平及其损伤机制和吡格列酮的保护作用。方法  选6~8 周龄Wistar大鼠随机分为对照组（NC组,n=10）、胰岛素抵抗组(IR组,n=13)和吡格列酮组(PIO组,n=13)。后两组建立胰岛素抵抗模型,模型成功后PIO组给予吡格列酮［10mg/(kg·d)］干预,12周后采用免疫荧光技术检测血管壁AGEs表达;应用RT-PCR法检测RAGE 、NADPH氧化酶 p47phox mRNA 的表达;免疫组织化学技术检测RAGE、磷酸化NF-Кb蛋白的表达。结果  与IR组比较,PIO组AGEs的表达减弱,而两组明显高于NC组;IR组和PIO组RAGE、NADPH氧化酶P47phox mRNA表达较NC组明显升高(P< 0.01),而PIO组上述指标表达较IR组减弱（P<0.05）;PIO组RAGE、磷酸化NF-Кb蛋白表达较IR组减弱（P<0.05）,但两组均明显强于NC组（P<0.01）。结论  胰岛素抵抗大鼠血管AGEs及RAGE表达增多,继而促进氧化应激及炎症反应导致血管损伤;吡格列酮能通过减少AGEs、RAGE生成而抑制氧化应激及炎症反应,改善血管损伤。     

RAGE／NF-κB 信号通路调控溶血卵磷脂诱导的人视网膜内皮细胞TGF-β1表达

目的：探讨糖基化终产物受体（RAGE）／核因子κB（NF-κB）信号通路在调控溶血卵磷脂（LPC）诱导的人视网膜内皮细胞（HERCs）转化生长因子β1（TGF-β1）表达中的作用。方法利用 RAGE siRNA 及 NF-κB 抑制剂作用 RAGE／NF-κB 信号通路,实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）及 Western blot 检测 RAGE 及 TGF-β1基因表达。结果LPC 能增加 HERCs 的 RAGE、TGF-β1基因表达,RAGE 基因沉默后能抑制 LPC 诱导的 RAGE、TGF-β1的表达。加入 NF-κB 抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）能显著减少 LPC 诱导的 RAGE、TGF-β1基 因 表达。结论 RAGE／NF-κB 信号通路在调控 LPC 诱导的 HERCs 表达TGF-β1中起重要作用。     

NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用

目的探讨NADPH氧化酶在人真皮成纤维细胞氧化应激损伤中的作用。方法H2O2 构建氧化应激模型,将实验分为正常 组、氧化损伤组和NADPH氧化酶抑制剂（DPI）组,MTT检测细胞活力,DCFH-DA 荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）改变, Western blot分析NADPH氧化酶胞膜亚基gp91phox表达变化。结果H2O2 对成纤维细胞的氧化损伤呈时间和浓度依赖,H2O2 700 μmol/L处理24 h后细胞活力下降约40%（P<0.05）,ROS升高2倍（P<0.05）。而抑制剂组细胞活力较氧化损伤组增加20% （P<0.05）,ROS下降至正常水平（P<0.05）。Western blotting结果显示氧化损伤组gp91phox表达随H2O2 浓度逐渐升高,而抑制 剂组表达接近正常水平。结论H2O2 可通过影响NADPH氧化酶特别是胞膜亚基gp91phox引发成纤维细胞氧化损伤。     

高糖环境对肝星状细胞TLR4表达及脂多糖诱导的炎症因子表达的影响

目的研究高糖环境对肝星状细胞Toll样受体4(TLR4)表达及脂多糖（LPS）诱导的炎症因子表达的影响。方法体外培养
大鼠肝星状细胞株HSC-T6,采用高糖刺激,Western blot及RT-PCR检测细胞TLR4蛋白及mRNA表达;低糖或高糖培养基预处
理肝星状细胞24 h 后采用LPS（100 ng/ml）刺激,2 h 后Western blot 检测NF-κB核转位,24 h 后RT-PCR 检测MCP-1 和IL-6
mRNA表达,ELISA检测细胞上清两种炎症因子的浓度。结果高糖环境可上调肝星状细胞TLR4 蛋白及mRNA表达（均为P<
0.01）,且呈明显的时效-量效关系。高糖可促进肝星状细胞NF-κB核转位（P<0.01）,并促进MCP-1和IL-6表达及分泌（均为P<
0.01）。高糖预处理可增强LPS诱导的肝星状细胞NF-κB核转位（P<0.01）、MCP-1和IL-6表达及分泌（均为P<0.01）。结论高
糖可上调肝星状细胞TLR4的表达,并可促进脂多糖激活NF-κB而增加炎症因子表达及分泌。
     

NADPH氧化酶在TGF-β1诱导大鼠小管上皮细胞表达炎症因子中的作用

【目的】观察转化生长因子β1（TGF—β1）对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1（MCP-1）及白细胞介素-6（IL-6）表达的影响，并探讨NADPH氧化酶在其中的作用。【方法】以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，采用TGF—β1（10ng／mL）刺激0h，2h，4h，8h，12h，24h分别收取RNA；刺激0h，12h，24h，48h，72h分别收取细胞上清液；部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI（0．1，1，5，10μmol／L）预处理1h，然后含10ng的TGF—β1无血清DMEM／F12培养液分别培养12h（收集RNA）和24h（收集细胞上清液）。所有实验重复3次。细胞内活性氧（ROS）的产生采用激光共聚焦显微镜观察。NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6mRNA的表达采用RT—PCR检测。细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测。【结果】TGF—β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达，8h为对照的2．43倍（P〈0．01），24h达3．59倍（P〈0．01）。但对p22phox、gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响。TGF—β1显著增加细胞内ROS产生，DPI预处理后ROS产生较TGF—β1刺激组降低了43．69％（P〈0．05）。TGF—β1可显著上调MCP-1和IL-6mRNA及蛋白的表达。DPI预处理可明显逆转TGF—β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达。【结论】TGF—β1可促使细胞ROS产生增加。TGF—β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达。     

脂联素对自发性2 型糖尿病大鼠肝脏IRS-1 磷酸化的影响及其可能机制

摘要：目的探讨脂联素对自发性2型糖尿病（OLETF）大鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及其分子信号机制。方法自发性
2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只。于8周和32周龄分别宰杀。检测空腹血糖、血浆胰岛素、
脂联素、血脂水平,并以ELISA、免疫印迹和免疫组化法检测肝脏脂联素、胰岛素受体底物-1酪氨酸磷酸化水平(py-IRS-1)
以及IKKβ和NFkB表达水平。结果OLETF鼠血浆脂联素水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠(P<0.05)。32周龄
时OLETF鼠血清胰岛素、TG、FFA、ISI均显著升高(P<0.05)。脂联素水平与FBG、血清胰岛素、TG、FFA、ISI数显著相关（P
均<0.01）。OLETF鼠肝脏脂联素和py-IRS-1水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠,IKKβ和NFkB水平也显著升高
(P<0.01)。py-IRS-1与肝组织脂联素、IKKβ和NFkB变化显著相关(P<0.01)。32周龄时脂联素水平与NF-κB和py-IRS-1
显著负相关（P<0.05）。结论OLETF鼠脂联素可能通过NFkB通路影响肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平,导致肝脏的胰岛
素信号传导障碍及糖、脂代谢紊乱,参与2型糖尿病的发生发展。     

“益肾调督”针灸对阿尔茨海默病小鼠海马RAGE和NF-κB p65影响

目的:探讨益肾调督针灸(KGAM)对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马晚期糖基化终产物受体(RAGE)和核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的影响。方法:C57BL/6小鼠随机分对照组、模型组、治疗组(多奈哌齐0.001 g/kg)、KGAM组(针刺再艾灸百会和肾俞穴),共28只,7只/组,治疗28 d。采用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆能力,观测海马CA1电镜结构和检测脏器指数,双抗体夹心法测定海马β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)、β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)、RAGE和NF-κB p65,RT-PCR检测海马RAGE和NF-κB p65 m RNA表达。结果:与模型组比较,KGAM组小鼠海马学习记忆能力明显改善(P0.05),海马CA1区神经元结构明显改善,脾、胸腺指数明显增加(P0.05),海马APP、Aβ1-40、RAGE和NF-κB p65明显降低(P0.05)。结论:KGAM可下调海马RAGE和NF-κB p65表达来发挥防治AD作用。     

欧前胡素对小鼠急性肺损伤的影响及其机制研究

目的 探讨欧前胡素对小鼠急性肺损伤的影响及其作用机制。方法 将32只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、欧前胡素30?mg/kg组、欧前胡素60?mg/kg组。用欧前胡素预处理,脂多糖诱导进行模型复制,7?h后收集小鼠肺组织。测量肺湿/干重比,采用苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理学改变,检测小鼠肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活力及活性氧类（ROS）的水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）,Western blotting检测小鼠肺组织中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、核转录因子κB（NF-κB）p65及基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）蛋白表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肺组织损伤评分、肺组织ROS水平及PI3K、Akt、NF-κB p65蛋白磷酸化水平升高（P?<0.05）,TNF-α、IL-1β的释放及MMP-9蛋白表达水平升高（P?<0.05）;与模型组比较,欧前胡素组能够减轻肺组织损伤,降低肺损伤评分（P?<0.05）,降低小鼠肺组织中ROS水平及PI3K、Akt、NF-κB p65蛋白磷酸化水平（P?<0.05）,降低TNF-α、IL-1β的释放及MMP-9蛋白表达水平（P?<0.05）;与欧前胡素30?mg/kg组比较,欧前胡素60?mg/kg组小鼠肺损伤评分、肺组织ROS水平、Akt及NF-κB p65蛋白磷酸化水平、TNF-α的释放及MMP-9蛋白表达水平降低（P?<0.05）,PI3K蛋白磷酸化水平及IL-1β的释放差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 欧前胡素对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用,其作用机制可能与脂多糖诱导的急性肺损伤中ROS被抑制,以及ROS介导的PI3K/Akt/NF-κB通路被抑制有关。     

NADPH氧化酶在TGF-β1诱导大鼠小管上皮细胞 表达炎症因子中的作用

 【目的】 观察转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及白细胞介素-6 (IL-6) 表达的影响,并探讨NADPH氧化酶在其中的作用?【方法】 以大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为研究对象,采用TGF-β1(10 ng/mL)刺激0 h, 2 h, 4 h, 8 h, 12 h, 24 h分别收取RNA;刺激0 h, 12 h, 24 h,48 h, 72 h分别收取细胞上清液;部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI (0.1, 1, 5, 10 μmol/L)预处理1 h, 然后含10 ng的TGF-β1无血清DMEM/F12培养液分别培养12 h (收集RNA)和24 h (收集细胞上清液)?所有实验重复3次?细胞内活性氧(ROS)的产生采用激光共聚焦显微镜观察?NADPH氧化酶p22phox?gp91phox?p47phox和 p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6 mRNA的表达采用RT-PCR检测?细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测?【结果】 TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达, 8 h为对照的2.43倍 (P < 0.01),24 h达3.59倍(P < 0.01)?但对p22phox?gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响?TGF-β1可显著增加细胞内ROS产生, DPI预处理后ROS产生较TGF-β1刺激组降低了43.69% (P < 0.05)? TGF-β1可显著上调MCP-1和IL-6 mRNA及蛋白的表达?DPI预处理可明显逆转TGF-β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达?【结论】 TGF-β1可促使细胞ROS产生增加?TGF-β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达?     

卡博替尼阻断小鼠体内产单核细胞李斯特菌感染的实验研究

目的探讨c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂卡博替尼作为抗产单核细胞李斯特菌（Listeria monocytogenes, LM）感染新型药物
的可能性。方法6周龄C57BL/6小鼠随机分为卡博替尼组、氨苄青霉素（Amp）组、卡博替尼和氨苄青霉素联合用药组和PBS
对照组。腹腔注射LM菌液后,再分别灌胃给予卡博替尼20 μg/g、腹腔注射氨苄青霉素20 μg/g、卡博替尼和氨苄青霉素联合用
药、以及腹腔注射等量PBS,比较4组小鼠的生存曲线、血液和脑组织细菌载量、血清IL-10和脑脊液中NF-κB p65含量、脑组织
中依文思蓝（EB）含量以及脑组织病理变化。结果卡博替尼组比对照组小鼠生存率增高、血液和脑组织的细菌载量明显减少
（P<0.05,P<0.001）;血清IL-10和NF-κB p65含量显著降低（P<0.05,P<0.01）;脑组织EB量降低（P<0.001）,脑组织病理变化减
轻。联合用药组比卡博替尼单独用药组小鼠血液和脑细菌载量（P均<0.001）、血清IL-10和NF-κB p65含量（P<0.01,P<0.001）、
脑组织EB量均明显减少（P<0.001）。结论酪氨酸激酶抑制剂卡博替尼对LM感染具有阻断作用,为研发新型抗胞内感染药物
提供重要理论依据。
     

辛伐他汀对肢体缺血再灌注肺损伤大鼠肺组织中NF-κB及ICAM-1表达的影响

摘要：目的探讨辛伐他汀对肢体缺血再灌注(I/R)肺损伤大鼠肺组织核因子-κB（NF-κB）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表
达的影响及其机制。方法成年雄性SD大鼠48只,体质量250~300 g,随机分为6组（n=8）：假手术组（C组）、肢体缺血再
灌注组（IR组）分别给予等容量的(1 ml)的蒸馏水、辛伐他汀1、5、10 mg/(kg·d)组（S1组、S5组、S10组）和辛伐他汀对照组（S
组）分别于每日清晨将1、5、10、10 mg/(kg·d)辛伐他汀溶于1 ml蒸馏水灌胃1次,连续3 d,IR组、S1组、S5组和S10组于最后1
次给药后2 h行肢体缺血再灌注。再灌注3 h末行血气分析,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿/干质量比（W/D）、多
形核中性粒细胞（PMN）数目、MPO活性、NF-κB p65mRNA及ICAM-1蛋白的表达。结果与C组比较,IR组肺组织病理
损伤较重,PaO2降低,W/D、PMN计数和MPO活性升高（P<0.01）;与IR组相比,S1组、S5组和S10组减轻了肺组织病理损伤,
PaO2升高,W/D、PMN计数和MPO活性降低,NF-κB p65mRNA及ICAM-1蛋白表达下调（P<0.01）。结论辛伐他汀可减
轻肢体I/R大鼠的肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB激活,从而减少ICAM-1介导的中性粒细胞浸润有关。     

S100A12/RAGE/NF-κB炎性信号通路与急性脑梗死严重程度的相关性

目的观察急性脑梗死病人血清中S100钙结合蛋白A12（S100A12）、晚期糖基化终产物受体（RAGE）及核转录因子-κB（NF-κB）的动态变化,并分析其与脑梗死严重程度的相关性。方法纳入82例急性脑梗死病人为观察组,于入院后1、3、7 d进行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分,ELISA检测相应时间点血清S100 A12、RAGE及NF-κB水平变化,并与NIHSS评分进行相关性分析;另纳入85例因非脑血管病住院病人为对照组,于入院后1 d检测S100 A12、RAGE及NF-κB水平。结果观察组1、3、7 d血清S100 A12、RAGE及NF-κB水平均明显高于对照组（P < 0.01）;1 d血清S100 A12、RAGE以及NF-κB水平均最高（P < 0.05~P < 0.01）;3 d与7 d水平差异均无统计学意义（P>0.05）。相关性分析显示,各时间点血清S100 A12、RAGE及NF-κB水平与相应NIHSS评分均呈正相关关系（P < 0.05~P < 0.01）。结论脑梗死急性期S100 A12、RAGE及NF-κB水平升高,且与急性脑梗死后神经功能缺损严重程度相关。     

Kiss-1基因通过NF-κB信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞迁移

目的探讨Kiss-1 基因抑制人结直肠癌细胞转移能力与NF-κB信号传导通路的相关性。方法构建重组pGC-LV-Kiss-
1-EGFP慢病毒载体并转染人结直肠癌HCT116细胞,实验分为空白对照组（CON组）、慢病毒空载体阴性对照组（NC组）、Kiss-1
基因过表达组（OE组）。CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测转染前后细胞增殖能力的变化,Transwell法分别检测转染前后细
胞的侵袭和迁移能力的变化。Western-blot法检测转染前后NF-κB信号传导通路中抑制性蛋白I-κB以及下游效应蛋白MMP-9
表达量的变化。结果OE组HCT116细胞中I-κB的表达含量较CON组、NC组明显升高（P<0.05）,下游效应蛋白MMP-9的表
达量明显下降（P<0.05）,差异具有统计学意义。OE组较CON组、NC组细胞增殖受到明显抑制（P<0.05）,细胞侵袭、迁移能力
亦出现明显抑制（P<0.05）。结论重组pGC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒转染人结直肠癌HCT116细胞后,可能通过NF-κB信号传
导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。
     

AGEs-RAGE/NF-κB途径对慢性间歇低氧小鼠脏器的影响及大株红景天对其脏器的保护作用

目的 通过建立慢性间歇低氧小鼠模型探讨晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs) -糖基化终末产物受体(advanced glycosylation end product-specific receptor,RAGE) /核因子-κB（NF-κB）途径与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）脏器损伤的关系以及大株红景天注射液对其脏器的保护作用。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测10只健康对照组小鼠（对照组）、11只单纯慢性间歇低氧小鼠（A组）、11只慢性间歇低氧后再复氧小鼠（B组）、11只慢性间歇低氧后使用大株红景天注射液腹腔注射的小鼠（C组）血清中AGEs、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平,用Western Blotting方法检测小鼠大脑及心脏中RAGE及NF-κB蛋白的表达情况,并观察经HE染色后组织形态学改变情况。结果ELISA结果：与对照组相比,A组小鼠血清中ACEs、IL-6、TNF-α水平显著升高（P＜0.05）;与A组对比,B组及C组小鼠血清AGEs水平有下降趋势（P＞0.05）;与A组相比,C组血清IL-6水平有所降低（P＜0.05）。而B组及C组之间差异无统计学意义(P>0.05);而在血清TNF-α水平方面,B组及C组均较A组下降（P＜0.05);而B组及C组两组间差异无统计学意义（P>0.05）。RAGE免疫组化结果: 心脏组织：对照组小鼠RAGE及NF-κB的表达最弱;A组小鼠的NF-κB的表达在各组中表达最强,其RAGE蛋白表达比对照组及B组强,而与C组相仿;C组小鼠RAGE及NF-κB较对照组及B组表达增多。大脑组织：A组的RAGE及NF-κB蛋白在各组小鼠的大脑组织中表达最强;对照组小鼠RAGE表达较少,NF-κB蛋白在各组中表达最弱;与A组相比,C组的RAGE表达稍有减少,而NF-κB的表达则较其有更为明显的下降。HE染色结果：对照组小鼠心肌组织结构清晰完整、界限清楚、排列紧密;而A组小鼠心肌组织排列紊乱,结构、纹理不清,部分肌细胞核固缩深染。B组小鼠心肌结构较A组小鼠清晰,核固缩深染现象亦较其减少,而C组小鼠心肌结构较清楚,排列亦较紧密。结论OSAS可引起多器官、组织如心脏、大脑组织的损害。OSAS可激活AGEs-RAGE/NF-κB通路,调节炎症细胞释放IL-6、TNF-α等炎症因子,或是OSAS易合并多脏器损害的原因之一。大株红景天注射液有一定程度的抗炎作用,可用于防治OSAS多脏器的损害,但其作用机制与AGEs-RAGE/NF-κB信号通路的激活无明显关系。